鸡胚接种鸡白介素18重组质粒对IBDVDNA疫苗免疫增强作用的研究

用鸡白细胞介素18(ChIL-18)重组质粒(pCI-ChIL-18)接种18胚龄SPF鸡胚,利用适时荧光定量PCR方法对试验鸡不同时间点的动态变化进行检测.检测结果表明,胚胎接种pCI-ChIL-18使ChIL-18在鸡血液中早期持续高浓度存在,能促进鸡脾脏和法氏囊中ChIL-18基因的大量表达.用pCI-ChIL-18与传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白DNA疫苗分别免疫18胚龄SPF鸡胚,设1日龄雏鸡肌肉免疫对照组和空白对照组,2周龄时二免,6周龄时用IBDV标准强毒株BC6/85攻击.结果表明,胚胎免疫pCI-ChIL-18能显著促进试验鸡T、B淋巴细胞的早期增殖反应,增强IBDV多聚蛋白DNA疫苗诱导的早期抗体水平及其对强毒攻击的保护力.并进一步证明胚胎免疫pCI-ChIL-18对IBDV多聚蛋白DNA疫苗的早期免疫效果具有显著的增强作用(P相似文献   

种毒接种剂量与鸡胚尿囊液量的相关性研究

对成分３组而同机孵化的１８０个９日龄罗曼蛋鸡鸡胚分别尿囊腔接种ＮＤＶ Ｌａｓｏｔａ种毒液０．１ｍＬ／个，０．１５ｍＬ／个，和０．２０ｍＬ／个。结果：尿囊液的收集量与种毒接种量显著负相关，而血凝价受接种剂量的影响不显著。     

鸡新城疫胚胎免疫接种的疫苗剂量和接种方法

通过对出雏率、HI抗体水平、外周血液中 ANAE T细胞百分率、淋巴细胞转化率和免疫保护力的测定 ,评定了鸡新城疫胚胎免疫的不同免疫剂量和接种方法的效果。结果表明 ,3倍剂量免疫组的出雏率较低 (89.4% ) ,而 2倍剂量的 2个免疫组的出雏率均较高 (96 .9%、99.2 % ) ,接近非免疫对照组 (10 0 % ) ;2倍剂量旋转组雏鸡的 HI抗体于 14日龄时即达峰值 (7.9log2 ) ,到 42日龄时 ,其 HI抗体的水平仍然较高 (6 .5 log2 ) ,而 3倍剂量组和 2倍剂量非旋转组雏鸡的 HI抗体达到峰值的时间为 2 1日龄 ,到 42日龄时的 HI抗体水平 (分别为 4.0 log2和 3.5 log2 )较旋转组低 ;2倍剂量接种旋转组雏鸡于 14日龄 ANAE T细胞率和淋巴细胞转化率均达到峰值 ,而 2倍剂量非旋转组和 3倍剂量组于 2 1日龄达到峰值 ,且与旋转组之间差异显著 ,试验组均与对照组之间差异显著。 5 0日龄攻毒时 ,3倍剂量免疫组的保护率较低 (78.9% ) ,2倍剂量免疫组的保护率较高 (96 .4% ) ,而旋转组的保护率最高 (10 0 % )。上述结果表明 ,选择 2倍剂量接种并加以适当地旋转进行免疫 ,可取得较好的免疫效果。     

鸡马立克氏病胚胎免疫的研究

用MD京CV1988／Rispens冷冻疫苗对孵化至18日龄的鸡胚进行免疫接种，试验结果表明：胚胎免疫不影响孵化率，对鸡的生长发育也无影响，与1日龄免疫的雏鸡比较，可明显提高对MD强毒攻击的抵抗力。     

种毒接种剂量与鸡胚尿囊液量的相关性研究

对分成3组而同机孵化的180个9日龄罗曼蛋鸡鸡胚分别尿囊腔接种NDVLasota种毒液0.1mL／个,0.15mL／个和0.20mL／个。结果：尿囊液的收集量与种毒接种量呈显著负相关,而血凝价受接种剂量的影响不显著。     

马立克氏病疫苗胚胎免疫鸡红细胞免疫功能的研究

作者检测了胚胎免疫鸡（孵化至18日龄时鸡胚接种马立克氏病二价疫苗）及其相应1日龄免疫鸡和未免疫鸡的红细胞CR1花环率和红细胞IC花环率以观察其外周血液红细胞免疫功能。结果表明,随着试验鸡日龄的增长,其外周血液中红细胞CR1活性呈现一定的递减性变化,但胚胎免疫鸡红细胞CR1活性的降低幅度远低于其它两组鸡。胚免鸡出壳后7日龄进行vMDV攻毒,结果也显示胚胎免疫可显著阻止红细胞免疫功能的下降。此外,胚免组鸡血清中红细胞免疫粘附抑制因子活性下降（IC形成减少）,使得红细胞免疫功能得以更好的发挥。     

囊素对鸡传染性法氏囊病弱毒苗免疫的影响

为了研究囊素对鸡传染性法氏囊弱毒苗免疫效果的影响,将囊素按不同剂量与法氏囊弱毒苗混合滴鼻接种雏鸡。对接种后7,14,21和51日龄的鸡进行抗体琼扩效价检测、抗体转阳率检测和囊指数测定。结果显示：中等剂量（10μg／羽）囊素添加的鸡传染性法氏囊弱毒疫苗组抗体效价产生和持续时间高于其他剂量组和疫苗对照组（低毒力）,囊指数值也高于其他组;鸡传染性法氏囊弱毒疫苗（中等毒力）接种试验鸡,能长时间维持较高抗体,但对鸡的法氏囊损伤较大。试验证明,适当剂量的囊素对鸡传染性法氏囊弱毒疫苗具有免疫增强作用和减少法氏囊损伤作用。     

堆型艾美耳球虫pcDNA3-3-1E重组表达质粒的免疫保护性

将堆型艾美耳球虫保定株裂殖子3-1E基因,插入到真核表达载体pcDNA3.1（＋）中,构建重组表达质粒pcDNA-3-1E,用碱裂解法大量提取重组表达质粒,纯化后免疫接种1周龄雏鸡。分别设高（100μg）、中（50μg）、低（25μg）3个剂量组,同时设活卵囊接种组、非免疫感染组和健康对照组。在7日龄时首免,14日龄加强免疫,1周后用2.5×105个E.acervulina保定株球虫孢子化卵囊进行攻毒试验。结果显示50μg的剂量可使试验鸡产生较强的抗球虫效果,攻虫鸡的卵囊产量下降67.67%,肠道病变记分降低66.96%,并使鸡的相对增重率达88.36%,ACI值为176.06。     

鸡马立克氏病（MD）胚胎免疫的试验研究

用ＭＤ火鸡疱疹病毒（ＨＶＴ０疫苗对孵化至１８日龄的鸡胚进行免疫接种，试验结果表明：胚胎免疫不影响孵化率，对鸡的生长发育亦无影响，与出壳当日注射ＨＶＴ苗的鸡雏比较，可明显提高对ＭＤ强毒攻击的抵抗力。     

不同时期鸡胚胎体外培养的比较研究

试验采用代用蛋壳体外培养方法进行了不同时期鸡胚胎换蛋壳培养的研究。结果显示：体外受精卵体外培养发育率为10％。X期胚胎体外培养的孵化率为1．2％；孵化1日龄的胚胎体外培养的孵化率为7．9％；直接去1／4壳的鸡胚孵化率为3．7％；鸡胚胎换蛋壳以后，添加6～8札的稀蛋白对换壳鸡胚发育比较适宜。     

Bioactivity and secretion of interleukin-18 (IL-18) generated by equine and feline IL-18 expression constructs

Interleukin 18 (IL-18) is a cytokine capable of induction of IFNgamma, granulocyte monocyte-colony stimulating factor (GM-CSF), TNFalpha and IL-1 in immunocompetent cells. Equine and feline plasmid vectors expressing pro-IL-18, mature IL-18 and IL-18 fused to a synthetic signal sequence from human IL-1beta receptor antagonist protein (ILRAP), ILRAP-IL-18, have been generated. In vitro protein expression of these constructs was compared by Western blot analysis. These data demonstrated that ILRAP-IL-18 protein was secreted readily from transfected chinese hamster ovary (CHO) cells. A simple bioassay for human IL-18 was recently described using human myelomonocytic KG-1 cells, which produce human IFNgamma in response to human IL-18 in a dose dependent manner (Konishi et al., 1997). We demonstrated bioactivity of equine and feline IL-18 protein in transfection products of CHO cells using this assay. Bioactivity of ILRAP-IL-18 protein was demonstrated in the culture medium of transfected CHO cells. These data imply that the ILRAP-IL-18 construct shows potential for use in vivo, where cell secretion of protein is crucial.     

白细胞介素18研究进展

白细胞介素18(IL-18)是IL-1细胞因子家族成员,主要由单核巨噬细胞系统的细胞分泌,其基因结构、合成表达、受体与信号转导等方面比较特殊,IL-18具有多种生物学功能,特别是具有诱导产生IFN-γ的强大功能,它在先天及后天的免疫应答调节中发挥重要作用,在刺激T细胞增殖、增强Th1型反应、细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞等活性,抗肿瘤、免疫调节等方面有着积极的作用.对IL-18的生物学特性的研究发现,它在某些疾病病理状态,包括自身免疫及感染中作为潜在的效应因子而发挥调节作用.     

Cellular localization of IL-18 and IL-18 receptor in pig anterior pituitary gland

Pro-inflammatory cytokine interleukin 18 (IL-18) has been proposed to have a role in modulating immuno-endocrine functions. Our previous study showed that IL-18 and IL-18 receptor (IL-18R) colocalized in somatotrophs of the bovine anterior pituitary gland, and the possibility that IL-18 acts on somatotrophs as an autocrine factor. In the present study, we investigated the localization of IL-18 and IL-18R in the pig anterior pituitary gland. RT-PCR analysis showed the expression of IL-18 and IL-18R mRNAin the pig anterior pituitary gland. Immunohistochemistry of IL-18 and specific hormones revealed the presence of IL-18 in somatotrophs, mammotrophs, thyrotrophs and gonadotrophs. IL-18R was localized in somatotrophs and thyrotrophs. Furthermore, the somatotrophs immunoreactive for IL-18 did not contain IL-18R. Thus, IL-18R and IL-18 were not colocalized in an identical somatotroph. These findings suggest that the localization of IL-18 in pig somatotrophs is different from that in bovine somatotrophs, although IL-18 closely associates with somatotrophs in the anterior pituitary glands in both species.     

白细胞介素18研究进展

白细胞介素18（IL-18）作为疫苗的高效免疫增强剂,能大幅度提高疫苗的免疫保护率和机体的免疫水平,成为近年来DNA疫苗研究领域的热点之一.文章概述了IL-18的发现与分布、分子特性、生物学作用以及在兽用疫苗中的应用等方面的研究进展.     

猪IL-18基因的原核表达及重组蛋白的纯化

以pcDNA3．1-pIL-18为模板，采用PCR技术扩增到了猪白细胞介素18（IL-18）的成熟蛋白基因，通过KpnⅠ＋SacⅠ双酶切及连接反应，构建了pET32c—pIL—18原核表达质粒。经过限制性内切酶分析、PCR鉴定及DNA序列测定证实，重组质粒中的基因片段连接正确。之后，重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），于37℃、1．0mmol／L IPTG条件下诱导表达。菌体裂解产物经SDS—PAGE分析，在分子质量约为33ku处出现了预期的目的蛋白。用8mol／L脲对表达产物变性，经Ni^2＋NTA柱纯化，透析复性，得到了纯化的IL-18蛋白。Western—blot分析证实，纯化的重组IL-18蛋白具有反应活性。上述研究结果为重组IL-18的应用奠定了基础。     

The F18 fimbrial adhesin FedF is highly conserved among F18+Escherichia coli isolates

F18⁺ Escherichia coli cause postweaning diarrhoea and oedema disease in newly weaned piglets. Protection against these diseases can be established by preventing the fimbrial adhesion of these bacteria to the enterocytes of the porcine intestine. To test a vaccine against F18⁺ E. coli consisting of the adhesin of F18 fimbriae, FedF, the conservation of the FedF subunit had to be examined. Therefore, the fedF sequence of 37 F18⁺ E. coli isolates from different countries was determined and compared to the fedF gene of the F18ab reference strain F107/86. The amino acid sequence of the mature FedF from the individual F18⁺ E. coli isolates was 96–100% identical to that from E. coli F107/86, but the overall homology was 90.4%. Hyper variable regions were not found in the FedF sequence. The FedF sequence was conserved over the different countries and between the two antigenic variants, F18ab and F18ac, suggesting that F18ab and F18ac strains have the same receptor. Furthermore, the conserved C-terminal region in the FedF adhesin suggests that the F18 fimbriae, in analogy with type 1 and P pili, are assembled by a donor strand mechanism. In conclusion, the reported conservation of FedF supports the usefulness of the fimbrial adhesin as a subunit vaccine against F18⁺ E. coli infection.     

白细胞介素18研究进展

白细胞介素 1 8是一种能诱导IFN γ产生的新型细胞因子。它具有多种生物学功能 ,能促进T细胞增殖 ,增强NK细胞的细胞毒作用 ,在诱导Th1细胞的分化成熟过程和Th1细胞为主的细胞免疫反应中具有促进和调节作用。在疫苗佐剂、多肽性药物的开发等方面有着潜在的应用前景