SHU 9119对小鼠发情周期中Ghrelin表达的影响

为了研究SHU9119与ghrelin之间的潜在的生理学关系,本试验选择4周龄的C57BL/6小鼠下丘脑和卵巢组织为研究材料,对小鼠发情周期中SHU9119介导的ghrelin mRNA在下丘脑和卵巢部位表达水平进行研究。结果表明,正常生理条件下小鼠间情期下丘脑保持较高水平的ghrelin mRNA表达,而在卵巢内其表达水平相对较低;腹腔注射SHU9119(50μg/kg体重)可极显著抑制下丘脑中ghrelin mRNA的表达(P<0.01),同时显著促进小鼠间情期卵巢Ghrelin mRNA的表达(P<0.05)。然而,SHU9119并未引起小鼠发情前期、发情期和发情后期ghrelin mRNA表达量的显著差异。上述结果表明,SHU9119可能通过MC4R系统调节间情期小鼠ghrelin的变化,而不参与其他性周期ghrelin mRNA表达量的相关调控。     

Ghrelin通过弓状核区域α型雌二醇受体神经元介导雌性小鼠采食调控

Ghrelin作为一种具有特殊功能的能量调控因子,在能量代谢平衡以及生殖调控研究中被广泛关注,然而其在小鼠性周期变化过程中发挥调控的机制尚不明确。本研究通过腹腔注射ghrelin研究其对小鼠性周期不同阶段采食量及血清中雌二醇浓度的影响,并运用免疫荧光技术鉴定了ghrelin与弓状核(arcuate nucleus,ARC)区域分布的α型雌二醇受体(estrogen receptorα,ERα)神经元之间的共表达情况。结果表明,ghrelin(50μg·kg-1)注射后的2h内可显著促进小鼠发情前期采食量(P0.05);ghrelin可极显著抑制雌激素的分泌(P0.01),其他阶段未见显著性差异。同时,ghrelin显著增强小鼠各个性周期中ARC区域的神经元活动(P0.05或P0.01),均能直接作用于ARC区域ERα神经元,且在发情前期共表达率最高。因此,我们推论小鼠发情前期,腹腔注射ghrelin可直接作用于下丘脑区域的ERα神经元调控血清中雌二醇浓度,并最终介导雌性小鼠采食。     

从下丘脑室旁核向背肩胛棕色组织发送投射的谷氨酸能神经元的鉴定

谷氨酸能神经元可抑制摄食并防止肥胖。有证据表明,在缺乏囊泡型谷氨酸转运蛋白2(VGlut2)的小鼠中,重新表达专一蛋白1(SIM1)神经元上的VGlut2可降低采食。然而,VGlut2神经元的位置和轴突投射尚不清楚。因此,本试验探寻了向背肩胛棕色脂肪组织(IBAT)发送神经元投射的上游脑区,检测了VGlut2和黑皮质素4型受体(MC4R)神经元的脑内定位,确认了胰淀素(amylin)对于VGlut2和MC4R免疫阳性神经元表达的调控作用,拓展了VGlut2神经元发送神经支配的大脑区域。结果显示,PVN^VGlut2神经元向IBAT发送密集的神经支配信号。在前皮质杏仁核(ACo)、纹状体(CPu)和海马齿状回(DG)发现VGlut2与MC4R共定位。amylin注射显著促进PVN^VGlut2::MC4R(P=0.004 8)免疫阳性神经元表达,提示VGlut2与MC4R涉及amylin的调节过程。PVN^VGlut2神经元向下丘脑腹内侧核(VMH)、外侧下丘脑(LH)、中脑导水管周围灰质(PAG)和蓝斑(LC)核团发送神经元投...     

黑皮质素神经元通过多重途径调节新陈代谢

<正>中枢黑皮质素通路由众多神经元组成,释放内源性黑皮质素配体(ACTH,α-β-γ黑皮质素刺激激素(MSH)),五个受体(MC1R,MC2R,MC3R,MC4R及MC5R)和内源性黑皮质素抑制剂/反向激动剂及刺鼠相关肽(AgRP)。中枢神经系统中POMC神经元定位在下丘脑弓状核(ARC)及脑干的孤束核(NTS)内,二者均涉及到能量平衡的调节中。在热量充足的应答中,POMC神经元被激活后减少进食,增加能量消耗及减少体重。AgRP被促进食欲的激     

脂肪酸调控动物采食研究进展

采食量是影响动物生产性能的一个极其重要的因素。目前普遍认为,动物的食欲调控主要在于下丘脑食欲中枢的信号整合。下丘脑弓状核促采食神经元能够感应包括葡萄糖、脂肪酸和氨基酸等在内的营养物质的浓度变化,通过刺激刺鼠相关蛋白(AgRP,一种促采食肽)的表达和分泌进而参与动物采食和能量平衡的调控。迄今为止,各种脂肪酸对动物采食的调控和影响机制还不是很系统。本文依据大量国内外研究成果对脂肪酸调控畜禽采食的研究进展作一综述。     

Ghrelin调节采食量的研究进展

Ghrelin是从人和大鼠的胃中分离出来的,作为生长激素促分泌素受体的内源性配体,具有促进生长激素(GH)的分泌、增加胃肠蠕动、调节神经内分泌、消化代谢和能量稳态等功能。此外,Ghrelin通过激活下丘脑弓状核中的神经肽Y(NPY)/刺鼠基因相关蛋白(AgRP)神经元,刺激食欲素(Orexin)等激素的释放调节摄食。文章就Ghrelin调节采食、消化代谢、与其他采食因子的关系等进行综述。     

MC4R在小鼠下丘脑的定位及其基因在发情周期下丘脑、卵巢中的表达变化

黑素皮质素受体-4(Melanocortin-4 Receptor,MC4R)在参与调节摄食行为和机体能量平衡中发挥重要作用,但其在生殖活动中的作用尚不明确。为此本实验以不同发情周期中的C57小鼠为对象,利用免疫荧光对MC4R神经元在下丘脑的表达进行定位。通过Western Blot确定MC4R在小鼠发情前期、发情期、发情后期和间情期的下丘脑和卵巢中蛋白表达变化。结果表明:MC4R神经元广泛分布于下丘脑第三脑室,发情期下丘脑中MC4R蛋白表达量显著低于其他3个时期(P0.05);同时期卵巢中MC4R蛋白表达量显著低于发情前期和发情后期(P0.05),发情后期MC4R蛋白表达量极显著高于其他3个时期(P0.01)。这一结果阐明了小鼠在发情周期不同阶段下丘脑和卵巢组织中MC4R的表达变化规律,为进一步研究MC4R在小鼠生殖活动中的作用提供理论基础。     

可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)在绵羊下丘脑中的分布

可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)是一类具有调控动物食欲和体质量等生理功能的重要因子。但有关CART神经元在绵羊下丘脑的分布部位和基本神经投射通路尚无报道,限制了对其潜在功能的进一步研究。本试验以绵羊下丘脑为研究材料,运用免疫荧光技术研究CART神经元在下丘脑的分布。结果表明,CART神经元集中分布在绵羊下丘脑腹内侧视前核(ventromedial preoptic nucleus,VMPO)区域,且均有较为明晰的神经元胞体及纤维结构,与小鼠CART神经元的分布部位有明显的差异,但公母绵羊之间没有明显的分布差异。这一结果为进一步研究CART在绵羊机体能量代谢平衡中的生物学作用奠定了基础。     

黑皮质素4型受体在绵羊下丘脑区域的定位

黑皮质素4型受体(melanocortin 4 receptor,MC4R)作为下丘脑参与能量调控过程中的关键性受体,在动物能量代谢调节中被广泛关注。目前,关于该受体在绵羊下丘脑中分布区域的相关报道较少。针对试验过程中MC4R免疫荧光结果不稳定,分布区域不明显的特点,本研究在改进现有MC4R免疫荧光试验方法基础上,对MC4R在绵羊下丘脑的分布区域进行了观察。结果显示,分别经过4%多聚甲醛长时间固定(6 d),Triton X-100(pH≈8.68)长时间通透(2 d),以及3%过氧化氢和0.2 mol/L甘氨酸+0.3%SDS+20%甲醇的预处理后,可以获得稳定且饱满的MC4R免疫荧光结果。MC4R主要分布在绵羊下丘脑的室旁核(arcuate nucleus,ARC)区域,但在弓状核区域并无类似分布。     

刺鼠相关蛋白/阿片黑素促皮质激素原神经元在鱼类摄食调控中的研究进展北大核心CSCD

摄食对鱼类生存、生长和繁殖至关重要。摄食过程主要受下丘脑中枢神经系统的调控,其中刺鼠相关蛋白(AgRP)神经元和阿片黑素促皮质激素原(POMC)神经元是控制摄食的2个关键神经元。本文通过梳理国内外文献,在概述AgRP/POMC神经元及其分布的基础上,分析其在摄食调控中的作用,并基于AgRP/POMC神经元途径探究调控鱼类摄食的策略,以期为鱼类等水产动物摄食调控研究提供参考。     

猪侧脑室注射NMS对胰岛素合成与分泌的影响

神经介素S(NMS)具有调节动物的摄食、能量代谢、神经内分泌和生殖等多种生物学功能。本试验主要从NMS抑制摄食的作用入手,研究其对胰岛素合成和分泌的影响。将12头猪随机分为(对照组、NMS组和SHU9119+NMS组)3组,每组4头,分别侧脑室注射生理盐水、NMS和SHU9119+NMS,采血后用放射免疫法测定了血清中胰岛素的含量,NMS组及SHU9119+NMS组均显示注射NMS后血清中胰岛素持续升高,其中NMS组为三者中最高,SHU9119+NMS组次之。结果表明,侧脑室注射NMS可使体内血清胰岛素的含量增加,SHU9119预处理可拮抗NMS对胰岛素的这种作用;实时荧光定量PCR方法研究胰岛素mRNA表达,结果显示:2个试验组的胰岛素mRNA表达量较对照组均明显降低,注射NMS的试验组最低,而加入了拮抗剂SHU9119显示胰岛素mRNA表达量有所回升。试验结果表明猪侧脑室注射NMS可能抑制胰腺组织内胰岛素的合成,并引起血清中胰岛素含量的升高。NMS通过调节胰岛素的合成和分泌,从而对摄食、能量代谢调控都有重要的影响。     

黑皮质素受体-4:生物学特征、作用机理和影响因素

黑皮质素受体4(MC4R)是G-蛋白耦联受体(GPCR),是下丘脑分泌的一种肽类物质,在调控动物采食量中起着重要的作用。MC4R与阿黑皮质素原(POMC)分泌的α-促黑素(α-MSH)结合,激活下丘脑MC4R神经元的表达,从而抑制采食量。本文综述了MC4R的生物学特征及其在动物采食量调控中的作用机理,并阐述了影响MC4R活性的因素。     

γ-氨基丁酸对大骨鸡生产性能和下丘脑采食调控相关基因调控研究

为了研究γ-氨基丁酸(GABA)对大骨鸡生产性能和下丘脑采食相关基因表达的影响,将120只21日龄大骨鸡分成4组,分别在基础日粮中添加GABA 0、5、50和500 mg/kg,每组3个重复,每重复10只,试验为期2周。分析各组鸡生产性能并检测下丘脑NPY、AgRp、GABAA-α1、MC4R和POMC基因的mRNA表达量。结果:与对照组相比,日粮中添加5 mg/kg GABA(低剂量)对增重无显著影响(P0.05),50 mg/kg(中剂量)组极显著提高平均日增重(P0.01),500 mg/kg(高剂量)组极显著降低平均日增重(P0.01)。与对照相比,高剂量组大骨鸡公鸡下丘脑GABAA-α_1 mRNA和MC4R mRNA表达显著提高(P0.05),而POMC mRNA和AgRP mRNA极显著降低(P0.01),NPY mRNA无显著变化(P0.05);高剂量组母鸡GABAA-α_1 mRNA极显著降低(P0.01),NPY mRNA显著降低(P0.05),而MC4R mRNA显著提高(P0.05)。试验提示,日粮中添加GABA,对大骨鸡下丘脑采食调控基因表达均有影响,且存在性别差异。     

牛CART基因核心启动子鉴定及转录调控分析

旨在筛选牛CART基因核心启动子区并鉴定调控CART表达的转录因子,探究其转录调控机制。本研究采集3头健康母牛下丘脑组织,提取基因组DNA,通过PCR扩增、测序获得牛CART启动子序列,EMBOSS、MethPrimer、New PLACE数据库分析启动子结构特征;构建4个包含不同截短长度的CART启动子报告基因载体,双荧光素酶报告基因活性检测鉴定核心启动子区;应用DNA pull down结合质谱分析(n=3),功能聚类及结合位点预测分析筛选核心启动子区候选转录因子;构建转录因子过表达载体,转染至293T细胞,分析转录因子对牛CART核心启动子区的转录调控功能(n=3)。结果表明,牛CART基因-1 200 bp～+22 bp区域存在CpG岛和TATA box、CAAT box等顺式作用元件;构建的4个截短启动子报告基因载体均具有转录起始活性,-292 bp～+22 bp片段转录起始活性最强,为牛CART基因核心启动子区;转录因子RFX5、CREB、RFX1、JUND、TEAD4、TFAP2D、RELA可与牛CART基因核心启动子区特异性结合;进一步研究证实RFX5、RFX1、TEA...     

Ghrelin及相关基因的研究进展

1999年,日本科学家Koji ma等人从小鼠的胃中提纯并鉴定了促生长激素分泌受体的特定的内源性配体,即生长素(Ghrelin)。它是一种含有28个氨基酸残基的多肽,主要由胃黏膜的一种内分泌细胞分泌,也分布于其他许多组织中,如垂体、下丘脑和胰腺等〔1〕。Ghrelin与其特异性受体结合后,会产生一系列生物学效应,如刺激垂体前叶释放生长激素,调节心血管功能,通过激活下丘脑弓状核细胞的NPY/AGRP神经元来调节采食,还参与体重和能量平衡的调节〔2,3〕。Ghrelin影响生殖系统功能并参与胃肠道生长和功能发育的调节,可以促进胃酸分泌和胃肠运动〔4,5〕…     

Ghrelin免疫反应阳性神经元在鸡脑中的定位分布、发育性变化及禁食对其影响

本试验应用免疫组织化学方法和显微图像分析技术,研究了鸡脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的定位分布,分析了2、16、30、44、58日龄鸡下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的发育性变化规律,并探讨了30日龄鸡分别禁食12、24、48h及重新采食4h对下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的影响。结果表明,在下丘脑弓状核、室旁核、内侧核、室周区、内侧区、外侧区,丘脑卵圆核、圆核,中脑丘中央灰质层、红核,脑桥前庭腹外侧核,小脑内侧核、小脑皮质颗粒层,大脑皮质多形细胞层等,均可观察到Ghrelin免疫反应阳性神经元;随着日龄的增长,下丘脑主要核团中的Ghrelin免疫反应阳性神经元的数量增多,免疫反应强度增强,但细胞密度下降;在禁食条件下,下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的免疫反应强度减弱,细胞密度下降。     

大麻素受体1拮抗剂利莫那班对肉仔鸡下丘脑食欲调控因子和腺苷酸激活蛋白激酶基因表达的影响

研究旨在探讨大麻素受体1(CB1)拮抗剂利莫那班(SR141716)对肉仔鸡下丘脑食欲调控因子和腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)基因表达的影响。选取1日龄体重相近的健康爱拔益加(AA)肉仔鸡20只,7日龄时随机分为2个组,进行第3脑室埋管,恢复3 d。10日龄08:00试验组以1μg剂量脑室注射SR141716,对照组同时注射等量的二甲基亚砜(DMSO)。统计每只鸡在注射后2 h的采食量,然后采集血液和下丘脑样品,测定血清中丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶活性及葡萄糖、尿酸、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量,利用荧光定量PCR技术检测下丘脑中AMPKα1、AMPKα2以及食欲调控相关基因厌食神经肽(POMC)、促食神经肽Y (NPY)、刺鼠色蛋白相关蛋白(AgRP)、可卡因和苯丙胺调节转录物(CART)的基因表达量。结果表明:1)与对照组相比,肉仔鸡脑室注射SR141716后,2 h内的采食量显著降低(P0.05)。2)与对照组相比,肉仔鸡脑室注射SR141716显著提高了血清中低密度脂蛋白胆固醇含量(P0.05),对其他血清生化指标无显著影响(P0.05)。3)与对照组相比,肉仔鸡脑室注射SR141716显著降低了下丘脑AMPKα1、AMPKα2、POMC和AgRP的基因表达量(P0.05),显著提高了下丘脑CART的基因表达量(P0.05),对下丘脑NPY的基因表达量无显著影响(P0.05)。由此可见,脑室注射CB1受体拮抗剂SR141716可降低肉仔鸡食欲,并影响中枢AMPK及其下游食欲调控因子POMC的基因表达;中枢通过抑制促食神经肽AgRP和提高抑食神经肽CART的基因表达,参与肉仔鸡食欲调控。     

Dnmt1和GnRH在母羊初情期启动过程中下丘脑的分布定位

本文旨在研究DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,Dnmt1)和促性腺激素释放激素(Gonadotropin Releasing hormone,GnRH)在母羊初情期启动过程中的表达、分布及两者关系。选取初情期前、临近初情期和初情期阶段雌性小尾寒羊各3只,采集其下丘脑,利用免疫荧光双标记技术研究Dnmt1和GnRH在母羊下丘脑视前区(Preoptic area,POA)和弓状核(Arcuate nucleus,ARC)中的表达和分布。研究表明,Dnmt1和GnRH在下丘脑ARC和POA均有表达,且呈现共表达模式,ARC中共表达阳性细胞数在初情期显著高于初情期前期(P 0. 05),POA共表达阳性细胞数在初情期显著降低(P 0. 05)。结果提示,Dnmt1可能通过调控下丘脑GnRH的表达而参与母羊初情期启动的调控。     

促性腺激素释放激素在妊娠牦牛下丘脑主要核团中的表达

为了研究促性腺激素释放激素(GnRH)在妊娠期牦牛下丘脑主要核团中的表达,研究其与牦牛妊娠期调控的关系。运用免疫组化ABC法和图像分析软件Image-Pro Plus 6.0对妊娠期牦牛下丘脑主要核团中GnRH的表达情况进行研究。结果表明:在下丘脑中,GnRH神经元主要分布在下丘脑前核(AH)、乳头体内侧核(MMN)、腹内侧核(VMN)、弓状核(ARC)和室旁核(PVN)等核团。在核团间,GnRH阳性产物的表达面积(S)及累积光密度(IOD)值存在差异,(SAHSMMNSVMNSARCSPVN和IODAHIODMMNIODVMNIODARCIODPVN);妊娠期的表达量高于非妊娠期的,推测这些核团中的GnRH神经元对妊娠期激素的调控发挥重要作用。     

初情期启动过程中MeCP2和GnRH在母羊下丘脑的分布定位

本实验旨在研究甲基化CpG结合蛋白(MeCP2)和促性腺激素释放激素(GnRH)初情期启动过程中在母羊下丘脑的分布及二者关系。选取初情期前、临近初情期和初情期阶段雌性小尾寒羊各3只,采集下丘脑,利用免疫荧光双标记技术研究MeCP2和GnRH在母羊下丘脑视前区(POA)和弓状核(ARC)中的分布。结果表明:MeCP2和GnRH在下丘脑ARC和POA均有分布,且呈现共表达模式,ARC中共表达阳性细胞数在初情期显著高于初情期前期和临近初情期(P0.05),POA中共表达阳性细胞数初情期显著低于初情期前期和临近初情期(P0.05)。结果提示,MeCP2可能通过调控下丘脑GnRH的表达而参与母羊初情期启动的调控。