值得推广的鸡新城疫诊断和监测法——B微量法

β-微量法用于检测鸡新城疫具有操作简便、迅速、易判定、能准确表达结果等一系列特点,远远优于试管全量法。一、器材 1.96孔V型凝集板。 2.微量吸液器(50微升,上海制),用于定量取样和加样。     

用微量凝集试验检疫家畜布氏杆菌病

用微量凝集试验检疫家畜布氏杆菌病王川庆，孙海峰，范庆高，李忠勇，王相根，熊书海，左新桐，侯玉泽，宋永军（河南农业大学畜牧兽医系，郑州４５０００２）目前，血清试管凝集反应仍是在布病检疫中应用最广的血清学方法之一。但是，因其采血量大、操作方法落后、反应时...     

比特犬弓形虫临床感染血清学检测报告

比特犬勇猛好斗,属比赛型犬,近年来很多养犬爱好者饲养比特犬用于比赛娱乐,2005年1~12月我们对到郑州牧专兽医院就诊的比特犬,随机采血用弓形虫IHA试验进行抗体水平检测,并进行了针对性治疗,报告如下。1材料与方法1.1被检样品从到郑州牧专兽医院就诊的比特犬中随机选取。1.2被检血清犬前肢静脉无菌采血,每犬采血3 mL,离心取血清备用。1.3诊断液弓形虫IHA抗原、阴性标准血清、阳性标准血清、稀释液,均购自中国农业科学院兰州兽医研究所。1.3器械5~200μL微量移液器、微量振荡器、电热恒温箱、96孔“V”型微量有机玻璃反应板。1.4方法1.4.…     

应用O-多糖抗原琼扩反应鉴别布氏杆菌自然感染和菌苗接种反应牛

按J.W.Cherwonogrodzky、.K.H.Nielsen法制备布氏杆菌O-多糖抗原,建立琼脂扩散反应。该法可鉴别布氏杆菌自然感染病牛和菌苗接种反应牛。本文报道了应用该法,在生产条件下进行检测表现出的特异性和敏感性。 材料和方法:牛血清样本采自萨拉托夫州11个农场6655份。其中248份来自布病清净场,961份为2个布病疫情场,另5408份来自7个本病情况不清的农场。采血的牛只,除对照组外均在不同时间内接种过布氏杆菌菌苗。 血清样本按以下方法检测:用O-多糖抗原的琼脂扩散试验;使用凝集、补反通用抗原的凝集反应和补体结合反应。琼扩反应操作用0.8％的俄罗斯产琼脂,融于10％氯化钠液中,然后均匀辅浇在9cm×12cm的玻板上,每板18ml。用打孔器打孔、中间1孔,周围6孔。每板可打72个周围孔和12个中心孔。71个周围孔内滴加待检     

石河子市家犬布氏杆菌病的血清学调查

1989年我站对本市136只家犬,进行了布氏杆菌病血清学调查.血清先用虎红平板凝集试验筛选,有68份出现凝集,阳性率为50%.然后用试管凝集反应对68份血清进行复检,用光滑型抗原试管凝集反应检出阳性犬4只,用粗糙型抗原试管凝集反应检出阳性犬3只,共检出阳性犬7只,阳性感染率为5.1%。本次犬布氏杆菌病的调查阳性感染率低(5.1%),阳性犬无布病临床表现,不易被发现.由于目前养犬数量猛增,而犬与人畜关系又极为密切,其作为潜在的布病传染源,对人和其他动物的危害是严重的,应引起足够的重视.     

用微量凝集试验检测布氏杆菌抗体的研究

本文报道了用微量凝集试验代替经典的试管法检测牛布氏杆菌抗体。在96孔“V”型血凝板上,将血清样本(25ul)进行倍比稀释,加入1:4(40亿个菌/ml)稀释的标准菌体抗原,混匀后,置37℃下反应4小时,即可观察结果。本法快速、灵敏、节省材料、简化操作程序,适应于群体大样本快速分析。试验表明:用本法检测样本的阴/阳临界效价为1:4,也即当血清凝集(++)价在1:8以上者即判为阳性。通过与试管法比较表明:二种方法对138份血清的阳性检出率毫无显著性差异(P>0.01,X~2=0.00)。     

奶牛塑料细管冻精配种试验

由于奶牛饲养户居住分散,距配种站远,因而奶牛配种困难。为解决这一问题,在原颗粒冻配的基础上,增设输精点三处,进行了塑料细管和颗粒冻精配种对比试验。试验用陕西省家畜改良站种公牛细管冻精和甘肃省冻精站生产的公牛颗粒冻精,用卡苏输精枪和牛用 A 型输精器输精。将合水县发情母牛随机分成试验组和对照组,不受年龄、胎次、产犊间隔的影响。试验组采取细管冻精到户配种,对照组采取颗粒冻精上站配种,输精量以每支细管与每粒冻精1000—2000万有效精子数。采用子宫颈内口直肠把握法输精,根据直肠检查卵巢变化,在排卵期输精1—2次。做好配种记录,试验结束     

高压聚乙烯输血管在动物检疫采血中的应用

兽医人员历来应用试管进行采取血样,需血量多时以大试管接血,需采血量少则用小试管或小青瓶,多用小试管或小青瓶分离血清。近年我们将医务人员使用的输血器材——高压聚乙烯输血管用于临床检疫采取血样,代替了传统的试管法。在近60万只种鸡雏进口检疫的抽样采血应用中,对其深有体会,总结报告如下。 1 使用方法 1.1 使用前的处理选取外径为3mm、内径为2mm规格的高压聚乙烯输血管,剪成每根约12cm长,两端的剪口呈锐角。需无菌采取血样时,用蒸馏     

猪注射猪丹毒活菌苗血清抗体凝集价与免疫效力关系试验

本试验仅做远期免疫后的血清抗体凝集价与免疫力关系方面的试验,所以作者在免疫期试验猪群中留下若干头猪至免疫期六个月时,采血分离血清测定抗体凝集价,观察抗体凝集价与远期免疫力的相互关系,现将试验结果报告如下。试验材料和方法一、材料1.猪丹毒G_4T_(10)弱毒株冻干菌苗。2.40—50市斤哈白猪,血清抗体凝集阴性。3.猪丹毒强毒C_(43)—2、6、7、8四株作为攻毒试验用。4.合格的20%氢氧化铝胶生理盐     

扬中县农村母猪布鲁氏杆菌病流行情况调查初报

布鲁氏杆菌病为人畜共患病,我县自1962年从乳牛中检出阳性牛以后,1982年我县又在全省畜禽流行病学调查中对农村母猪中进行了监测。经363头血样应用血清凝集试验试管法检出阳性血清9份,阳性率为2.47%。从而说明我县农村母猪群体中有布病的存在。为了进一步调查我县农村母猪群中布病流行的情况,自1983年起至1987年相继五年间对农村母猪群实施对该病的监测,现将监测结果初报如下:一、材料与方法1、监测对象:为农村饲养的生产母猪。2、方法:为试管凝集法。3、判定依据:根据“家畜布氏杆菌病试管凝集反应技术操作规程及判定标准”,凡检出阳性血清一律再用人医用诊断液复检,以复检结果阳性者为准,其判定标准不变。4、血样来源:各乡(镇)站兽医在各自承包范围内,按母猪数采血5-10头份,血清由县兽医站统一分离,保存供试。5、监测时间,为每年11～12月份进行。     

微量凝集试验用大肠杆菌O50、O60、O117、O131定型血清的研制

为进一步完善中国大肠杆菌菌体微量凝集试验定型血清库,改良微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清的制备工艺,本试验选取大肠杆菌O50、O60、O117、O131血清型进行定型血清制备方法的探究。首先用大肠杆菌不同血清型的参考菌株制备灭活抗原,而后多次免疫家兔以采血获得粗血清,用微量凝集试验的方法确定不同粗血清的交叉凝集素及凝集效价,再通过交叉凝集素吸收法结合血清稀释法消除非特异性凝集,最终研制出特异性良好的微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清。本研究确定了大肠杆菌O50、O60、O117、O131定型粗血清的主要交叉凝集素,最终成功研制出特异性良好的微量凝集试验用大肠杆菌O50、O60、O117、O131定型血清共4种,凝集效价在1∶256至1∶2 048之间,其中微量凝集试验用大肠杆菌O50、O60定型血清无交叉凝集素,为单因子定型血清,微量凝集试验用大肠杆菌O117、O131定型血清存在1～2种非特异性的交叉凝集素O14和O107。本研究作为大肠杆菌O抗原定型血清制备工艺摸索过程中的重要部分,为完善中国大肠杆菌菌体微量凝集试验定型血清库,进一步改良微量凝集试验用大肠杆菌O抗原定型血清的制备方法提供了重要理论依据。     

奶牛隐性乳房炎奶样中埃希氏大肠杆菌共同性抗原初探

用LMT的方法对新疆8个奶牛场采集的1020份奶样进行隐性乳房炎的检测,并对阳性样品进行了大肠杆菌的分离与鉴定。从不同牛场分离菌株中挑选8株用家兔制备免疫血清,用试管凝集对从乳房炎奶样分离出的其它21株大肠杆菌进行共同性抗原的筛选。结果显示,免疫血清效价达1∶2560～1∶5120,85.7%的待检菌株与其中3种血清凝集反应呈阳性。对制备血清的8株菌进行SDS-PAGE电泳分析,菌体蛋白图谱显示在20~84 ku处存在大量相同或相似的蛋白条带;用制备的免疫血清进行免疫印迹分析,与8株菌的菌体蛋白在70 ku处呈现明显的抗原抗体反应。说明这些菌株存在共同性抗原。     

牛胚胎冷冻保存技术一步细管法(续)

三、一步细管的制作准备把回收的牛胚胎集中在含20%牛血清的修正PBS液内,洗2—3遍,然后,放到盛有10%甘油加PBS的小型培养皿里,用一步浸泡(铃木和下平The riogenslogy投稿中)。制作10%甘油加PBS时,在小试管里准备PBS9ml,再加1ml甘油。10%甘油加PBS液用0.22mm滤器过滤到2枚小型培养皿里,然后,在小型培养皿盖上写上No.1、2,用     

应用斑点酶标联合诊断牛羊寄生虫病的检测结果

应用斑点酶标技术 ,对山羊和奶牛的血矛线虫病、血吸虫病、伊氏锥虫病、肝片吸虫病 (以下简称四种寄生虫病 )进行了联合诊断 ,在 5h内完成了 30 0 0多份血样的检测工作。现将测定结果报告如下。1　材料与方法1 .1　被检牛羊　山羊 2 973只 ,奶牛 50头。1 .2　 Pot- EL LSA诊断试剂盒　试剂 1～ 5( 6～ 1 0现配 )1 .3　方法及步骤　山羊和奶牛颈静脉采血5～ 1 0 ml于小试管中 ,凝固后析出血清移至另 1小试管。加 1 .5ml试剂 6于每 1试管。每份取 4 μl待检血清加入相应号的试管中摇匀。在快诊膜上编上血清号 ,放入相应号的试管中。将试管…     

广西山羊布鲁氏菌病血清学调查

我国的羊布鲁氏菌病主要流行于东北、西北及内蒙古牧区。近年来,广西大力发展山羊养殖,各地引种频繁,在引种中疏忽了对该病的检疫,造成了一定的隐患。为摸清疫情,消除隐患,从2003年8月到2005年10月对全区山羊传统主产区和新养殖区的11市28县(区)进行山羊布鲁氏菌病血清学调查,结果报告如下。1材料和方法1.1血清现场采血,分离血清后,冷冻保存待检。1.2抗原及标准阳性血清试管凝集抗原购自中国流行病学研究所,批号2004-03,有效期2006.03。阴性血清自备,批号2003-1,有效期2008.06。1.3方法具体操作按《动物布鲁氏菌病诊断技术》(GB/T18646—2002)的规定进行。血清先做虎红平板凝集试验筛选,阳性和可疑样品再做试管凝集试验进一步确认,判断标准为:血清稀释1∶50出现“ ”以上凝集,判为阳性。2结果检测南宁、崇左、北海、梧州、贺州、桂林、河池、防城港、来宾、百色和柳州11市的28县(区)共1469份血清,检测结果如表1。3小结检测区内11个市28个县(区)共1469份血清,结果阳性18份,阳性率为1.23%。检出的18份阳性血清均来自柳州市的一个养羊点,经现场重新采血,试管凝集试验确...     

如何给小猪喂药

如果初生猪拉黄痢,就需要给小猪灌药,如果用小勺灌,容易呛着小猪,在多年的实践中,本人探索出了一条好的方法,下面我将此方法介绍于大家。1.自制灌药器用5ml一次性的塑料注射器1支,用剪刀将一次性塑料输液管剪下20cm,接在注射器上,这样,自制的灌药器便做好了。2.具体给小猪灌药的方法左手将小猪的头部抓好,头背部靠住手心,左手拇指与食指掐住小猪嘴角,使小猪嘴张开,右手持自制的灌药器,抽取药液(一般不超过5ml)后,捉住嘴处将管捏死,使管的另一端留有15cm,往小猪嘴里送,随着小猪的吞咽,将管送入小猪食管胃中。这时,用左手使劲捏小猪一下,或让…     

不同浓度RC对鸡NDHI的影响

在ＮＤＨＩ(新城疫血凝抑制试验 )试验中使用的鸡红细胞 (ＲＣ)浓度 ,资料中提法不一 ,多数为0 5 %和 1 %。据实践发现 ,使用两种浓度的ＲＣ悬液 ,其ＨＩ效价不一样。经试验 ,0 7%～ 0 8%的浓度比较适宜。材料仪器 :注射器、针头、96孔Ｖ型微量反应板 1 2块、微量振荡器、5 0 μｌ单道和 8道加样器各 2支、吸头若干、1 0ｍｌ离心管 6支、离心机、恒温箱等。试剂 :3 8%的柠檬酸钠溶液、0 85 %灭菌生理盐水。ＮＤ抗原 (由山东省畜牧兽医站检验中心提供 )、ＮＤ标准阳性血清。ＲＣ悬液 :利用非经ＮＤ疫苗免疫的健康成年公鸡 3只 ,采血混合…     

猪囊虫病生前快速诊断的研究——血片定量法间接血球玻璃板凝集试验

间接血球凝集反应对猪囊虫病生前诊断由朱彦鹏(1976)用试管法及刘文超(1984)用微量法已有报导。该方法具有敏感、特异、检出率高等优点。但因需要分离血清,操作程序复杂,实验器材要求较多,技术较难掌握,而且需要1—1。5小时才能出现结果,不适于在现地生产上应用。为了解决现地分离血清的困难,缩短反应时间,在上述研究基础上,又试     

ELISA双抗原夹心法检测乳牛白血病病毒的抗体

<正> 用辣根过氧化物酶(Sigma Ⅵ型)标记牛白血病病毒gp69和p24混合抗原(南京农学院微生物组生产),在塑料微量滴定板上作ELISA双抗原夹心法试验,以检测牛白血病抗体。操作过程如下:(1)滴定板的每个小孔加50μg/ml     

布病羊型五号菌苗室内气雾免疫停留不同时间细菌存活和免疫效力试验(1981)

应用布病羊型五号菌苗气雾免疫,牲畜是否需要在气雾室内停留或者停留多长时间,才能获得最理想的免疫效果?据了解,目前我省各地采取的停留时间不一,阳转率亦有差异。因此,我们进行了本项试验。现报告如下: 一、材料和方法 1.绵羊25只,分成五组,每组5只。采取血清经布病检查为阴性反应。 2.菌检用胰蛋白培养基平皿。 3.布病羊型五号菌苗(青海生物药品厂产品>。批号8146—2。制造日期81年4月,92头份气雾。剂量为每只羊50亿活菌。细菌检查和效力试验分别按试验羊25只计算总需要菌苗量。稀释液用生理盐水。稀释量为75毫升。