犬瘟热病毒强毒株的分离与鉴定

从病死犬肺,肝和淋巴结分离到２株ＣＤＶ,ＣＤＶ９３０３９和ＣＤＶ９３０４１。消除小牛血清中的干扰因素和３３℃培养是分离成功的主要因素,两株病毒均在Ｖｅｒｏ细胞生长良好,传２～４代毒力稳定,ＣＰＥ产生明显,ＴＣＩＤ５０为１０＾－６．５０～１０＾－６．７７,明显高于国内外野毒株和弱毒的毒力效价,人工感染犬死亡率较高,表明该分离株致病力较强,作者推测我国犬群可能存在ＣＤＶ强毒变异株。     

犬瘟热病毒的分子生物学研究进展

犬瘟热病毒的分子生物学研究进展耿志贤田克恭（军事医学科学院实验动物中心，北京１００８５０）李钟铎（军事医学科学院微生物学流行病学研究所）犬瘟热病毒（ｃａｎｉｎｅｄｉｓｔｅｍｐｅｒｖｉｒｕｓ，ＣＤＶ）是犬瘟热病的病原。自然条件下ＣＤＶ感染食肉目中犬科、...     

犬瘟热病毒MD-77株在Vero细胞上增殖规律的观察

犬瘟热病毒ＭＤ┐７７株在Ｖｅｒｏ细胞上增殖规律的观察遇秀玲田克恭吴娜李俊梅隋丽华任晓明（军事医学科学院实验动物中心,北京丰台１０００７１）犬瘟热病毒（ＣａｎｉｎｅＤｉｓｔｅｍｐｅｒＶｉｒｕｓ,ＣＤＶ）是对我国养犬业危害较大的病毒之一。近年来,我们从临...     

动物细胞系的染色体组型分析和致癌／致瘤性

为确定供生物制品和生物工程产品生产所用动物传代细胞系有无致癌／致瘤性,对研制生产犬、貉、狐用五联病毒,即犬狂犬病病毒（ＲＶ）、犬瘟热病毒（ＣＤＶ）、犬细小病毒（ＣＤＶ）、犬腺病毒２型（ＣＡＶ２）和犬副流感病毒（ＣＰＩＶ）的活疫苗以及猫、狮、虎、豹用三联病毒,即泛白细胞减少症病毒（ＦＰＬＶ）、猫疱疹病毒１型（ＦＨＶ１）和猫杯状病毒（ＦＣＶ）的活疫苗,所用猫肾细胞系（Ｆ８１,ＣＲＦＫ）、犬肾细胞系（ＭＤＣＫ）、非洲绿猴肾细胞系（Ｖｅｒｏ,Ｖｅｒｏ２）、恒河猴肾细胞系（ＭＡ１０４）和叙利亚金…     

犬实验性感染犬瘟热病毒的研究

犬／实／验／性／感／染／犬／瘟／热／病／毒／的／研／究田克恭遇秀玲隋丽华吴娜渠川玫李俊梅刘永梅（军事医学科学院实验动物中心，北京丰台１０００７１）犬瘟热是由犬瘟热病毒（ＣａｎｉｎｅＤｉｓ－ｔｅｍｐｅｒＶｉｒｕｓ，ＣＤＶ）引起的犬的一种急性烈性传染病，...     

犬瘟热诊疗初探

犬瘟热诊疗初探周昌贵，李真银，刘友平，何锡荣（四川省江津市农牧渔业局６３２２６０）犬瘟热是由犬瘟热病毒（ＣＤＶ）引起的主要危害犬、特别是２～４月龄幼犬的一种高度接触性传染病，病死率高，流行面广。据资料报道ＣＤＶ感染病犬自然死亡率可达８０％以上，对犬危...     

犬瘟热病毒的研究进展

犬瘟热病毒 (ＣａｎｉｎｅＤｉｓｔｅｍｐｅｒＶｉｒｕｓＣＤＶ )在分类学上与麻疹病毒 (ＭＶ)、牛瘟 (ＲＰＶ)、小反刍兽瘟疫 (ＰＰＲＶ)、海豹瘟热病毒 (ＰＤＶ)、海豚瘟热病毒 (ＤＤＶ)、鼠海豚瘟热病毒 (ＰＭＶ)同属于副粘病毒科麻疹病毒属[1 ] 。研究发现 ,ＣＤＶ可感染犬科 (如犬、狐、狼等 )、鼬科、浣熊科、猫科 (如狮、虎、豹 )等多种动物。近年来其感染范围不断扩大 ,已经延伸至西湍、日本猕猴和人[2 - 4 ] 。Ｍｅｅ等还从患Ｐａｇｒｔｓ疾病的病人组织中检测出ＣＤＶ核酸[5] 。因此 ,犬瘟热有可能成为犬传播给人的第二种疫病 ,引…     

犬瘟热的微生物学诊断研究

对临床诊断为犬瘟热的１４例病犬，取其脑组织，运用细胞培养、合胞体检查、包涵体检查、免疫荧光试验、电镜观察等５种检测方法，就犬瘟热的微生物学诊断进行了系统的研究。结果表明，犬脑组织块与猫胚（ＦＥ）细胞或非洲绿猴肾（Ｖｅｒｏ）细胞共同培养，盲传的培养物出现不稳定的细胞病变，通过对不同代次的培养物检查包涵体，并作超薄切片或负染，电镜观察犬瘟热病毒（ＣＤＶ）粒子，证实分离到ＣＤＶ野毒。病犬脑组织切片经ＨＥ染色检查包涵体及用ＣＤＶ荧光抗体直接法检测脑抹片及接种犬脑的细胞培养物，均获得一定的阳性结果。建立的改良离子捕获电镜法，用于检测犬脑匀浆和犬脑接种细胞培养物，与离子捕获电镜法、免疫电镜法及直接电镜法相比，效果更为理想。１４例临床诊断为犬瘟热的病犬，综合运用上述微生物学手段检测，结果为１２例阳性，２例疑似。     

狂犬病 犬肠炎 犬瘟热 犬腺病毒病犬副流感五联弱毒冻干疫苗的研究

从国外引进的犬瘟热病毒（ＣＤＶ）、犬细小病毒（ＣＰＶ）、犬腺病毒－２型（ＣＡＶ２）和犬副流感病毒病毒（ＣＰＩＶ）四联弱毒样品中，分离筛选出增殖性良好的ＣＰＶ０ＸＮ１，ＣＡＶ２－ＸＮ３和ＣＰＩＶ－ＸＮ４株。另外还通过离体异种细胞交叉传代，获得的ＣＤＶ－ＸＮ１１１２弱毒株；从狂犬病毒株疫苗样品中筛选出ＥＲＡ８３６株。经试验证明这５株病毒在５代以内可作为制苗用种毒。采用静置和旋转培养法高滴度扩增这５株弱     

Dot—ELISA检测犬瘟热病毒抗原的研究

用建立的三抗体夹心法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测犬瘟热病毒（ＣＤＶ）抗原,其抗原最低检出量为１．１５μｇ／ｍＬ（０．５７６２５ｎｇ／点）,经与常规ＥＬＩＳＡ对１０４份自然感染犬的血液白细胞样本,６０份眼结膜分泌物样本,７３份脾、肝、淋巴结等脏器样本进行检出的阳性率分别为９２．３１％、６６．６７％、８３．５６％和９０．７２％、６３．２９％、８１．８６％;两种方法检出的总阳性率分别为８３．５４％（１９８／２     

南昌某犬场发生犬瘟热病毒感染的诊断

对南昌某犬场从外地引进的德国牧羊犬发病死亡的病料进行电镜检验,发现存在犬瘟热病毒（ＣＤＶ）样病毒粒子,病料的ＲＴ－ＰＣＲ检测均为ＣＤＶ阳性,并且从部分病料中分离出了ＣＤＶ,说明德国牧羊犬发病是由于ＣＤＶ感染所致。用从德国牧羊犬肝脏病料中分离中的ＣＤＶ ＮＣＳ株接种幼犬进行的动物感染试验结果表明ＮＣＳ株能够引起全部试验犬ＣＤ的发生,进一步证明了德国牧羊犬所发生的疾病是ＣＤ。     

犬瘟热病毒(CDV)93039与CDV MD-77株感染Vero细胞的电镜观察

采用电镜技术对犬瘟热病毒（ＣＤＶ）９３０３９株和ＣＤＶ ＭＤ－７７株在体外培养细胞中的增殖过程和所致病变特点进行了比较研究。结果表明,２株病毒的形态发生过程与文献报道相符。ＣＤＶ９３０３９株与ＣＤＶＭＤ－７７株相比,少见长丝状核衣壳聚集及曲型的胞膜上出芽病毒粒子,涵体以电子致密小体为主,与文献报道的ＣＤＶond株较为相似 ;ＣＤＶ ＭＤ－７７株可见成堆存在的核衣壳结构,胞膜上出芽增殖明显可见,早期包涵     

犬瘟热病毒高压灭活疫苗的制备与应用

本试验用静水压高压灭活的方法对ＣＤＶ进行灭活,并加入蜂胶佐剂制备犬瘟热病毒高压灭活疫苗。将此灭活疫苗免疫接种ＣＤＶ易感犬,同时以用福尔马林灭活的犬瘟热病毒灭活疫功为对照,检测结果表明：犬瘟热病毒高压灭活疫苗安全、可靠,其诱导试验犬所产生中和抗体的能力明显高于该病毒的福尔马林灭活苗,临床应用证明该疫苗对犬的保护率达８９％。     

用RT—PCR检测犬外周血液单核细胞中犬瘟热病毒核衣壳蛋…

为了迅捷地诊断犬瘟热病毒（ＣＤＶ）感染，本研究采用及转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，检测犬外周血液核细胞（ＰＢＭＣ）中ＣＤＶ核衣壳蛋白（ＮＰ）基因。以两套引物针对ＣＤＶＯｎｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ毒株ＮＰ基因的两个片段。应用ＲＴ－ＰＣＲ〉以６株ＣＤＶ毒株感染Ｖｅｒｏ细胞，用ＣＤＶ人工感犬染的的ＰＢＭＣ，在这两处细胞的提的ＲＮＡ中，手增ＮＰ基因片段，取得了较好的结果。在３２例临床疑为ＣＤＶ感染     

犬实验感染CDV的病理学研究

对实验感染犬瘟热病毒的病犬进行了系统的病理学观察，并用酶标ＳＰＡ法对病犬脏器组织中ＣＤＶ抗原进行了定位检查。结果表明，淋巴系统各器官组织是ＣＤＶ急性感染早期首先侵犯的靶器官。脏器组织的病理改变与ＣＤＶ抗原检出呈正相关。脏器组织中包涵体的检出与形态结构具有一定的特征性和示病意义，但采用免疫组化方法检查ＣＤＶ抗原，更具优越性。作者认为，ＣＤＶ９３０３９株和ＣＤＶ９３０４１株是致病力很强的泛嗜性ＣＤＶ。     

犬瘟热脏器组织中的抗原定位及病理形态学观察

本文采用免疫组化间接ＢＡ法，对临诊疑似犬瘟热病犬脏器组织中的抗原，进行了定位检查并进行了系统病理学观察。结果表明：发病犬大脑、小脑、延髓、肺、心、脾、膀胱、肠、肝、胰、肾上腺等组织细胞及血管内皮、支气管上皮细胞胞浆内均可见抗原阳性反应。同时，抗原阳性反应组织、器官均可见不同程度的病理变化。     

犬实验感染CDV的病理学研究

对实验感染犬瘟热病毒的病犬进行了系统的病理学观察，并用酶标ＳＰＡ法对病犬脏器组织中ＣＤＶ抗原进行了定位检查，结果表明淋巴系统各器官组织是ＣＤＶ急性感染早期首先侵犯的靶器官，脏器组织的病理改变与ＣＤＶ抗原出呈正相关，脏器组织中包涵体的检出与形态结构具有一定的特征性和示病意义，但采用免疫组化方法检查ＣＤＶ抗原，更具优越性，作者认为：ＣＤＶ９３０３９株和ＣＤＶ９３０４１株是致病力很强的泛嗜性ＣＤＶ。     

ICHV在MDCK细胞上增殖的研究

采用免疫组化ＢＡ法进行了犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）在ＭＤＣＫ细胞上定位的研究．结果表明，接毒后１０小时可见细小阳性反应颗粒出现于肿胀的病变细胞核中．ＨＥ染色所见包涵体形态与临床发病犬肝实质细胞包涵体形态相似，提示可能是ＩＣＨＶ感染细胞所引起的特征性变化．同时测定的病毒血凝滴度结果表明，包涵体的形成与病毒增殖有一定关系，８４～９６小时收毒较为适宜．     

ICHV在MDCK细胞上增殖的研究

采用免疫组化ＢＡ法进行了犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）在ＭＤＣＫ细胞上定位的研究。结果表明，接毒后１０小时可见细小阳性反应颗粒出现于肿胀的病变细胞核中，ＨＥ染色所见包涵体形态与临发病犬肝实质细胞包涵体形态相似，提示可能是ＩＣＨＶ感染细胞所引的特征性变化。同时测定的病毒血凝滴度结果表明，包涵体的形成与病毒增殖有一定关系，８４～９６小时收毒较为适宜。     

犬瘟热病毒野毒株融合蛋白主要功能区基因的变异研究

根据犬瘟热病毒（ＣＤＶ）融合蛋白（Ｆ）基因的核苷酸序列，设计合成了１０条引物。用１对引物从延吉犬病料中扩增出了含Ｆ２区基因的３１４ｂｐ的片段。除两端引物序列外为２６５ｂｐ，编码８８个氨基酸。它与日本弱毒株（ＣＤＶ－Ｄ，Ｏｏｄｅｒｓｔｅｐｏｏｒｔ弱毒株（ＣＤＶ－ＯＮ）、海豹瘟热病毒２型（ＰＤＶ２）、１型（ＰＤＶ１）在核苷酸和氨基酸水平上的同源性，分别为９８．１％和９５．５％、９６．２％和９３．２％和