羧甲基纤维素钠对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释剂是提高猪精子质量的关键因素之一。为探讨羧甲基纤维素钠(CMC)对猪精液常温保存效果的影响,本研究以传统的猪精液保存稀释剂Zorlesco(-BSA)为基础稀释液,通过添加不同浓度的CMC(0、8、16和24μmol/L)对原精液进行稀释和保存。采用计算机辅助精液分析仪(CASA)检测精子活率和活力,低渗肿胀法(HOST)检测精子质膜完整性,考马斯亮蓝染色检测精子顶体完整性。结果显示,在猪精液保存的前3d内,添加不同浓度CMC组的精子活率和活力与对照组相比较高,但差异不显著(P0.05);保存4~7d时,与对照组相比添加16μmol/L CMC组的精子活率和活力明显升高(P0.05)。在保存的前4d内,添加不同浓度CMC组的精子质膜完整率和顶体完整率与对照组相比差异不显著(P0.05),但在保存至5~7d时,添加16μmol/L CMC组的质膜完整率和顶体完整率显著高于对照组(P0.05)。猪精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率之间存在极显著的正相关关系(P0.01),在Zorlesco稀释剂中添加8~24μmol/L的CMC能显著改善和提高猪精子活率、活力、质膜完整性以及顶体完整率,其最佳添加浓度为16μmol/L。CMC可作为精液稀释剂中的悬浮剂,用于减缓精子沉降速率,提高猪精液保存质量。     

菟丝子水提物对17℃保存猪精子品质的影响

在猪精液基础稀释液中添加不同浓度的菟丝子水提物,测定17℃保存时猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率及SOD活性,探讨菟丝子水提物对猪精液17℃保存效果的影响。试验分5组:基础稀释液组(I)、菟丝子水提物0.125%(II)、0.25%(III)、0.5%(IV)及Vc对照组(V),结果表明,随着保存时间的延长,各组猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和SOD活性均降低,且前三者降低显著(P<0.05),后者I、IV和V组在保存第2天时及II组和III组在保存第4天时显著降低(P<0.05)。各组相比,保存后第1天和第2天时,精子活率、质膜完整率和顶体完整率均无显著差异(P>0.05),且保存后第3⁵天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第15天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第1³天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第43天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第4⁵天时,精子SOD活性II-V组均显著高于I组(P<0.05),其中以III组最高,但仅第4天III与各组存在显著差异(P<0.05)。结果表明:适量浓度的菟丝子水提物对17℃保存猪精子具有保护作用。     

淫羊藿苷的抑菌效果及对新西兰兔精液常温保存品质的影响研究

为了研究淫羊藿苷对常温保存新西兰兔精液品质及抑菌效果的影响,试验将新西兰兔精液分为6组,1～5组分别加入淫羊藿苷使其生药含量分别为0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%,6组不添加淫羊藿苷为对照组,测定淫羊藿苷对精液细菌生长的抑制作用;另将新西兰兔精液分为7组,1～5组在精液稀释液中加入淫羊藿苷使其生药含量分别为0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%,6组为维生素C对照组(添加0.05%维生素C),7组为空白对照组(不添加任何抗氧化剂),测定17℃保存新西兰兔精液的精子活率、顶体完整率、质膜完整率和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:精液中添加淫羊藿苷的抑菌效果和添加浓度呈正相关性(P0.05),在精液保存前3天抑菌效果较好;试验各组随着保存时间延长精子活率下降,但3组、4组和5组下降较其他各组缓慢,其中4组精子活率最高;与保存前1天比,兔精子质膜完整率随着保存时间的延长均显著降低(P0.05),4组精子质膜完整率在第2～5天时较高,和其他组差异显著(P0.05),在保存第3天和第5天时分别为77.37%、56.38%;各组兔精子顶体完整率随着保存时间的延长均显著降低(P0.05),4组顶体完整率较其他各组高;在保存第3～5天,添加淫羊藿苷的各组精子SOD活性比空白对照组高,差异显著(P0.05),其中3组和4组精子SOD活性最高。说明17℃保存时,向兔精液稀释液中添加一定量的淫羊藿苷(0.20%)不但可以有效降低精液中细菌数量,还能对兔精子品质起到较好的保护作用。     

3种商品稀释剂对关中黑猪精液常温保存效果的研究

研究通过检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜完整率来评价3种商品稀释剂对关中黑猪精液保存的效果。结果表明,日本某稀释剂对关中黑猪精液常温保存效果要显著优于比利时以及英国某稀释剂(P0.05),保存至第5天时日本某稀释剂组的精子活率仍达到0.75,大于比利时某稀释剂组的0.53和英国某稀释剂组的0.51。此外,保存至第5天精子活率、顶体完整率、线粒体膜完整率保存效果上,比利时某稀释剂组和英国某稀释剂组较为相近,而在对质膜完整率的保存效果上,英国某稀释剂组要显著优于比利时某稀释剂组(P0.05),保存至第5天时质膜完整率英国某稀释剂组和比利时某稀释剂组分别为44.52%和32.48%。     

没食子酸对猪精液常温保存的效果及浓度筛选

本实验旨在研究不同浓度没食子酸(GA)对猪精液常温(17℃)保存效果的影响并筛选没食子酸的浓度范围。在猪精液稀释剂中分别添加不同浓度(0、5、6、7、8、9、10μg/mL)没食子酸,于不同保存时间测定猪精子的活率、A+B级精子数、质膜完整率及顶体完整率指标。结果表明,保存第1～3 d各浓度组间指标无明显差异(P0.05),保存第5 d, 6、9μg/mL组除组质膜完整率极显著高于对照组(P0.01),保存第5、7 d时,7、9μg/mL组精子活率显著高于对照组(P0.05);保存至第9 d时9μg/mL组活率显著高于对照组(P0.05)。综上表明,一定浓度范围的没食子酸有助于提高常温(17℃)保存下猪精液的质量,并延长保存时间。     

五种糖对马精子低温保存及冷冻效果的影响

为了研究单独或组合添加葡萄糖、果糖、乳糖、棉籽糖及海藻糖对马精子低温和冷冻保存效果的影响,试验选取4匹6~12岁公马进行精液收集,经离心浓缩处理后置于含有不同糖的低温或冷冻稀释液中保存,低温保存1,24,48,72,96小时时检测活精子比例(total motility,TM)和直线运动精子比例(progressive motility,PM),评价糖对精子低温保存效果的影响,冷冻后精液于37℃水浴解冻后检测TM、PM、质膜完整率及高线粒体膜电势评价不同糖对精子冷冻效果的影响。结果表明:单独添加乳糖和棉籽糖组低温保存24 h后精液TM和PM明显低于葡萄糖、果糖及海藻糖组,葡萄糖、乳糖分别与其他几种糖两两组合低温保存1,24,48,72,96小时时精液TM和PM差异不显著,单独添加棉籽糖组精子冻融后TM和PM显著低于果糖和海藻糖组(P0.05),但精子质膜完整率和高线粒体膜电势显著高于其他各组(P0.05),单独添加葡萄糖、果糖、海藻糖及乳糖组精子冻融后TM、PM及高线粒体膜电势均无显著差异(P0.05),添加果糖组冻融后精子质膜完整性显著低于葡萄糖组(P0.05)。不同糖组合精子冻融后,乳糖+葡萄糖+海藻糖组精子质膜完整率显著高于乳糖+果糖组、乳糖+海藻糖组、乳糖+葡萄糖+果糖组、乳糖+果糖+海藻糖组(P0.05),乳糖+葡萄糖+果糖组精子高线粒体膜电势显著高于乳糖+果糖组(P0.05),与其他组相比差异不显著(P0.05)。仅含棉籽糖、乳糖或棉籽糖+乳糖的稀释液不适合于马精液低温保存,不同糖组合并没有获得比经典葡萄糖+乳糖更好的低温和冷冻保存效果。     

在4℃降温平衡过程中0.2g/L咖啡因与精子共孵育时间对猪颗粒冻精质量的影响

实验旨在探讨在猪精液于4℃平衡2 h过程中0.2 g/L咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h,对颗粒冻精解冻后精子活率、活力、质膜完整性和顶体完整性以及解冻后精子体外存活时间等指标的影响,以期进一步提高猪颗粒冻精质量。实验结果表明,在精液冷冻之前,咖啡因不同平衡时间组的精子活率和活力都呈现出升高趋势,但与对照组差异不显著;咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组的精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组,前3组之间差异均不显著。而颗粒冻精解冻后,咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组精子活率和活力均显著高于对照组,其中共孵育1 h组显著高于其他3组(P0.05),共孵育2 h组和0.5 h组间差异不显著(P0.05);共孵育2 h组精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组和共孵育0.5 h、1 h组(P0.05),但后3组之间差异不显著;共孵育2 h组精子存活时间显著低于对照组、共孵育1 h和0.5 h组(P0.05),其中共孵育1 h组精子存活时间最长,达7 d以上。总之,在精液4℃降温平衡过程中咖啡因与精液共孵育1 h对冷冻后精子质量最有利,解冻后精子活率和活力显著高于其他各组,且解冻后精子体外存活时间最长。     

羊精液稀释保存液的筛选

试验旨在探讨不同稀释保存液对常温下羊精子活率及存活时间的影响。选取哺乳动物8种常用精液稀释液配方,检测精液稀释后精子活率变化,分析精子存活时间及生存指数。结果表明:不同稀释液对羊精子活率的影响均有差异,精子活率会随着保存时间的增加而降低;同种稀释液在4℃条件下对精子的保存效果更好,与25℃条件下相比,各项指标均有极显著的延长和提高(P0.01);B组液(无水葡萄糖+柠檬酸钠+新鲜卵黄)精子总存活时间、有效存活时间和生存指数在4℃条件下分别为(108.2±9.6)h,(61.5±7.4)h和(63.5±5.8)h,与其他各组相比差异显著(P0.05),可应用于生产。     

解冻温度和保存时间对牛细管冻精精子活率的影响

本试验采用4组解冻温度,每组解冻温度设计了2个不同的解冻时间,观察不同解冻温度、解冻时间及解冻后常温保存时间对牛细管冷冻精液精子活率的影响。结果显示,4组解冻温度以80℃（3s）精子活率最高,为48．77％,20组（2（80s）精子活率最低,为30．02％,两者差异极显著（P〈0．01）。各组精液解冻后保存1h检查精子活率明显高于解冻时镜检活率（P〈0．05）,80℃解冻后间隔5h精子活率仍达到30％。     

维生素E对猪精液常温负压保存效果的影响

为了探究不同浓度维生素E在负压(-0.04 MPa)条件下对猪精液常温(17℃)保存效果的影响，试验将猪精液分为A～D组，分别在含0,0.1,0.5,1 mg/mL维生素E的Modena基础稀释液中保存，用全自动精子质量分析仪检测猪精子质量指标及畸形率，用相应试剂盒检测总抗氧化能力(T-AOC)及H₂O₂含量，用酸度计检测猪精液pH值。结果表明：在精液保存至第7,11天时，C组精子活率显著高于其他各组(P<0.05),且在保存至第1～5天时精子活率高于60%;在精液保存期间，C组精子活力高于其他组，且在第9天显著高于其他组；在精液保存期间，C组精子平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度及鞭打频率均高于其他组，畸形率低于其他组；在精液保存至第9天时，C组精子T-AOC显著高于其他组(P<0.05);在精液保存至第9,11天时，C组H₂O₂含量显著低于其他组(P<0.05);在精液保存期间，C组pH值的下降趋势相较其他组最缓慢，pH值最高，使猪精子处于较为适宜的弱酸环境中。说明将0....     

采精频率对长白种公猪精液品质的影响

为了研究采精频率对成年长白种公猪精液品质的影响。试验通过对6头成年长白种公猪进行五个不同阶段的采精试验,分别为A阶段(采精1次/2 d),B阶段(采精1次/3 d),C阶段(采精1次/4 d),D阶段(采精1次/5 d),E阶段(采精1次/6 d)。研究结果表明:(1)采精频率为A组时,其精液采精量显著低于B组、C组、D组、E组(P0.05),而B组采精量虽低于C组、D组,但差异不显著(P0.05),所以成年种公猪精液采精量的最佳采精频率为B组;(2)采精频率为D组时,其精液精子密度与E组差异不显著(P0.05),但显著高于A组、B组、C组(P0.05);(3)采精频率为C组时,C组精液的精子活率与D组、E组差异不显著(P0.05),但与A组、B组差异显著(P0.05);(4)当采精频率为A组、B组时,其精液中精子畸形率均达到20%以上,而E组、D组的精子畸形率均在5%左右,且E组、D组间差异不显著(P0.05),而C组精子畸形率在15%左右,虽低于20%,但与E组、D组差异显著(P0.05);(5)采精频率与总精液量、活率、密度之间都呈现极显著的负相关性(P0.01),与精子畸形率呈现极显著的正相关(P0.01)。     

中卫山羊细管冻精制作与种质资源保存初步研究

为了中卫山羊种质资源的保护、利用,试验采用细管冷冻技术对宁夏地方品种中卫山羊进行了冻精制作和保存,比较了稀释液、冷冻保护剂类型和浓度、稀释倍数及不同稀释法等对中卫山羊精液冷冻保存品质的影响。结果表明:解冻后的精液品质,3号稀释液精子活率高于1号、2号稀释液,差异极显著(P0.01);相同浓度的甘油和二乙醇,解冻后的精子活率甘油高于二乙醇,差异极显著(P0.01),当甘油浓度为5%时,解冻后精子活率显著(P0.05)高于3%和6%;2倍稀释解冻后精子活率最高,5倍稀释解冻后精子活率最低,但不同稀释倍数解冻后精子活率差异不显著(P0.05)。     

促性腺激素对坝上长尾公鸡精液品质影响

为探究促性腺激素对坝上长尾公鸡精液品质的影响,本试验选用28周龄健康、体重一致的坝上长尾公鸡36只,随机分成3组,每组12只,将三个组别分别注射0、10、40IU促卵泡素,每间隔12h重复注射,第4天注射100 IU的人绒毛膜促性腺激素(h CG),在第7天对36只鸡进行人工采精,收集各组数据并进行对比分析。采精后用生理盐水溶液对原精液进行5倍、10倍、15倍稀释,然后进行精液品质检查。在显微镜下观察,测得不同稀释倍数生理盐水溶液在低温条件下对精子活率的影响。结果显示,注射促卵泡素10、40IU与对照组相比差异极显著(P0.01);对照组与注射10IU促卵泡素、注射40IU促卵泡素的各个分组中精子畸形率数据表现为差异极显著(P0.01);稀释处理后的精液在低温保存下结果显示,稀释5倍的精子保存6 h后活率无显著变化(P0.05),稀释10倍和15倍的两组的精子活率则显著降低(P0.05);在低温保存12 h后,稀释10倍和15倍的精子活率均显著低于稀释5倍的精子活率(P0.05)。结果表明,注射促卵泡素可以提高精子活率,降低精子畸形率;精液稀释倍数不同,稀释倍数越高的精子活率越低,稀释倍数越低的精子活率越高;每只最佳注射剂量为10 IU,精液稀释倍数不超过5倍。     

新西兰兔精液冷冻保护剂的筛选

本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。     

同种和异种抗精子抗体血清对牛精子活力和顶体完整性的影响

8头黑白花成年公牛,每头采集3次精液,利用精子死活染色法和顶体染色法,评定不孕母牛抗精子抗体阳性血清(同种血清组,试验组Ⅰ)和兔抗牛精子抗体免疫血清(异种血清组,试验组Ⅱ)在0.2、4及6小时对精子活力和顶体完整性的影响,研究抗精子抗体引起牛不孕的可能机理。结果表明,在2小时,试验组Ⅰ和Ⅱ的精子活率显著低于处女牛血清组(对照组Ⅲ)和空白对照组(对照组Ⅳ,P<0.05或0.01),但在4、6小时,各组之间的差异不明显(P>0.05)。2、4和6小时对照组Ⅲ、Ⅳ的精子顶体完整率均明显高于试验Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01或0.05)。在6小时前,相同时间间隔时,各组精子活率高于顶体完整率,随着作用时间延长,精子顶体完整率的下降幅度大于精子活率。试验表明,抗精子 抗体血清除能影响精子活力外,主要损伤精子顶体的正常形态。     

不同常温保存稀释液对猪精液保存效果的影响

本研究利用3种不同的常温保存稀释液对猪精液进行常温保存,测定了精子活率、有效存活时间、生存指数、pH值以及总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)活性。结果表明:3号稀释液稀释后精子活率在第3天和第5天均显著高于其他2种稀释液(P<0.05);精子有效存活时间和生存指数显著高于2号稀释液(P<0.05);pH值在精液稀释后的第4天显著高于2号稀释液(P<0.05)。精子T-AOC在第3天和第4天显著高于1号稀释液(P<0.05),但与2号稀释液差异不显著(P>0.05);3种稀释液之间精子MDA变化差异不显著(P>0.05)。因此,3号稀释液对精子的保存效果最好,有利于猪精液的常温保存。     

谷胱甘肽对湖羊精液低温保存效果的影响

为探究谷胱甘肽(GSH)对湖羊精液低温保存效果的影响,在基础稀释液中分别添加了0(对照组)、2、4、8、10 mM的GSH,在4℃保存过程中对精子的活率、活力及直线速率等运动性能指标进行了检测。结果表明,与对照组相比,在保存1～3 d时,4～8 mM的GSH显著提高了精子活率(P0.05),10 mM的GSH对精子活率没有显著影响(P0.05);保存4～6 d时,4 mM的GSH显著提高了精子活率和精子运动性能(P0.05)。说明GSH可以提高湖羊精液在低温保存下的质量,且以4 mM的GSH对湖羊精液的低温保存效果最好。     

不同稀释液中添加十二烷基硫酸钠对吐鲁番黑羊精液冷冻保存的影响

为改善吐鲁番黑羊精液的冷冻保存效果,提高精液冻后的精子活率,本实验在3种精液冷冻稀释液中添加不同浓度(0、1%、2%)的十二烷基硫酸钠(SDS),TrⅠs-葡萄糖-柠檬酸钠为Ⅰ液,蔗糖-葡糖糖-柠檬酸钠为Ⅱ液,OptⅠdyl稀释液做对照为Ⅲ液。熏蒸冷冻后解冻,用精子分析系统(CASA)和流式细胞仪检测冷冻效果。结果表明:Ⅰ液1%SDS组精子活率最高(65.4%),与Ⅰ液2%SDS组精子活率没有差异,高于其他7组(P<0.05);Ⅲ液1%SDS组畸形率(9.4%)低于Ⅱ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液2%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组直线运动速率(51.4μm/s)高于Ⅰ液0%SDS组、Ⅱ液2%SDS组和Ⅲ液0%SDS组(P<0.05);Ⅰ液1%SDS组和Ⅲ液1%SDS组的质膜完整率高于Ⅰ液2%SDS组和Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),且Ⅰ液1%SDS组最高;Ⅰ液1%SDS组的顶体完整活精子比率高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05),各组的活精子顶体完整率无显著差异;Ⅰ液1%SDS组高线粒体膜电位比率(43.0%)高于Ⅱ液1%SDS组(P<0.05)。因此,采用添加1%SDS的Tris-葡萄糖-柠檬酸钠稀释液配方显著提高了吐鲁番黑羊精液冷冻保存效果。     

牛奶、卵黄稀释液对新西兰兔精液常温保存的影响

通过对比试验,观察研究了牛奶与卵黄作为稀释剂成分对新西兰兔精液常温保存的影响。结果表明,卵黄组和牛奶组在存活时间、精子活率变化趋势方面都优于空白对照,差异极显著(P0.01);而卵黄组又优于牛奶组,差异显著(P0.05)。各处理组内浓度5%与20%的比较,差异不显著(P0.05),即浓度变化无影响。     

不同精液稀释液对海扬黄鸡配套系亲本精液品质的影响

为探究鸡适宜的精液稀释液配方以及稀释液最佳保存时间,本实验采集50只海扬黄鸡精液,测定比较3种不同的精液稀释液(基础稀释液、BPSE稀释液、自配稀释液)稀释后体外不同存放时间(0.5、1.5 h)以及对自配稀释液在100℃灭菌和加双抗条件下不同存放天数(3、6 d)稀释后的精液品质。结果表明:存放0.5 h后,自配稀释液稀释后的精子活力较BPSE稀释液提高了2.29%(P<0.05),自配稀释液稀释后的精子活率较基础稀释液、BPSE稀释液分别提高0.65%(P<0.05)、0.66%(P<0.05);存放1.5 h后自配稀释液稀释精子活力较基础稀释液提高了4.61%(P<0.05),精子活率较基础稀释液和BPSE稀释液分别提高0.98%(P<0.05)、1.12%(P<0.05);BPSE稀释液稀释后的精子畸形率在存放0.5 h和1.5 h后均为最高;3种稀释液稀释后的精液在体外存放0.5和1.5 h之后,精液死精率均无显著差异,但在1.5 h时自配稀释液死精率最低;100℃煮沸和加双抗的稀释液在4℃冰箱中存放3 d和6 d后稀释的各精液品质指标间均无显著差异。综合上述,自配稀释液稀释后精液品质优于基础稀释液、BPSE稀释液,可作为海扬黄鸡的精液稀释液;煮沸或加入双抗的自配稀释液保存6 d之内对所测精液品质指标没有影响。