羧甲基纤维素钠对4℃保存藏猪精液指标的影响

试验旨在研究羧甲基纤维素钠(CMC)对藏猪精液4℃保存效果的影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,添加不同浓度的CMC(0、6、12、18和24μmol/L),将藏猪种公猪新鲜精液稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率和精子顶体完整率为评价精液品质指标,探讨CMC对藏猪精液4℃保存效果的影响。结果显示:12μmol/L CMC添加组藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率均极显著好于其他试验组(P0.01)。总之,在改进的猪精液稀释液中添加CMC 12μmol/L可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质,该试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

维生素E对4℃保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用的影响

试验旨在研究维生素E对4℃藏猪精液品质和抗氧化保护作用影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,每1 000 m L添加维生素E 0、3.0、4.0、5.0、6.0 g,将藏猪种公猪新鲜精液做4倍稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价精液品质指标,以超氧化物歧化酶(Superoxidas dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量为评价抗氧化保护作用指标,探讨维生素E对4℃藏猪精液品质影响。结果显示:维生素E 5.0 g/L添加组藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率均极显著好于其他试验组(P0.01)。精浆超氧化物歧化酶活力和丙二醛含量以5.0 g/L维生素E添加组为最高;同时发现,5.0 g/L维生素E添加组精子超氧化物歧化酶活力与其他各组间差异不显著。总之,在改进的猪精液稀释液中添加5.0 g/L的维生素E可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用,此试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

半胱胺对4℃保存藏猪精液指标的影响

试验旨在研究半胱氨酸对4℃藏猪精液品质和抗氧化保护作用影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,每1 000 m L添加半胱氨酸0、0.02、0.04、0.06、0.08 g,将藏猪种公猪新鲜精液做4倍稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价精液品质指标,以超氧化物歧化酶(Superoxidas dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量为评价抗氧化保护作用指标,探讨半胱氨酸对4℃藏猪精液品质影响。结果显示:半胱氨酸0.06 g/L添加组藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率均极显著好于其他试验组(P0.01),0.06 g/L半胱氨酸添加组的精浆超氧化物歧化酶活力含量均显著好于其他试验组(P0.05),0.08 g/L半胱氨酸添加组的精浆丙二醛含量均显著好于其他试验组(P0.05);同时发现,0.08 g/L半胱氨酸添加组精子超氧化物歧化酶活力最高,各组间差异不显著,精子丙二醛含量0.06 g/L半胱氨酸含量最高。总之,在改进的猪精液稀释液中添加0.06 g/L半胱氨酸后将藏猪种公猪精液做4倍稀释,可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用,该试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

红景天多糖对藏猪精液4℃保存效果的研究

试验旨在研究红景天多糖对4℃藏猪精液品质和抗氧化保护作用影响,采用电刺激法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液为基础液中,每1 000 m L添加红景天多糖0、3.0、5.0、7.0、9.0、11.0 g,将藏猪种公猪新鲜精液做4倍稀释后于4℃环境保存至第5天,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价精液品质指标,以超氧化物歧化酶(Superoxidas dismutase,SOD)活力和丙二醛(Maleic dialdehyde,MDA)含量为评价抗氧化保护作用指标,探讨红景天多糖对4℃藏猪精液品质影响。结果显示:藏猪精液4℃保存到第5天时,9.0 mg/L红景天多糖添加组的精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率这4个指标均极显著好于其他组(P0.01)。7.0 mg/L和11.0 mg/L添加组除精子活力差异显著外,其他指标差异不显著(P0.05)。同时发现,9.0 mg/L红景天多糖添加组精子超氧化物歧化酶活力最高,5.0 mg/L、7.0 mg/L和11.0 mg/L组间无差异;精子MDA含量以9.0 mg/L红景天多糖添加组为最高,较7.0 mg/L和11.0 mg/L、5.0 mg/L、3.0 mg/L和对照组差异极显著(P0.01),7.0 mg/L和11.0 mg/L添加组无差异。总之,在改进的猪精液稀释液中添加9.0 mg/L的红景天多糖可明显改善4℃环境保存藏猪精液品质和抗氧化保护作用,该试验研究为今后藏猪精液低温保存的生产应用奠定了基础。     

维生素C对藏猪精液4℃保存及其精子全基因组DNA甲基化的影响

旨在研究维生素C对藏猪精液4℃保存效果及其精子全基因组DNA甲基化的影响。用手握法采集健康藏猪精液,在改进的猪精液低温稀释液中添加不同浓度的维生素C(0.0、2.5、5.0、7.5、10.0g·L~(-1)),4℃保存到第5天时,以藏猪精子活力、精子畸形率、精子顶体完整率和质膜完整率为评价指标,探讨维生素C对藏猪精液4℃保存的效果;用甲基化荧光定量法检测藏猪新鲜精液组、保存到第5天时未添加维生素C组、添加维生素C组(添加维生素C最佳效果组5.0g·L~(-1))精液DNA甲基化的水平,以探讨维生素C对藏猪精液4℃保存所造成的精子全基因组DNA甲基化的影响。结果显示:添加5.0g·L~(-1)维生素C组其精子活力、畸形率、顶体完整率和质膜完整率均显著好于其它组(P0.05);鲜精组、未添加维生素C组、添加维生素C组的DNA甲基化水平分别为(0.604 7±0.040 3)、(0.920 2±0.016 9)、(0.656 9±0.048 3)ng,鲜精组与添加组均显著低于未添加组(P0.05),而鲜精组与添加组间差异不显著(P0.05)。综上表明,在改进的猪精液稀释液中添加5.0g·L~(-1)维生素C可以明显改善藏猪精液4℃保存的效果,并且可以明显降低4℃保存对藏猪精液精子全基因组DNA甲基化的影响,这将为藏猪精液低温保存的生产应用奠定基础。     

水蛭素对猪精液低温保存的影响

为了改善猪精液低温保存方法,通过在改进的猪精液低温稀释液中添加不同浓度(0,0.50,1.00,1.50,2.00 mg/mL)的水蛭素,研究在4℃低温保存条件下其对猪精液品质的影响。试验采用PI荧光染色检测精子活率,利用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活力,Diff-Quik染色检测精子畸形率,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整率及采用低渗肿胀法(HOST)检测质膜完整率。猪精液保存7 d,每天检测上述指标,试验重复5次。结果表明:稀释液中添加一定浓度的水蛭素在一定时间内有利于维持精子的活率、活力,降低精子的畸形率,提高精子的顶体完整率和质膜完整率,并且水蛭素浓度越高,保存效果越好。因此,在本试验条件下,2.00 mg/mL是水蛭素在猪精液低温保存时的最佳添加浓度。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对猪精液常温保存效果的影响

为探究不同浓度表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对猪精液常温保存效果的影响,该试验通过在猪精液常温保存基础稀释液中添加0、5、10、20、30、40、50μmol/L EGCG,检测保存过程中精子活率、质膜完整率、顶体完整率等指标.结果表明:⑴猪精液常温保存基础稀释液中添加EGCG可以显著提高精子活率、质膜完整率和顶...     

原花青素对猪精液常温保存效果的影响

为探究常温保存稀释液中添加原花青素(OPC)对猪精液保存效果的影响,本实验在经典猪精液稀释液BTS中添加0、10、20、30、40、50、60、70μg/mL OPC,检测17℃保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整性、总抗氧化能力(T-AOC)及精液丙二醛(MDA)含量等指标。结果表明:在经典猪精液稀释液BTS中添加OPC,随着添加浓度的增大,其对精子的保护作用呈先上升后下降的趋势,且添加浓度达50μg/mL时,效果最佳,可显著提高常温保存过程中猪精子活率、质膜和顶体完整率(P0.05);当保存至第5天时,精子活率仍为61.63%、质膜完整率为41.88%、顶体完整率为75.88%、T-AOC浓度为1.43 U/mL、MDA含量为2.37 nmol/mL。因此,在经典猪精液稀释液BTS中添加50μg/mLOPC能够提高猪精液常温保存效果,延长精液保存时间。     

羧甲基纤维素钠对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。     

Gln对猪精液常温保存效果的影响

L-谷氨酰胺具有增强免疫力和抗氧化等生物学作用。为了探究猪常温稀释液中添加L-谷氨酰胺(Gln)对保存效果的影响,本试验在自配基础稀释液中添加0、0.5、1、2、4、8、16 mmol/L的L-谷氨酰胺,在常温保存过程中,检测精子活率、顶体完整性、质膜完整性、总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)浓度等指标,分析Gln对猪精液常温保存效果的影响。结果表明:常温保存的过程中,在基础稀释液中添加4 mmol/L的Gln,精子活率、质膜完整率和顶体完整率显著高于其他组(P0.05),保存第5天时,精子活率为59%、质膜完整率为47.05%、顶体完整率为74.40%、T-AOC浓度为4.34 IU/m L、MDA浓度为1.51 nmol/m L。因此,添加4 mmol/L的Gln能够提高猪精液常温保存效果,延长猪精液常温保存时间。     

菟丝子水提物对17℃保存猪精子品质的影响

在猪精液基础稀释液中添加不同浓度的菟丝子水提物,测定17℃保存时猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率及SOD活性,探讨菟丝子水提物对猪精液17℃保存效果的影响。试验分5组:基础稀释液组(I)、菟丝子水提物0.125%(II)、0.25%(III)、0.5%(IV)及Vc对照组(V),结果表明,随着保存时间的延长,各组猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和SOD活性均降低,且前三者降低显著(P<0.05),后者I、IV和V组在保存第2天时及II组和III组在保存第4天时显著降低(P<0.05)。各组相比,保存后第1天和第2天时,精子活率、质膜完整率和顶体完整率均无显著差异(P>0.05),且保存后第3⁵天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第15天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第1³天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第43天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第4⁵天时,精子SOD活性II-V组均显著高于I组(P<0.05),其中以III组最高,但仅第4天III与各组存在显著差异(P<0.05)。结果表明:适量浓度的菟丝子水提物对17℃保存猪精子具有保护作用。     

弱酸性环境对猪精液常温保存的影响

试验旨在探究不同pH的弱酸性环境常温稀释液对于猪精液常温保存的影响。通过测定不同pH（PH为6．2、6．3、6．4、6．5、6．6、6．7）的稀释液条件下猪精子的活率、质膜完整率和顶体完整性来检测对猪精液的保存效果。结果表明,稀释48h后,pH为6．4和6．5的稀释液中精子活率、质膜完整性和顶体完整性都分别出现降低,明显低于对照组（P〈0．05）。pH为6．2时,稀释液中精子的活率、质膜完整性和顶体完整性显著降低（P〈0．01）,不同PH的稀释液稀释后精液的品质在24h后开始出现明显的下降（P〈0．05）。试验表明,适宜猪精液常温保存的稀释液的弱酸性环境PH为6．4和6．5,在24h内保存效果较好。     

两种稀释剂不同稀释倍数对猪精液保存效果的研究

为探讨课题组研制的猪精液17℃常温保存稀释剂在高倍稀释下对猪精子的保护效果,试验以BTS稀释剂为对照组,分别将原精进行1,3,5,10和15倍稀释,以精子有效存活时间内的活力、质膜完整性和顶体完整性为评价指标,研究课题组研制的稀释剂对高倍稀释的猪精液常温保存效果的影响。结果表明,配方组在5倍和10倍稀释时精液有效保存时间分别为8.77 d和8.43 d,在15倍稀释时配方组中精液有效保存时间明显下降,仅为4.56 d。而对照组中,精液最长有效保存时间为3倍稀释下的3.1 d;配方组采用10倍稀释,保存至第3天精子质膜完整率为82%,顶体完整率达87%,与对照组相比差异显著(P 0.05)。试验结论是课题组研制的稀释剂能够使猪精子耐受高倍稀释并具有较好的保护作用。     

3种稀释液对鸡精液体外常温保存的影响

配制柠檬酸-Tris稀释液、磷酸盐稀释液和猪精液稀释液3种稀释液.测定3种稀释液对鸡鲜精常温(17℃)保存的影响.试验表明,添加磷酸盐稀释液的精液精子活力最强,精子存活时间最长,精子的存活指数最大,并且精子的畸形率最低.添加柠檬酸-Tris稀释液的顶体完整率较高,但是与添加磷酸盐稀释液的差异不显著,结果表明,磷酸盐稀释液更适合鸡精液体外常温保存.     

解冻稀释液及孵育温度对冷冻-解冻后犬精液品质的影响

实验旨在比较解冻后解冻稀释液(Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液)的添加比例(1:0、1:1、1:2)对精液品质的影响,并比较了4种孵育温度(37、34、25、4℃)对精子寿命及精子活力的影响,探索合适的冷冻-解冻后犬精液的孵育条件。结果显示:解冻稀释液的添加与否及添加比例对解冻后孵育30 min的精子活力、活率、质膜完整率及顶体完整率均无显著影响;解冻后,在不同温度下孵育30 min,4组精子活率和质膜完整率无显著差异,而4℃孵育温度下精子活力和顶体完整率高于37℃(P0.05);解冻后孵育2 h,4℃孵育温度下的精液品质(精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率)最佳(P0.05),34℃和25℃组之间差异不显著,而37℃组的精液品质最差。结果表明,解冻稀释液对解冻后精液的孵育效果无影响,而解冻后精液的孵育温度以4℃最佳。     

冷冻稀释液和抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响

为了探究不同冷冻稀释液及抗氧化剂对金华猪精液冷冻效果的影响,试验通过手握法采集健康的20月龄纯种金华猪公猪精液,采用两种常用的商品冷冻稀释液(A、B)稀释精液,然后液氮冻存1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率和质膜完整率指标,筛选最适金华猪精液冷冻保存的稀释液;在最适冷冻稀释液中添加20,30,40,50μmol/L表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate, EGCG),以未添加EGCG和上述添加EGCG的冷冻稀释液稀释金华猪精液,然后液氮冷冻保存精液1 d,解冻后测定精液精子活力、顶体完整率、质膜完整率及抗氧化指标[包括活性氧(reactive oxygen species, ROS)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)和过氧化氢酶(catalase, CAT)活性],筛选EGCG的最适添加量。结果表明：两种商品冷冻稀释液的精子活力、顶体完整率、质膜完整率差异不显著(P>0.05),但考虑到价格成本,选择B冷冻稀释液作为后续试验的冷冻稀释液。随着EG...     

辅酶Q10对猪精液17℃保存效果的影响

为提高猪精液常温保存效果,本试验探讨17℃保存过程中,在Modena稀释液在不同浓度辅酶Q10(Co-Q10)(0、10、15、25、35μg/mL)对猪精液质量的影响。在17℃条件下每隔24 h检测不同组的精子活力、pH,每隔48 h检测精液的渗透压、精子线粒体活性和质膜完整率。结果表明：保存第5天,25μg/mL Co-Q10组精子活力、线粒体活性、质膜完整率均高于其他组（P<0.05）,pH下降速度也最慢,并且对渗透压变化影响不大。综合考虑Co-Q10在猪精液17℃保存中的适宜添加浓度为25μg/mL。     

稀释液中添加还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响

为了研究还原型谷胱甘肽对猪精液液态保存效果的影响,实验通过在稀释液中分别添加不同浓度的还原型谷胱甘肽,研究了它对猪精液液态保存后的精子活力、顶体完整率、质膜完整率、DNA损伤率、体外受精卵裂率及囊胚率等影响。结果表明,向稀释液中添加1 mmol/L,5 mmol/L,10 mmol/L GSH均能显著提高精子保存质量。其中添加1 mmol/L还原型谷胱甘肽效果最好,10 mmol/L效果较差,但大部分指标仍显著高于对照组。证实了稀释液中添加还原型谷胱甘肽有助于提高液态保存猪精液的质量。     

版纳微型猪近交系精子冷冻保存研究

在版纳微型猪近交系（BMI）公猪精液冷冻保存稀释液中添加不同浓度甘油,并对不同解冻液配方和解冻方法进行研究,对比解冻后的精子活力、质膜完整率和顶体完整率,优化BMI公猪精液冷冻保存方法。结果表明,解冻后,甘油浓度为2%和3%组的精子活力、质膜完整率、顶体完整率显著高于1%、4%和5%组（P<0.05）;Ⅰ号解冻液解冻后精子活力、质膜完整率、顶体完整率均显著高于Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ号解冻液（P<0.05）;在活力、质膜完整率和顶体完整率方面,40℃ 6 s和50℃ 6 s这两种程序的解冻效果都显著优于38℃ 30 s（P<0.05）。由此可见,2%或3%的甘油作为抗冻保护剂、Ⅰ号解冻液解冻、40℃ 6 s或50℃ 6 s水浴解冻是较为理想的BMI公猪精液冷冻保存方法。     

淫羊藿苷的抑菌效果及对新西兰兔精液常温保存品质的影响研究

为了研究淫羊藿苷对常温保存新西兰兔精液品质及抑菌效果的影响,试验将新西兰兔精液分为6组,1～5组分别加入淫羊藿苷使其生药含量分别为0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%,6组不添加淫羊藿苷为对照组,测定淫羊藿苷对精液细菌生长的抑制作用;另将新西兰兔精液分为7组,1～5组在精液稀释液中加入淫羊藿苷使其生药含量分别为0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%,6组为维生素C对照组(添加0.05%维生素C),7组为空白对照组(不添加任何抗氧化剂),测定17℃保存新西兰兔精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:精液中添加淫羊藿苷的抑菌效果和添加浓度呈正相关性(P0.05),在精液保存前3天抑菌效果较好;试验各组随着保存时间延长精子活率下降,但3组、4组和5组下降较其他各组缓慢,其中4组精子活率最高;与保存前1天比,兔精子质膜完整率随着保存时间的延长均显著降低(P0.05),4组精子质膜完整率在第2～5天时较高,和其他组差异显著(P0.05),在保存第3天和第5天时分别为77.37%、56.38%;各组兔精子顶体完整率随着保存时间的延长均显著降低(P0.05),4组顶体完整率较其他各组高;在保存第3～5天,添加淫羊藿苷的各组精子SOD活性比空白对照组高,差异显著(P0.05),其中3组和4组精子SOD活性最高。说明17℃保存时,向兔精液稀释液中添加一定量的淫羊藿苷(0.20%)不但可以有效降低精液中细菌数量,还能对兔精子品质起到较好的保护作用。