尼卡巴嗪的残留检测方法进展

尼卡巴嗪是一种广谱、高效、性能稳定的饲料添加剂,用于防治鸡、火鸡等禽类球虫病,对已产生耐药性的球虫,仍有显著疗效。然而,尼卡巴嗪残留对人体存在潜在的威胁,需对其进行残留监控。综述了尼卡巴嗪残留检测方法,包括高效液相色谱法,差示脉冲极谱法,分光光度法,气相色谱法,高效液相色谱串联质谱法以及免疫色谱法。     

抗球虫药尼卡巴嗪的残留检测方法进展

尼卡巴嗪是一种广谱、高效、性能稳定的饲料添加剂,用于防治鸡、火鸡等禽类球虫病,对已产生耐药性的球虫,仍有显著疗效。然而,尼卡巴嗪残留对人体存在潜在的威胁,需对其进行残留监控。目前,尼卡巴嗪残留检测方法很多,包括高效液相色谱法,差示脉冲极谱法,分光光度法,气相色谱法,高效液相色谱串联质谱法以及免疫色谱法。本文对这些方法加以综述。     

禽类产品及饲料中尼卡巴嗪药物检测分析方法研究进展

尼卡巴嗪(nicarbazin,NIC)是一类由4,4’-二硝基苯脲(4,4-dinitrocarbanilide,DNC)和2-羟基-4,6-二甲基嘧啶(2-hydroxyl-4,6-dimethylpyrimidine,HDP)组成的等分子复合物,其中DNC为其残留标志物。NIC因安全高效被广泛应用于鸡和火鸡等禽类球虫病防治。近年来,NIC残留问题高发,严重威胁动物源性食品安全和消费者生命健康安全。目前,针对禽类产品和饲料中NIC分析方法主要包括仪器分析方法和免疫分析方法两大类。其中,仪器分析方法作为确证方法,具有高特异性、高灵敏度、结果可靠的优点,主要包括高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)和液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)等。免疫分析方法是NIC快速检测方法的主流技术,具有速度快、成本低、实用性强的优点,主要包括酶联免疫检测法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、免疫层析方法(immunochromatography,IC)、表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)、荧光免疫检测法(fluorescent immunoassay,FIA)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)等。笔者综述了近40年来国内外禽类产品和饲料中NIC的检测分析方法,以期为NIC残留监控提供理论和实践指导依据。     

用于监测禽饲料中尼卡巴嗪污染的方法

即使每千克饲料中的球虫抑制药尼卡巴嗪浓度低于2毫克，也能在禽类肝脏中产生药物残留。最近英国和爱尔兰的科学家联合发明了一种专门用来监测禽饲料中尼卡巴嗪污染的横流装置（LFD），使用该装置前需将饲料进行溶液抽提。通过对22份无尼卡巴嗪和尼卡巴嗪含量逐渐增至2mg／kg的样品分析发现，相对抑制率分别为0-45％和53％-85％。     

不同抗球虫药物对球虫的敏感性试验

以岭南黄鸡为试验动物,采集广东省内部分散养户的鸡粪便,分离球虫卵囊,分别选取癸氧喹酯、马杜霉素、莫能霉素、解百球、尼卡巴嗪、球痢灵、马杜霉素＋尼卡巴嗪、禽安＋尼卡巴嗪、球虫散9种药物或组分,进行抗球虫敏感性试验。结果表明：混合球虫对尼卡巴嗪和马杜霉素＋尼卡巴嗪敏感,对禽安＋尼卡巴嗪、球痢灵、解百球和马杜霉素中度敏感,对其它药物药有抗药性。     

尼卡巴嗪混悬液的研制及其对鸡球虫病的疗效

以尼卡巴嗪为原料,纯化水为溶媒,利用胶体磨采用分散法成功研制出尼卡巴嗪混悬液,并对制剂进行了稳定性研究。所有参试样品的外观性状、沉降体积比、再分散性、相对含量等指标均无明显变化,表明该制剂稳定性良好。试验了尼卡巴嗪混悬液对鸡柔嫩艾美耳球虫病的疗效。结果表明,对经口一次人工感染1.0×105个/只柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的雏鸡按100kg饮水中分别添加100g/L尼卡巴嗪混悬液25、50、100mL的剂量混饮连续给药5d,其保护率均达100%,抗球虫指数分别为189.7、189.9、184.2,属高效抗球虫药。     

畜产品中青霉素类药物残留检测方法研究进展

药物残留危害着消费者健康。随着人民生活水平的提高,近年来畜产品中药物残留问题日益受到重视。青霉素类药物残留的分析方法主要包括高效液相色谱法、免疫分析法和微生物测定法,其中高效液相色谱法灵敏、高效,但需要特殊的检测仪器;微生物测定法简便,但灵敏度不高;免疫分析法是将抗原抗体反应与灵敏的检测系统结合而成的一种简便、快速、敏感的分析方法,具有广阔的应用前景。     

鸡可食性组织中尼卡巴嗪残留的测定高效液相色谱法

为建立鸡可食性组织(皮脂、肌肉、肝脏、肾脏)中尼卡巴嗪的高效液相色谱(HPLC)检测方法,本研究采用乙腈提取组织样品中尼卡巴嗪,正己烷除脂;流动相为乙腈:超纯水(55:45,v/v);紫外检测波长347 nm.结果显示:各组织中尼卡巴嗪浓度在50~1000μg/kg范围内呈良好线性关系(R^2≥0.9992);各组织中检测限和定量限均分别为10μg/kg和50μg/kg;组织中尼卡巴嗪添加浓度为50、200、400μg/kg时,皮脂中药物平均回收率为(87.18±3.85)%,肌肉中药物平均回收率为(93.33±3.76)%,肝脏中药物平均回收率为(80.77±3.63)%,肾脏中药物平均回收率为(85.27±6.58)%;日内和日间变异系数分别小于4.20%和4.30%.该方法前处理简单省时,无需使用固相萃取,节约了试验成本与时间,为尼卡巴嗪的检测提供了方法学基础.     

尼卡巴嗪和氨丙啉单独及配合应用对鸡球虫病的疗效

目的研究尼卡巴嗪和氨丙啉单独及配合应用对鸡球虫病的疗效。方法将15日龄鸡人工感染柔嫩艾美耳球虫,以鸡平均增重率、盲肠病变记分、粪便记分和抗球虫指数等指标为参数,综合评价尼卡巴嗪和氨丙啉单独及配合应用的抗球虫效果。结果尼卡巴嗪左旋咪唑 大蒜素 维生素K组抗球虫指数为189。氨丙啉 乙氧酰胺甲酯 乙胺嘧啶 磺胺喹啉组抗球虫指数为184.5,这两组药均具有良好的抗球虫效果。氨丙啉 乙氧酰胺苯甲酯组,氨丙啉 乙胺嘧啶组及氨丙啉药物对照组抗球虫指数分别为162.8,163.2,和160.5;尼卡巴嗪 乙氧酰胺苯甲酯组和单用尼卡巴嗪组抗球虫疗效较差,AC I分别为142.7和146.4。结论尼卡巴嗪配合左旋咪唑、大蒜和维生素K产生了增效作用;用氨丙啉配合乙氧酰胺苯甲酯、乙胺嘧啶和磺胺喹啉也可达到增效目的,经两药单用提高了疗效。     

酶联免疫法测定鸡肉中尼卡巴嗪残留

为了建立鸡肉中尼卡巴嗪残留标志物4,4’-二硝基均二苯脲（DNC）残留酶联免疫（ELISA）检测方法。将N-琥珀酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-L-丙氨酸4-硝基苯胺（SAN）与载体蛋白偶联作为抗原免疫动物,获得抗DNC抗体,在此基础上建立了鸡肉中尼卡巴嗪残留的检测方法。人工抗原中SAN与载体蛋白的结合比约为12：1,血清效价1：2000倍,鸡肉中检测限为9．2μg／kg,添加回收率在49．4％～118％之间,批内、批间变异系数均小于20％。该方法在灵敏度、精密度和准确度方面均能满足兽药残留筛选检测要求。     

尼卡巴嗪对人工感染球虫后雏鸡免疫器官发育的影响

本试验研究尼卡巴嗪对人工感染球虫后雏鸡免疫器官发育的影响。将14日龄海兰褐公雏54只，随机分成3组，分别为不感染不给药对照组、感染不给药对照组、尼卡巴嗪组（感染给药组），除不感染对照组，于14日龄接种1.2×105个孢子化卵囊，试验到第9d结束。试验期间，观察雏鸡的精神，食欲，粪便情况并记录体重、胸腺、脾和法氏囊的变化。结果表明尼卡巴嗪可促进雏鸡胸腺和法氏囊迅速成熟，从而使雏鸡整体免疫机能加强。     

鸡球虫湖南醴陵分离株的药物敏感性试验

为探究最适宜湖南醴陵地区鸡抗球虫药物,试验选择目前临床上常用的的抗球虫药甲基盐霉素+尼卡巴嗪、马杜霉素+尼卡巴嗪、盐霉素、莫能霉素、拉沙霉素、二硝托胺和磺胺喹恶啉+甲氧苄啶,以抗球虫指数(ACI)为试验指标,综合评判湖南醴陵地区分离的鸡柔嫩艾美耳球虫的抗药性情况。结果显示,甲基盐霉素+尼卡巴嗪组ACI为164.6,为高效抗球虫药;其次为马杜霉素+尼卡巴嗪和拉沙菌素,ACI分别达到152.6和147.1,属于中效抗球虫药;盐霉素ACI为131.6,为低效抗球虫药;而二硝托胺、莫能霉素和磺胺喹恶啉+甲氧苄啶ACI均低于120,为无效药。试验表明,对于该地区的球虫病应首选甲基盐霉素+尼卡巴嗪,其次选马杜霉素+尼卡巴嗪和拉沙菌素甲基盐霉素+尼卡巴嗪,但为了防止尼卡巴嗪的热应激和延缓耐药性的产生,可选择拉沙霉素和盐霉素进行轮换用药。     

尼卡巴嗪对鸡柔嫩艾美耳球虫田间株的敏感性试验

以最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变记分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)为指标,检测了尼卡巴嗪对秦皇岛株和唐山株柔嫩艾美耳球虫的敏感性.结果表明,唐山株柔嫩艾美耳球虫对尼卡巴嗪无耐药性,秦皇岛株对其呈轻度耐药性.提示尼卡巴嗪在唐山和秦皇岛地区可以继续合理使用,但应控制用量和使用时间,以...     

英国土壤协会呼吁禁止在家禽使用尼卡巴嗪

根据英国土壤协会（SA）调查，在英国生产的鸡肝和一些鸡肉中一直存在高比例的尼卡巴嗪（Nicarbazin）残留，在鸡蛋中也存在残留。欧盟（EU）调查发现，残留的安全水平尚无法确定，因为该公司对其生产的这种饲料添加剂没有提供足够的科学证据，证明该化学品不会对人造成损害。目前，英国食品标准局（FSA）和业界正试图通过提醒生产者在鸡被宰杀前确保有充分的停药期以降低风险。但是，由于肉鸡可以接触自己的粪便，在宰杀前5天停药期期间尼卡巴嗪可能再进入循环。英国兽药理事会（VMD）的最新数据表明，在2008年，9％的鸡肝仍污染有超过官方安全范围的残留。土壤协会一再呼吁禁用尼卡巴嗪并指责FSA和兽药品监管部门管理无效。     

鸡皮脂组织中尼卡巴嗪残留量的测定高效液相色谱-串联质谱法

本研究旨在建立一种检测鸡皮脂组织中尼卡巴嗪标志物4,4-二硝基均二苯脲残留量的高效液相色谱-串联质谱法。组织样品用乙腈提取,氮气吹干浓缩,正己烷除脂、甲醇水溶液(75∶25,v/v)萃取,高效液相色谱-串联质谱法测定,内标法定量。该方法在50~1000 ng/m L范围内,线性关系良好,线性相关系数r=0.9998,该方法的检测限和定量限分别为2.5μg/kg和25μg/kg,加标平均回收率为98.10%~114.11%,批内批间的RSDs均小于5%,具有较好的回收率和重复性。该方法简单、快速、有效,可用于鸡皮脂中尼卡巴嗪残留标志物残留量的定量检测。     

氟喹诺酮类药物残留检测方法研究进展

药物残留直接危害人体健康,近年来畜产品中药物残留问题倍受关注.氟喹诺酮类药物残留检测的方法较多,同时也获得了大量的试验数据.常用的方法有微生物法、免疫分析测定法、免疫亲和色谱-液相色谱法、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法、液相色谱-质谱-质谱法、薄层色谱法、荧光分光光度法等.文章对这些检测方法从定性(筛选)和定量两个方面进行综述.     

超高效液相色谱-串联质谱法检测鸡肉中尼卡巴嗪残留标志物

基于高效液相色谱-串联四级杆质谱(UPLC-MS/MS),建立了鸡肉中尼卡巴嗪残留标志物4,4'-二硝基均二脲(DNC)的检测方法。检测样本在乙腈水溶液提取下,经PRIME HLB固相萃取柱净化,氮吹浓缩后定容过膜上机检测。在2.0~500.0μg/L线性范围内,DNC标准曲线相关系数为r=0.999 26,检出限为0.11μg/kg。阳性添加回收试验中,DNC加标浓度分别为1.0、10.0、200.0μg/kg,回收率范围为91.4%~103.0%。本研究建立的方法简便、快捷、容易操作,液相色谱-串联质谱条件设置合理,灵敏度较高,相关参数优化较佳,可对样品进行准确定性和定量检测,适用于可食动物肌肉中尼卡巴嗪残留标志物DNC的检测。     

高效抗球虫新药——尼卡巴嗪(球虫净)的毒性试验研究

一、前言我们研制并生产的高效抗球虫新药——尼卡巴嗪(球虫净)是一种广谱、高效、无毒、性能稳定的抗球虫饲料添加剂,对鸡、火鸡等禽类的各种球虫病均有显著的预防和治疗效果。(1)对其它抗球虫药已产生耐药性的球虫,使用尼卡巴嗪仍有良好效果,其抗药性与其它抗球虫药相比,产生缓慢。尼卡巴嗪不影响鸡体免疫力。(2)对鸡体生长有明显的促进作用,能提高饲料的利用率。每吨饲料加入125克尼卡巴嗪混入饲料拌匀,     

克伦特罗检测方法研究进展

本文对β2肾上腺素受体激动剂克伦特罗的检测方法进行了综述,对各种方法优缺点作了简单地说明.其中酶联免疫分析法是目前克伦特罗最佳残留筛选检测法,高效液相色谱法、液相色谱-质谱法和气相色谱-质谱法是检测饲料及动物组织中克伦特罗残留的最终确认分析方法.     

HPLC法检测饲料预混料中尼卡巴嗪的含量

利用HPLC法检测饲料预混料中尼卡巴嗪的含量。采用C18柱,甲醇-水(80-20)为流动相,波长265nm。线性回归方程为Y=2828.4X+1548.7(R2=0.9997),在尼卡巴嗪浓度10～50μg/ml范围内线性良好。