ICHV在MDCK细胞上增殖的研究

采用免疫组化ＢＡ法进行了犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）在ＭＤＣＫ细胞上定位的研究．结果表明，接毒后１０小时可见细小阳性反应颗粒出现于肿胀的病变细胞核中．ＨＥ染色所见包涵体形态与临床发病犬肝实质细胞包涵体形态相似，提示可能是ＩＣＨＶ感染细胞所引起的特征性变化．同时测定的病毒血凝滴度结果表明，包涵体的形成与病毒增殖有一定关系，８４～９６小时收毒较为适宜．     

犬传染性肝炎病毒在犬肾传代细胞中增殖过程的观察研究

用免疫荧光技术对犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）在感染犬肾传代细胞中的增殖过程进行了观察。结果：ＩＣＨＶ感染犬肾传代细胞吸附时间为１ｈ，在感染过程中出现二次“隐蔽期”和二次“繁殖高峰”。结果表明，ＩＣＨＶ感染犬肾传代细胞４８ｈ收毒较为合适。     

应用电镜原位杂交技术对宿主细胞内犬传染性肝炎病毒DNA定位

应用电镜原位杂交技术，在超微水平上对犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）ＤＮＡ在感染的犬肾传代细胞内的分布进行了定位研究。结果胶体金颗粒不仅特异地标记在细胞核致密型包涵体上，而且在细胞质致密型包涵体上也有胶体金颗粒的特异标记，提示细胞质内含有大量ＩＣＨＶＤＮＡ成分，从而为ＩＣＨＶ的细胞质内装配途径提供了证据。     

犬三大疫病的临床鉴别

犬瘟热病、犬细小病毒病、犬传染性肝炎病可称为犬的三大疫病。其对犬及犬类动物危害严重 ,往往引起死亡 ,给养殖业造成严重的经济损失。笔者根据多年的临床工作经验 ,将此三大疫病的临床特征归纳见表 1。表 1　犬三疫病的临床特征病名犬瘟热犬细小病毒病犬传染性肝炎病毒ＣＤＶ病毒ＣＰＶ病毒ＩＣＨＶ病毒体温Ｔ39.5℃～ 41℃Ｔ40℃以上或不高Ｔ40℃以上包涵体 核内胞浆包涵体胞浆为主肠上皮细胞内 ,核包涵体肝细胞内和内皮细胞内 ,核内包涵体年龄 4～ 1 2月龄发病率高幼犬多发各龄犬均发 ,幼犬多发季节冬季多发无明显季节性无季节性特征双…     

犬瘟热的微生物学诊断研究

对临床诊断为犬瘟热的１４例病犬，取其脑组织，运用细胞培养、合胞体检查、包涵体检查、免疫荧光试验、电镜观察等５种检测方法，就犬瘟热的微生物学诊断进行了系统的研究。结果表明，犬脑组织块与猫胚（ＦＥ）细胞或非洲绿猴肾（Ｖｅｒｏ）细胞共同培养，盲传的培养物出现不稳定的细胞病变，通过对不同代次的培养物检查包涵体，并作超薄切片或负染，电镜观察犬瘟热病毒（ＣＤＶ）粒子，证实分离到ＣＤＶ野毒。病犬脑组织切片经ＨＥ染色检查包涵体及用ＣＤＶ荧光抗体直接法检测脑抹片及接种犬脑的细胞培养物，均获得一定的阳性结果。建立的改良离子捕获电镜法，用于检测犬脑匀浆和犬脑接种细胞培养物，与离子捕获电镜法、免疫电镜法及直接电镜法相比，效果更为理想。１４例临床诊断为犬瘟热的病犬，综合运用上述微生物学手段检测，结果为１２例阳性，２例疑似。     

犬呼肠病毒3型在BHK-21细胞上增殖的研究

采用酶标ＳＰＡ法进行了犬呼肠３ 型病毒在ＢＨＫ２１ 细胞上定位的研究。结果表明：接毒后６ ｈ 即可在胞浆见到絮状阳性反应,２４ ｈ 后呈强阳性着染;Ｈ．Ｅ．染色在胞浆内可见强嗜酸性着染或嗜酸性包涵体,提示可能是病毒感染引起的特征性病变,感染后细胞病变发展较快,６０ ｈ 细胞大部脱落;病毒血凝滴度结果也证实了细胞病变与病毒增殖有关。     

鸭病毒性肝炎的研究：弱毒在雏鸭和成年鸭体内分布和排泄

本文首次报道了将鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）弱毒株接种鸭（成年鸭和雏鸭）后，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测不同时间病毒在鸭体各组织器官的分布和由粪便排出的情况，以及同群饲养但不接种ＤＨＶ的雏鸭和成年鸭感染ＤＨＶ弱毒后在体内分布及排泄情况，结果表明ＤＨＶ弱毒接种１日龄争论鸭后２０小时，接各成年鸭后４８小时即可在直肠中检出ＤＨＶ；雏鸭接种弱毒后年鸭后４８小时即可在直肠中检出ＤＨＶ；雏鸭接种弱毒后用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ     

CDV93039株在Vero细胞上增殖的研究

ＣＤＶ９３０３９株感染Ｖｅｒｏ细胞后主要表现细胞变性，坏死，空泡化，合肥体形成和包涵体的出现。感染后４天可见胞浆包涵体，８天可见核内包涵体，核内包涵体的产生可能与病毒的毒力有关。与文献报道的ＣＤＶ其他毒株相比，ＣＤＶ９３０３９株在Ｖｅｒｏ细胞上的感染速率属中间型。     

用聚合酶链反应检测犬传染性肝炎的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对人工感染犬传染性肝炎病毒（ＩＣＨＶ）的犬进行定期尿检，并以血凝和血抑制试验及病毒分离进行比较。结果表明，用ＰＣＲ方法可以快速检出排毒的犬，其灵敏度是血凝效价的上百倍。     

犬实验性感染ICHV的病理学研究

采用北京地区分离的犬传染性肝炎病毒ＢＪ－１株经口服感染１月龄幼犬，对死亡犬和濒死犬进行病理形态学观察和脏器组织中抗定位的研究。表明，肝脏是ＩＣＨＶ侵害的主要靶器官，胆囊的病理改变和脏器组织中的包涵体形态具有一定的诊断意义；采用ＢＡ法诊断犬传染性肝炎，具有特异性强，结果确实可靠，标本易于长期保存等优点。     

光敏生物素标记EDSV—DNA探针检测鸡减蛋综合症（EDS）的研究

应用光敏生物素标记ＥＤＳＶ－ＤＮＡ与ｐＵＣ１９重组质粒ＤＮＡ做探针，检测人工发病减蛋综合症蛋鸡的粪便，蛋，输卵管样品，以新城疫病毒（ＮＤＶ），传染性病毒（ＩＢＤＶ），传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ），包涵体肝炎病毒（ＩＢＨＶ）作对照。实验结果显示：探针能特异地检出ＥＤＳ病鸡粪便，输卵管，蛋清样品中的病毒，与ＮＤＶ，ＩＢＤＶ，ＩＢＶ及ＩＢＨＶ均呈阴性反应。探针灵敏度达１０ｐｇＥＤＳＶ－ＤＮＡ。     

应用高免卵黄抗体防治鸭病毒性肝炎的研究

应用雏鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）鸡胚化弱毒株（ＱＬ７９）和鸭病毒性肝炎油剂苗免疫鸡制备了高免卵黄抗体。考察了使用高免卵黄抗体治疗雏鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）的疗效。结果表明，用卵黄抗体治疗ＤＶＨ的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间。卵黄抗体的中和效价应达２８．５以上，治疗最佳时间应在ＤＨＶ强毒进入鸭体后２８小时内，抗体效价在２８．５以下或错过最佳时间或超过３６小时，则治疗效果极差。     

犬传染性肝炎的诊疗报告

犬传染性肝炎是由腺病毒引起的一种急性败血性传染病。以肝小叶中心坏死 ,肝实质细胞和皮肤细胞内出现核内包涵体及出血时间延长为特征。犬传染肝炎在上海地区比较多发 ,对犬危害严重 ,给养犬业造成较大的经济损失。犬传染性肝炎病毒 (ＩＣＨＶ)属于腺病毒 ,犬腺病毒分为ＣＡ -Ⅰ型和ＣＡ -Ⅱ型。ＣＡ -Ⅰ型是引起犬传染性肝炎的病原 ,ＣＡ -Ⅱ型是引起呼吸道疾病的病原 ,因此一般也分肝炎型和呼吸型这两型。该病毒抵抗力相当强 ,低温条件下 ,长期存活在土壤中 ,经 1 0～ 1 4天仍有致病力 ,在犬窝里也能存活较长的时间。病犬和康复带毒犬是…     

应用高免卵黄抗体防治鸭病毒性肝炎的研究

应用雏鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）鸡胚化弱毒株（ＱＬ７９）和鸭病毒性肝炎油剂苗免疫鸡制备了高免卵黄抗体，考察了使用高兔卵黄抗体治疗雏鸭病毒性肝炎（ＤＶＨ）的疗效。结果表明，用卵黄抗体治疗ＤＶＨ的疗交取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间，卵黄抗体的中和效应应达２＾８．５以上，治疗最佳时间应在ＤＨＶ强毒进入鸭体后２８小时内，抗体效价在２＾８．５以上或过最佳时间或超过３６小时，则治疗效果极差。     

犬冠状病毒的分离鉴定及其纤突蛋白基因的克隆与序列比较

以犬胎原代细胞，采用同步接种、带毒传代和添加新细胞的方法，从１例腹泻犬脾脏和１例临床健康犬肠内容物中分离出２株犬冠状病毒（ＣＣＶＹＳ１，ＣＣＶ ＣＩ１）。该２株病毒可使ＣＲＦＫ细胞出现典型的细胞融合病变，与从美国引进的ＣＣＶＮＬ－１８参考株形成的细胞病变相似；电镜负染和超薄切片观察，分离毒株细胞培养物中均含有典型的冠状病毒粒子，并形成胞浆内包涵体；经理化学、生物学鉴定，濉有ＣＣＶ的特性；间接免疫荧     

CDV93039株在Vero细胞上增殖的研究

ＣＤＶ９３０３９株感染Ｖｅｒｏ细胞后主要表现细胞变性、坏死，空泡化、合胞体形成和包涵体的出现。感染后４天可见胞浆包涵体，８天可见核内包涵体，核内包涵体的产生可能与病毒的毒力有关。与文献报道的ＣＤＶ其他毒株相比，ＣＤＶ９３０３９株在Ｖｅｒｏ细胞上的感染速率属中间型。ＣＤＶ９３０３９株在Ｖｅｒｏ细胞上增殖后的毒力较高，除不同毒株间可能存在差异外，培养温度的高低亦是原因之一。ＣＤＶ９３０３９株在Ｖｅｒｏ细胞上的最佳增殖条件是在３３℃培养８～１２天。     

狂犬病 犬肠炎 犬瘟热 犬腺病毒病犬副流感五联弱毒冻干疫苗的研究

从国外引进的犬瘟热病毒（ＣＤＶ）、犬细小病毒（ＣＰＶ）、犬腺病毒－２型（ＣＡＶ２）和犬副流感病毒病毒（ＣＰＩＶ）四联弱毒样品中，分离筛选出增殖性良好的ＣＰＶ０ＸＮ１，ＣＡＶ２－ＸＮ３和ＣＰＩＶ－ＸＮ４株。另外还通过离体异种细胞交叉传代，获得的ＣＤＶ－ＸＮ１１１２弱毒株；从狂犬病毒株疫苗样品中筛选出ＥＲＡ８３６株。经试验证明这５株病毒在５代以内可作为制苗用种毒。采用静置和旋转培养法高滴度扩增这５株弱     

聚合酶链反应,病毒分离和血凝试验检测犬粪样中细小病…

对聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增犬细小病毒（ＣＰＶ）衣壳基因的诊断方法与用Ｇｒａｎｄｅｌｌ猫肾细胞（ＣＲＦＫ）或Ｍａｄｉｎ－Ｄａｒｂｙ犬肾细胞（ＭＤＣＫ）分离病毒和能被ＣＰＶ特异性抗血清抑制的粪便血凝（ＨＡ）试验进行了比较；ＰＣＲ检测的５９例粪样中有１例假阴性（１．７％）。它与用ＭＤＣＫ细胞分离病毒同样敏感，而比用ＣＲＦＫ细胞分离病毒或ＨＡ试验更敏感。这些结果表明，ＰＣＲ可作为粪样ＣＰＶ检测的常     

鸭病毒性肝炎的研究——弱毒在雏鸭和成年鸭体内分布和排泄

本文首次报道了将鸭肝炎病毒（ＤＨＶ）弱毒株接种鸭（成年鸭和雏鸭）后，用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测不同时间病毒在鸭体各组织器官的分布和由粪便排出的情况，以及同群饲养但不接种ＤＨＶ的雏鸭和成年鸭感染ＤＨＶ弱毒后在体内分布及排泄情况。结果表明，ＤＨＶ弱毒接种１日龄雏鸭后２０小时、接种成年鸭后４８小时即可在直肠中检出ＤＨＶ；雏鸭接种弱毒后用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检出ＤＨＶ的时间顺序是：心、肝、肾、脾、肺、肾和粪便，胸肌和脑未检出ＤＨＶ，同居感染雏鸭检出ＤＨＶ的时间顺序是：肺、肾、心、肝、脾和粪便，同样在胸肌和脑中未检出ＤＨＶ；成年鸭接种弱毒后检出ＤＨＶ的时间顺序为：心、肝、脾、肺和粪便，胸肌和脑未检出ＤＨＶ，同居感染成年鸭检出ＤＨＶ的时间顺序是：肺、肾、心、肝、脾和粪便，胸肌和脑未检出ＤＨＶ。本试验为临床上更好地应用ＤＶＨ弱毒疫苗预防ＤＶＨ提供了理论依据     

传染性法氏囊病病毒（IBDV）人工感染SPF鸡的病理学观察

取３２０只３０～４０Ｈ龄ＳＰＦ鸡，经滴鼻和点眼接种传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ），接种后２４～７２ｈ出现死亡，病死率５１．２５％，死亡鸡剖检变化主要为法氏囊肿胀、出血，甚至呈紫葡萄样，脾脏肿大、出血，骨骼肌出血，腺胃肌胃交界处出血。病理组织学变化，呈现以法氏囊淋巴滤泡内髓质淋巴细胞坏死为主的特征性病变，并可在巨噬细胞浆内发现病毒包涵体。电镜观察，在法氏囊内淋巴细胞、异染性细胞、巨噬细胞浆内，见大量晶格状排列的病毒粒子和包涵体，表明ＩＢＤＶ首先损害法氏囊淋巴滤泡髓质内未成熟的Ｂ淋巴细胞，病毒在淋巴细胞内以包涵体方式增殖。