对动物检疫中检测试剂使用问题的探讨

进出境动物检疫是保护国门生物安全的重要举措,而规范、合格的检疫试剂是检疫任务顺利完成的前提。文中分析了近几年动物检疫常用检测试剂的对比研究文献,发现在动物检疫实际工作中,因检测靶标和方法不同,往往导致结果出现差异,同时检测试剂的诊断敏感性和特异性也会影响检测结果的准确性。在对相应问题分析的基础上,提出了建立标准化、规范化的质量评价体系,依据检测目的选择相应试剂,以及加强自主研发,提高检测水平等建议,以期为进出境动物检疫常用试剂的选用提供依据。     

4种动物虫媒病病毒多重RT-PCR检测方法的建立

分别设计和合成4对特异性引物,通过对反应条件的优化,初步建立了鉴别蓝舌病病毒(BTV)、鹿流行性出血病病毒(EHDV)、水疱性口炎病毒(VSV)和赤羽病病毒(AKV)的多重RT-PCR检测方法,并对其特异性和敏感性进行了检测。结果表明,所设计的4对引物可对同一样品中的VSV、BTV、EHDV和AKV进行特异性扩增,所扩增的目的片段的长度分别为301、351、537、250bp。建立的四重RT-PCR检测方法能够检测出10-7稀释的细胞培养病毒液,4种病毒之间没有发生交叉反应,说明该检测方法特异性强,敏感性较高。所建立的多重RT-PCR方法可用于上述4种动物虫媒病病毒的快速鉴别诊断,在动物检疫、临床诊断和流行病学调查方面具有较好的应用前景。     

环介导等温扩增技术及其在动物疫病诊断中的应用

环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplifi cation,LAMP）技术是一门新兴的分子生物学检测技术,因其具有特异性强、敏感性高、简单、快捷及不需要昂贵的仪器设备等特点,受到了生物医学研究者的高度关注。目前,该方法已经被广泛应用于各种病原微生物检测。本文综述了近年来LAMP在动物疫病检测中的具体应用实例和目前的研究进展,并对LAMP方法在动物疫病诊断中的应用前景做了展望。     

屠宰检疫工作中的问题与解决措施

<正>对于动物检疫工作来说,需要将兽医理论中的各项诊断措施进行合理利用,从而对禽畜产品的健康状况进行检查。通过对检疫结果进行分析,就能够及时了解疫病的流行情况,从而采取一定的措施,在疫病开始蔓延和扩散前就将其遏制,所以动物检疫工作十分重要。生猪屠宰检疫是我国动物检疫工作中的重要环节,对于保障肉食品安全具有重要意义。生猪屠宰检疫包括宰杀前的活体检疫、宰杀中各器官检疫和宰杀后的疫情检查。将屠宰工作切实有效地落到实处,能     

斑点杂交法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒

斑点杂交技术是一种快速、稳定、高通量的检测方法,在动物疫病的诊断和流行病学调查中发挥着重要作用。在本研究中,通过RT-PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)SD1株ORF7基因,并以其为模板,制备地高辛标记cDNA探针,并进行了特异性和敏感性检测。利用该探针对50份临床病料进行PRRSV检测,并与RT-PCR进行了比较,结果显示,斑点杂交结果与RT-PCR结果完全一致,探针敏感性和特异性亦较高,说明本研究建立的斑点杂交方法可用于PRRSV临床检测与免疫监测。     

基因芯片技术在动物疫病检测中的应用研究进展

基因芯片技术具有高通量、高特异性、高敏感性等优点,作为1种新型的快速检验检测技术被应用于动物疫病的检测诊断,并显示出良好的临床检测效果。文章介绍了基因芯片技术的设计原理、基本特点以及在多领域动物疫病检测诊断中的开发现状,展望未来发展前景,为基因芯片技术在动物疫病检测诊断中的应用提供参考。     

几种牛羊布鲁氏菌病抗体检测方法的比较

应用虎红平板凝集试验、试管凝集试验、间接ELISA、竞争ELISA和胶体金法对牛羊血清样品进行布鲁氏菌病抗体检测,对不同的检测方法进行比较,以建立和优化动物布病简便快速的检疫诊断方法。结果显示:针对牛血清,胶体金法结果阳性率最高,虎红平板凝集试验与间接ELISA结果阳性率相似,试管凝集试验与竞争ELISA结果阳性率一致,表明胶体金法和虎红平板凝集试验的敏感性较好,而试管凝集试验与竞争ELISA特异性较好。针对羊血清,试管凝集试验、竞争ELISA和胶体金法的敏感性和特异性好于虎红平板凝集试验和间接ELISA。     

应用聚合酶链反应诊断魏氏梭菌病

应用聚合酶链反应 (PCR)建立了一种诊断动物魏氏梭菌病的方法。试验根据已报道的浕毒素基因设计ＰＣＲ引物建立其诊断方法。该方法特异性强 ,仅可检测出魏氏梭菌 ;敏感性高 ,每克粪便可检出 2× 10 5个菌。初步应有结果表明 ,所建立的PCR诊断方法适合于人和动物魏氏梭菌病的临床诊断和流行病学调查     

几种动物病毒的基因芯片检测技术

分别用水疱性口炎病毒、蓝舌病病毒、口蹄疫病毒、猪瘟病毒、牛病毒性腹泻病毒、鹿流行性出血热病毒和赤羽病病毒各一段高度保守的基因片段构建质粒，在此基础上制备了芯片探针。提取样品中的核酸，经反转录和荧光标记后滴加到芯片上进行特异性杂交，对杂交结果扫描检测，可同时对上述7种动物传染病进行快速、准确的诊断，此方法敏感性高，特异性强，适合于大批动物高通量检疫。     

非洲猪瘟病毒实时荧光RPA快速检测方法的建立

非洲猪瘟是一种跨境动物疫病,对世界养猪业危害严重。目前,该病的流行范围越来越广。为防止该病传入我国,当前急需建立快速、简便、可靠的检测方法。本研究通过分析非洲猪瘟病毒B646L基因保守区域,设计并合成了特异性引物和exo探针,建立了检测非洲猪瘟病毒的实时荧光RPA方法。利用该方法可在20 min内完成检测过程,最低可检测到16拷贝/反应;与猪的其他常见病原核酸无交叉反应;与荧光PCR方法具有相似的灵敏度和特异性;利用该方法对100份国内临床样品进行检测,结果均为阴性。本研究所建立的非洲猪瘟病毒实时荧光RPA检测方法具有简单、快速、敏感性高、特异性强的优点,在临床鉴别诊断、检验检疫和病原监测等方面具有广泛的应用价值。