优势卵泡对供体牛超排效果的影响

利用超声波活体采卵仪,去除具有优势卵泡的荷斯坦母牛卵巢上的优势卵泡,诱发新的卵泡波进行超排处理,并进行了:(1)与发情后9d处在黄体期的母牛进行的超排效果比较;(2)与利用CIDR、孕酮、雌二醇诱发新的卵泡波进行的超排效果比较;与具有优势卵泡但没有去除而进行的超排效果进行比较,从而探讨优势卵泡对奶牛超排效果的影响。结果表明,去除优势卵泡组与CIDR组以及自然发情组的超排结果,3组间头均获卵、受精卵数、可用胚胎数差异均不显著(p>0.05)。带有优势卵泡组超排结果与其他三组相比,头均获卵、受精卵数、可用胚胎数差异极显著(p<0.01),可见超排处理时优势卵泡的存在对超排效果的影响极大。     

山羊超排过程中主要生殖激素变化规律的研究

将试验羊按年龄和体重配对分成2组(试验组和对照组)。试验组羊超排后在发情配种时注射促黄体素(LH)80U,发情配种后3d,开始以3d6次法注射孕酮(P4)6mL。对照组不注射LH和P4。在同期发情、超数排卵和配种后的不同生理阶段分别进行颈静脉采血,分离血清,然后用放射免疫法(RIA)测定血清中促黄体素、促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)、孕酮的含量。在发情配种后6d,采用手术法冲胚。采胚结果表明试验组获胚数、可用胚数、卵泡数、黄体数等各项指标和对照组相比均有明显升高的趋势,但统计学上差异不显著。对激素分析结果表明注射外源LH和P后相应的血液中激素水平升高,说明超排过程中注射LH和P对提高超排效果有一定作用。     

17β雌二醇或促性腺释放激素(GnRH)与FSH-P结合使用对牛进行超数排卵效果的研究

本实验将生殖正常的54头杂种母牛,在发情周期的第8—12天进行重复超排处理。FSH—P的总用量为28毫克,每天二次,逐日递减。FSH—P处理后的48小时,每头牛注射前列腺素(PGF)500微克。第一组注射FSH—P为对照组;第二组注射FSH—P,并在前列腺素处理后36小时再注射400微克17β雌二醇;第三组注射FSH-P,并在PGF处理后48小时再注射250微克GnRH。在母牛开始发情后的12,24,36小时用冷冻精液进行人工授精。发情后第七天用非手术法采卵(胚胎)。通过直肠检查,记录黄体数并评价卵的回收率。并将试验牛全部采血进行激素测定。处理结果,卵巢反应没有差异。第三组回收的胚胎均数,显著地高于第一、二组(P<0.05),但多精卵或可移植的胚胎均数间差异不显著。组间胚胎回收率、受精率或可移植胚胎的百分率亦不存在明显差异。第二组排卵末期血清雌二醇水平显著地高,这与较高的受精率有关。而且发现黄体数和胚胎参数及发情期雌二醇的水平间有着显著的正相关。     

绵羊同步发情和超数排卵的研究

应用国产激素于发情季节对90只东北细毛羊和半细毛羊进行超数排卵和同步发情,研究了不同激素、不同超排和同步发情方案、不同品种及重复超排对绵羊超排效果的影响。实验结果表明:方法Ⅰ用提纯FSH、PGF_(2α)和hCG与方法Ⅱ用孕酮、PMSG、FSH超排绵羊的排卵数差异不显著(p>0.05),但前者的获卵率明显高于后者的(p<0.05)。比较方法Ⅰ与方法Ⅱ发情26～48小时和66～90小时输卵管冲卵(胚)率说明,用方法Ⅱ超排时,卵(胚)进入子宫的速度明显快于方法Ⅰ;用方法Ⅱ超排时,排卵15个以上与排卵少于15个的绵羊其获卵率差异不显著(p>0.05);间隔2个情期再次超排的绵羊排卵数接近于初次超排绵羊的排卵数,但明显高于间隔、1个情期再次超排绵羊的排卵数;用方法Ⅱ超排的东北细毛羊与半细毛羊的排卵数无明显差异(p>0.05);用孕酮同步处理的绵羊超排后,绝大多数于最后1次注射孕酮后42～51小时开始发情,而经PGF_(2α)处理的超排绵羊发情时间很不集中,从注射PG的后18到42小时之间几乎均匀分布。     

雌二醇与孕酮奶样纸片酶免法建立及其临床应用

乳汁雌二醇与孕酮含量是判断母牛卵巢机能状态的重要指标。本试验建立了雌二醇与孕酮奶样纸片酶免法,并用于测定不同定时排卵程序中母牛乳汁雌二醇与孕酮含量,结果表明所建立的方法简便实用,排卵程序中母牛乳汁孕酮、雌二醇含量变化规律与理论分析相符,可以用来判定母牛发情、妊娠及卵巢功能。     

奶牛乳中孕酮水平和超排效果的研究

对12例超排供体母牛固体干奶样孕酮含量进行了放射免疫分析,研究了其与超排效果间的关系。结果指出:(1) 孕酮水平变化规律正常者,超排有效率达100%。即超排前孕酮值>12、超排期发情<10、采卵期>40ng/ml者,其黄体数均>4并获可用胚胎。(2) 超排采卵后注射PGF2α,虽孕酮有下降趋势,但未降低至发情的水平,在有效期内均未出现发情。关于缩短超排后供体的发情期问题,尚需进一步研究。     

用多种促卵泡素产品超排黑白花母牛效果比较

本试验用国内外的6种FSH产品分12组超排黑白花母牛297头次。各组依次为(1)动物所pFSH,(2)动物所oFSH,(3)AUSAoFSH,(4)AUSA加剂量oFSH,(5)AUSApFSH,(6)Sigma FSH,(7)日本FSH,(8)宁波500单位,(9)宁波360单位,(10)武汉500单位,(11)武汉360单位,(12)武汉500单位加LH。冲卵时记录卵巢上的黄体数、卵泡数、采集的总卵数和可用胚胎数。经统计分析,第8和12组在各组中排卵数最高(P<0.05,或P<0.01除第11组),oFSH排卵数最低。有效胚胎数列在前6位的是第9、11、1、7、4和5组,第1-7组有效胚胎的比率较高(P<0.05或P<0.01)。使用宁波和武汉产的FSH,360单位比500单位效果要好,配种时注射LH可提高排卵数和有效卵数。冲卵时卵巢上的卵泡数与黄体数、采卵数和有效胚胎数没有明显相关(r<±0.02,P>0.05),而黄体数与采卵数(r=0.83)和有效胚胎数(r=0.67)为强相关,采卵数与有效胚胎数也呈强相关(r=0.81),且皆为差异极显著(P<0.01)。由此得出结论:oFSH比PFSH用于牛超排生物活性低;FSH质量与有效胚胎数有关,用高纯度的FSH超排可以提高胚胎的可用率。     

超排山羊17β—雌二醇和促卵泡素与卵巢反应的关系

对１７只性周期正常的母山羊于性周期第八，九天应用ＦＳＨ－ＰＧＦ２α超排处理，同时将同期经受体作为对照，用放射免疫方法测定血浆１７β－雌二醇和促卵泡素浓度。试验发现，超排组排卵数和收集胚胎数显著高于对照组。在处理组中，有６头羊超排无效果。经ＦＳＨ处理后，１７β－雌二醇的血浆浓度呈上升趋势，于处理后８４ｈ达到峰值，此时表现发情，但超排有反应组的血浆逍度显著高于无反应组，发情时１７β－雌二醇浓度与排卵数     

同期发情处理对西门塔尔母牛发情率、受胎率和分娩率的影响

为了研究同期发情对西门塔尔母牛使用性控冻精人工输精后繁殖率的影响，试验选择体况中等、健康的2～4岁空怀母牛1 824头，随机分为A、B、C组，分别采用戈那瑞林、氯前列醇钠、促黄体素释放激素不同组合处理，测定母牛繁殖性能指标。结果表明：A组母牛发情率、受胎率和分娩率均最高，发情率显著高于B、C组(P<0.05),受胎率和分娩率显著高于C组(P<0.05);第二次自然发情配种率3组之间差异不显著(P>0.05)。说明西门塔尔母牛采用第0天肌肉注射戈那瑞林100μg,第7天肌肉注射氯前列醇钠0.8 mg,第9天肌肉注射戈那瑞林100μg,第10天检查发情排卵情况配种，配种前肌肉注射促黄体素释放激素A3(LH)25μg处理，可以促进母牛发情配种、提高养殖经济效益。     

奶牛的发情鉴定与适时配种

1　正常发情征状奶牛属非季节性发情动物 ,只要营养充分 ,饲养管理良好 ,则可常年发情。奶牛发情持续期较短 ,从发情到排卵时间平均为 30 h。排卵时间一般在发情症状消失以后。大多数奶牛发情过程中都有爬跨现象 ,即母牛与母牛相互爬跨——俗称“同性爱”。多数奶牛都排单卵( 97% ) ,也有 3%的母牛可能排双卵 ,排多卵的极少 ,如果注射外源性激素 (如 PMSG、FSH) ,排卵数可增加 2 1 .6 %。一般右侧卵巢排卵多( 6 0 .5% ) ,左侧卵巢排卵少 ( 39.5% ) ;夜间排卵多 ( 85.2 % ) ,特别是在 0～ 6时排卵多 ,所以配种常在夜间。奶牛发情时 ,体温…     

超排山羊内源性激素含量变化与卵巢反应的关系

26只波尔山羊随机分成4组(第1、2组各7只,第3、4组各6只),用1.5mg孕酮耳皮下埋植,11d后移去并注射5mgPGF2α2次(间隔12h)进行同期发情。孕酮移去前2d,第1、2、3组用16AUFSH分6次注射(4、4、2、2、2、2AU),间隔12h;第4组同样用16AUFSH,仅将1d的剂量1次注射。第1组纯用pFSH,第2、3、4组用pFSH添加40%pLH。第1、3组山羊在最后2次注射FSH时加注200μgpLH。孕酮移去前,将采血导管插入试验羊颈静脉内并加以固定,孕酮移去前及移去后不同时间采集血样,用ELISA方法测定血浆中17β-雌二醇(E2)和卵泡刺激素(FSH)的含量。孕酮移去后,每8h用试情公羊试情,发情后用公羊每天配种1~2次至发情结束。胚胎回收前1d,用内窥镜检查卵巢反应。最后1次配种后6~7d,进行非手术回收胚胎。结果显示,试验羊在最后2次注射FSH时加注LH,能缩短孕酮移去后E2上升、E2最高浓度和E2下降的时间。E2的最高浓度出现的时间相对稳定,为孕酮移去后28.7~38.9h。不同的超排处理对FSH的分泌、卵巢反应和胚胎产量没有影响。试验羊用pFSH/40%pLH不加注pLH,能获得较多的卵子或胚胎和可移胚胎。黄体数与E2的最高浓度存在显著的正相关(r=0.44,P<0.05)。E2上升至下降的时间与黄体数存在极显著的负相关(r=-0.52,P<0.05)。黄体数与第2次FSH上升和第2次FSH最高浓度出现的时间均存在显著的正相关(r=0.54和r=0.52,P<0.05)。结果显示,用pFSH/40%pLH超排处理山羊能取得比较满意的效果。E2最高浓度出现的时间为孕酮移去后29~39h。此时间内E2的浓度能表明供体卵巢反应的好坏。     

肌注复合维生素ADE液对西门塔尔母牛性控冻精受胎率的影响

为了探索提高西门塔尔母牛繁殖率的措施，试验将新疆阿瓦提县饲养的西门塔尔适龄空怀母牛1 286头分为3组，A组462头母牛、B组430头母牛，第0天肌肉注射维生素ADE液10 mL,第7天肌肉注射氯前列醇钠(CS)0.8 mg(A组第7天同时肌肉注射维生素ADE液10 mL,B组不注射),第10天发情的母牛肌肉注射1支促黄体素释放激素A3(LH);C组394头母牛，第0天检查空怀并登记，第7天肌肉注射氯前列醇钠0.8 mg,第10天有发情表现的肌肉注射1支促黄体素释放激素A3。3个组母牛均在注射氯前列醇钠6 h内采用西门塔尔牛X性控冻精进行人工授精。空怀母牛自然返情后(19～21 d)进行补配，配种前肌肉注射1支促黄体素释放激素A3。测定母牛首次和二次发情率、受胎率和母犊率。结果表明：经过两次同期发情处理，A、B、C组西门塔尔母牛总发情率分别为98.9%、97.9%、95.2%,总受胎率分别为89.1%、81.5%、72.5%,母犊率分别为90.2%、90.4%、90.4%。说明西门塔尔母牛同期发情处理第0天和第7天肌注复合维生素ADE液可以显著提高母牛的发情率、受胎率。     

GnRH对人工孪生处理母牛下丘脑－垂体－性腺轴的调控

从农区黄牛群中选择２１头产后正常母牛，分比三组。组Ⅰ在产后发情周期第１７天注射孕马血清促性腺激素（ＰＭＳＧ），发情当天注射抗ＰＭＳＧ血清，配种时注射生理盐水。组Ⅱ和组Ⅲ的ＰＭＳＧ及其抗血清处理方法与组Ⅰ相同，但在配种时分别注射促性腺激素释放激素（ＧｎＲＨ）或其抗体。各组母牛在ＰＭＳＧ处理前安装颈静脉血管导管，每日间隔１５分钟收集血样，连续３小时。发情当天，间隔３０分钟收集血样，直至发情征兆消失。应用双重酶标免疫测定方法和酶联免疫吸咐测定方法，分别检测血清中ＧｎＲＨ、ＬＨ和Ｐ＿４（孕酮）水平。结果表明，（１）在结合应用ＰＭＳＧ及其抗体处理的母牛发情期间，外源ＧｎＲＨ可使外周血中ＧｎＲＨ和ＬＨ水平升高。用ＧｎＲＨ抗体中和内源ＧｎＲＨ，可使血中ＧｎＲＨ和ＬＨ的水平降低，并阻抑排卵。（２）在母牛排卵前，通过某种途径调控ＧｎＲＨ和ＬＨ的脉冲释放水平，可以提高母牛的超排效果，并有可能控制母牛的排卵数。（３）用ＰＭＳＧ及其抗体和ＧｎＲＨ超排处理的母牛，发情期间的ＧｎＲＨ在排卵前有多个脉冲释放峰，但ＬＨ只有一个脉冲释放峰，而且ＧｎＲＨ脉冲释放高峰出现的时间较ＬＨ峰早。（４）在配种后第８天检出的血清孕酮水平与排卵数呈强正相关?     

人工授精后不同阶段葡萄糖、孕酮和雌二醇含量对奶牛妊娠预测的研究

为探究人工授精后不同阶段葡萄糖、孕酮和雌二醇含量对奶牛妊娠的影响,本实验选取63头2～3胎、3～4岁和体况评分(BCS)2.75左右的健康荷斯坦奶牛,人工授精后经发情鉴定及妊娠诊断将奶牛分为妊娠组(n=24)、未妊娠组(n=19)、返情组(n=20)。分别在人工授精后1、5、17、28 d采集尾静脉血10 mL,测定血浆葡萄糖、孕酮(P_4)和雌二醇(E_2)含量并进行分析。结果显示:人工授精后第5天妊娠和未妊娠组血浆中孕酮和雌二醇极显著高于返情组;人工授精后第17天返情组和妊娠组血浆中P_4、E_2含量以及P_4/E_2极显著高于未妊娠组;人工授精后第28天未妊娠组血浆P_4含量显著高于返情组,人工授精后第28天血浆葡萄糖含量妊娠组显著高于返情组。综上表明,人工授精后第5天和第17天高浓度血浆P_4和E_2有利于维持胚胎细胞正常发育和母体和胚胎识别,提高奶牛胚胎存活率;授精后第28天低浓度葡萄糖不利于妊娠,说明血浆中葡萄糖、孕酮和雌二醇对奶牛人工授精后不同阶段早期妊娠具有预测作用。     

猪精液抑制素主动免疫诱导黄牛超数排卵的研究

用从猪精液提取的抑制素制品作免疫原对产后２～５个月的２５头母黄牛进行主动免疫。抑制素用福氏完全佐剂乳化后间隔２０天对其进行两次免疫。在发情配种后第１０天对１１头受试牛经直肠触摸卵巢检查黄体数，同时颈静脉采血，采用ＥＬＩＳＡ法检测血清孕酮水平。用直肠触摸黄体数来估测有超排反应的母牛占１８％（２／１１），而通过孕酮水平与排卵数的线性回归关系推算有超排的牛占３６％（４／１１）。结果表明，用猪精液抑制素主动免疫黄牛，可以提高其排卵率。     

奶牛血清孕酮和总胆固醇水平与超数排卵效果的关系

为了研究血清中若干生化指标与母牛超数排卵的关系。在性周期中期第10天或11天超排处理之前颈静脉采血,用以测定血清中孕酮、总胆固醇等指标的水平,而后用FSH进行超排处理。输精后第7天左右采用非手术采卵,并通过形态学检查对胚胎进行鉴定。根据可用胚胎数将供体母牛分为A组(可用胚胎>2枚)和B组(可用胚胎≤2枚),并比较两组孕酮、总胆固醇等指标的水平。结果表明:周期中期血清孕酮水平在3.0ng/ml以上对于预选供体母牛是有效的。血清总胆固醇水平与可用胚胎数的相关系数r=0.6079(n=19;P<0.01),周期中期血清总胆固醇水平高于140mg/dl似乎可以做为预选供体牛较好的参数。     

GnRH在母牛繁殖中的应用

一、用于母牛超排促性腺释放激素(GnRH)和其它激素配合使用,可以显著地提高超排效果。金川(1983)对黑白花青年母牛投与2500国际单位的孕马血清激素(PMSG),并于第一次人工授精时分两次给与促黄体素-释放激素(LH-RH),确认可以提高排卵数和回收卵数,但     

海门山羊超数排卵,卵巢反应和胚胎发育观察

用促性腺激素 FSH(280IU 和340IU)、PMSG(1000IU)对海门山羊进行超数排卵处理,并比较它们的超排效果.试验结果表明:用280IU 的 FSH 超排,排卵数平均为7.5±4.6;用340IU 的 FSH 超排,排卵数平均为8.6±6.2;用 PMSG 超排,排卵数平均为5.5.FSH 处理超排效果比 PMSG 处理效果好。FSH 组的两种剂量间的效果差异不显著(P>0.05);卵巢对激素的反应比较明显,卵泡多,卵巢体积增大.经观察,胚胎发育在发情配种后的第3天,以单细胞受精卵到2细胞阶段的胚胎趋多;第4天,以4—8细胞阶段的胚胎趋多;第5天,以16—32细胞阶段趋多;第6天,发育到桑椹胚;第7—8天,以囊胚趋多。这一结果,为海门山羊今后进行胚胎工程提供了参考价值。     

关中驴产后期和发情期血浆17β-雌二醇、孕酮和睾酮浓度的变化

本研究应用放射免疫分析法,测定了关中驴产后期(n=18)和发情期(n=6)血浆17β-雌二醇(E_2)、孕酮(P)和辜酮(T)的浓度。测定结果表明,产后第一次发情前血浆E_2浓度较低(12.22±1.92pg/ml),第一次发情期逐渐上升,排卵前第一天和第二天达到较高水平(19.48±2.16pg/ml和20.41±3.27pg/ml,±SE,P<0.05),排卵后降至基础浓度。产后第一次发情前血浆P浓度较低(2.74±0.51ng/ml),排卵后逐渐上升,第四天和第五天显著和极显著高于排卵前P水平,血浆值为6.19±0.66ng/ml和8.09±1.09ng/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次发情前血浆T浓度较高,发情期下降,排卵后逐渐上升,第五天和第六天显著和极显著高于发情期T水平,分别为313.11±37.57pg/ml和356.73±46.37pg/ml(P<0.05和P<0.01)。产后第一次排卵前P/E_2和P/T比值均较低,排卵后上升,第五天分别达到861和25.83。产后第一次发情前T/E_2比值较高,发情期下降,排卵后上升,第五天达到33.34。排卵前后间隔6小时采样的分析结果表明,排卵前第30～24小时,E_2浓度急剧上升达到峰值。排卵后P浓度于第78～96小时达到较高水平。血浆E_2与P、E_2与T均呈中等负相关(r=-0.42和r=-0.41)。P与T为极显著正相关(r=0.92)。周期性发情期血浆E_2、P、T浓度的分泌范型和产后第一次发情期基本相似。     

LH对沼泽型水牛超数排卵的作用(研究简报)

水牛超数排卵中主要技术难题之一是经人工数素超排后,卵巢中己发育的卵泡,不能正常排出卵子,本试验目的是探讨如何提高超排水牛的排卵率。8头具有正常的性周期,年龄6～8岁的本他沼泽型水牛用于该项研究。首先对试验水牛进行二次性周期同期化处理,每头肌注PG(前列腺素F_2α)0.3mg,相隔11天。在母牛第二次发情后11天,进行连续5天的超数排卵处理。每头母牛每天注射2次FSH—OV(北京动物所生产的高纯度促卵