去甲斑蝥素对U937细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响

为了观察去甲斑蝥素(NCTD)对人白血病U937细胞凋亡相关基因蛋白表达的影响,试验将5,10,20 nmol/L去甲斑蝥素与U937细胞共同培养48 h,采用MTT法测定细胞活性,应用免疫组织化学法检测细胞中细胞型FLICE抑制蛋白(cFLIP)、存活蛋白(survivin)以及胱天蛋白酶-3(caspase-3)的表达。结果表明:与阴性对照组比较,5,10,20 nmol/L去甲斑蝥素组细胞活性下降(P<0.05或0.01);去甲斑蝥素显著抑制cFLIP和存活蛋白的阳性表达,促进胱天蛋白酶-3的阳性表达(P<0.05或0.01)。推测去甲斑蝥素可能通过下调cFLIP和存活蛋白的表达,上调胱天蛋白酶-3的表达诱导U937细胞凋亡。     

血管紧张素Ⅱ协同LPS诱导巨噬细胞活化和凋亡的研究

为了研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞活化和凋亡的影响,在体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,流式细胞术分析不同浓度AngⅡ对细胞TLR4表达的影响;AngⅡ处理细胞8 h后用LPS诱导细胞,流式细胞术分析细胞内活性氧(ROS),p H值,细胞凋亡和线粒体膜电位。通过研究发现,AngⅡ以浓度依赖的方式上调小鼠巨噬TLR4表达,而在AngⅡ与LPS协同诱导后,细胞内ROS含量显著增加,p H值下降幅度也较LPS单独作用组增大;与LPS单独作用比较,AngⅡ与LPS协同诱导增加了巨噬细胞凋亡和线粒体损伤效应。表明AngⅡ对LPS活化巨噬细胞具有增敏作用,同时也促进LPS诱导的细胞凋亡。     

活性氧参与脂多糖诱导小鼠巨噬细胞RAW 264.7活化诱导凋亡

研究活性氧(ROS)与脂多糖(LPS)诱导后巨噬细胞活化诱导凋亡的关系。体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,采用不同浓度LPS诱导细胞,添加100μmol/L H2O2增加细胞内ROS,或用姜黄素(7.5μmol/L)降低细胞内ROS;流式细胞术分析细胞凋亡、线粒体膜电位(MMP)和ROS。结果显示,RAW264.7细胞凋亡和细胞内ROS水平均随LPS浓度增加而增加,高浓度的LPS导致MMP下降;与LPS(8μg/m L)单独作用组比,H2O2增加ROS,并导致凋亡细胞百分率增加;姜黄素降低LPS诱导的细胞凋亡,同时减少细胞内ROS。表明活性氧参与LPS诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7活化诱导凋亡。     

MPTP在庆大霉素诱导MDCK细胞线粒体凋亡途径中的作用

为研究线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeablity transition pore,MPTP)在庆大霉素(gentamicin,GM)诱导MDCK细胞线粒体凋亡中的作用,试验用4 mmol/L GM和2μmol/L抑制剂CsA(cyclosporin A,CsA)单独或联合处理MDCK细胞24 h,流式细胞术检测MPTP开放情况和细胞凋亡率;JC-1探针检测线粒体膜电位的变化;荧光检测线粒体变化;免疫印迹法检测Bax与Bcl-2表达量,Caspase-9、Caspase-3和PARP蛋白活化情况,Cyt C和AIF释放。结果显示,CsA能够显著或极显著抑制GM引起的MDCK细胞MPTP的开放,细胞凋亡率的上升,线粒体膜电位下降,Bcl-2/Bax比值下降,Caspase-9、Caspase-3和PARP蛋白的活化以及Cyt C与AIF的释放(P0.05或P0.01);说明MPTP正向调节GM引起的MDCK线粒体凋亡。     

线粒体凋亡通路在皮质酮(CORT)诱导海马神经元凋亡中的作用

为在细胞水平探讨皮质酮(CORT)诱导HT22细胞凋亡的机制,以模拟冷应激过程中机体分泌的糖皮质激素对海马神经元的作用。试验组HT22细胞用500μmol/L CORT处理3 h,对照组不予处理。用CCK8法检测CORT对HT22细胞活力的影响,Annexin/PI流式细胞术检测细胞凋亡率。为了进一步研究CORT引起的海马神经元凋亡是否是由线粒体凋亡通路介导的,用JC-1探针检测线粒体膜电位的变化,免疫蛋白印迹(Western blot)检测凋亡相关蛋白细胞色素c(Cyt-c)、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果显示,与对照组相比,500μmol/L CORT处理组细胞生存率显著降低,细胞凋亡率显著升高,线粒体膜电位显著下降,Cyt-c、Bax/Bcl-2及活化的Caspase-3表达水平显著升高。结果表明,500μmol/L CORT处理3 h会导致HT22细胞凋亡,并且线粒体凋亡通路在该过程中发挥重要作用。     

山羊副流感病毒3型通过Caspase途径诱导气管上皮细胞凋亡

旨在揭示山羊副流感病毒3型(CPIV3)感染气管上皮细胞后是否可诱导细胞发生凋亡,并对细胞凋亡的信号通路进行初步探究。本研究将CPIV3病毒液接种气管上皮细胞,在12、24、36、48、72和96 h收集培养物上清检测病毒增殖滴度;通过形态学观察CPIV3诱导气管上皮细胞病变(CPE)情况;采用Annexin V-FITC/PI双染细胞凋亡检测试剂盒和Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性检测试剂盒检测凋亡水平及相关指标;荧光定量PCR检测细胞凋亡分子mRNA表达水平;Western blot分析激活型Caspase-3蛋白表达变化情况。结果显示,CPIV3在气管上皮细胞中的增殖呈上升趋势,96 h能达到10~(4.50)TCID_(50)·mL~(-1);形态学观察发现,病毒接种后48 h出现细胞收缩变圆、脱落等CPE现象;流式细胞术检测及Caspase活性检测表明,感染组细胞出现细胞凋亡,48 h后细胞凋亡率达19.66%,且Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9活性随着时间延长逐渐升高;死亡受体凋亡途径和线粒体凋亡途径细胞凋亡因子mRNA表达上调。Western blot分析揭示,激活型Caspase-3蛋白在病毒感染过程中被活化。本研究证实CPIV3感染可诱导气管上皮细胞凋亡,且Caspase途径在病毒诱导细胞凋亡的过程中发挥重要作用。     

人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞凋亡的影响

为了研究人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用及其对细胞凋亡、p53蛋白表达和Caspase-3活性的影响,试验采用MTT方法检测细胞的生长抑制率、DNA片段化试验检测细胞凋亡、流式细胞术测定细胞周期、Western-blot检测p53蛋白表达、Caspase-3活性检测试剂盒检测Caspase-3的活性.结果表明:人乳铁蛋白对宫颈癌Hela细胞的抑制呈现时间和剂量依赖性,有73%的Hela细胞停滞在G0～G1期;Western-blot检测结果显示人乳铁蛋白可以上调p53蛋白的表达; 人乳铁蛋白作用48 h后Caspase-3的活性是0小时时的5.5倍,二者差异极显著(P<0.01).结果说明人乳铁蛋白能显著抑制宫颈癌Hela细胞生长,其抗肿瘤机制与诱导细胞凋亡、调控细胞周期、上调p53表达、活化Caspase-3有关.     

姜黄素诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

姜黄素能够诱导包括白血病、肝癌、卵巢癌、胃癌等多种肿瘤细胞的凋亡,并可获得很好的效果,其诱导肿瘤细胞凋亡的途径可能是通过影响细胞生长周期、相关凋亡基因、Caspase蛋白表达、细胞端粒酶活性等方式来实现的。姜黄素作为姜黄的主要活性成分,具有来源广泛、价格低、不良反应小等优点,其抗癌效果备受关注。虽然姜黄素诱导肿瘤细胞凋亡是一个比较复杂的生物学过程,但是在生物医药科技高度发达的今天,将姜黄素等中药制剂用于临床癌症的治疗,不仅会为癌症的治疗提供新的手段,而且也会为包括姜黄素在内的许多中药的开发提供新的途径。     

布鲁氏菌OMP16对RAW264.7细胞凋亡与免疫活性的影响

旨在研究布鲁氏菌外膜蛋白OMP16对小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡和免疫活性的影响及其机制探讨。以OMP16处理RAW264.7细胞为模型,通过MTT以及Hoechst法检测OMP16对细胞活力的影响,通过Western blot检测Caspase-3、GRP78、CHOP的表达情况,流式细胞术检测OMP16对细胞凋亡的影响以及RT-PCR检测免疫因子IL-1β、IL-6和TNF-α的变化。结果表明,OMP16能够影响RAW264.7细胞的活力,且有浓度依赖性;添加OMP16后能够显著增加凋亡标志因子Caspase-3的表达（P<0.001）,并促进RAW264.7细胞的凋亡;作用24、36 h之后,显著引起内质网应激标志蛋白GRP78、CHOP的表达;并且能显著上调IL-1β、IL-6、TNF-α等炎性因子的mRNA表达水平。布鲁氏菌OMP16能够诱导RAW264.7凋亡,OMP16显著引起内质网应激CHOP通路的激活。     

C_(17)-吡唑琳基甾体衍生物诱导Hela细胞凋亡研究

通过电镜、AO/EB染色检测细胞形态学变化,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率,通过检测Caspase活性及相关凋亡蛋白的变化确定C17-吡唑琳基甾体衍生物1诱导细胞凋亡的机制。经化合物1处理后的Hela细胞出现典型的凋亡特征,细胞凋亡率与处理时间呈正相关,同时Caspase-3与Caspase-9活性也逐渐增加,而促凋亡蛋白Bax表达量上升,抑凋亡蛋白分子Bcl-2表达量显著下降。说明C17-吡唑琳基甾体衍生物1通过线粒体通路诱导Hela细胞凋亡。     

6种中草药抗病毒试验

选用人参叶、山楂、艾叶、紫苏叶、青蒿和刺五加等６种中草药的１３份提取液,在ＲＫ和ＤＫ细胞上分别进行了抗伪狂犬病病毒和抗狐狸脑炎病毒试验。结果,仅人参叶的水提取液和醇提取液对狐狸脑炎病毒和伪狂犬病病毒均有抗病毒作用;水提取液和醇提取液对狐狸脑炎病毒在ＤＫ细胞上的５０％抑制浓度（ＩＣ５０）分别为１∶５６５．５和１∶１０３７．４。     

22味中草药对3种奶牛乳腺炎病原菌的体外抑菌试验

本研究采用平板挖洞灌药法,选择连翘、黄柏、蒲公英等22味中草药对奶牛乳腺炎3种主要致病菌进行体外抑菌试验,并测定所筛选的4味中药的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。试验结果表明,黄芩、桉叶、蒲公英、丹参4味中药对奶牛乳腺炎3种病原菌的综合效果较好,从而为研制治疗奶牛乳房炎的方剂提供理论依据。     

三种中药提取物添加剂对肉鸡抗病性影响的研究

为了研究黄芩提取物(A,含黄芩苷85%)、金银花提取物(B,含绿原酸75%)、中草药C提取物(C,含C苷50%)组成的复方添加剂对肉鸡抗病性的影响。采用正交试验研究了提取物A+B+C复方添加剂的最佳配比。采用牛津杯法和试管二倍稀释法测定添加剂各组分及复方的最小抑菌浓度(MIC),采用动物感染模型研究提取物A+B+C复方添加剂及各组分的体内抗菌作用。通过自然感染病例研究提取物复方添加剂的抗病性作用;采用ELISA法测定肉鸡血清中的IgG抗体的含量。提取物A、B、C按A2B3C2(A 9mg/mL,B 0.03mg/mL,C 50mg/mL)比例配合时,体外抗菌作用最好;提取物A+B+C复方添加剂具有较好的抗金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌作用;可显著降低肉鸡腹水症的发生率,极显著提高病鸡的治愈率和降低病鸡病死率;可显著提高鸡血清IgG的含量。提取物A+B+C复方添加剂对肉鸡的抗病性有显著提高作用。     

8味中草药水提物对马红球菌的体外抑菌和杀菌效果研究

[目的] 筛选对马红球菌（Rhodococcus equi,R. equi）具有抑菌和杀菌效果的中草药。[方法] 选择黄连、黄芩、大青叶、鱼腥草、黄柏、连翘、金银花及板蓝根共8味中草药制备单味水提物,采用微量肉汤稀释法及平板涂布法测定中草药水提物对R. equi参考菌株103S及临床分离株的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度。[结果] 不同中草药水提物对R. equi的抑菌及杀菌效果不同,其中,黄连、黄柏和连翘单独用药杀菌及抑菌效果显著（P<0.05）强于其他中草药水提物;黄连、黄柏和连翘不同组合联合用药对R. equi的抑菌及杀菌效果均优于单独用药,其中,“黄连+连翘”联用后药效呈相加作用。[结论] 黄连等中草药对R. equi表现出抑菌及杀菌效果,且联合用药效果优于单独用药,提示这些中草药制剂有望作为抗R. equi乃至其他耐药病原微生物感染的有效治疗药物。     

中药抗柔嫩艾美尔球虫机制研究

根据中兽医理论和鸡球虫病的特点，用纯中药组方，经组方药效筛选试验，选用抗球虫效果最佳的组方进行抗球虫机制研究，结果表明，所选中药组方具有明显的抑制未孢子化柔嫩艾美尔球虫卵囊的成熟，对孢子化孵囊具有杀灭作用，并且使外周血液中淋巴细胞尤其是Ｔ淋巴细胞增多，提高免疫器官中Ｔ和Ｂ淋巴细胞的数量和活性，从而提高机体的免疫能力，证明了该组具有高效抗球虫效果。     

16种中药体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒作用的研究

To observe the antiviral action of 16 kinds of Chinese medicinal herbs (Houttuynia cordata Thunb,Flos Chrysanthemi,Flos Lonicerae Confusae,Anemarrhena asphodeloides,CassiaTwig,Herba Ephedrae,Radix Paeoniae Rubra,Bupleurum chinense,Dryopteris setosa,Folium Isatidis, Gardenia jasminoides Ellis,Mntha haplocalyx Briq,Paeonia suffruticosa Andr,Cornu Bubali, Herba Senecionis Scandentis,Radix Gentianae) against porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV）, the blocking, inhibiting and killing roles were detected in present study in vitro. The results showed that 13 kinds of Chinese medicinal herbs had antiviral actions against PPRSV except Paeonia suffruticosa Andr, Herba Senecionis Scandentis and Folium Isatidis, and Houttuynia cordata Thunb, Flos Chrysanthemi, Anemarrhena asphodeloides, CassiaTwig and Radix Paeoniae Rubra exhibited the best antiviral actions followed by Herba Ephedrae, Bupleurum chinense and Dryopteris setosa.     

抗流感病毒的中草药研究进展

流感是一种常见多发的呼吸道疾病。中医认为流行性感冒为疲疠之邪，属于温病范畴。中草药中的解表药、清热药以及以它们为主组成的中成药通过抗病毒、解热抗炎、镇痛及增强机体免疫功能而达到抗流感的疗效。中草药及其中成药抗流感病毒的基本原理在于扶正祛邪或驱邪扶正，通过阻断病毒繁殖过程的吸附、穿入、复制、成熟中的某一环节而直接抑制病毒，并通过提高机体的免疫功能，促进机体的特异性和非特异性免疫功能而间接抑制病毒。研究和开发抗动物流感的中草药及其中成药有极广阔的前景。     

中草药饲料添加剂的应用及发展前景

文章综述了中草药饲料添加剂在畜牧生产中的使用效果，并对其发展前景和发展方向作以预测，希望对我国中草药饲料添加剂行业的规范化发展提供参考。     

三种中药及绿茶对烟焦油引起的小鼠肝ANDM和GST活性变化的影响

通过烟焦油对小鼠肝微粒体ANDM和GST的作用,探讨甘草、黄芪、五味子及绿茶的抗烟毒作用。采用钙沉淀法制备肝微粒体,Lowry法测定蛋白含量并测定小鼠肝微粒体中的ANDM、GST活性水平。结果表明,2%LD50(0.01 g/kg)的烟焦油可使小鼠肝脏中ANDM显著升高,对GST的影响不明显,经统计学检验差异无显著性(P>0.05)。大剂量甘草、黄芪、五味子及绿茶组可使焦油升高的ANDM明显降低,并明显升高GST活性,经统计学检验差异有显著性(P<0.01)。说明甘草、黄芪、五味子及绿茶有明显的抗烟毒作用。     

中草药添加剂对仔猪生长性能的影响

本文介绍了添加不同浓度的复方中草药饲料添加剂与添加抗生素饲喂仔猪，抗生素组头均增重提高2．42kg，增重率14．18％，头均增收16．94元，差异显著（P＜0．05）。并能有效地防制仔猪黄、白痢的发生，具有较好的饲喂效果。