茶树精油兽用消毒剂中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇检测方法的建立

通过检测茶树精油兽用消毒剂中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的含量,并建立茶树精油中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的气相色谱检测方法,为茶树精油新制剂的质量标准研究提供理论依据。采用水蒸气蒸馏法先将茶树精油兽用消毒剂中的茶树精油提取出来,再用GC法测定提取的挥发油中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的含量。茶树精油兽用消毒剂不同批次中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇含量保持稳定;1,8-桉叶素在0.013mg/mL～0.41 mg/mL之间具有良好的线性关系(r=0.999 98),松油烯-4-醇在0.175 mg/mL～5.575mg/mL之间具有良好的线性关系(r=0.999 93),1,8-桉叶素的平均加样回收率为99.19%,RSD为1.89%(n=6),松油烯-4-醇的平均加样回收率为102.58%,RSD为1.45%(n=6)。该方法能够简便、准确、快速的测定茶树精油兽用消毒剂中1,8-桉叶素和松油烯-4-醇的含量,可为茶树精油兽用消毒剂的质量评价提供依据。     

气相色谱法检测混合型饲料添加剂中的大蒜素和香芹酚

建立了检测混合型饲料添加剂中大蒜素和香芹酚含量的气相色谱方法。样品采用乙醇提取,经毛细管相色谱柱(HP-5,30m×0.32mm×0.25μm)分离,氢火焰离子化检测器测定,外标法定量,并采用气质确证。方法学研究结果表明,目标化合物二烯丙基二硫醚,二烯丙基三硫醚,香芹酚在0.01~10 mg/m L浓度范围内具有良好线性关系,相关系数为r≥0.9990,检出限分别为10mg/kg、15mg/kg、10mg/kg;回收率为79.8%~96.2%,相对标准偏差为2.61%~4.73%。该方法前处理简单,准确可靠,灵敏度可以用于混合型饲料添加剂样品中大蒜素和香芹酚进行测定。     

气相色谱法测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量

目的建立气相色谱测定混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量的方法。方法样品采用乙醇提取,以毛细管色谱柱分离,采用氢火焰离子化检测器检测。结果薄荷脑在0.0356~1.780 mg/m L范围内具有良好的线性关系,线性方程为Y=139 286×X-3 452,相关系数R为0.9998,方法的定量限(LOQ)为0.1 g/kg。样品添加回收试验的平均回收率在98.2.8%~99.2%,相对标准偏差(RSD)为1.06%~1.96%(n=6)。结论本方法简便、快速,结果准确、可靠,适用于混合型饲料添加剂薄荷素油中薄荷脑含量的测定。     

高效液相色谱法测定混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚含量

研究建立了同时测定混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚含量的液相色谱方法。混合型饲料添加剂样品用甲醇提取,以C_(18)柱(150 mm×4.6 mm×5μm)为分析柱,紫外检测器检测,外标法定量。结果表明:在所选择的色谱条件下,空白载体中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚能达到很好的分离;丁香酚、香芹酚和百里香酚在1.0～500 mg/L内线性关系良好,肉桂醛在0.10～50.0 mg/L内线性关系良好;丁香酚、香芹酚和百里香酚最低定量限为50 mg/kg,肉桂醛最低定量限为5.0 mg/kg;加标回收率为83.7%～112%,变异系数为0.70%～6.39%。该方法样品前处理简单、简便可靠,可用于混合型饲料添加剂中肉桂醛、丁香酚、香芹酚和百里香酚的同步检测。     

气相色谱法检测饲料添加剂中的柠檬醛、D-柠檬烯和甲基庚烯酮

建立了气相色谱方法同时测定混合型饲料添加剂中甲基庚烯酮、D-柠檬烯、柠檬醛(包括橙花醛和香叶醛)含量的分析方法。样品采用乙酸乙酯提取,经毛细管气相色谱柱(ZB-5,30m×0.32mm×0.25μm)分离,氢火焰离子化检测器测定,外标法定量,并对目标化合物采用气质确证。方法学研究结果表明:目标化合物甲基庚烯酮、D-柠檬烯、橙花醛和香叶醛在0.01～10 mg/m L浓度范围内具有良好线性关系,相关系数为R~2≥0.9990,方法的定量限在0.02～0.04g/kg,回收率为81.3%～108.5%,相对标准偏差为2.01%～4.88%。该方法简便、快速、准确,可以用于饲料添加剂样品中甲基庚烯酮、D-柠檬烯、橙花醛和香叶醛含量的测定。     

茶树油制剂(颗粒剂)对保育猪生长性能的影响

试验旨在探究茶树油饲料添加剂(颗粒型)对保育猪生长性能的影响。试验动物选取小保育猪50头和大保育猪36头,小保育猪分为5组,每组10头,对照组饲喂基础饲料,试验组饲喂基础饲料中分别添加50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg茶树油的试验饲料。大保育猪分为6组,每组6头,对照组饲喂基础饲料,试验组饲喂基础饲料中分别添加500 mg/kg、1000 mg/kg、2000 mg/kg、4000 mg/kg、6000 mg/kg茶树油的试验饲料,试验期为60 d。结果表明,在小保育阶段,添加50 mg/kg茶树油饲料添加剂组在增重方面显著高于对照组(P<0.05);在大保育阶段,添加500 mg/kg茶树油添加剂组的试验组猪只增重最高,料重比最低;但是在大保育猪,添加茶树油添加剂的量达到6000 mg/kg时,料重比最高,并且显著低于对照组(P<0.05),说明在保育猪的不同阶段添加适量的茶树油饲料添加剂,可提高猪只的生长性能,降低料重比。     

混合型饲料添加剂中硫酸黏杆菌素的液相色谱检测方法研究

本研究建立了混合型饲料添加剂中硫酸黏杆菌素含量的液相色谱检测方法。混合型饲料添加剂样品用5%草酸提取,经离心和HLB小柱净化,用丹磺酰氯柱前衍生,以C_8柱(150 mm×4.6 mm×5μm)为分离柱,荧光检测器在激发波长344 nm,发射波长518 nm下进行检测。结果表明:在所选择的色谱条件和衍生条件下,硫酸黏杆菌素A在0.025～10.0μg/mL时线性关系良好,最低定量限为2 mg/kg;添加回收率为85.1%～108%,变异系数为0.84%～5.52%。本方法样品前处理简便、可靠,可用于混合型饲料添加剂中硫酸黏杆菌素的检测。     

高效液相色谱紫外检测法测定添加剂预混合饲料中叶酸含量

本实验建立了添加剂预混合饲料中叶酸测定的高效液相色谱紫外检测测定方法。样品经碳酸钠溶液提取,通过阴离子交换柱净化富集,高效液相色谱紫外法测定。结果表明:叶酸浓度为0.1~250.0μg/m L时,具有良好的线性关系,样品回收率为79.9%~100.4%,相对标准偏差小于10%,定量限可达0.3 mg/kg,适用于添加剂预混合饲料中叶酸含量的测定。     

火焰原子吸收光谱法测定混合型饲料添加剂、微量元素预混料和矿物质饲料原料中铬含量的研究

试验旨在建立火焰原子吸收光谱法测定混合型饲料添加剂、微量元素预混料、矿物质饲料原料中铬含量的分析方法。试验通过改变样品溶解体系，优选狭缝宽度、燃助比等，将混合型饲料添加剂、微量元素预混合饲料、矿物质饲料原料样品经盐酸、硝酸、氢氟酸和高氯酸溶解，于原子吸收分光光度计上进行检测。结果显示，试验方法检出限为0.000 9 mg/kg，线性相关系数为0.999 9，样品加标回收率为95.50%～103.10%；矿物质饲料原料相对标准偏差（RSD）小于5.91%，微量元素预混料RSD小于3.06%，混合型饲料添加剂RSD小于3.00%。研究表明，试验所用方法具有良好的灵敏度、精密度和准确度，可操作性强，可实现快速准确测定混合型饲料添加剂、微量元素预混合饲料、矿物质饲料原料中铬的含量。     

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定饲料及原料中的呕吐毒素

应用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定饲料及原料中的呕吐素,试样用水提取,通过免疫亲和柱净化、浓缩,采用EclipseXDB-C18分析柱(150mm×4.6mm,5μm),以甲醇-水(20∶80)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为218 nm,在此色谱条件下,呕吐毒素在0.1~5.0μg/mL范围内线性关系良好,相关系数为0.9999,在0.5~5.0 mg/kg加标浓度范围内,样品平均回收率在84.0%~97.2%,日内相对标准偏差为1.75%~4.21%,日间相对标准偏差为3.54%~7.47%,按信噪比S/N=3计算,呕吐毒素检出限为0.05 mg/kg。该方法简便快速、灵敏度高、重现性好,适用于饲料及原料中呕吐毒素的测定。     

茶树纯露化学成分和抑菌活性研究

试验旨在研究茶树纯露化学成分和抑菌活性。采用D101大孔吸附树脂和AB-8大孔吸附树脂对茶树纯露中的化学成分进行富集，选用50%和95%两个不同浓度的乙醇-水溶液作为洗脱剂，先用50%乙醇溶液分别对D101和AB-8大孔吸附树脂柱进行洗脱，再用95%乙醇溶液对两根树脂柱进行洗脱。使用气相色谱质谱联用仪（GC-MS）对茶树纯露粗提物进行化学成分分析，并测定粗提物的抑菌活性。结果显示：经过D101大孔吸附树脂富集的M1-95%粗提物主要化学成分为松油-1-醇、γ-松油烯、1,8-桉叶素和α-松油烯，经过D101大孔吸附树脂富集后又再次经过AB-8大孔吸附树脂富集的M2-95%粗提物主要化学成分为松油-1-醇、γ-松油烯、1,8-桉叶素和α-松油烯。M1-95%对白色念珠菌、枯草芽孢杆菌和藤黄微球菌具有较强的抑制活性；M1-50%对白色念珠菌、枯草芽孢杆菌、藤黄微球菌和肺炎克雷伯菌具有中等强度的抑制活性。研究表明，D101大孔吸附树脂对茶树纯露中的化学成分具有较强的富集能力，而AB-8大孔吸附树脂并未富集出其他化学成分，生产车间无须将流出液再次经过AB-8大孔吸附树脂富集。     

反相高效液相色谱法测定饲料及饲料添加剂中阿朴酯的含量北大核心

研究旨在建立一种反相高效液相色谱(RP-HPLC)法检测饲料及饲料添加剂中阿朴酯含量的方法。饲料或饲料添加剂样品经水、甲基叔丁基醚-甲醇溶液提取,样液在50℃水浴中经氮气吹干(添加剂样品直接稀释),使用流动相稀释,定容,上机检测。结果显示,采用C30色谱柱、流动相甲基叔丁基醚-甲醇比例为15∶85时,阿朴酯能够与其他类胡萝卜素很好地分离。试验所用方法在0.04~10.00 mg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数为0.999 98。样品中添加阿朴酯的加标回收率为86.0%~99.8%,方法检出限为0.15 mg/kg,方法定量限为0.40 mg/kg。研究表明,试验所用方法操作简单、灵敏度高,能够检测饲料及饲料添加剂中的阿朴酯。     

毛细柱气相色谱法测定饲料中丙酸及丙酸盐

实验建立了气相色谱法测定饲料中丙酸及丙酸盐的分析方法。样品经盐酸酸化后,丙酸盐转化为丙酸,乙醚提取,毛细管柱(HP-FFAP,30 m×0.32 mm×0.25μm)分离,进行FID检测器检测。结果表明,方法的线性范围为5.0~500 mg/L(R=0.9993),检出限为0.77 mg/kg,丙酸的回收率为87.2%~93.4%,相对标准偏差为1.7%~3.2%。     

高效液相色谱法测定饲料中替米考星含量

为建立饲料中替米考星含量的高效液相色谱检测分析方法，实验样品经水-乙腈-磷酸二丁胺溶液-四氢呋喃（805:115:25:55，V:V:V:V）提取后，振荡10 min，超声10 min，4000 r/min离心5 min，取上清液过0.45 μm有机微孔滤膜后供高效液相色谱仪分析测定。结果表明：替米考星在10 ~ 500 μg/mL质量浓度范围内线性关系良好，相关系数大于0.999，方法检出限为5 mg/kg，定量限为10 mg/kg，平均回收率为92.0% ~ 101.2%，相对标准偏差为1.02% ~ 5.17%。该方法操作简单，重复性好，准确率高，且上机8 min即可完成替米考星的检测，适用于饲料中替米考星含量的测定。 [关键词] 饲料|替米考星|高效液相色谱法     

QuEChERS样品前处理-高效液相色谱法测定饲料中5种磺胺类药物

本实验建立了QuEChERS样品前处理一高效液相色谱法测定饲料中5种磺胺类药物的方法。饲料样品中5种磺胺类药物经乙腈提取,用PSA、C_(18)和无水硫酸钠分散固相萃取方法净化,氮气吹干复溶后,用高效液相色谱一紫外检测器测定。在10~500μg/L的线性范围内,5种磺胺类药物线性相关系数(r~2)均大于0.9990:检测限和定量限分别为0.05 mg/kg和0.1 mg/kg。在0.1~10 mg/kg添加浓度范围内,猪、鸡配合饲料中磺胺类药物平均回收率为76.0%~101%,批内相对标准偏差(RSD)为2.1%~10.1%。该方法条件易于控制,结果准确、重现性好,适用于饲料中5种磺胺类药物的测定。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定饲料中的恩诺沙星和喹乙醇药物的含量

试验建立了同时测定饲料中恩诺沙星和喹乙醇药物含量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC/MS/MS)分析方法。采用80%乙腈(含1%甲酸)作为样品的提取溶液,经HLB固相萃取柱净化后上机测定。在正离子模式下通过两对离子对进行定性和定量分析。结果显示,恩诺沙星和喹乙醇在5~100μg/l范围内线性关系良好,相关系数r均大于0.998;空白饲料在0.1、0.2、0.5 mg/kg的添加浓度上的回收率均在70%~90%之间;批内、批间相对偏差(RSD)均小于20%;本方法对饲料中恩诺沙星和喹乙醇的定量限为0.1 mg/kg(S/N10),检测限为0.05 mg/kg(S/N3)。     

气相色谱-串联质谱法测定饲料中硫丹

建立气相色谱-串联质谱法测定饲料中α-硫丹、β-硫丹、硫丹硫酸盐的方法。饲料样品经过粉碎,乙腈提取,浓缩尽干,正己烷溶解,硅藻土固相萃取柱(SPE)小柱净化。采用Agilent122-5532UIDB-5MS(30 m×0.25 mm,0.25μm),以流速1.0 mL/min高纯氦为载气,使用电子轰击离子源(EI),多反应监测模式(MRM)检测,外标法定量。结果表明,硫丹在5～1 000μg/L浓度范围内线性良好,相关系数为99.96%～99.97%。方法的检出限和定量限分别为1μg/kg和4μg/kg。4、8、20μg/kg的平均加标回收率为79.4%～100.3%,方法的相对标准偏差为5.2%～13.8%(n=5)。检测方法快速高效、检出限低、准确度和精密度高,能够满足饲料硫丹检测的需求,可用于饲料中硫丹的检测。     

凝胶电泳法（SDS-PAGE）测定饲料添加剂溶菌酶二聚体的含量

溶菌酶二聚体标准溶液在0.1～1.0 mg/mL范围内具有良好的线性,线性方程:Y=1.99×10~(-5)X-0.0708,R0.99。精密度试验结果显示,采用凝胶电泳法对饲料添加剂中溶菌酶二聚体的含量进行测定,其含量为32.19%～34.91%,日内相对标准偏差为1.35%～1.73%,日间相对标准偏差为1.82%,结果表明SDS-PAGE方法测定溶菌酶二聚体具有试验操作简单、结果稳定可靠的特点,适用于饲料添加剂溶菌酶二聚体含量的测定。     

高效液相色谱法测定饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量

本实验建立了高效液相色谱法测定饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量的方法。取2 g样品以0.1%盐酸-乙腈沉淀蛋白,8000 r/min高速离心3 min后合并上清液,50℃减压旋转蒸发至干。5 mL 0.1%盐酸-乙腈(90∶10,V/V)溶液溶解后通过混合型阳离子交换柱净化,收集洗脱液于50℃减压旋转蒸发至干,用1 mL 0.1%盐酸-乙腈(90∶10,V/V)溶液溶解后,过0.22μm尼龙过滤膜,上机测定。液相色谱条件为:流动相A为0.1%HCl(pH=2.0),流动相B为乙腈,进行梯度洗脱,色谱柱为十八烷基硅烷键合相,柱温30℃,流速1.0 mL/min,检测器为二极管阵列检测器,检测波长为210 nm。实验结果表明,该方法在1~100 mg/kg线性关系良好(r0.999),在预混合饲料、浓缩饲料、配合饲料中添加量为1、10、100 mg/kg时方法的准确性(回收率70%)和重现性(RSD10%)好,可用于饲料中盐酸赛庚啶和盐酸可乐定含量的检测。     

混合型饲料添加剂中胆汁酸含量测定方法比较研究

本试验采用高效液相色谱-示差折光（HPLC-RID）和高效液相色谱-荧光（HPLC-FLD）法,研究建立混合型饲料添加剂中猪胆酸、猪去氧胆酸、鹅去氧胆酸含量的高效液相色谱测定方法,并对2种高效液相色谱法、重量法、容量法胆汁酸含量测定结果进行比较分析。HPLC-RID法：试样用甲醇-乙腈-水溶液提取,C18柱分离,HPLC-RID测定,3种胆汁酸的定量限为10.0～20.0 mg/g,平均回收率为82.54%～108.50%,相对标准偏差（RSD）为2.90%～7.61%;HPLCFLD法：试样用甲醇提取,氢氧化钾甲醇溶液皂化,以1,4,7,10,13,16-六氧杂环十八烷乙腈液和4-溴甲基-7-甲氧基香豆素乙腈液衍生,C18柱分离,HPLC-FLD测定,3种胆汁酸的定量限为2.0～3.0 mg/g,平均回收率为70.43%～84.31%,RSD为4.82%～9.80%。结果表明：HPLCRID法、HPLC-FLD法均可测定混合型饲料添加剂中的3种胆汁酸含量,但由于HPLC-FLD法胆汁酸需要衍生,易受样品基质影响,胆汁酸含量测定结果重现性、稳定性差;重量法、容量法测定的是混合型饲料添加...