肉仔鸡两步法体外消化模拟技术研究

试验旨在建立一套能模拟肉仔鸡消化和吸收养分的两步法体外消化模型。通过测定体外干物质消化率(IVDMD),确定该模型胃和小肠消化阶段最适pH值、蛋白酶添加量、消化时间等消化参数,以及该模型最适宜的透析液体积。结果显示,在胃消化阶段,当pH为3时,IVDMD可达最大值23.38%,与pH2.5、pH3.5的值之间差异极显著(P<0.01);当胃蛋白酶浓度升高到70mg/mL时,IVDMD最大值为22.95%;当消化时间为75min时,IVDMD达最大值23.08%。在小肠消化阶段,所选取的三个pH值参数之间差异不显著(P>0.05),当pH值为6.3时,IVDMD降解率最大;当胰酶添加量为50mg时,IVDMD降解率达到48.16%,极显著高于添加量为30mg的试验组(P<0.01),但与添加量为40mg的试验组差异不显著(P>0.05);当消化时间达到200min时,IVDMD降解率达到51.11%,与反应时间120min和160min相比差异达到极显著水平(P<0.01)。当透析液体积达到400mL时,干物质消化率达到最大(P<0.01)。结果表明,肉仔鸡两步法体外消化最佳参数为:胃阶段pH值3.0,胃蛋白酶浓度70mg/mL,反应时间75min;小肠消化阶段pH值6.3,胰酶添加量50mg,反应时间200min;最佳透析液体积为400mL。     

不同酶解条件对豆粕降解的影响

采用中性蛋白酶处理豆粕,在不同pH值、固液比、酶用量条件下,测定氨基氮的产生量。研究结果表明:中性蛋白酶的适宜反应条件为pH值7.5、固液比1:9和酶用量1.5%,并极显著提高了氨基氮的释放量(P<0.01)。     

一株高产内切纤维素酶贝莱斯芽孢杆菌的产酶条件优化及酶学性质分析

试验旨在对一株杜仲树皮内生菌贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)的内切纤维素酶(CMCase)进行产酶条件优化及酶学性质分析,为探究贝莱斯芽孢杆菌CMCase的相关特性提供参考依据。采用单因子试验设计,分别优化pH、接种量、温度、时间、碳源和氮源等发酵条件,并探讨温度、pH、底物专一性、金属离子及表面活性剂对CMCase的影响。结果表明,以玉米秸秆为碳源(30 g/L)、豆粕为氮源(30 g/L)、3%接菌量、pH 7.0的条件下37℃培养48 h,贝莱斯芽孢杆菌157的CMCase最高可达(5.14±0.18) U/mL。经CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157的最适酶反应温度为60℃,最适pH为5.0;温度稳定性试验发现,在40和50℃时,相对剩余酶活力均高于80%,随着温度的升高,酶活力逐渐降低,当温度高于55℃,相对剩余酶活力约为50%;pH稳定性试验发现,在pH 5.0～10.0之间耐受性良好,相对剩余酶活力均高于90%,随作用时间的延长,相对剩余酶活力变化不大。贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase属于典型内切型纤维素酶。Na^+、Mg²⁺、Ca²⁺可促进贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase酶活力,而Co²⁺、Hg²⁺、Fe²⁺、Cu²⁺和SDS抑制CMCase酶活力;表面活性剂Tween-80、Tween-20、Triton X-100对贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase无影响。本试验通过对贝莱斯芽孢杆菌157进行产酶条件优化及CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase具有产酶量高,耐受pH范围广的特点,在饲料添加剂、洗涤剂和造纸领域中具有一定的应用价值。     

一株高产内切纤维素酶贝莱斯芽孢杆菌的产酶条件优化及酶学性质分析

试验旨在对一株杜仲树皮内生菌贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)的内切纤维素酶(CMCase)进行产酶条件优化及酶学性质分析,为探究贝莱斯芽孢杆菌CMCase的相关特性提供参考依据。采用单因子试验设计,分别优化pH、接种量、温度、时间、碳源和氮源等发酵条件,并探讨温度、pH、底物专一性、金属离子及表面活性剂对CMCase的影响。结果表明,以玉米秸秆为碳源(30 g/L)、豆粕为氮源(30 g/L)、3%接菌量、pH 7.0的条件下37℃培养48 h,贝莱斯芽孢杆菌157的CMCase最高可达(5.14±0.18) U/mL。经CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157的最适酶反应温度为60℃,最适pH为5.0;温度稳定性试验发现,在40和50℃时,相对剩余酶活力均高于80%,随着温度的升高,酶活力逐渐降低,当温度高于55℃,相对剩余酶活力约为50%;pH稳定性试验发现,在pH 5.0～10.0之间耐受性良好,相对剩余酶活力均高于90%,随作用时间的延长,相对剩余酶活力变化不大。贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase属于典型内切型纤维素酶。Na~+、Mg~(2+)、Ca~(2+)可促进贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase酶活力,而Co~(2+)、Hg~(2+)、Fe~(2+)、Cu~(2+)和SDS抑制CMCase酶活力;表面活性剂Tween-80、Tween-20、Triton X-100对贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase无影响。本试验通过对贝莱斯芽孢杆菌157进行产酶条件优化及CMCase酶学性质分析发现,贝莱斯芽孢杆菌157 CMCase具有产酶量高,耐受pH范围广的特点,在饲料添加剂、洗涤剂和造纸领域中具有一定的应用价值。     

检测饲料添加剂中木聚糖酶活力

测定木聚糖酶活力的方法主要有黏度法、底物染色法、还原糖法。大量实践证明．影响木聚糖酶实际使用效果的因素很多．从目前的研究进展分析．采用还原糖法．分析影响酶活测定值的因素并结合生产实际．制定相对公正的评判标准是可行的．也是科学的。测定饲料添加剂中木聚糖酶活力应注意：固定反应体系，即固定反应温度、pH值、反应时间、底物浓度和要求的产物浓度范围。建议以燕麦木聚糖为标准底物．反应液中底物的浓度为5mg／mL：配制的木聚糖底物溶液的存放时间不超过12h．存放温度应在4℃下避光保存；反应体系的pH值为5．5；反应温度为37℃：反应体系的缓冲液中盐浓度为0．1mol／L：反应时间为30min．     

中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶最佳反应体系的建立

乙酰胆碱酯酶是昆虫体内重要的生化标记物,利用其活性的变化可以监测农药对昆虫的亚致死效应。乙酰胆碱酯酶活性测定的条件会因为来源于不同的物种甚至同一物种不同部位而改变。本文采用正交试验排列的25个组合试验探究了酶浓度、底物浓度、pH、反应温度及反应时间5个因素对测定中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶比活力的影响,并从中选择出最佳测定组合。试验结果表明,5个因素对中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶比活力影响的大小顺序为酶浓度反应温度pH反应时间底物浓度,各因素最佳组合为酶浓度0.25g/L、底物浓度0.8mmol/L、pH值7.5、反应温度40℃及反应时间5min。本文优化了中华蜜蜂头部乙酰胆碱酯酶测定条件,为今后评估有机磷类、氨基甲酸类和新烟碱类杀虫剂提供条件。     

粗状假丝酵母产脂肪酶催化特性及水解猪油的初步研究

通过比较,研究了粗状假丝酵母诱变株产脂肪酶催化水解不同底物的相对活力,包括低级酯、脂肪酸甘油酯和天然油脂。并对粗状假丝酵母产脂肪酶催化水解猪油反应中的pH值、温度、时间、加酶量、乳化剂用量和Ca2+浓度等因素进行了研究,得出pH值为7.5、温度为45℃、水解反应时间为72h、加8ml粗酶液、2%油的乳化剂、Ca2+浓度为75mmol/l时,猪油有最佳水解率。通过对该酶反应动力学进行研究得出其水解反应的米氏常数Km为12.25×10-3mol/l和最大反应速率Vmax为11.14μmol/min。     

日粮蛋白质水平对湖羊胃肠道内pH值、氨态氮和菌体蛋白的影响

试验借助瘤胃、十二指肠造瘘技术,研究4种蛋白质水平[8.4%(A)、11.2%(B)、14.0%(C)、16.8%(D)]日粮对湖羊胃肠道pH值、氨态氮和菌体蛋白的影响,对科学的指导反刍动物生产具有现实意义。试验结果显示,随着日粮蛋白质水平的升高,湖羊胃肠道各参数也呈现了升高的趋势。瘤胃液氨氮浓度在食后4h达到峰值,蛋白质水平高时产氨量也较高,D组极显著高于其它组(P<0.01);C组极显著高于A组(P<0.01)。十二指肠食糜中D组氨氮浓度最高,极显著高于其它三组(P<0.01);B、C组极显著高于A组(P<0.01)。瘤胃液中的菌体蛋白以D组(5.24mg N/100ml)最高,A组最低(4.18mg N/100ml),D组显著高于A组(P<0.05)。表明蛋白质水平日粮对湖羊胃肠道内环境各参数有显著影响。     

瓜蒌纤溶酶的分离纯化及性质研究

利用亲和层析从瓜萎蛋白粗提液中分离纯化得到一纤溶酶,并对其部分酶学性质进行研究.结果表明,该酶表观分子量为66.0 kD;最适pH值为9.0;在4～40℃活性无明显变化,78℃以上完全失活;在以酪蛋白为底物的水解反应中,温度、酶底物比、pH值、反应时间4种因素对水解反应的影响力大小为:温度>酶底物比>反应时间>pH;Km值为1.89mg/mL,Vmax=555.56μmol/(L·min).     

纤维素酶活力测定条件研究

用DNS法测定纤维素酶活力,分析测定条件对测定结果的影响。在不同的条件下测定酶活力会得到不同的纤维素酶活力测定值。其中,酶液用量、酶解反应时间、温度对测定结果影响较大,酶液的稀释度、DNS显色时间对测定结果也有一定影响。测定纤维素酶活力的最适条件为:酶解反应时间为30min,最适温度40℃,DNS用量2.5ml,显色时间5min。