用ELISA检测血清、乳样和尿样中BLV感染的比较K、T、Carli等

从15头BLV阳性牛和20头BLV阴性牛采集血清、乳样和尿样。血清用含0．2％吐温一20，0．001％硫柳汞的＊BS作1：100稀释，乳样作1：4稀释，阳性和阴性参照血清溶于0．sml灭菌蒸馏水中，再作1：100稀释。阳性参照血清稀释后一式3份用于各个试验板中，以便计算阳性临界值。ELISA试验步骤为；100PI稀释血清加入含病毒抗原孔或阴性对照抗原孔．4C“作用18～24h．用稀释缓冲液洗板3次．每孔加入100ul过氧化物酶结合物（抗牛IgGI单克隆），371：温有比，洗涤后加入10On底物（PH4．2，0．SM醋酸盐缓冲液中溶有ZmMABTS，添有外l％H。0，…     

兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立

用兔出血症病毒（RHDV）单克隆抗体包被酶标板,以兔多克隆抗体作为夹心抗体,建立RHDV抗原捕获ELISA检测方法,优化反应条件并对该方法的敏感性、特异性、重复性、稳定性等指标进行了测试和评价。结果表明,单抗最佳包被质量浓度为1mg/L,兔多抗血清最佳质量浓度为4mg/L。本方法可特异性地检测出兔肝脏病料中的RHDV,纯化病毒的最低检出量为26μg/L。对已知阳性样品的检测显示,捕获ELISA检测的病毒滴度是HA试验的3～13倍。对67份可疑病料,捕获ELISA阳性检出率为62.7%,HA试验阳性检出率为55.2%。用不同批次包被的酶标板重复检测已知样品显示出良好的重复性。本方法敏感性、特异性、稳定性良好,可应用于RHDV的快速、批量、特异检测。     

高效安全养貉把五关

（一）消毒关及时消除兔舍内的粪便、污物和垃圾,防止舍内潮湿。食盆、水盆应每天清洗1次,每周用消毒药喷洒消毒地面1次。消毒兔笼、兔舍、粪道、粪池等可用10%～20%石灰乳或3%的火碱。用0.5%的过氧乙酸喷洒笼舍,对细菌、霉菌和病毒等都有很好的杀灭作用。     

“瘦肉精”检测原理及操作步骤

1测定原理 ＂瘦肉精＂（克仑特罗）竞争酶标免疫检测的基础是抗原抗体反应。酶联板的微孔包被有针对兔抗克仑特罗特异性抗体的羊抗体（第2抗体）。加入兔抗克仑特罗特异性抗体（第1抗体）与第2抗体结合而被固定,洗涤后加入标准液或样品溶液与酶结合物（酶标记抗原）,     

用紫草和敌虫治疗兔脚癣病

1　发病情况2 0 0 0年 8月 ,平安县平安镇兽医站有 4只脚癣病患兔求诊。2　临床症状初在鼻、唇、眼圈出现脱毛、骚痒 ,发红 ,继而在其它部位(主要是四肢下端 )出现脱毛 ,骚痒、渗出 ,以后结成干痂 ,患兔食欲减退 ,精神不振、消瘦。3　治疗针对以上症状 ,对 4只患兔采用了中西医结合疗法 ,具体做法 :剪除患部兔毛 ,用盐水清洗浸泡患部痂皮 ,再用 2 %的敌百虫溶液在患部洗擦 2～ 3次 ,洗至患部出现新鲜的皮肉 ,最后将研成末的紫草用食油调成糊状涂在患部 ,每隔 1～ 2ｄ重复治疗 1次 ,3ｄ后症状明显减轻 ,一周后痊愈。用紫草和敌百虫治疗兔脚癣…     

巧用草药治兔病

一、治兔痢疾:用鲜马鞭草,马齿苋各25ｇ,捣烂取汁调少量红糖灌服,每次服15ｍＬ,每日2次。二、治兔便秘:用南瓜根25ｇ,用水煎成20%的浓液灌服,每次服15ｍＬ,每日2次。三、治兔疥癣:用土大黄鲜根捣烂,取其汁10ｍＬ,加米醋10ｍＬ,枯矾01ｇ,调匀外涂患处,每日2次。四、治兔眼结膜炎:用鲜茉莉花50ｇ,煎水用纱布过滤后,取上层澄清液洗兔患眼,每日2～3次。五、治兔乳腺炎:用蒲公英鲜全草25ｇ,食盐少许,捣烂外敷病兔患处,每日换药1次。巧用草药治兔病!上海南汇县书院李雪村201300@李正飞     

治兔感冒验方

1取大蒜5～10份捣烂，用90～95份水浸泡12小时，取浸液洗兔鼻，每日2～3次。     

甘肃省部分地区兔艾美耳球虫分子流行病学调查研究

为调查甘肃省兔艾美耳球虫的感染状况、虫种分布和风险因素,本研究从甘肃省平凉、酒泉、武威地区采集5个不同品种兔的592份粪便样品,提取粪便样品中的基因组DNA,基于艾美耳球虫核糖体第1内转录间隔区（ITS1）设计引物,采用特异性PCR扩增兔艾美耳球虫基因片段。结果发现,兔艾美耳球虫的总感染率为50%（296/592）;通过序列比对分析共鉴定出7种不同的兔艾美耳球虫,分别是大型艾美耳球虫（24.5%,145/592）、肠艾美耳球虫（4.1%,24/592）、中型艾美耳球虫（11.5%,68/592）、穿孔艾美耳球虫（19.8%,117/592）、维氏艾美耳球虫（24.5%,145/592）、小型艾美耳球虫（4.9%,29/592）和盲肠艾美耳球虫（0.84%,5/592）;以大型艾美耳球虫、维氏艾美耳球虫、穿孔艾美耳球虫为优势虫种,同时发现所调查的兔中有多重感染的情况,最多包括四重感染。统计学分析显示,地区因素（P<0.05）、品种因素（P<0.05）和年龄因素（P<0.05）是影响兔艾美耳球虫感染率的风险因素,提示应该针对这3种因素采取有效的防控措施。本研究结果揭示了甘肃省部分地区养殖场兔的艾美耳球虫感染率、虫种分布和感染率的风险因素,为预防和控制甘肃省地区养殖兔的艾美耳球虫病提供了科学依据。     

兔卵母细胞孤雌激活方法的研究

对兔卵母细胞的孤雌激活方法进行探讨,为兔的体细胞核移植奠定良好的技术平台。体外成熟培养20～22h的兔卵母细胞随机分组,分别进行以下试验：采用不同脉冲电压、脉冲次数和脉冲时间,电激活兔卵母细胞,摸索最佳电激活参数;比较不同的激活方法处理免卵母细胞的效果,Ⅰ：Ion5min＋6-DMAP3h,Ⅱ：Ion5min＋CHX3h,Ⅲ：Ion5min＋6-DMAP联合CHX3h,Ⅳ：电激1次联合6-DMAP＋CHX3h;优化6-DMAP与CHX作用时间。结果显示：当电激参数为：电压40V／mm,脉冲时间20μs和脉冲次数3次时,兔孤雌胚的分裂率和囊胚率最高,可达80．64％和14．51％;采用第Ⅳ种方法激活兔的卵母细胞,胚胎的分裂率和囊胚率（80．64％,13．71％）均显著高于Ⅰ组（66．67％,8．6％）和Ⅱ组（43．21％,1．24%,P〈0．05）,略高于第Ⅲ组（77．59％,12．07％）;当兔孤雌胚分别在含6-DMAP和CHX的CM中培养1。h和3h时,1h处理组在分裂率（80．68％vs77．59％）和囊胚率（15．91％vs12．07％）上都略高于3h处理组。结果表明：兔卵母细胞经Ion处理5min,或先电激1次（参数为电压40V／mm,脉冲时间20μs,脉冲3次）,再用2mmol／L6-DMAP＋5mg／LCHX处理1～3h,均可获得较好的激活效果,有利于兔孤雌胚的发育。     

单克隆抗体捕捉猪瘟病毒抗原ELISA方法的建立

分别用原核表达的猪瘟病毒（CSFV）主要抗原E2蛋白和猪瘟基因疫苗免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合与克隆筛选出5株稳定分泌CSFV抗体的杂交瘤细胞株1E2、1G7、3A2、3B7和4B6.间接免疫荧光和Western-blotting试验结果表明,5株单抗均与CSFV E2蛋白和全病毒抗原反应.将筛选的CSFV特异性单抗1E2、3B7和4B6纯化后等量混合后包被酶标板（捕捉抗体）,与兔抗CSFV IgG（检测抗体）联合应用,建立起CSFV抗原捕捉ELISA（AC-ELISA）方法.随后采用方阵滴定法确定了单抗与多抗的最适工作浓度及判定检测结果的OD450临界值.最后以建立的AC-ELISA检测CSFV细胞培养物、CSFV攻毒死亡猪的病料和临床猪瘟组织样品,结果表明,该方法敏感、特异、重复性好,与病毒分离和RT-PCR方法符合率分别为86.2%和90.3%.     

重复超数排卵获取兔成熟卵母细胞的研究

采用重复剖腹的手术方法，收集经过激素刺激超数排卵兔的成熟卵母细胞，分为垂体促卵泡素（FSH）组（3d分6次注射）和FSH与250mg/L聚乙烯吡咯烷酮（PVP）混合组，用正常排卵雌兔作对照。结果，经3次手术取卵（每次手术间隔至少50d以上），由输卵插管冲出卵母细胞，收集并筛选，用激素处理的2组获取总卵母细胞数和可用卵数比对照组均高出3倍以上（P＜0．01），两种超排方法之间超排效果无显著差异（P＞0．05），连续3次手术均成活兔中，对照组和FSH组3次聚卵效果无显著差异（P＞0．05），FSH与PVP混合组次手术与第3次手术出现显著差异（P＜0．01）。     

塞北兔血液蛋白多态性研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法对塞北兔血液中的红细胞酯酶（Es-1,ES-3)、血红蛋白（Hb）、红细胞碳酸酐酶（CA）、血清转铁蛋白（Tf）、前转铁蛋白（Prt）、后白蛋白（Po）、白蛋白（Alb）和血清碱性磷酸酶（AKP）共9个蛋白位点的遗传多态性进行了检测。结果表明，在塞北兔群体中，Hb、Alb和Tf呈单态，Es-1、Es-3、Prt、Po、AKP和CA呈多态。根据多态蛋白位点的基因频率计算遗传距离，并用类平均聚类法进行聚类分析。结果表明，塞北兔与比利时兔遗传相似系数最大，遗传距离最近，与加利福尼亚兔遗传相似系数最小，遗传距离最远。     

分光光度法测定饲料中越霉素A的含量

用0.1 mol/L pH7.8磷酸盐缓冲液提取样品中的越霉素A,浓缩后点样于活化后的硅胶G薄层板上,在氯仿∶甲醇∶氨水=1∶2.5∶1中展开,用0.5%茚三酮的乙醇溶液显色,刮下越霉素A斑点,于570 nm处比色,同时做标准曲线.在该条件下,DM.A的点样量为28.5 g时回收率为:91.69%,批内变异系数＜6.97%.     

幼兔腹泻轮状病毒的鉴定

用直接电镜（EM）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和ELISA检测了35份幼兔腹泻粪便样品，从中发现了轮状病毒（RV）抗原和RVRNA，并见到了典型的完整RV粒子，从而首次在国内检测出兔RV。新检测出的两株兔RVRNA电泳型为4、2、3、2，短型，归属于A组RV的第Ⅰ亚组。     

红烧兔肉的烹调技术

<正>1选兔2kg左右鲜活兔1只(1.5～2kg的活兔最佳)。2宰杀吊起肉兔一只后脚,用尖刀剌杀兔心脏,放血,剥皮,洗净备用。3兔肉准备把兔肉切成宽1cm、长1.5～2cm的小块,多洗几     

UPLC-MS/MS测定牛血浆中加米霉素方法的建立

建立牛血浆中加米霉素含量的UPLC-MS/MS检测方法。血浆样品经甲醇沉淀蛋白，外标法定量, 使用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱，以甲醇：10 mM乙酸铵缓冲液为流动相，流速0.3 mL?min-1；柱温：50℃；进样量：10 μL。三重四级杆质谱仪电喷雾离子源（ESI），正离子扫描、多反应监测（MRM）。考察方法的线性范围、准确度与精密度、稳定性和稀释可靠性。结果显示，加米霉素出峰时间在1 min左右，本方法在1 ng?mL-1~100 ng?mL-1浓度范围内呈良好的线性关系，相关系数（r）≥0.999，检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.5 ng?mL-1和1 ng?mL-1。3个浓度（1 ng?mL-1、50 ng?mL-1和100 ng?mL-1）的空白血浆添加样品批内和批间平均回收率分别在85.2%～96.4%和87.7%～94.0%之间，相对标准偏差（RSD）分别在1.4%～13.9%和2.9%～8.6%之间。准确度和精密度、稳定性及稀释可靠性均符合生物样品分析的相关要求。本方法可用于牛的血浆中加米霉素的浓度测定及药代动力学研究。     

兔水泡性口炎的治疗

莒南县某个体户饲养的2月龄幼兔，发生水泡性口炎。症状：发病初期，在口唇部有小的水泡，一般1～2天后，水泡破溃．病兔大量流诞，使颈、胸、前爪部被毛沾湿，粘成一片，口腔内有臭味。病变：病死兔消瘦，口腔内有溃疡，胃内有较多粘稠的液体。根据临床症状和病变情况，初步诊断为兔水泡性口炎。防治：（1）更换饲料，将花生秧换成由玉米、麸皮、花生饼等混合而成的混合料；（2）将整个兔舍用食醋喷洒，隔日1次；（3）全群兔用磺胶二甲基嘧啶进行预防、治疗，剂量为0.2g／kg体重，同时配合应用等量小苏打，每日2次，经治疗，全部病兔治愈。…     

jhhhhjh新型五香板兔加工技术研究

用獭兔肉为原料,经超声波处理后,以食盐、白砂糖和酱油为主要腌制剂对兔肉进行腌制,然后运用模糊数学评价法研究板兔加工中腌制剂对产品感官质量的影响以及超声波处理对板兔加工过程的影响。结果表明：利用模糊数学评价法得到板兔加工中主要腌制剂的最佳腌制工艺配方是食盐6%,白砂糖3%,酱油4%;经过超声波处理后进行腌制能比对照组提前1 d达到腌制平衡,缩短了腌制时间;同时,超声波处理后的兔肉也有利于产品风味的形成。     

新型五香板兔加工技术研究

用獭兔肉为原料,经超声波处理后,以食盐、白砂糖和酱油为主要腌制剂对兔肉进行腌制,然后运用模糊数学评价法研究板兔加工中腌制剂对产品感官质量的影响以及超声波处理对板兔加工过程的影响。结果表明:利用模糊数学评价法得到板兔加工中主要腌制剂的最佳腌制工艺配方是食盐6%,白砂糖3%,酱油4%;经过超声波处理后进行腌制能比对照组提前1 d达到腌制平衡,缩短了腌制时间;同时,超声波处理后的兔肉也有利于产品风味的形成。     

牛冻卵体外受精产犊

近年来牛冻胚己商业化应用,如果牛卵母细胞能冷冻保存,则对建立胚胎库及提高遗传改良技术将是很有利的。本试验的目的是建立一种卵母细胞冷冻方法,即一步加入或除去高渗冷冻保护剂来冷冻保存未成熟牛卵母细胞。1 卵母细胞冷冻1.1 未成熟卵母细胞冷冻从屠宰场取回牛卵巢,用生理盐水保存,2小时内带到实验室。从卵巢吸出卵母细胞,用改进的磷酸盐缓冲液(m-PBS)洗两次,在含有 Hepes 缓冲液的 TCM199+10%超排