河南省犊牛腹泻主要病原调查研究

[目的]为了解河南省犊牛腹泻主要病原流行情况和腹泻病因,有效防控犊牛腹泻,加快养牛业健康发展。[方法]用ELISA方法对从河南省12个地区采集1～6月龄有腹泻临床症状和无腹泻临床症状犊牛粪便样品187份,血液样品305份进行检测。[结果]在305份血液样品中,共检测到病毒性腹泻病毒(BVDV)阳性血样17份;副结核分支杆菌阳性血样13份。187份粪便样品中,检测到微小隐孢子虫阳性样品47份;轮状病毒阳性样品3份;大肠杆菌K99⁺阳性样品8份;冠状病毒阳性样品5份。[结论]发现犊牛腹泻主要是由病原感染引起的,其中微小隐孢子虫的感染率为较高,同时以单一病原感染为主。     

新疆南疆某规模化绵羊养殖场腹泻羔羊隐孢子虫感染情况及其分子鉴定

[目的]了解新疆南疆某规模化绵羊养殖场腹泻羔羊隐孢子虫感染情况和基因亚型分布特点。[方法]采集新疆维吾尔自治区某规模化绵羊养殖场4个品种1月龄以内腹泻羔羊新鲜粪便样本60份,使用饱和蔗糖溶液漂浮法检查隐孢子虫卵囊,进行种类初步鉴定;全部粪便样本提取基因组DNA后,基于隐孢子虫SSU rRNA基因位点和微小隐孢子虫gp60基因位点,对其进行PCR扩增、测序和序列分析,鉴定隐孢子虫种属和基因亚型,构建遗传进化树解析其分子遗传特征。[结果]经显微镜观察,发现38份样本呈隐孢子虫卵囊阳性,形态学初步鉴定为微小隐孢子虫;基于SSU rRNA基因位点,采用PCR方法检测出52份样本呈隐孢子虫阳性,感染率为86.67%(52/60),经序列比对分析,均为微小隐孢子虫;基于微小隐孢子虫gp60基因位点,PCR扩增后成功获得49条序列,经比对分析均为ⅡdA19G1基因亚型。[结论]该养殖场腹泻羔羊普遍感染微小隐孢子虫,其基因亚型均为ⅡdA19G1。调查结果为新疆南疆绵羊隐孢子虫种属鉴定与遗传进化研究提供了基础数据。     

致犊牛腹泻肠道原虫的分子生物学鉴定

为确定导致犊牛腹泻的寄生原虫种类及分子学特性,利用基于隐孢子虫核糖体小亚基RNA、蓝氏贾第虫β-贾第素和毕氏肠微孢子虫内转录间隔区的分子生物学技术对腹泻犊牛的粪便样品进行鉴定。结果表明,引起犊牛腹泻的寄生原虫包括微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫、瑞氏隐孢子虫、E型蓝氏贾第虫和多种基因型的毕氏肠微孢子虫,并且存在多种原虫混合感染。说明原虫是引起犊牛腹泻的重要病原,畜牧业临床中应加强原虫病的防控。     

邯郸地区规模化牛场犊牛隐孢子虫感染情况调查

研究旨在调查邯郸地区规模化牛场犊牛隐孢子虫感染情况,为该地区犊牛隐孢子虫的防治工作提供依据.试验从邯郸地区5个县(区)的牛场随机采集犊牛的新鲜粪便各80份,采用饱和蔗糖溶液漂浮法收集卵囊,采用改良抗酸染色法染色,在400倍光学显微镜下进行观察.结果显示,邯郸地区成安县、魏县、临漳县以及邯山区、肥乡区犊牛隐孢子虫的感染率...     

奶牛源微小隐孢子虫的分子鉴定及动物感染试验

采用饱和蔗糖溶液漂浮法检查商丘市某奶牛场牛新鲜粪便样本的隐孢子虫卵囊,用18SrRNA基因对隐孢子虫进行PCR扩增和限制性片段长度多态性分析;基于GP60基因位点对微小隐孢子虫进行基因亚型鉴定。结果显示:103份样本中有50份为隐孢子虫阳性,42份经形态学鉴定为安氏隐孢子虫,8份形态学未能鉴定到种。经限制性片段长度多态性分析,7个分离株为微小隐孢子虫,1个分离株为牛隐孢子虫;序列比对分析,7个微小隐孢子虫均为人兽共患基因亚型IIdA19G1。接种1头3日龄犊牛1×106个卵囊,潜隐期为3d,显露期为14d,于感染后第7天和第10天出现2个排卵囊高峰期,收集到大量纯卵囊。     

陕西部分地区秦川牛断奶后犊牛隐孢子虫感染状况

为明确陕西部分地区秦川牛断奶后犊牛隐孢子虫感染率及其种类分布,本试验从杨凌和宝鸡3个秦川牛场采集了113份3~6月龄的犊牛粪便样品,基于隐孢子虫18SrRNA基因位点对其进行PCR检测和序列分析。结果显示,隐孢子虫总感染率为16.8%(19/113),各养殖场的隐孢子虫感染率差异不显著(P0.05);种类鉴定发现了3种隐孢子虫,分别为安氏隐孢子虫(Cryptosporidium andersoni)、瑞氏隐孢子虫(Cryptosporidium ryanae)和牛隐孢子虫(Cryptosporidium bovis),其中安氏隐孢子虫为优势虫种,广泛分布于各个养殖场。这些研究结果表明这些地区的秦川牛断奶后犊牛隐孢子虫感染比较普遍,且种类较为复杂。     

黑龙江某规模化牛场犊牛腹泻病原检测及防控建议

2020年5-6月份,黑龙江省某奶牛场的新生犊牛出现精神沉郁、消瘦、水样腹泻等临床症状。为确诊发病原因,采集腹泻犊牛肛拭子、粪便等样品20份,采用PCR技术检测牛轮状病毒、牛冠状病毒、牛病毒性腹泻黏膜病病毒及隐孢子虫,细菌分离培养和致病性试验鉴定可能的致病细菌。结果表明,在20份腹泻粪样中,未检出牛轮状病毒、牛冠状病毒及牛病毒性腹泻黏膜病毒,隐孢子虫的阳性率为25%(5/20),致病性大肠杆菌检出率为75%(15/20)。说明该奶牛场犊牛养殖区存在较为严重的大肠杆菌及隐孢子虫感染。     

某奶牛场犊牛腹泻的病原诊断及防控建议

2019年10月,湖南常德市某奶牛场26头犊牛发生腹泻,为了确诊发病原因,无菌采集4头病死牛的肠内容物、肠组织、粪便,采用RT-PCR技术检测牛病毒性腹泻病毒、牛轮状病毒、牛冠状病毒、隐孢子虫、大肠杆菌毒力基因及黏附素,对分离到的大肠杆菌用纸片法(K-B)进行药物敏感试验。结果显示,在肠道样品中有3个astA毒力基因阳性,阳性率为75%,隐孢子虫1个阳性,其他检项均显示阴性,大肠杆菌对10种抗生素全部耐药,耐药率100%。结果表明,该牛场犊牛腹泻主要是由致病性大肠杆菌和牛隐孢子虫感染引起,且大肠杆菌耐药性非常严重。本研究可为该场犊牛腹泻防治提供参考。     

宁夏部分地区奶牛犊牛隐孢子虫感染情况调查

为了解宁夏地区犊牛隐孢子虫的感染情况,从3个市8个规模化奶牛场采集272份犊牛粪便样品,利用巢氏PCR技术对18S rRNA基因位点进行检测和分析。结果显示,隐孢子虫的总感染率为12.88%,银川市隐孢子虫感染率为16.89%,吴忠市隐孢子虫感染率为6.94%,石嘴山市隐孢子虫感染率为9.62%,三者差异不显著(P0.05),断奶前、后感染率分别为14.14%,12.14%。序列处理分析发现3种隐孢子虫,分别为牛隐孢子虫(Cryptosporidium bovis,C.bovis)、瑞氏隐孢子虫(Cryptosporidium ryanae,C.ryanae)和微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum,C.parvum),其中C.bovis分离率最高(54.29%)。研究表明这些地区犊牛隐孢子虫感染比较普遍,且感染的虫种有3种,其为深入了解宁夏部分地区隐孢子虫的分子流行情况提供了参考数据。     

国际上首次报道犊牛感染火鸡隐孢子虫

中国兽医信息网中国疾病预防控制中心寄生虫病预防与控制所重点实验室沈玉娟研究员与哈尔滨医科大学刘爱芹教授合作在《PLoSONE》杂志上发表文章,报告了我国黑龙江省哈尔滨、大庆、牡丹江和齐齐哈尔地区断奶前犊牛隐孢子虫感染调查情况：总感染率为47.68%（72/151）,分子鉴定为牛隐孢子虫47.22%（34/72）,安氏隐孢子虫36.11%（26/72）,赖氏隐孢子虫6.94%（5/72）,火鸡隐孢子虫6.94%（5/72）和微小隐孢子虫2.78%（2/72）。其中微小隐孢子虫、安氏隐孢子虫和火鸡隐孢子虫,均为人兽共患隐孢子虫虫种,具有潜在的公共卫生危害。亚型分型：微小隐孢子虫亚型为IIdA19G1,火鸡隐孢子虫亚型为IIIeA22G2R1。在我国犊牛自然感染火鸡隐孢子虫具有地域流行特点,系国内外首次报道。火鸡隐孢子虫主要感染禽类,也是继人隐孢子虫和微小隐孢子虫后,第三大能感染人的隐孢子虫虫种。而犊牛作为火鸡隐孢子虫的储存宿主,需要开展更多系统的实验感染研究来证实;同时应对人、动物进行进一步的分子流行病学研究,来阐明微小隐孢子虫和火鸡隐孢子虫等传播动力学关系。     

内蒙古某奶牛场两种致犊牛腹泻原虫的鉴定及遗传进化分析

为明确内蒙古某规模化奶牛养殖场腹泻犊牛寄生虫性病原的感染情况及其分子学特性,采集该养殖场18头发生腹泻犊牛的新鲜粪便样品。通过形态学方法并结合分子生物学方法对样品中隐孢子虫(Cryptosporidium)和蓝氏贾第虫(Giardia lamblia)进行分离鉴定和感染情况统计分析。形态学检查结果表明,18份粪便样品中隐孢子虫感染率为5.56%(1/18),蓝氏贾第虫感染率为72.22%(13/18)。进一步对18份粪便样品提取DNA,并基于SSU rRNA和BG基因位点分别对隐孢子虫和蓝氏贾第虫进行PCR扩增、序列比对和遗传进化分析。电泳检测结果显示,显微镜检测阳性粪便样品均在830 bp和511 bp处出现目的扩增条带。同时,序列比对及遗传进化分析也表明,所分离到的隐孢子虫与来自于不同国家和地区的牛隐孢子虫(C.bovis)在SSU rRNA基因位点上具有100%序列同源性,因此被归于同一个进化分支,而所分离的蓝氏贾第虫在BG基因位点上与集聚体E参考分离株的序列同源性高达99.78%以上,提示其属于集聚体E。通过形态学和分子学方法明确了牛隐孢子虫和蓝氏贾第虫是该奶牛场主要致犊牛腹泻...     

河南省部分地区乳牛隐孢子虫病的流行病学调查

为进一步掌握乳牛隐孢子虫病在河南省的流行动态,从河南省郑州、开封、济源和鹤壁4个地区9个奶牛场采集12月龄以内的乳牛粪便样品582份,用饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法进行检测。结果显示,隐孢子虫总感染率为26．12％（152／582）。其中,断乳前犊牛（5日龄至2月龄）隐孢子虫感染率为30．91％（51／165）,断乳后犊牛（3～12月龄）感染率为24．22％（101／417）。依据形态数值初步鉴定为2种隐孢子虫,即微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫。微小隐孢子虫在断乳前犊牛阳性样品中的比率为50．98％（26／51）,在断乳后乳牛阳性样品中的比率为9．90％（10／101）。另外,饲养方式（断乳前犊牛单独隔离饲养和未隔离饲养）对断乳前犊牛2种隐孢子虫的感染率有显著影响。     

青海省大通县犊牛粪样中隐孢子虫的鉴定及分子特征

从青海省大通县采集200份奶牛犊粪样用于隐孢子虫检测。所有样品经蔗糖密度梯度离心法处理后采用免疫荧光试验(IFT)和巢式(nPCR)方法进行检测。巢式PCR结果中有2个样品为隐孢子虫阳性(1%),PCR扩增片段长度约为500bp左右,分别命名为QHDTC201701株和QHDT201702株,测序结果分别与隐孢子虫XW3株(KY808976)和XD1株(KY808999)核糖体小亚基RNA(18SrRNA)的同源性为100%,遗传进化分析表明分离株分别为Cryptosporidiumandersoni(C.andersoni)和Cryptosporidiumbovis(C.bovis)。结果表明大通县犊牛中存在不同程度的隐孢子虫的感染,对于犊牛腹泻诊断具有临床意义。     

北京地区牛隐孢子虫病的调查及小鼠的人工感染

隐孢子虫病是全世界流行的一种人畜共患病。笔者对北京地区的牛隐孢子虫病进行了初步调查,在调查的5个牛场中有4个发现有隐孢子虫感染,其中二月龄、三月龄犊牛感染率最高(二月龄为19.5%,三月龄为17.4%),四、五月龄时逐步下降,一月龄犊牛感染率最低。人工感染试验证明牛隐孢子虫能够感染正常的和免疫力降低的小鼠。从而证明北京地区牛隐孢子虫不具有宿主特异性,它既能感染牛,又能感染小鼠。笔者还在电镜样品和组织切片中发现了隐孢子虫各发育阶段的虫体;被隐孢子虫寄生的肠绒毛发生不同程度的变性、坏死、萎缩和上皮细胞的脱落,从而证明北京地区牛隐孢子虫具有一定的致病性。     

家畜隐孢子虫病的流行和诊疗

<正>世界各地都确认存在隐孢子虫病,主要发生于新生犊牛,但绵羊羔、山羊羔、马驹与仔猪也能患此病。隐孢子虫能在新生农畜中,引发不同程度的自然腹泻。隐孢子虫通常与其他肠道病原菌并发,造成肠道损伤与腹泻。本病尚无有效疗法。可试用文末提及的治疗方法。本病有人兽共患病风险,需做好防护。1病原与流行微小隐孢子虫感染常见于幼龄反刍动物,也见于包括人在内的多种哺乳动物。感染常见于犊牛,在1～3周龄的奶犊     

新疆犊牛轮状病毒性腹泻流行状况的调查

从新疆4个不同地区7个规模化牛场采集犊牛腹泻粪便样品274份,用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行轮状病毒检测,其中有6个牛场检出阳性,各牛场阳性率在25%～50%之间,所有样品平均阳性率37.2%.部分样品用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)法进行了符合性检测,符合率为85.7%,核酸电泳带型均为标准的4:2:3:2排列,进一步明确为A群轮状病毒感染.该结果表明轮状病毒是引起新疆境内犊牛腹泻的重要病原之一.     

宁夏地区犊牛腹泻的病原调查

为了解宁夏地区奶牛犊牛腹泻的病原微生物种类及流行病学情况,2017年6月至12月对宁夏地区20个牧场有临床腹泻症状的犊牛,随机采集127份腹泻粪便样品,采用快速检测试剂盒对轮状病毒、隐孢子虫、大肠杆菌和贾第鞭毛虫4种病原微生物进行了抗原检测。结果显示:在127份腹泻粪样中,轮状病毒的阳性检出率为32. 28%(41/127),隐孢子虫的阳性检出率为25. 20%(32/127),大肠杆菌阳性检出率为11. 02%(14/127),贾第鞭毛虫阳性检出率为4. 72%(6/127)。结果表明:宁夏部分奶牛养殖区犊牛已经存在着较为严重的轮状病毒和隐孢子虫病感染,此调查为宁夏制定科学有效的综合防控措施提供了有效依据,对促进宁夏地区奶产业健康持续发展具有重要意义。     

防制犊牛小球隐孢子虫感染的策略

防制犊牛小球隐孢子虫感染的策略查红波摘译索勋校小球隐孢子虫（Ｃｒｙｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｐａｒｖｕｍ）感染是犊牛腹泻的主要原因之一。至今，尚无防制隐孢子虫病的特效药物。治疗犊牛隐孢子虫病在目前仅限于支持疗法，即在发生腹泻时，补充体液。人们曾试图用被动...     

新疆南疆地区某规模奶牛场牛病毒性腹泻抗原检测

为了解新疆南疆地区某规模化奶牛场牛病毒性腹泻病毒(bovine viral diarrheavirus,BVDV)感染情况,采用血清流行病学调查方法,对该规模化奶牛场2358份牛血清样品、35份新生犊牛耳组织样品进行BVDV抗原ELISA检测。结果显示,该场有9份血清样品为BVDV抗原阳性,阳性率为0.38%;对阳性样品的来源牛间隔21d后采血复检,检出1份阳性血清样品,确认该样品来源牛为持续性感染牛;在新生犊牛耳组织中,未检测出BVDV。本次抗原检测证明,新疆南疆地区规模化奶牛场存在一定的BVDV流行和持续感染,建议督促牛场积极开展BVDV净化工作。     

一起奶牛腹泻病的病原学诊断

辽宁省某奶牛养殖场10～30日龄犊牛发生腹泻,为查明病因,我们对送检的18份犊牛腹泻样本分别进行牛轮状病毒(BRV)、牛冠状病毒(BCoV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、产肠毒素大肠杆菌(ETEC)、沙门氏菌(Salmonella)和安氏隐孢子虫(C. andersoni)的PCR检测。结果显示:18份犊牛腹泻样本中,BRV、BCoV、BVDV的检出率分别为83.3%(15/18)、88.9%(16/18)、61.1%(11/18),这3种病原的混合感染率较高,其他病原均未检出,说明该奶牛场的犊牛腹泻主要由BRV、BCoV、BVDV混合感染引起。