实验小鼠粪便中致病性病原微生物检测与耐药性分析

为了分析实验小鼠粪便中致病性病原微生物分布与耐药性,本试验从某市的实验小鼠养殖基地采集粪便样品120份,采用常规的细菌鉴定方法、致病性试验、K-B药敏纸片法对采集的粪便样品进行细菌分离鉴定、致病性及耐药性进行检测与分析.结果显示,从120份样品中分离了25株致病性大肠杆菌、24株致病性沙门菌、20株致病性志贺菌;分离的24株致病性沙门菌对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等10种药物的耐药率在50.0%以上,对其他药物耐药率在16.7%～37.5%之间;分离的20株致病性志贺菌对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等10种药物耐药率在65.0%以上,对其他药物的耐药率在10.0%～35.0%之间;分离的25株致病性大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林、青霉素等9种药物耐药率在60.0%以上,对其他药物耐药率在12.0%～48.0%之间。说明了实验小鼠粪便中分离的大肠杆菌、沙门菌、志贺菌具有很强的致病性,且存在严重的耐药性。     

猪源气单胞菌分离鉴定及耐药谱检测

为调查气单胞菌在我国猪粪便中流行情况及耐药谱,2017年3~7月从河南省4个地区,共采集370份猪粪样品,通过缓冲液蛋白胨水增菌培养后,使用添加有氨苄青霉素的气单胞菌基础培养基选择培养,分离气单胞菌。可疑菌株通过形态特征、生化试验和16SrDNA序列比对进一步鉴定。微量稀释法测定分离菌株对17种抗菌药物耐药谱。结果显示,共分离到11株气单胞菌,分离率为2.97%,其中豚鼠气单胞菌5株(占45.45%),杀鲑气单胞菌2株(占18.18%),中间气单胞菌、嗜水气单胞菌、水生气单胞菌和贝斯特润气单胞菌各1株(各占9.09%);阿莫西林/克拉维酸菌耐药率为100%,磺胺甲恶唑、氟苯尼考耐药率81.82%,阿米卡星、美罗培南敏感率均为100%,除了其中1株气单胞菌,其他菌株对头孢噻呋、头孢曲松、庆大霉素、强力霉素、磷霉素、恩诺沙星均敏感,各菌株均呈多重耐药性。表明我国健康猪粪便中携带气单胞菌,如果造成水源或者食物污染,可能有引起人类或者动物感染的风险,应引起重视。     

美洲红点鲑嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

为预防和治疗在美洲红点鲑中暴发嗜水气单胞菌病提供实验依据。从患病美洲红点鲑的鳃及肠等病灶部位分离到一株细菌,经回归试验均出现与自然病例相似的症状,并分离到革兰染色和生理生化特性结果与原菌株相同的细菌。结果表明,该菌为短杆状,两端钝圆的革兰阴性菌,与D-葡糖酸、丙二酸和葡萄糖等反应呈阳性,而与黏菌素、七叶苷和L-阿拉伯糖等反应呈阴性,结合16S rRNA基因序列分析结果,该菌与嗜水气单胞菌的亲缘关系最近,鉴定为嗜水气单胞菌。对其进行药敏试验,结果对氨苄西林、环丙沙星和头孢唑啉等药物表现出耐药,对阿米卡星和亚胺培南等药物敏感。本试验首次从美洲红点鲑中分离出嗜水气单胞菌,并得到16种高度敏感的药物,同时阐明了嗜水气单胞菌在美洲红点鲑中的发病症状。     

致病性嗜水气单胞菌耐喹诺酮类药物菌株的分离鉴定

对吉林省内12个水域采集和送检的66尾病鱼进行了细菌分离鉴定，共检出46株嗜水气单胞菌疑似菌，通过生化试验结合PCR扩增气溶素基因Aer，确定其中22株为致病性嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法和双倍稀释法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的耐药性，其中有4株对喹诺酮类药物耐药，并且为交叉耐药，耐药菌检出率为18．2％，纸片扩散法检测其对喹诺酮类药物的抑菌圈均小于19mm。将病料中分离的8株嗜水气单胞菌负染后电镜观察，耐药菌表面有许多大小不同的球形结构，而敏感菌表面则为细丝状菌毛结构。     

重庆某牛场乳房炎病原菌分离鉴定及药物敏感试验

对重庆某牛场患乳房炎奶牛的乳汁进行细菌分离鉴定,共分离出8种11株细菌。将11株分离细菌经人工感染小鼠,结果显示嗜水气单胞菌、微球菌、表皮葡萄球菌,鲍曼不动杆菌和枯草杆菌5种菌有致病性。表明主要致病菌对链霉素等药物敏感,但嗜水气单胞菌对氨苄青霉素、头孢噻吩耐药,枯草杆菌对氨苄青霉素、头孢噻吩、阿莫西林和磺胺耐药。     

致病性嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

对锦州及周边地区3个水库30尾病鱼进行细菌分离培养、染色镜检、生化试验和PCR扩增气溶素基因aer鉴定,确定6株为嗜水气单胞菌。进一步采用纸片扩散法测定嗜水气单胞菌分离株对多种抗生素的敏感性,各分离菌株均对环丙沙星、氯霉素、强力霉素、妥布霉素敏感;对氨苄青霉素、青霉素不敏感;部分菌株存在不同程度的耐药性。接种试验动物出现典型的嗜水气单胞菌的病理变化和死亡。     

邵阳地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型鉴定及耐药性分析

为了分析邵阳地区宠物犬源致病性大肠杆菌的血清型与耐药性,采用细菌分离鉴定的方法对38家宠物医院中无菌采集的87份腹泻宠物犬肛拭子及粪便样品进行大肠杆菌分离鉴定,采用人工感染动物试验、玻板凝集试验和K-B药敏纸片法分别检测分离菌株的致病性、血清型及耐药性。结果显示:分离得到了49株大肠杆菌,其中34株为致病性;34株致病性大肠杆菌分离株属于9种血清型,以O_2、O_9、O_(13)和O_(20)为主要的优势血清型;34株致病性大肠杆菌分离株对阿莫西林、氨苄西林、美罗培南等4种药物耐药率在82.4%～94.1%之间,对丁胺卡那、头孢他啶、恩诺沙星等6种药物的耐药率在41.2%～79.4%之间,对头孢曲松、头孢噻肟耐药率在14.7%～23.5%之间。研究结果为该地区宠物犬大肠杆菌病防治提供参考。     

辽宁猪源大肠埃希菌的分离鉴定与药敏试验

为了调查辽宁省不同地区猪源大肠杆菌病的流行和耐药情况,无菌采集临床疑似大肠杆菌病病死猪或患病猪病料65份,经细菌分离培养及生化试验,共分离到65株大肠埃希菌,分离率为100%。对分离到的菌株进行药物敏感试验及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)筛选和确证试验,结果显示,辽宁地区分离株均表现出不同程度的耐药,耐药菌株占98.46%,其中对四环素、青霉素及氨苄西林的耐药率分别为93.33%、81.54%和80.00%;对甲氧苄啶、磺胺异恶唑、氯霉素、恩诺沙星耐药性较高,分别为74.29%、74.29%、69.23%和68.57%;对米诺霉素及多粘菌素B较为敏感,耐药率仅为10%和9.23%;分离株多药耐药率较高,达92.31%。ESBLs确证试验结果发现,辽宁省分离株中29.23%的菌株能产生ESBLs。说明辽宁地区猪大肠埃希菌流行情况较为广泛,耐药情况较为严重。     

上海地区奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解上海地区奶牛乳房炎主要致病菌种类、分布及药物敏感特性,为奶牛乳房炎治疗选用敏感性药物提供依据。采集该地区奶牛场71份临床型奶牛乳房炎奶样进行细菌分离鉴定,并对主要病原菌进行药敏试验。结果显示,71份奶样共检出金黄色葡萄球菌12株,分离率最高,为16.9%,大肠杆菌11株,占15.5%,克雷伯氏菌8株,占11.3%,粪肠球菌5株,占7.0%。药敏试验显示,4种主要病原菌主要对头孢噻吩、氨苄西林、磺胺异唑抗菌药物表现不同程度的耐药,耐药率在75.0%～100.0%,对头孢噻呋、环丙沙星、阿莫西林-克拉维酸抗菌药物较敏感,敏感率在60.0%～100.0%;多重耐药菌株共16株,占22.5%,大肠杆菌和克雷伯氏菌存在同时对9种和10种抗菌药物耐药现象,多重耐药较严重。说明引起该地区奶牛乳房炎的关键致病菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、粪肠球菌、克雷伯氏菌。细菌药敏试验结果显示:分离菌株对氨苄西林、磺胺异唑、庆大霉素具有较强耐药性;对头孢噻呋、环丙沙星、阿莫西林-克拉维酸抗菌药物敏感,上述研究结果可为该地区奶牛乳房炎的防制提供可靠的理论依据。     

藏鸡大肠杆菌分离鉴定及耐药性研究

本文从西藏林芝某农户家采集藏鸡新鲜无污染粪便样品50份,组织样品10份,分离鉴定细菌后,采用WHO推荐的K-B纸片法测定常用抗菌药物的敏感性。结果显示,60份样品中分离鉴定出10株藏鸡大肠杆菌。这些菌株对16种抗菌药物产生了不同程度的耐药。其中对氨苄西林和头孢噻吩耐药率最高,达100%,对头孢哌酮、头孢噻肟、头孢呋辛、妥布霉素、链霉素和哌拉西啉耐药率较高,达80%,对头孢曲松、头孢唑啉耐药率为70%,对阿米卡星、氧氟沙星和卡那霉素耐药率为60%,对庆大霉素耐药率为50%,但耐药菌株对头孢西丁和头孢他啶敏感性较高,达90%。由此可见,藏鸡大肠杆菌分离株对常用抗菌药存在着一定的耐药现象。     

新疆某规模化牛场乳房炎金黄色葡萄球菌的分离鉴定及药敏试验

为了解新疆某规模化牛场奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌的感染情况以及对常用抗生素药物的敏感程度。从该牛场采集50份乳样,采用细菌分离培养、16S rRNA鉴定、生化鉴定等方法对菌株进行分离鉴定;使用药敏纸片对已鉴定菌株进行药物敏感试验;从50份乳样中,分离出了16株金黄色葡萄球菌,分离率为32%;分离出1株大肠杆菌,分离率为2%。将16株金黄色葡萄球菌进行药敏试验。结果显示,氨苄西林的耐药率高达100%,庆大霉素和克林霉素也产生了较低的耐药性,其耐药率均为6.25%,而恩诺沙星、头孢噻呋、呋喃妥因、多西环素等具有较强的抗菌活性,其敏感率均高于80%,本试验为牛场预防乳房以及临床用药提供了科学依据。     

从福建省部分猪场分离的常见细菌对消毒剂抗性情况调查

为了调查福建省猪场内常见细菌对消毒剂抗性情况,试验于2018年1—12月份采集福建省宁德市、南平市、莆田市、龙岩市、泉州市、厦门市和漳州市7个地区12家猪场水样本240份和粪便样本240份,分离样本中的大肠杆菌、肠球菌、沙门氏杆菌和葡萄球菌,检测所分离细菌对氢氧化钠和乙醇的MIC值,以及分离细菌对碘酸混合液、聚维酮碘和过氧乙酸溶液3种常用消毒剂成品的抗性情况。结果表明:从240份水样本中共分离出大肠杆菌136株,肠球菌105株,葡萄球菌42株,沙门氏杆菌55株;从240份粪便样本中分离出大肠杆菌177株,肠球菌141株,葡萄球菌64株,沙门氏杆菌92株。粪便样本中细菌的分离率高于水样本,且大肠杆菌的分离菌株数最高。猪场常见细菌对现配的氢氧化钠和乙醇溶液MIC值低于常用的浓度,2%～4%氢氧化钠和75%乙醇仍可达到良好的杀菌功效;但样本细菌对3种成品消毒剂都产生了一定的抗性,抗性率为9.5%～18.1%。说明细菌对消毒剂产生抗性情况与细菌的种类、细菌来源、消毒剂的种类、成品消毒剂品牌、使用方法及细菌对抗菌药物耐药性等因素都存在相关性。     

宁夏地区犊牛腹泻源大肠杆菌的分离鉴定

为了解宁夏地区犊牛腹泻大肠杆菌的耐药情况及血清型分布,采集犊牛腹泻样本35份,进行大肠杆菌的分离鉴定、药敏试验和血清型鉴定。结果显示,共分离鉴定得到26株大肠杆菌,对四环素、阿莫西林100%耐药,对哌拉西林、氨苄西林、头孢唑啉的耐药率大于95%,对阿米卡星较敏感,耐药率为19.23%;最多对20种抗菌药物耐药,占7.69%(2/26)。10株可定型,16株未定型;已定型的10株大肠杆菌分属7个血清型,分别为O2、O9、O20、O26、O36、O44和O64,优势血清型是O20和O26。结果表明,宁夏地区犊牛腹泻大肠杆菌对抗生素的耐药率高,多重耐药普遍,耐药现象严重。     

30日龄犊牛粪源大肠杆菌耐药性调查

旨在调查新疆某牛场犊牛粪源大肠杆菌对临床常用抗菌药物的耐药情况。对该牛场92头30日龄犊牛进行直肠粪样采集,采用常规方法进行大肠杆菌的分离鉴定,利用纸片扩散法对分离菌株进行药物敏感性试验。结果表明,从92份犊牛粪便样本中共分离到92株大肠杆菌,分离率为100%;分离菌株对阿米卡星(93.75%)、恩诺沙星(64.50%)、诺氟沙星(59.30%)、庆大霉素(57.14%)4种抗菌药物的耐药性较强,耐药率均超过50%;对阿莫西林/克拉维酸钾(36.30%)、阿莫西林(26.00%)、环丙沙星(13.60%)3种抗菌药物的耐药率也相对较高;对氨苄西林的敏感性最高,耐药率仅为3.03%。综上提示,该牛场犊牛粪源大肠杆菌对不同抗菌药物产生了一定程度的耐药性,建议该牛场应在药物敏感性试验结果的指导下合理选择抗菌药物。     

鸡源大肠杆菌对氧苄西林及复方制剂的敏惑性

对豫北地区临床分离的106株鸡源大肠杆菌进行分离、纯化、鉴定、MICS值测定.试验结果表明,鸡源大肠杆菌对氨苄西林的耐药率高达100%,对氨苄西林/舒巴坦复方制剂的耐药率有所降低,为77.36%.豫北地区鸡源大肠杆菌对氨苄西林及其复方制剂的耐药性严重状况不容忽视.本试验基本能反映目前河南省的鸡源大肠杆菌对抗菌药物氨苄西林及其复方制剂的敏感情况,为本省集约化养鸡场和个体养殖户针对大肠杆菌的防治选药提供了参考.     

疑似草鱼嗜水气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

试验对疑似嗜水气单胞菌草鱼的肝脏、脾脏、肾脏组织进行嗜水气单胞菌的分离鉴定。通过普通营养琼脂、胰蛋白大豆琼脂及生化试剂等的分离培养与生化鉴定后,获得3株细菌;16S rRNA通用引物检测3株细菌的基因序列比对确定菌株后,对确定的草鱼嗜水气单胞菌进行回归试验确认其致病性,然后采用临床上常用的阿奇霉素、阿米卡星、链霉素等10种抗生素进行药敏试验。结果表明,经过分离培养、生化鉴定及16S rRNA通用引物鉴定后确定3种菌株分别为嗜水气单胞菌、嗜麦芽窄食单胞菌和腐败斯瓦尼菌,确定的嗜水气单胞菌回归试验证明其具有致病性;药敏试验显示阿奇霉素对腐败斯瓦尼菌和嗜麦芽窄食单胞菌敏感,其抑菌直径分别为105、95 mm,阿米卡星对嗜麦芽窄食单胞菌、嗜水气单胞菌和腐败斯瓦尼菌这3种菌都较敏感,抑菌直径分别为105、95和93 mm。结果表明,疑似为嗜水气单胞菌病的草鱼有3种细菌感染,其中鉴定的嗜水气单胞菌是致病菌,常用抗生素阿米卡星对3种菌都有抑制作用,而仅对腐败斯瓦尼菌和嗜麦芽窄食单胞菌敏感的是阿奇霉素。     

鸡源大肠杆菌对氨苄西林及复方制剂的敏感性

对豫北地区临床分离的106株鸡源大肠杆菌进行分离、纯化、鉴定、MICS值测定。试验结果表明,鸡源大肠杆菌对氨苄西林的耐药率高达100%,对氨苄西林/舒巴坦复方制剂的耐药率有所降低,为77.36%。豫北地区鸡源大肠杆菌对氨苄西林及其复方制剂的耐药性严重状况不容忽视。本试验基本能反映目前河南省的鸡源大肠杆菌对抗菌药物氨苄西林及其复方制剂的敏感情况,为本省集约化养鸡场和个体养殖户针对大肠杆菌的防治选药提供了参考。     

规模化牧场154株奶牛乳腺炎源大肠杆菌的耐药性分析

为了解规模化牧场中奶牛乳腺炎源大肠杆菌的耐药性，试验采集安徽、福建、广东、江苏及内蒙古等省(自治区)的11个规模化牧场的临床型乳腺炎奶牛的乳样进行细菌分离纯化，采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法对分离株进行鉴定，采用K-B纸片扩散法检测大肠杆菌对11种常用抗生素的耐药性。对乳腺炎源大肠杆菌多重耐药性及不同地区大肠杆菌的耐药性进行分析。结果表明：共分离到154株大肠杆菌，分离率为22.95%,其中安徽60株，广东42株，福建22株，江苏16株，内蒙古10株，其他地区4株。154株大肠杆菌对青霉素、阿莫西林、链霉素、氨苄西林耐药性较强，耐药率分别为98.05%、61.69%、42.21%、40.91%;对庆大霉素、环丙沙星、氟苯尼考和阿米卡星相对敏感，敏感率分别为90.26%、73.38%、68.83%和61.04%;经多重耐药性分析，90株(占58.44%)大肠杆菌对3种及以上抗生素耐药，其中30株大肠杆菌对6种抗生素耐药；多重耐药菌株中，耐药谱为氨苄西林(AMP)-青霉素(PEN)-阿莫西林(AMX)-头孢氨苄(LEX)-四环素(STR)-链霉素(TC...     

湛江地区肉鸡养殖场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解广东湛江地区肉鸡养殖场中大肠杆菌耐药性和耐药基因的流行与传播特点,从湛江地区的8个肉鸡场分别采集粪便和土壤样品各120份,从中分离鉴定出200株大肠杆菌,药敏纸片扩散试验检测分离菌株对23种抗菌药的耐药情况,并利用PCR法检测分离菌株携带耐药基因的分布情况。结果显示,从粪便和土壤中分离的200株菌株均对磺胺异噁唑、万古霉素、复方新诺明等12种抗菌药具有较高耐药率(≥50%),对美罗培南、呋喃唑酮、磷霉素等11种抗菌药具有较低耐药率(≤50%)。分离的大肠杆菌菌株均检出耐药基因,养殖场粪便分离菌中检出耐药基因28种,其中bla_TEM、sul2检出率较高;土壤分离菌中检出耐药基因25种,其中bla_TEM、int1、sul2、tet D检出率较高。分离菌的多重耐药现象普遍存在。由于耐药机制复杂,细菌耐药性的传播特点和方式仍需进一步探索。     

淄博地区猪源产ESBL大肠杆菌的多重耐药分析

为了解淄博地区猪源产ESBL大肠杆菌耐药特点,本研究于2016年4月对淄博地区3个养猪场采集猪粪便棉拭子,分离猪源产ESBL大肠杆菌,14种抗生素药敏片进行药敏检测。共收集236份猪粪便棉拭子样本,通过产ESBL确证试验获得94株产ESBL大肠杆菌,占猪源大肠杆菌的39.8%。所有产ESBL大肠杆菌菌株耐药性较强且呈现多重耐药,对碳青霉烯类药物敏感率较高。猪源产ESBL大肠杆菌分离率高且耐药谱广,给临床中应用抗生素的治疗猪源大肠杆菌病带来很大的障碍。