以柑橘皮为原料用宇佐美曲霉生产饲用复合酶的研究

以实验室筛选的一株可同时产纤维素酶、木聚糖酶和酸性蛋白酶的宇佐美曲霉A.us-amii-CF1为生产菌株,以柑橘皮为原料,对固体发酵培养基的水分含量、起始pH值、碳源、无机盐及柑橘皮粉与豆粕比例对产酶率的影响进行了研究,研究发现,当培养基配方为橘皮粉53%、豆粕23%、麸皮19%、尿素1%、Na2HPO42%、MnSO42%;最佳培养基水分为55%～60%时,菌种产酶活力达到CMC酶41.6U/g、β-葡萄糖苷酶102.2U/g、木聚糖酶2079.6U/g、酸性蛋白酶7884.6U/g。经干燥后的复合酶储存性能稳定。     

白酒酒糟制备多酶益生菌饲料发酵工艺研究

选择产甘露聚糖酶枯草芽孢杆菌L-1、产植酸酶枯草芽孢杆菌L-2、产木聚糖酶YB-5、乳酸片球菌Rp作为制备多酶益生菌饲料的生产菌种。通过单因素和正交试验最终确定最佳底物干基组分为36%白酒酒糟、26%玉米粉、28%麸皮、8%豆粕,料水比10.8,装填量20 g/250 ml。结果表明:多酶益生菌饲料中益生菌活菌数为(1.97±0.09)×10~(11)cfu/g,甘露聚糖酶酶活(11.62±0.26)U/g、木聚糖酶酶活(15.30±0.36)U/g、植酸酶酶活(16.37±0.16)U/g、蛋白酶酶活(15.27±0.16)U/g以及淀粉酶酶活(19.37±0.33)U/g。     

固态发酵复合酶培养条件的优化及工艺研究

根据猪的消化生理特点和饲喂饲料,确定猪用复合酶以酸性蛋白酶、木聚糖酶为主,兼有纤维素酶,并采用单因素搜索试验对培养基组成、培养条件进行优化。试验确定的最佳培养基组成为:麸皮60g,纤维素粉40g,豆粕10g,(NH4)2SO42g,MgSO40.05g,K2HPO40.1g。最佳培养条件为:接种量w(曲种)=0.3%,每克原料含3×105个孢子,培养温度30～35℃和适宜的培养时间,在此条件下,所产酶活力分别为:纤维素酶8597U/g,木聚糖酶5054U/g,酸性蛋白酶861U/g。     

发酵花生壳粉生产复合酶的初步研究

从实验室保藏的菌株中选取了一株能发酵花生壳粉产酸性蛋白酶的菌株黑曲霉HKS-07,并通过诱变得到高产菌株UV11,对培养基组成及培养条件进行了优化研究试验。结果表明,菌株UV11在m(麸皮):m(花生壳粉)为6:4、豆粕10%、(NH4)2SO42%、MgSO4·7H2O0.05%、K2HPO40.1%的培养基质上,加水比1:1.1,接种量为105~106个/g,置28～30℃下培养24～30h,产酶量为酸性蛋白酶1226U/g、纤维素酶7996U/g、木聚糖酶3192U/g、糖化酶1080U/g,热稳定性好,具有良好的应用前景。     

玉米皮固态培养混合益生菌的研究

本试验以玉米皮为主要原料,通过单因素试验和正交试验对黑曲霉与酿酒酵母的混合固态培养进行了研究。以蛋白酶、纤维素酶、活菌数为主要考察指标,优化得出的最佳培养条件为:尿素添加量0.5%(P0.05)、含水量60%、麸皮添加量15%(P0.05)、黑曲霉接种量20%、培养天数7 d;混菌培养接种比(黑曲霉∶酿酒酵母)为3∶1,混菌共培养1 d。在此条件下,纤维素酶的酶活为622.11 U/g,蛋白酶的酶活为606.55 U/g,每克发酵物含益生活菌总数超过百亿。     

大豆虾粉肽适宜酶解好条件的研究

为了筛选生产大豆虾粉肽的适宜蛋白酶及酶解条件,试验采用单因素试验设计,以水解度为检测指标,按酶浓度、底物浓度、pH值、酶解温度和酶解时间逐一分别对3种微生物发酵产生的酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的适宜酶解条件进行筛选.试验结果表明:酶解体系中的酶浓度、底物浓度、pH值、酶解温度和酶解时间均显著影响3种蛋白酶对脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的酶解效果.在3种蛋白酶中,酸性蛋白酶的酶解效果最好,其次是碱性蛋白酶,中性蛋白酶的酶解效果最差.酸性蛋白酶水解脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的适宜条件为:酶浓度为2000 U/g,底物浓度为9%,pH值3.5,酶解时间为3.5 h,温度50℃.     

黑曲霉ZM-8菌株产纤维素酶的固态培养基组分优化

本试验以玉米秸秆粉为主要原料,研究了麸皮添加量、氮源、含氮量、含水量和接种量等因素对一株经航天诱变筛选出的高产纤维素酶菌株黑曲霉ZM-8产纤维素酶的影响.并在确定了最佳氮源的基础上对其他各组分采用正交试验进行了优化.结果表明,其最佳固态培养基组分为:氮源为(NH4)3PO4,含氮量0.6%,含水量250%(m/m),玉米秸秆粉与麸皮质量比为4:1,接种量1:30.在优化后的培养基组分上测定的滤纸酶(FPU)酶活和内切β-1,4葡聚糖酶(CMC)酶活分别为3.32 U/g和12.48 U/g,比优化前分别提高了约50%和56%.     

多菌种发酵豆粕的筛选试验

试验旨在通过乳酸杆菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌的配合发酵筛选出三种菌的最佳比例以达到最好的发酵豆粕制作效果。采用正交试验设计,按正交L_(16)(4~3)设计试验发酵豆粕,通过前期探索试验得出适宜的发酵参数为:温度28℃、水分35.3%、厌氧条件、时间2 d。通过测定发酵后豆粕的p H值、酸溶蛋白的量、蛋白酶酶活,从中选出最优组合及其最佳比例。发酵后结果表明,当3种菌的添加量为乳酸杆菌44×10~9U/kg、酵母菌80×10~9U/kg、枯草芽孢杆菌260×10~9U/kg时,发酵豆粕的粗蛋白、酸溶性蛋白的含量最高,蛋白酶酶活最高。     

饲用β-葡聚糖酶的发酵工艺研究

通过对本实验室保藏的12株黑曲霉菌株采用培养、选择性培养基分离,筛选出一株相对酶活较高的菌株作为出发菌株,然后通过紫外线、硫酸二乙酯等复合诱变筛选出一株β-葡聚糖酶高产菌株An08-752。以复合碳源(麸皮+花生壳粉+大麦粉)为碳源;有机氮源为豆粕粉,无机氮源为硫酸铵、硝酸钠;添加无机盐磷酸氢二钾(K+)、硫酸镁(Mg2+);料水比为1:1。固态发酵优化条件为:初始pH值6.8;装料量50 g/500 ml;发酵温度30℃;发酵时间37 h。酶活力达到了1.23×105 U/g。     

饲料用酸性蛋白酶研究

从固体发酵角度研究了酸性蛋白酶的生产， 经过初步的菌株筛选，确定黑曲霉 HW22做为生产菌株。进一步的研究得出适宜的培养基组成是麸皮∶豆粕∶菌渣 =3∶ 6∶ 1、添加固体物料 1.0％的尿素、 0.2％磷酸二氢钾，适宜的培养条件是温度 28℃、 pH自然（ pH值 6.5）、物料加水比 1∶ 1.2、物料热处理条件 9.806× 104Pa，培养时间 56h～ 64h。在上述的条件下，曲料的绝干酶活力可达 24 178U/g。 HW22产酸性蛋白酶的最适温度和 pH值分别为 45℃～ 47.5℃和 2.5，此酶在 40℃以下比较稳定，在温度 55℃以上经过 20min处理即造成酶的严重失活，同时此酶在 pH值 2.5～ 3.5的范围内也比较稳定。     

Nutritive value of oat flour and oat bran

Oat flour, the by-product resulting from commercial production of oat bran, was analyzed to contain 7.7% moisture, 11% CP, 6% crude fat, 8.8% NDF, 1.56% ash (.10% Ca, .23% P), 4,265 kcal/kg GE, .41% lysine, .36% threonine, .17% tryptophan, .21% methionine and .34% cystine. Chick bioassays revealed that lysine and threonine were the first- and second-limiting amino acids in oat flour. Slope-ratio protein quality assessment indicated that the protein quality of oat flour was similar to that of dehulled soybean meal. True ME (corrected for N retention, i.e., TMEn) of oat flour for adult cockerels was 3,726 kcal/kg. A P bioavailability assay with chicks indicated that the P in oat flour was 59.7% bioavailable relative to a KH2PO4 standard. Oat bran was analyzed to contain 9.7% moisture, 15% CP, 6.2% crude fat, 19.2% NDF, 2.33% ash (.12% Ca, .41% P), 4,316 kcal/kg GE, .59% lysine, .47% threonine, .18% tryptophan, .24% methionine and .44% cystine. Protein quality assessment in chicks indicated that the protein quality of oat bran was similar to that of dehulled soybean meal. True MEn of oat bran was found to be 3,449 kcal/kg. Of the .41% total phosphorus in oat bran, 42.2% was bioavailable, relative to the KH2PO4 standard.     

不同叶面肥对桑叶产量的影响

在桑园管理措施一致的前提下,用5种常用叶面肥对桑叶产量的影响进行了比对,结果表明,667 m2产叶量依次为：0.3-0.5%的磷酸二氢钾[KH2PO4]＞0.5-0.7%的尿素[CO（NH2）2]水溶液＞0.3-0.5%的硫酸铵[（NH4）2SO4]＞0.4-0.6%的硫酸钾[K2SO4]＞0.5-0.8%的过磷酸钙[Ca（H2PO4）2]。据此认为,桑园施用叶面肥应首选0.3-0.5%的磷酸二氢钾[KH2PO4]和0.5-0.7%的尿素[CO（NH2）2]水溶液。考虑到生产成本及工作之便,生产上推荐使用0.5-0.7%的尿素[CO（NH2）2]水溶液。     

固态混菌发酵生产饲用复合酶制剂营养条件和培养条件的研究

黑曲霉变种(A.niger v.Tiegh)CGMCC1182、黑曲霉MA-56(A.niger MA-56)CGMCC2722和黑曲霉XY-1(A.niger XY-1)CGMCC1182分别为α-半乳糖苷酶、β-甘露聚糖酶和木聚糖酶生产菌株。为获得高产α-半乳糖苷酶、β-甘露聚糖酶和木聚糖酶的复合酶制剂,通过单因素实验,研究了黑曲霉三种菌株在固态发酵条件下产复合酶制剂的培养基组成和培养条件。结果表明,黑曲霉混菌发酵生产复合酶的最适培养基组成为:麸皮∶豆粕为7∶3(m/m),在此基础上(以麸皮和豆粕总量为10 g计算)添加玉米芯1.0 g,魔芋粉0.1 g,葡萄糖0.5 g,(NH4)2SO4 0.2 g,NaNO3 0.1 g,MgSO4 0.1 g,KH2PO4 0.2 g,H2O 11 mL。产酶最适培养条件为:培养温度30℃,固形物与加水比1∶1,α-半乳糖苷酶、β-甘露聚糖酶和木聚糖酶接种比例为5∶6∶6,接种混合孢子悬浮液2.5 mL(以一支菌种斜面加30 mL无菌水为标准),300 mL三角瓶中装量8 g培养基,发酵60 h时,复合酶产量达到最优,α-半乳糖苷酶、β-甘露聚糖酶和木聚糖酶三种酶制剂的活力分别可以达到221、894、10188 IU/g。     

外加酶提高发酵豆粕蛋白质水解度的研究

在枯草芽孢杆菌发酵豆粕的工艺基础上添加外源蛋白酶进行优化,以蛋白质水解度为指标,试验得到酶添加量、接种量、料水比、温度、时间5个单因素的最佳条件为:加酶量120U/g,接种量1%、料水比1:1.2、温度35℃、发酵时间48h。对5个因素进行正交优化试验,得到优化发酵方案为:加酶量50U/g、接种量1.5%、料水比1:1.2、温度35℃、发酵时间48h,发酵豆粕水解度从对照的16.25%提高到37.29%,提高了1.3倍。     

玉米芯二步发酵生产生物饲料的研究

为探讨玉米芯综合利用的潜力,以固体方式进行黑曲霉和啤酒酵母的发酵试验,通过正交试验研究发酵产物营养价值,其最佳发酵条件为:在质量分数为80%的玉米芯和20%的麸皮混合物中,加入含(NH4)2SO4质量分数2%,MgSO4.7H2O质量分数0.05%,KH2PO4质量分数0.01%的营养液,初始水分含量为48%,pH值为5.5,接种黑曲霉,接种量为10%,30℃培养48 h后接种啤酒酵母,接种量为10%,黑曲霉培养72 h后添加啤酒糟,添加量为玉米芯量的50%,再发酵72 h,产品粗蛋白和粗脂肪含量分别达14.42%和2.29%,净增量分别为10.21和1.50个百分点,粗纤维含量从31.12%降至23.02%。     

碳源和氮源对黑曲霉产木聚糖酶的影响

研究了碳源、氮源以及其它因子对黑曲霉(Aspergillusniger)A3菌株产木聚糖酶的影响。结果表明,当迟效碳源为玉米芯70g/l、速效碳源为葡萄糖10g/l,氮源为NaNO33g/l和(NH4)2SO43g/l,麸皮5g/l,用无氮的Mandels无机盐溶液配制,起始pH值5.5～6.0,并添加中和剂CaCO3调控发酵pH值,250ml三角瓶装液量为30ml时,黑曲霉A3液体发酵酶活力达405.6IU/ml。采用玉米芯代替半纤维素作为主要碳源,可以大大降低生产成本,减少环境污染,有利于工业化生产。     

一株饲用枯草芽孢杆菌CCAM080032固态发酵工艺的研究

为了提高一株饲用枯草芽孢杆菌CCAM 080032的芽孢产量,研究通过单因素试验及正交试验方法,确定了该枯草芽孢杆菌的最优培养基为:稻草粉:麸皮2:8、葡萄糖50 g、胰蛋白胨20 g、NH4NO3 15 g、KH2PO4 10 g、H2O 1 500 g,37℃培养48 h,芽孢产量达到7.90×1010 CFU/g。     

MB22木聚糖酶发酵条件的研究

通过因素轮换试验和正交试验,对MB22菌产木聚糖酶的培养基配方和发酵条件进行了研究。结果显示最佳培养基组成是:以玉米芯粉和麸皮为碳源,麸皮120g/l,玉米芯280g/l,(NH4)2SO44g/l,CaCO31.5g/l,Tween80,2.0g/l,MgSO4·7H2O1.5g/l;最佳发酵条件为:起始pH5.0,摇床培养温度30℃,转速160r/min,振荡培养84h。在最佳发酵条件下,MB22菌的最高产酶活力可达898.23U/ml。虽然与一些高产菌株相比该菌株的产酶能力还有待于进一步提高,但该试验结果为进一步进行微生物生产木聚糖酶的研究提供了理论依据。     

发酵工艺参数对发酵豆粕营养成分的影响

为探讨发酵豆粕生产的最适条件,本研究测定不同的菌种接种量、发酵温度、水分、发酵时间、辅料等几种因子对豆粕发酵效果的影响。结果显示枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、乳酸菌的添加比例分别为3‰、2‰、1‰,蛋白酶添加量为2‰,菌种活化时间为0.5 h,发酵的初始水分为38%,温度保持在30~42 ℃时,发酵豆粕的理化指标最优,其中小肽含量可达20%以上,乳酸含量可达3.5%以上,并且质量稳定。     

Influence of Process Parameters on Nutritional Components of Fermented Soybean Meal

To study the optimal condition of fermented soybean meal production, several factors were selected to study the effects of different strains inoculation quantity, fermentation temperature, moisture content, fermentation time and accessories on soybean meal fermentation.The results showed that when Bacillus subtilis, Saccharomyces cerevisiae and Lactobacillus addition proportions were 3‰, 2‰, 1‰, respectively, proteinase supplementation was 2‰, strains activation time was 0.5 h, initial moisture content was 38%, fermentation temperature kept at 30 to 42 ℃, physical and chemical indexes of fermented soybean meal were optimal, the contents of small peptide and lactic acid could reach more than 20% and 3.5%, respectively, and at the same time, quality of fermented soybean meal was very stable.