性控精液对奶牛情期受胎率的影响

研究了性控精液对奶牛情期受胎率及母犊率的影响。结果表明:经产(青年牛/成母牛)对性控精液的受胎率有显著影响(P<0.05),输精部位、季节对性控精液的受胎率无显著影响(P>0.05)。青年牛试验组与对照组的情期受胎率分别为80.00%和60.00%。成母牛试验组与对照组的情期受胎率分别为33.33%和57.14%,没有显著差异(P>0.05)。性控精液的母犊率(95.45%)极显著高于常规精液的母犊率(47.37%)(P<0.01)。性控精液的流产率与犊牛成活率与常规精液差异不显著(P>0.05)。     

常规精液与性控精液生产胚胎的效果比较

分别采用常规精液和性控精液输精,对580头15～18月龄荷斯坦母牛(其中常规组521头,性控组59头)进行了超排效果试验。超排后,521头采用常规精液输精供体母牛,共回收卵5311枚,头均10.19枚,其中可用胚胎2804枚,平均可用胚胎5.38枚,可用率52.28%,未受精卵697枚,未受精卵率13.12%,退化胚胎1725枚,退化胚率32.48%。59头采用性控精液输精供体母牛,共回收卵600枚,平均每头10.16枚,其中可用胚胎250枚,平均可用胚胎4.24枚,可用率41.67%,未受精卵170枚,未受精卵率28.33%,退化胚胎169枚,退化胚率28.17%。结果表明,性控组的未受精率大大高于常规精液组,而有效胚胎数和比例明显低于常规精液组。其主要原因是性控精子在分离过程中,受到不同程度的损伤,使精子的存活时间缩短,从而增加了未受精率和降低了有效胚胎率。     

常规精液与性控精液的超数排卵效果比较

采用常规精液输精和性控精液输精对580头15～18月龄荷斯坦母牛(其中常规组521头,性控组59头)进行了超排试验。超排后,采用常规精液输精供体母牛521头,共回收卵5311枚,平均每头10.19枚,其中可用胚胎2804枚,平均可用胚胎5.38枚,可用率52.28%,未受精卵697枚,未受精卵率13.12%,退化胚胎1725枚,退化胚率32.48%。采用性控精液输精供体母牛59头,共回收卵600枚,平均每头10.16枚,其中可用胚胎250枚,平均可用胚胎4.24枚,可用率41.67%,未受精卵170枚,未受精卵率28.33%,退化胚胎169枚,退化胚率28.17%。结果表明,性控精液组的未受精率大大高于常规精液组,而可用胚胎数和可用率明显低于常规精液组。其主要原因是性控精子在分离过程中受到不同程度的损伤,使精子的存活时间缩短,从而增加了未受精率和降低了可用胚胎率。     

利用分离的奶牛X精子冷冻精液生产体内性控胚胎试验

采用常规精液和分离的X精子冷冻精液对115头超数排卵的青年和经产荷斯坦母牛人工输精生产体内性控胚胎。结果表明,利用2支和3支性控精液给超排青年母牛输精,头均分别获得6.8枚±4.8枚和6.3枚±3.2枚可用胚胎,与常规精液的超排效果(7.2枚±5.2枚)无明显差异;利用2支和3支性控精液给超排经产母牛输精,头均可用胚胎分别为7.5枚±4.5枚和8.6枚±5.6枚,与常规精液的超排效果(6.1枚±3.2枚)相比,分别增加23%(P>0.05)和41%(P>0.05),无显著差异,但解冻后性控精子会明显影响经产母牛的受精率;对用性控精液输精生产的12枚抽样胚胎采用LAMP法进行性别鉴定并移植,结果获得了91.7%的雌性率和36.4%的受胎率。结果提示,X精子的分离过程会在一定程度上影响受精率,用分离的X精子冷冻精液对超排母牛进行人工授精生产体内性控胚胎是可行的。     

性控精液对奶牛体内胚胎质量、发育和移植妊娠率的影响

[目的] 研究性控精液对奶牛体内胚胎质量、胚胎发育和胚胎移植妊娠率的影响。[方法] 将144头青年奶牛随机分为对照组（63头）和试验组（81头）,使用促卵泡激素（FSH,260 mg/头）进行超排处理。对照组和试验组分别使用常规精液和性控精液输精,并对获得的体内性控胚胎进行移植,对胚胎生产、胚胎质量、胚胎发育和胚胎移植妊娠情况进行统计。[结果] 试验组供体获得的平均可用胚胎数（5.67枚）显著（P<0.05）低于对照组（6.92枚）;试验组供体获得的可用胚胎中A级胚胎比例（62.53%）、B级胚胎比例（35.29%）与对照组（A级胚胎比例66.51%、B级胚胎比例30.97%）相比差异均不显著（P>0.05）;试验组供体获得的可用胚胎中桑葚胚比例（84.10%）显著（P<0.05）高于对照组（61.24%）,囊胚比例（15.90%）显著（P<0.05）低于对照组（38.76%）;试验组的鲜胚移植妊娠率（52.41%）显著（P<0.05）低于对照组（66.13%）。[结论] 与常规精液相比,使用性控精液生产奶牛体内性控胚胎并移植后,平均可用胚胎数、可用胚胎中囊胚比例和胚胎移植妊娠率降低,可用胚胎质量未明显降低;优化性控精液使用方案和胚胎移植技术能够提高体内性控胚胎生产和胚胎移植效率。     

黑安格斯牛体内性控胚胎生产影响因素的研究

为了对黑安格斯牛体内性控胚胎生产过程中的相关影响因素,如月龄、卵泡刺激素(FSH)剂量和精液质量进行研究,试验使用性控分离精液生产黑安格斯牛体内性控胚胎,选择90头13~25月龄黑安格斯牛为供体,分别使用260 mg、340 mg FSH对供体进行超数排卵(简称超排)处理,同时选择3头公牛性控分离精液进行人工授精。结果表明:260 mg、340 mg FSH对不同月龄供体超排获得的平均胚胎数、平均可用胚胎数、平均不可用胚胎数、供体卵巢平均黄体数差异均不显著(P0.05);使用3头不同公牛性控精液进行人工授精后获得的平均胚胎数分别为10.44枚、10.89枚、9.30枚,且差异不显著(P0.05);使用♂1和♂2性控分离精液获得的平均可用胚胎数分别为2.78枚、4.11枚,显著高于♂3性控分离精液获得的平均可用胚胎数(0枚)(P0.05);使用♂1和♂2性控分离精液获得的平均不可用胚胎数分别为7.66枚、6.78枚,显著低于♂3性控分离精液获得的平均不可用胚胎数(9.30枚)(P0.05)。因此,使用低剂量FSH对较早月龄黑安格斯牛进行超排,同时选择受精力高的性控分离精液能够进行体内性控胚胎生产。     

荷斯坦种公牛X-性控精液对体内胚胎生产效率的影响

本实验旨在系统、整体地评价同一品种不同种公牛个体性控精液质量的差异，研究荷斯坦种公牛X-性控精液对体内胚胎生产效率的影响。通过将精液品质分析与体内胚胎生产技术相结合，检测3头荷斯坦种公牛X-性控精液质量，人工授精后统计体内性控胚胎的发育情况和胚胎移植效果。结果表明：不同种公牛精液质量存在较大差异，♂2的精子活力低于♂1和♂3(P<0.05)，精子畸形率和细菌菌落数均高于♂1和♂3(P>0.05);3头荷斯坦种公牛X-性控精液人工授精后头均回收胚胎数、头均可用胚胎数和未受精率差异不显著，但♂2的可用胚胎率最低，退化率最高（P<0.05）；♂2 A级胚胎占比低于♂1和♂3(P<0.05)；移植后发现♂2妊娠率依旧低于♂1和♂3。本研究结果对促进体内胚胎生产效率具有一定指导意义，为荷斯坦种公牛X-性控精液生产优质体内胚胎提供一定参考依据。     

提高牛体外性控胚胎效率关键技术研究

为了提高牛体外受精效果,试验从性控冷冻精液体外获能方法及抗氧化剂的添加、体外成熟24h后卵母细胞是否部分脱除卵丘细胞3个方面,研究了影响牛性控精液体外受精效率的关键技术。结果表明,一次离心体外获能法体外受精卵裂率[(68.3±3.7)%]、囊胚率[(30.9±2.3)%]与精子上浮获能法体外受精卵裂率[(67.8±2.6)%]、囊胚率[(29.7±3.7)%]无显著差异(P>0.05),但显著高于二次离心体外获能法体外受精卵裂率[(56.1±4.1)%]、囊胚率[(21.6±4.6)%](P<0.05);获能液和体外受精液添加1.0%抗坏血酸组体外受精卵裂率[(70.2±3.2)%]、囊胚率[(35.0±4.7)%]显著高于不添加组体外受精卵裂率[(60.0±4.5)%]、囊胚率[(28.3±3.6)%](P<0.05);在体外受精前,成熟卵母细胞周围的卵丘细胞脱除情况为部分脱除组体外受精卵裂率[(70.1±4.6)%]、囊胚率[(35.5±3.7)%]显著高于不脱除组体外受精卵裂率[(52.9±4.1)%]、囊胚率[(26.1±3.6)%](P<0.05)。由此可见,性控精液体外受精时,获能方法宜采用一次离心体外获能法或上浮获能法,且精子获能液和体外受精液中宜添加抗坏血酸;体外受精前,成熟卵母细胞部分脱除卵丘细胞对于提高性控精液体外受精胚胎发育率具有重要意义。     

体外受精生产性控犏牛胚胎条件的优化

为提高性控犏牛胚胎体外发育率,从性控精液的精子密度、受精时间、卵丘细胞的脱除程度、胚胎培养体系和胚胎培养环境各个环节进行优化。结果表明:(1)受精24h的卵裂率和囊胚率显著高于受精6h、18h(P0.05);(2)性控精液的精子密度0.4×10~6~0.6×10~6个/mL时的卵裂率显著低于4×10~6~6×10~6个/mL组(P0.05),但囊胚率差异不显著(P0.05),均显著高于性控精液0.04×10~6~0.06×10~6个/mL的卵裂率和囊胚率(P0.05);(3)卵丘细胞不脱除组的囊胚率(23.42%)显著高于半脱除组(13.77%)和完全脱除组的囊胚率(15.61%)(P0.05);(4)输卵管上皮细胞共培养的囊胚率(24.63%)和卵丘细胞共培养的囊胚率(23.42%)差异不显著(P0.05),但均显著高于FBS CR1aa培养液的囊胚率(P0.05);(5)性控犏牛早期胚胎在低氧培养环境下囊胚率(23.42%)显著高于高氧培养环境(11.83%)(P0.05),而孵化囊胚率差异不显著(P0.05)。结果说明,生产性控犏牛胚胎最佳的条件是性控精液的浓度0.4×10~6~0.6×10~6个/mL,受精时间为24h,采取卵丘细胞不脱除的方法,胚胎培养方式采用输卵管上皮细胞共培养的方式,胚胎培养环境采用低氧环境。     

白绒山羊性控胚胎生产及移植应用研究初探

应用X性控冷冻精液对超排供体白绒山羊进行人工授精,生产性控胚胎并进行鲜胚移植。结果发现,①用性控冻精和鲜精输精的供体母羊,平均卵子回收数分别为13.3和12.5枚,其中性控冻精组受精卵比例为29.6%（55/186）,极显著低于鲜精组94.0%（281/299）的比例（P<0.01）;②性控胚胎和普通胚胎移植受体母羊产羔率分别为42.2% 和58.1% ,二者差异极显著（P<0.01）;③性控胚胎移植受体母羊所产羔羊雌性所占百分数为100%,极显著高于普通胚胎移植（P<0.01）。表明通过白绒山羊X、Y精子分离、人工授精生产性控胚胎,同时结合胚胎移植技术,可以达到按照生产实际中的意愿得到性别控制子代白绒山羊的目的。     

性控冻精对荷斯坦牛受胎率及经济效益的影响

选择体况良好、子宫环境相对稳定、健康无病的2～3胎次的成年母牛115头和16～18月龄、体重350kg左右的育成牛45头,分成两组,其中试验组成母牛和育成牛分别为20头和24头,对照组分别为95头和21头;分别采用性控冻精和常规冻精配种,配种后60d内进行妊娠检查。结果表明,育成牛和成母牛的性控冻精受胎率分别较常规冻精低18.45%(P<0.01)、23.95%(P<0.01),但育成牛的性控冻精受胎率极显著高于成母牛性控冻精受胎率(高27.5%,P<0.01)。性控冻精用于奶牛繁殖具有较好的经济效益。     

核心群奶牛超数排卵技术影响因素的研究

[目的]为进一步研究核心群奶牛超数排卵技术影响因素。[方法]试验使用3个FSH剂量和4 个公牛精液对27头青年奶牛进行超数排卵。对供体牛胚胎生产情况和受体胚胎移植妊娠率进行统计。[结果]结果显示供体2次超排获得7.8枚平均可用胚胎显著高于1次超排获得的5.7枚平均可用胚胎(P<0.05);260,280 mg FSH超排供体获得6.0和7.7 枚平均可用胚胎显著高于300 mg FSH超排供体获得的4.6枚平均可用胚胎(P<0.05);供体使用4个公牛精液人工授精后获得的平均可用胚胎数和平均未受精卵数差异不显著(P>0.05);移植前接种疫苗的受体胚胎移植妊娠率显著降低(P<0.05）。[结论]核心群奶牛超排适宜FSH剂量为260-280 mg,使用高受精力公牛精液和对超排反应好的供体重复超排能够提高超排效率,受体移植前避免疫苗接种能够提高胚胎移植妊娠率。     

应用X精子冷冻精液生产体内性控胚胎的试验研究进展

应用X精子冷冻精液对75头超排供体母牛进行2～3次（3～4支细管）输精，共采集胚胎633枚，其中可用胚339枚，退化胚135枚，未受精卵159枚。胚胎的受精率为74.9％（474/633），可用率为53.6％（339/633），发育率为71.5％（339/474），头均获得可用胚胎4.5枚。输2次精3支细管，与输3次精4支细管，均可获得同样的胚胎采集效果。应用LAMP法对61枚胚胎进行性别鉴定后，确定雌性胚胎比例为100％（61/61）。11枚X精子冷冻精液生产的体内性控冷冻胚胎移植后，怀孕率为63.6％（7/11）。因此，应用X精子冷冻精液对供体母牛进行输精，不仅可获得与未分离冷冻精液输精后相接近的胚胎的数量和质量，而且移植后可得到较高的怀孕率。应用X精子冷冻精液生产体内性控胚胎，可在我国胚胎移植技术中大量推广应用。     

不同年龄阶段供体和受体绵羊对超数排卵胚胎移植效果的影响

采用同一种FSH用各自的最适剂量对育成羊(10～12月龄)、适龄羊(2～5岁)、老龄羊(6岁以上)进行超数排卵。其结果如下:①育成羊组所获得的平均可用胚胎数(14.15±4.45)和适龄羊组获得的平均可用胚胎数(13.4±3.56)均显著高于老龄羊组所获得的平均可用胚胎数(8.15±4.12)(P<0.05);②育成羊组获得的平均可用胚胎数和适龄羊组获得的平均可用胚胎数无显著差异(P>0.05);③经产受体羊妊娠率为68.71/,显著高于育成受体羊妊娠率(59.3/)。     

性控胚胎生产对育成牛繁殖机能影响的研究

选择良种育成牛作供体,超排处理后用X精子冷冻精液人工授精生产性控胚胎,累计处理38头供体,冲胚35头,获可用胚胎96枚,平均2.74枚;冲胚后的育成牛用常规冷冻精液配种的情期受胎率和总受孕率分别为76.32%和94.74%,与该场同时期未作供体的育成牛的73.81%和94.44%相比差异不显著(P0.05);同时在夏、秋、冬三季对育成牛进行超排,胚胎可用率分别为18.95%、40.18%和57.89%(P0.05)。结果表明:利用育成牛作供体生产性控胚胎,对其繁殖机能无明显的影响;在秋、冬两季生产胚胎的可用率显著高于在夏季生产,而且在冬季供体冲胚后繁殖机能恢复的时间最短。     

不同因素对高产荷斯坦奶牛体内性控胚胎生产效率和质量的影响

[目的]试验旨在探讨不同种类的促卵泡素(FSH)超数排卵处理、不同精液类型人工输精处理以及不同季节等前处理方式对高产荷斯坦奶牛体内性控胚胎生产效率的影响,为高产胚胎牛后代的繁育做出贡献。[方法]试验选取208头优质供体牛使用加拿大(Folltropin-v)和比利时进口的促卵泡素(FSH)进行超排,性控冻精和性控鲜精进行人工输精,春(3—5月)、夏(6—8月)、秋(9—11月)、冬(12—2月)四季进行胚胎生产。[结果]结果表明,使用产地为加拿大(Folltropin-v)促卵泡素进行超数排卵头均可用胚胎数和I级胚胎数(包括桑葚胚I级、囊胚I级)均显著高于比利时(P<0.05);通过使用性控冻精和性控鲜精对供体牛进行人工输精头均可用胚胎数分别为和I级胚胎数差异均不显著(P>0.05);春、夏、秋、冬四季进行胚胎生产头均可用胚胎数和I级胚胎数夏季均显著低于其他三季(P<0.05)。[结论]因此,使用加拿大促卵泡素(Folltropin-v)超数排卵、性控冻精进行人工输精避免在夏季进行胚胎生产可获得质量较高的高产荷斯坦奶牛体内性控胚胎。     

常规冻精输精时间对奶牛胚胎质量和性别比例的影响

超排处理供体奶牛发情后8～11、12～15h和16～19h采用常规冻精分别实施第1次配种,12h后第2次配种,统计输精时间对胚胎质量和性别比例的影响。结果表明:12～15h组第1次输精获得可用胚率显著高于8～11h组(62.8%vs56.6%)(P<0.05);也高于16～19h组(62.8%vs55.6%)(P=0.06)。性别鉴定后,8～11h组,12～15h组和16～19h组雌性胚胎率分别为47.0%,48.6%和45.2%,3组间雌性胚率无显著差异(P>0.05)。本试验得出,供体奶牛发情后12～15h第1次输精可获得可用胚率和胚胎雌性率的最佳组合。     

胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响

[目的]为了评估胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响。[方法]使用63头青年奶牛作为供体进行超数排卵,评估回收胚胎质量和发育阶段。选择334头青年奶牛作为受体鲜胚移植不同质量和发育阶段胚胎。对胚胎质量分布、发育阶段分布、不同质量胚胎和不同发育阶段胚胎移植30 d妊娠率进行统计分析。[结果]可用胚胎中A级胚胎比例(60.78%)显著高于B级和C级胚胎比例(36.70%和2.52%)(P<0.05);致密桑椹胚比例(54.36%)显著高于早期囊胚,囊胚和扩张囊胚比例(18.35%,25.0%和2.29%)(P<0.05)。A级和B级胚胎移植30 d妊娠率(63.55%和64.35%)显著高于C级胚胎移植30 d妊娠率(44.44%)(P<0.05);致密桑椹胚、早期囊胚、囊胚和扩张囊胚移植30 d妊娠率差异不显著(P<0.05),早期囊胚、囊胚移植30 d妊娠率高于致密桑椹胚、扩张囊胚移植30 d妊娠率(P<0.05)。[结论]选择不同发育阶段的A级和B级胚胎能够获得较高胚胎移植妊娠率,增加早期囊胚和囊胚阶段胚胎移植数量能够提高胚胎移植妊娠率。     

用荷斯坦奶牛性控精液生产体内性控胚胎

采用荷斯坦奶牛X性控冻精和超数排卵技术结合生产奶牛性控胚胎,以建立高效、低成本的体内性控胚胎生产方法。研究发现,使用CIDR和Cue-Mate进行奶牛同期发情处理,发情率分别为90.9%和100%(P<0.05),且Cue-Mate的发情时间更加集中;加拿大的FOLLTROPIN-V和中国科学院动物研究所的FSH对奶牛超排效果影响不显著,分别为头均胚胎数10.08枚±8.08枚、头均可用胚胎数2.38枚±3.07枚和头均胚胎数6.57枚±4.31枚、头均可用胚胎数2.00枚±1.88枚,无显著差异(P>0.05);奶牛发情后12h～14h和16h～19h人工授精,分别获得头均胚胎数10.25枚±5.53枚、头均可用胚胎数5.33枚±4.52枚和头均胚胎数10.13枚±6.93枚、头均可用胚胎数5.88枚±6.26枚,无显著差异(P>0.05)。但是未受精胚胎数差异显著(27对7,P<0.05)。     

用控性精液提高奶牛繁殖母犊比例的试验报告

通过三年时间对三个乡(镇)、共881头母牛采用控性精液和非控性精液进行了分点对照试验。所得结果表明,试验组产母犊率平均为75.51%,对照组产母犊率平均为50.18%,试验组平均高于对照组25.33个百分点。经统计处理,差异分别为P<0.01和P<0.001;而试验组间和对照组间及各点提高率间差异分别为P>0.05和P<0.1。