水牛和黄牛同种及种间显微授精(ICSI)的初步研究

试验探讨了水牛和黄牛同种及种间显微授精的可行性。体外成熟22~24 h的水牛和黄牛卵母细胞分别注入冷冻/解冻的尼里－拉菲水牛和利木赞黄牛精子,进行同种或种间的显微授精操作,构建的ICSI胚胎一部分培养到16~18 h固定染色检查原核形成情况,另外一部分胚胎培养2~9 d分别记录胚胎的分裂情况及囊胚发育情况。结果发现,水牛同种(水牛+水牛)和水牛异种(水牛+黄牛)显微授精胚胎的双原核率(47.73%和36.67%)、分裂率(68.00%和72.64%)和囊胚发育率(16.44%和22.39%)均无显著差异(P＞0.05);黄牛同种(黄牛+黄牛)和黄牛异种(黄牛+水牛)显微授精胚胎的双原核率(60.00%和45.28%)、分裂率(73.33%和71.31%)和囊胚发育率(28.57%和33.70%)亦无显著差异(P＞0.05)。以上结果表明:①水牛精子注射到黄牛卵子和黄牛精子注射到水牛卵子的种间授精胚胎均可以体外发育到囊胚阶段;②黄牛卵子无论同种和种间显微授精的效果均优于水牛卵子。     

以骡鸭为宿主的PGCs转染途径制备转基因家禽

转基因技术在基础理论研究和生产实际中都展示出良好的应用前景。目前,哺乳类与鱼类的转基因技术已相当成熟,并获极大成功,而家禽的转基因技术还十分落后。家禽为体内受精,受精后在卵子周围形成卵白、壳膜及蛋壳,同时受精卵发生快速分裂。受精约20h后产出体外时,胚胎已发育到6000个细胞。因此,对家禽进行早期遗传操作十分困难。尽管如此,国外仍在努力探讨克服家禽胚胎遗传操作的难题,并取得一定的进展。据报道,到目前为止国外实验室已研究的家禽转基因技术主要有:1逆转录病毒感染技术,2DNA显微注射技术3精子介导法[1,2]。其中逆转录病毒感…     

猪人工授精和繁殖疾患的防治(续三)

第四讲母猪卵子的受精生理和授精操作第一节排卵、卵子的结构和受精生理一、卵子的发生和成熟母猪初生时有10万个以上卵母细胞,从性成熟后如一直不配种,一生也只能排出7000～8000个卵子。卵母细胞在形成卵泡后,其卵黄颗粒增多,体积增大,出现了透明带;卵泡细胞通过有丝分裂快速增殖,由单层转变为多层。卵泡细胞转变为营养细胞,为卵母细胞供应营养。初级卵母细胞在排卵前经过第一次成熟分裂变为次级卵母细胞,受精时才完成第二次成熟分裂,形成卵子。二、卵子的细微结构1.卵子的体积哺乳动物卵子的形状和体积大体相似,为球状。猪卵子的直径约为…     

意科学家克隆出公牛

意大利克雷莫纳繁殖技术试验室的年轻科学家切·加利克隆出一头公牛。这头名为“伽利略”的公牛已在克雷莫纳国际奶牛博览会展出。加利介绍说 ,他是用淋巴细胞来克隆“伽利略”的 ,而克隆多利羊所使用的是乳腺上皮组织。加利先用离心泵对公牛的血进行处理 ,分离出淋巴细胞 ,然后从母牛体内取出卵子 ,将其中的脱氧核糖核酸 (ＤＮＡ)去除 ,用微型注射技术将淋巴细胞注射到去除ＤＮＡ的卵子中 ,并使两者融合后分裂繁殖 ,8天后 ,这一融合细胞已分裂成 10 0个细胞并形成胚胎。将这一胚胎移植到母牛的子宫中发育 ,最后母牛顺利产下了这头雄性牛犊…     

显微注射针对猪ICSI胚胎的发育和EGFP表达效率的影响

本实验以猪体外成熟卵子以及冷冻解冻后失活的精子为材料,以无BSA且成分明确的TL-HEPES溶液为操作液,探讨显微注射过程中分别使用钝口针和磨口针进行注射,对猪卵子的激活、ICSI胚胎的发育及EGFP表达效率的影响。结果表明:成熟后的猪卵子在不进行精子注射和电激活的情况下,使用钝口针空注射后,卵裂率显著高于磨口针(P<0.05)。分别使用钝口针和磨口针对成熟后的猪卵子进行精子注射,不论进行或不进行电激活,使用钝口针注射,卵子的卵裂率、囊胚率和胚胎EGFP的表达效率均显著高于磨口针(P<0.05)。本实验研究发现,使用钝口针进行注射有利于猪ICSI卵子的激活,胚胎的发育以及胚胎中EGFP表达效率。     

用精子微注射技术研究获得的对哺乳动物受精过程的新认识

精子微注射技术就是借助显微操作仪,将精子或精子成分直接注入卵母细胞的细胞质或卵周隙中去,使卵子受精。它是体外受精的一种新的操作技术,可将体外受精研究和胚胎的显微操作技术相结合,因而,比常规体外受精研究更有发展前途。首先,它避免了正常受精过程中精子穿透卵子胶膜、卵丘细胞一透明质酸基质和透明带,进而和卵浆膜融合的过程,因而可以对精卵互作的某些特征进行探讨。比如可用以研究受精的准确时间、     

受精作用的分子学机制和发育活性

引言受精是一系列的协同过程,由卵子激活精子开始,到精子活化卵子结束。图1为两性配子相互作用的简要模型。卵子外围通常有一多细胞层,精子必须穿过这个细胞层,到达卵黄膜,才能与卵子融合。精子活力的品种特异性活化、精子对卵子的吸引、粘着,顶体反应(图2)的诱导以及多精子受精的阻抑等活动都受与卵子或雌性生殖道有关物质的调节(Garbers,1989)。本文主要讨论卵子对精子的活化过程。受精的分子学研究已开始阐明精子和卵子中有关分子的结构和功能,这些分子参与受精这一复杂的细胞互作。文中主要讨论小鼠的配子,因为小鼠的受精模式很     

用牛奶克隆出牛

日本科学家４月底宣布，他们利用牛奶中的乳腺细胞克隆出两头牛犊，这是世界上首次使用动物乳汁克隆出动物。研究人员于１９９８年７月从一种荷兰乳牛的初乳中取出５０个乳腺细胞，先从这些乳腺细胞中取出细胞核，然后与剔除核的未受精卵子融合，促使卵子分裂成胚胎，再移...     

日本显微授精孵化出鹌鹑有助优良家禽培育

正日本静冈大学日前宣布,该校副教授笹浪知宏领导的一个研究小组利用显微授精方式孵化出了鹌鹑,这将有助于培育品质更优良的家禽。研究人员在将鹌鹑的精子注入卵子时,先向一个精子中注入相当于100个精子的蛋白质等提取物,再现了有很多精子进入卵子的状态,从而成功通过显微授精方式孵化出了鹌鹑的雏鸟,并确认雏鸟长大后拥有正常的繁殖能力。     

显微注射转基因用猪胚胎获得研究

本文从猪胚胎的体外成熟和体内成熟两方面对显微注射用猪胚胎的获取进行了初步研究。实验结果表明 ;超数排卵母猪的手术冲胚是获取显微注射用猪胚胎的最佳方法 ,该方法获得的胚胎数量多 ,质量好 ,转基因效率高。体外成熟法获得可供显微注射用猪胚胎的效率低 ,基因转移的总效率也很低。     

线粒体融合、分裂及其相关疾病的研究进展

近年来,有关线粒体融合和分裂机制的相关研究越来越多。线粒体是所有真核生物都不可或缺的双层膜细胞器,大多数细胞中线粒体是高度动态的,且通过不断地融合、分裂来维持动态平衡。线粒体外膜与内膜的融合分别由Mfn1、Mfn2与多种形式的OPA1调控;DRP1介导外膜分裂,内膜的分裂可能是由S-OPA1和MTP18介导。多种客观因素通过影响融合或分裂的程度,进而影响线粒体的融合与分裂,提高线粒体融合程度或降低线粒体分裂程度都将导致在细胞内形成个体大、数量少的线粒体;反之,将出现个体小、数量多的线粒体。可以据此特性间接检测某项影响线粒体形态学变化的因素,了解线粒体动态变化所涉及的蛋白,以及影响线粒体形态学的重要外部因素、线粒体相关疾病的发病原因。因此,作者在总结前人研究成果的基础上,针对线粒体融合与分裂、参与线粒体融合与分裂的相关蛋白及线粒体融合、分裂与疾病的发生进行了综述。     

禽卵受精过程的新探讨

受精是精子穿入卵子形成受精卵(合子)的过程,始于精子细胞膜与卵子细胞膜的接触,终于精子细胞核与卵子细胞核的融合。家禽的受精大多是在输卵管漏斗部进行的。然而,人们对受精过程中的许多重要问题,如人工授精后受精卯的产生以及输卵管和卵子对精子的反应等仍知之甚少 尽管关于受精的许多细节仍有待阐明,但已知道精子在母禽生殖道的分布数量与受精有着密切的关系。     

血停搏液与心肌保护的研究进展

良好的心肌保护是体外循环心脏直视手术的支柱，亦是当今心脏移植手术供心心肌保护亟待解决的重大难题。随着对心肌缺血再灌注的病理变化认识的加深，心肌保护在不断变迁和发展。血停搏液、控制性再灌注及缺血预适应对心肌的保护，已成为心脏外科心肌保护中一个诱人的研究领域。小动物外科作为实验医学的重要组成部分，针对当今医学临床心脏手术中心肌保护存在的突出问题，探讨血停搏液对犬低温体外循环下心肌保护的最佳效应，为小动物临床开展体外循环心脏直视手术提供切实可行的心肌保护措施，同时为医学心脏外科临床及心脏移植的应用研究提供可靠的试验依据，具有重要的理论价值。     

山羊发情后排卵时间的研究

本试验以江苏地方白山羊为材料，供体羊经ＰＭＳＧ超排处理后，在发情后不同时间从输卵管获取卵子。受体关经ＰＧ处理进行同期发情，手术移卵时观察卵巢上的排卵点及其特征。试验中发现山羊超排处理后，排卵时间是在发情后不到２６小时；自然发情的山羊其排卵时间与超排山羊基本相同。山羊超排处理后排出的卵子有的尚未完成第一次成熟分裂。     

核移植兔研究进展

哺乳动物胚胎细胞核移植(NuclearTransplantation,NT)是指将动物早期胚胎卵裂球以显微手术和细胞融合的方法移植入去核的卵母细胞,并使其能正常分裂、发育成为新个体的技术。核移植技术对于研究动物繁殖和胚胎在发育过程中的核质互作有重要意义。尽管核移植在多种动物都已...     

局部麻醉技术在小动物临床方面的应用

近年来随着我国经济社会的发展,人们的物质和精神生活水平质量不断提升,家庭当中饲养小动物的情况逐渐增多,各类游览场所的小动物种类和数量也在不断增加。小动物临床疾病种类和数量也随之增多,部分疾病需要通过手术才可使其得以治愈,而绝大部分手术的实施均需要使用到局部麻醉技术。本文主要研究局部麻醉技术在小动物临床方面的应用,选择较为常用的麻醉药物和局部麻醉技术进行操作特点分析,希望为小动物临床医学活动的开展提供一定参考。     

山羊超数排卵处理后排卵时间的研究

本试验以江苏地方山羊为材料,经FSH超数排卵后,在发情后不同时间屠宰母山羊,并冲洗输卵管获取卵子。试验中发现山羊的排卵时间为发情开始后18～20小时,排卵时部分卵子尚未完成第1次成熟分裂。     

抑制素/活化素和卵泡抑素对卵巢功能的调节

抑制素／活化素和卵泡抑素是重要的糖蛋白激素，对卵巢功能具有局部调节作用。本文简述了抑制素／活化素和卵泡抑素对颗粒细胞增殖与分裂、卵子成熟、类固醇激素合成及黄体功能调节研究的进展情况，指出了目前研究中存在的关键问题，并提出了在今后研究中解决问题的方法。     

山羊超数排卵处理后排卵时间的研究

本试验以山东嘉祥青山羊为材料,经 PMSG 超排后在发情后不同时间屠宰,冲洗输卵管获取卵子。试验中发现山羊在超数排卵处理后,排卵时间是在发情后不到20小时。山羊超排处理排出的卵子有的尚未完成第一次成熟分裂。     

激光束对马创伤愈合过程效应的研究

激光是一项新兴技术,在国内外已广泛应用于工业、农业、军事和科学研究等许多领域中;在医学方面,用激光诊治疾病也较普遍,并且,还有人通过小动物实验,初步研究了激光的生物学效应和作用机理,为了探索激光在大动物创伤外科上的应用,我们通过给马造成无菌手术创和污染缺损创,用氦氖激光束进行照射的研究,进行了一系列的实验观察,试对氦氖激光的某些作用机理进行了阐述,初步为兽医外科临床应用氦氖激光提供了一些理论和技术上的依据。