牛至油与5种抗生素联合用药的抗菌作用研究

该试验旨在测定牛至油及其与5种抗生素联合应用的抗菌活性。用两倍稀释法测定牛至油对16株临床分离大肠杆菌,包括8株产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）菌和8株不产ESBLs菌的最小抑菌浓度（MIC）值．挑选几株耐药菌株用棋盘法测定牛至油与头孢噻呋、左旋氧氟沙星、阿奇霉素、多西环素、氟苯尼考联用的抗菌活性。结果表明：牛至油对产ESBLs和不产ESBLs菌的MIC值均为0．25mg／ml;牛至油与左旋氧氟沙星和氟苯尼考之间存在协同作用．与头孢噻呋、阿奇霉素、多西环素存在相加作用或无关作用。     

牛至油及抗生素联用对产ESBLs大肠埃希氏菌体外抗菌作用

采用微量肉汤稀释法,测定了牛至油和5种抗菌药物头孢噻呋、左氧氟沙星、多西环素、阿奇霉素、氟苯尼考及它们之间联用对临床分离的8株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鸡大肠杆菌的MIC值,考察牛至油和抗菌药物之间的相互作用。结果表明,8株产ESBLs鸡大肠杆菌对牛至油敏感,对5种抗菌药均有耐药性,头孢噻呋与牛至油联用表现为无相关作用;多西环素、阿奇霉素与牛至油联用主要表现为相加作用;左氧氟沙星、氟苯尼考与牛至油联用主要表现为协同作用。     

牛至油和小檗碱联用对产ESBLs鸡大肠埃希菌的体外抗菌试验

测定了牛至油、小檗碱、头孢噻呋、左氧氟沙星、多西环素及氟苯尼考6种药物对分离产ESBLs鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)及牛至油与小檗碱等5种药物联用对12株产ESBLs鸡大肠杆菌和标准菌的部分抑菌浓度(FIC)指数,分析牛至油与小檗碱等5种药物间的相互作用,为筛选对产ESBLs鸡大肠杆菌有效的药物及复方牛至油口服乳的推广提供依据。结果表明,12株产ESBLs鸡大肠杆菌对牛至油、小檗碱敏感,对4种抗菌药均有不同程度的耐药性;小檗碱与牛至油联用均表现为协同作用。     

透骨草含药血清与西药联合对产ESBLs E.coli的体外抑菌作用

为了探讨透骨草含药血清与抗菌药联合对产ESBLs大肠杆菌的抑菌作用,采用棋盘法测定透骨草含药血清与抗菌药联合的FIC指数。透骨草含药血清与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶(SMM)、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、乙酰甲喹、克林沙星、加替沙星、林可霉素、强力霉素、氟苯尼考、阿奇霉素、磷霉素联合作用后的FIC分别为:0.75、1.00、0.28、0.75、>2.00、0.75、>2.00、>2.00、0.26、0.26、0.26、0.50、0.50、1.00、0.50、>3.00、0.26、0.38、1.25。结果显示:透骨草含药血清与环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、乙酰甲喹、克林沙星、林可霉素、氟苯尼考、阿奇霉素、头孢噻肟钠体外联合作用为协同作用;与头孢曲松钠、加替沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢噻呋钠体外联合作用为相加作用;与阿莫西林、强力霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶体外联合作用为拮抗作用;与磷霉素体外联合作用为无关作用。     

舒巴坦、利血平、乙二胺四乙酸二钠对鸭源大肠杆菌抗菌药物敏感性的影响

本试验旨在研究β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦、外排泵抑制剂利血平及膜通透促进剂乙二胺四乙酸二钠(EDTA)对鸭源大肠杆菌抗菌药物敏感性的影响。采用微量肉汤稀释法测定8株多重耐药鸭源大肠杆菌对头孢噻呋钠、恩诺沙星、阿米卡星、氟苯尼考、多西环素及其与舒巴坦、利血平和EDTA联用的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,舒巴坦能使5株鸭源大肠杆菌对头孢噻呋钠的MIC值下降4倍以上;利血平仅能使3株菌株对头孢噻呋钠的MIC值下降4倍以上;而EDTA能使7、5、3、6、8株菌对以上5种药物的MIC下降4倍以上;舒巴坦+利血平使4株菌株对头孢噻呋钠的MIC下降4倍以上,使5株菌株对氟苯尼考的MIC下降4倍以上;舒巴坦+EDTA使鸭源大肠杆菌对以上5类药物的MIC大幅度下降,分别使8、5、2、8、8株菌MIC下降4倍以上;利血平+EDTA使7株菌株对恩诺沙星MIC下降4倍以上,使所有分离株对其余4种药物的MIC显著下降;舒巴坦+利血平+EDTA和5类药物联用后,所用分离株的MIC下降4倍以上。由此可见,引起鸭源大肠杆菌对以上抗菌药物的耐药原因主要包括细胞膜通透性的下降、药物的主动外排作用和产生β-内酰胺酶的破坏作用,三者相协同提高了鸭源大肠杆菌的耐药水平。     

不同配比头孢噻呋与舒巴坦的体外抗菌活性比较

试验旨在评价头孢噻呋与舒巴坦复方制剂的抗菌活性。用双纸片增效法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;用二倍试管稀释法测定其对临床分离的46株大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果表明：头孢噻呋与舒巴坦联用可显著降低产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠杆菌对头孢噻呋的耐药率。其中,1：1配比对产酶菌的MIC粥为6．269μg／ml,约为头孢噻呋单药的1／10;1：1配比对产酶菌有着较强的杀菌作用,明显优于头孢噻呋单药。对于不产酶大肠杆菌,复方制剂与单药的作用效果几乎相当。     

辽西地区鸡源大肠杆菌超广谱β-内酰胺酶的检测

为检测辽西地区(锦州、盘锦、阜新、朝阳、葫芦岛)鸡源大肠杆菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),选取15种代表药物,采用Kirby-Bauer纸片法、最小抑菌浓度(MIC)法进行药敏试验。结果:分离检测到产ESBLs的37株大肠杆菌,对氨苄西林、头孢噻呋、新诺明的耐药率较高,均高于91.2%,对硫酸安普霉素、阿米卡星、恩诺沙星、复方新诺明的耐药率均高于78.4%,对多西环素、氟苯尼考、克林沙星药物耐药率等于或低于46.0%,头孢吡肟、阿莫西林与棒酸(CA)酶抑制剂联用后耐药率低于8.11%。由此表明,辽西地区鸡源大肠杆菌产ESBLs耐药菌株表现多重耐药现象,但配合ESBLs抑制剂能明显增强抗菌活性,降低耐药率。     

透骨草水提物与抗菌药对产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的体外联合抑菌作用研究

为了探究透骨草水提物与抗菌药联合对产超广谱β-内酰胺酶大肠杆菌的体外抑菌作用。采用二倍微量肉汤稀释法与微量方阵棋盘法来测定各抗菌药与透骨草的最低抑菌浓度(MIC)及二者联合作用后的分级抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,透骨草水提物与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、阿奇霉素、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、利福平、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、林可霉素联合作用后的FICI分别为0.75、0.75、1.00、0.75、0.53、0.51、0.75、4.5、4.5、4.5、4.5、2.5。结果表明,透骨草水提物与头孢曲松钠、头孢他啶、头孢噻肟钠、头孢噻呋钠、阿莫西林、阿米卡星、阿奇霉素、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、利福平联合作用时有相加作用;与环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、林可霉素联合作用时有颉颃作用。     

鼠伤寒沙门菌cpxR和acrB双基因缺失菌株的构建及其对抗菌药物敏感性分析

为了探索cpxR基因对鼠伤寒沙门菌多重耐药性的调控机制,同时避免外排泵acrB的存在掩盖cpxR对其他外排泵或外膜蛋白的调控作用,利用基于Red同源重组系统的一步法失活染色体基因,用含有同源臂的线性打靶DNA片段替换目的基因,构建鼠伤寒沙门菌JS株的acrB基因缺失株JSΔacrB。然后利用噬菌体转导技术,以前期构建的cpxR缺失株JSΔcpxR∷kan为供体菌,本研究新构建的JSΔacrB为受体菌,在P22噬菌体的作用下构建双基因缺失菌株JSΔacrBΔcpxR∷kan,同时制备cpxR基因回补菌株JSΔacrBΔcpxR∷kan/pcpxR。最后用微量稀释法测定10种临床常用代表性抗菌药物对JS和各缺失株的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,成功构建鼠伤寒沙门菌的双基因缺失菌株JSΔacrBΔcpxR∷kan以及其cpxR基因互补菌株JSΔacrBΔcpxR/pcpxR。MIC结果显示,acrB基因缺失后,多西环素、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、恩诺沙星、氟苯尼考、头孢曲松和头孢噻呋的MIC值分别降低32、4、4、16、32、4、2和128倍;双基因缺失后,多西环素、庆大霉素、阿米卡星和头孢噻呋的MIC值进一步降低2、8、2和2倍;而将cpxR基因回补之后,这4种抗菌药物的MIC值会升高4、16、2和4倍。结果表明,cpxR能调控鼠伤寒沙门菌对多西环素、庆大霉素、阿米卡星和头孢噻呋的敏感性。     

我国部分地区鸡、猪源沙门氏菌血清型与耐药性比较

本研究将2012—2017年分离自山东等6省份的194株鸡源和89株猪源沙门氏菌进行了血清型鉴定和9大类13种药物的药敏试验。血清型鉴定结果显示:鸡源沙门氏菌血清型以肠炎(59.69%)、婴儿(13.61%)和鸡白痢(8.90%)为主,猪源沙门氏菌血清型以鼠伤寒(58.43%)、肠炎(12.36%)、印第安纳(11.24%)和德尔卑(7.87%)为主,两者优势血清型差异极显著(P0.01)。最小抑菌浓度(MIC)分布结果显示:沙门氏菌对氨苄西林、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、多西环素、氟苯尼考、磺胺甲基异噁唑、复方新诺明、恩诺沙星和氧氟沙星耐药的问题较为突出,对黏菌素E的耐药率相对较低;猪源菌株比鸡源菌株耐药严重,对11种药物的耐药率均高于鸡源菌株。2种来源的分离菌株对阿莫西林/克拉维酸钾、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、多西环素、氟苯尼考、恩诺沙星、氧氟沙星的耐药率差异均极显著(P0.01),对黏菌素E的耐药率差异显著(P0.05);猪源分离菌株的耐药问题较欧盟国家突出,与鸡源菌株5耐以上的菌株比例差异极显著(P0.01)。肠炎和鼠伤寒沙门氏菌对阿莫西林/克拉维酸、庆大霉素、大观霉素、四环素、氟苯尼考、磺胺异噁唑和黏菌素E的耐药率差异极显著(P0.01),对氨苄西林耐药率差异显著(P0.05)。不同年份间沙门氏菌分离株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋、庆大霉素、大观霉素、四环素、氟苯尼考、复方新诺明、恩诺沙星和黏菌素E的耐药率差异极显著(P0.01),对多西环素和氧氟沙星耐药率差异显著(P0.05)。结果表明:肠炎、鼠伤寒分别是我国部分地区鸡、猪源沙门氏菌的优势血清型;沙门氏菌耐药性与动物来源、血清型和分离年份相关,且鸡、猪源沙门氏菌耐药情况比欧盟国家严重。     

赤芍水提物与抗菌药联合对耐药大肠杆菌抑菌作用的研究

为了探究赤芍水提物与抗菌药联合对耐药大肠杆菌的体外抑菌作用,采用微量肉汤稀释法与微量棋盘法来测定各抗菌药与赤芍水提物的最低抑菌浓度(MIC)及二者联合作用后的分级抑菌浓度指数(FICI)。结果显示赤芍水提物与头孢曲松钠、阿莫西林、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、磷霉素、痢菌净、克林沙星、磺胺间甲氧嘧啶、加替沙星、阿米卡星、头孢他啶、林可霉素、头孢噻呋钠、氟苯尼考、阿奇霉素、头孢噻肟、利福平联合作用后的FICI分别为0.27、2.50、1.02、1.01、3.00、0.28、1.02、1.02、1.02、2.02、1.02、0.75、0.56、0.75、0.50、3.00、0.75、0.38。结果表明赤芍水提物与头孢曲松钠、磷霉素、氟苯尼考、利福平联合作用时有协同作用;与林可霉素、头孢噻呋钠、头孢噻肟、头孢他啶联合作用时有相加作用;与阿莫西林、左旋氧氟沙星、加替沙星、阿奇霉素联合作用时有颉颃作用;与环丙沙星、诺氟沙星、痢菌净、克林沙星、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星联合作用时表现为无关作用。     

山西猪场猪蓝耳病并发猪胸膜肺炎放线杆菌的病毒鉴定及细菌分离鉴定以及治疗方案

2020年2月份山西某大型规模猪场育肥猪突发呼吸困难,无过多症状表现,即突然死亡,发病率为2%,死亡率1.5%左右。实验室以病死猪为研究对象,综合死亡猪只脏器病变状况观察,无菌采集病死猪的肺脏、肝脏、脾脏病料,进行RT-PCR检测猪蓝耳病原;用含1%NAD和5%胎牛血清的TSA琼脂培养基进行细菌分离培养和纯化,经形态学鉴定、PCR鉴定、16Sr RNA基因序列进化树构建等方法,结果显示:该发病猪群为猪繁殖与呼吸障碍综合征并发猪胸膜肺炎放线杆菌感染。药敏试验结果显示:该猪胸膜肺炎放线杆菌对安普霉素、硫酸黏菌素、替米考星+氟苯尼考、替米考星+阿莫西林、氟苯尼考、头孢噻呋钠+硫酸黏菌素、头孢喹肟、头孢噻呋钠+新霉素、替米考星+头孢噻呋钠、多西环素+氟苯尼考、头孢噻呋钠+阿莫西林、阿莫西林+克拉维酸钾、头孢噻呋钠+恩诺沙星、新霉素、头孢噻呋钠、安普霉素+头孢噻呋钠敏感。对恩诺沙星耐药。本实验室根据临床及检测结果制定治疗方案,为该猪场的猪繁殖与呼吸障碍综合征并发猪胸膜肺炎的临床诊断及用药提供了理论依据。     

头孢噻呋与恩诺沙星联用体外抗菌活性研究

采用两倍稀释法、棋盘法测定头孢噻呋、恩诺沙星以及两者联用对鸡大肠杆菌标准株、临床分离株和鸡链球菌标准株、临床分离株的最小抑菌浓度(MIC)值。结果显示:单方头孢噻呋对五菌株的MIC值介于1～32μg/ml之间,恩诺沙星的MIC值介于0.5～64μg/ml之间,且两药对临床分离株的抗菌活性均明显较标准株低。两药联用对鸡大肠杆菌标准株和临床分离不产酶株、鸡链球菌标准株的部分抑菌浓度(FIC)指数均为0.75,呈现相加作用;对鸡大肠杆菌临床分离产酶株和鸡链球菌临床分离株的FIC指数为1.5,呈现无关作用,但头孢噻呋联用MIC值仅为单方的1/2。     

地锦草与10种抗菌药联用对鸡大肠杆菌的体外抑菌效果

为了观察地锦草与阿莫西林等抗菌药物联用对鸡致病性大肠杆菌的体外抑菌效果,试验采用琼脂稀释法分别测定地锦草与10种抗菌药物联用的抑菌作用,并与地锦草和抗菌药物单独应用时的抑菌效果相比较。结果表明:12株大肠杆菌对抗菌药物呈现多重耐药性,地锦草对大肠杆菌的最小抑菌浓度范围为7.812 5~31.250 mg/mL;地锦草与头孢曲松、头孢噻呋、氟苯尼考、多西环素联用时的抑菌协同率为58.3%~83.3%,与阿米卡星、大观霉素、恩诺沙星、黏菌素联用时的抑菌颉颃率为58.3%~100%,与阿莫西林、安普霉素联用时显示无关或颉颃作用。说明地锦草可以增强头孢曲松、头孢噻呋、氟苯尼考、多西环素对大肠杆菌的抑菌作用,可以颉颃阿米卡星、大观霉素、恩诺沙星、黏菌素对大肠杆菌的抑菌作用。     

鸡源致病性大肠杆菌药物敏感性调查

从广东省内中、大规模鸡场的病死鸡中分离细菌,选取经生化鉴定确定为大肠杆菌的93株为试验菌株。采用琼脂稀释法测定分离菌株对14种抗菌药的药物敏感性。结果显示:80%以上的菌株对头孢噻呋、安普霉素、阿米卡星敏感;55%～71%的菌株分别对左氧氟沙星、头孢曲松、庆大霉素和链霉素敏感。然而,多数菌株对四环素、多西环素、氯霉素、氟苯尼考、环丙沙星、恩诺沙星和磺胺甲噁唑的敏感率较低,在0～28%之间。上述结果表明,治疗大肠杆菌引起的鸡群感染时,可优先选择敏感率高的药物,如头孢噻呋、安普霉素和阿米卡星,不用敏感率较低的药物,如四环素环、丙沙星、恩诺沙星和磺胺甲噁唑。     

猪链球菌Ⅱ型四川分离株对抗菌药的敏感性分析

对四川省不同地区链球菌病病死猪体内分离的7株链球菌Ⅱ型进行抗菌药敏感性试验,用链球菌兰氏D群C55914作为对照,比对菌为肺炎链球菌质控菌株ATCC49619.在32种抗菌药中,选择29种药物进行纸片法药敏试验.试验结果表明:7株链球菌耐药谱非常相似,对青霉素、氨苄西林、阿莫西林、奥格门丁、卡那霉素、红霉素、壮观霉素、氯霉素、氟苯尼考、头孢氨苄、头孢拉定、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、环丙沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、达氟沙星、恩诺沙星、复方新诺明、万古霉素、亚安培南均敏感;对阿米卡星、新霉素、庆大霉素3株敏感,4株中敏;对四环素和多西环素2株中敏,5株耐药;对链霉素1株中敏,6株耐药.用21种药物进行最小抑菌浓度(MIC)测定,结果7株均对青霉素、氨苄西林、卡那霉素、红霉素、头孢他定、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻呋、环丙沙星、达氟沙星、氧氟沙星、二氟沙星、沙拉沙星、恩诺沙星、磺胺六甲氧嘧啶敏感,1株对新霉素和阿米卡星中敏,2株耐药;所有菌株对四环素、土霉素、多西环素、链霉素均耐药.两种方法总体结果一致.     

辽宁阜新地区奶牛隐性乳房炎调查及大肠埃希菌药敏试验

为调查辽宁阜新地区奶牛隐性乳房炎患病情况,选取该地区某规模化养殖场,对190头泌乳期奶牛进行体细胞检测。结果显示,该地区奶牛隐性乳房炎患病率为34.2%,乳区阳性率为8.5%。采用微量肉汤稀释法检测阳性乳样分离到的大肠埃希菌对14种抗菌药物的敏感性。结果表明,26株隐性乳房炎大肠埃希菌分离株对甲砜霉素和头孢氨苄耐药率为100%、氟苯尼考73.1%、土霉素65.4%、头孢唑啉57.7%、阿莫西林30.8%、四环素30.8%、恩诺沙星26.9%、阿奇霉素19.2%、氧氟沙星15.4%、多西环素11.5%、环丙沙星11.5%,对头孢噻呋和庆大霉素耐药率为0。建议该地区根据药敏试验结果选取药物进行治疗。     

11株鸡大肠杆菌对β-内酰胺类药物及其联用的耐药性分析

为了解洛阳地区鸡大肠杆菌病的流行现状以及对β-内酰胺类药物的敏感情况,采用两倍稀释法测定氨苄西林、头孢噻呋、头孢吡肟、氨曲南等药物对11株临床分离鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度。结果显示：单独用药,氨苄西林抗菌活性最弱,其MIC值均不低于320ug／ml,头孢吡肟抗菌活性最强,其MIC值为1．25-2．5ug／ml。氨苄西林、头孢噻呋与β-内酰胺酶抑制剂联用后,联用MIC值比单药的MIC值降低了1／32-1／2,头孢噻呋与非B一内酰胺类药物联用后,联用MIC值比单药MIC值降低了1／120-1／16。     

穿心莲水提物与10种临床常用抗菌药联用的体外抑菌试验

为研究穿心莲水提物与临床常用10种抗菌药联用对鸡致病性大肠杆菌的体外抑菌效果,本试验采用传统的水提法制备穿心莲中药液并浓缩至浓度为1 g/mL,用琼脂平板稀释法测定穿心莲水提物分别与阿莫西林、头孢曲松等10种常用抗菌药物联用对临床分离的10株鸡致病性大肠杆菌的体外抑菌作用。结果表明,穿心莲和头孢曲松、穿心莲和氟苯尼考联用100%呈现协同作用;穿心莲和头孢噻呋联用90%呈现协同作用,10%呈现无关作用;穿心莲和大观霉素联用80%呈现协同作用,20%呈现无关作用;穿心莲和林可霉素联用50%呈现协同作用,40%为无关或颉颃作用,10%为无关作用;穿心莲与阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、多西环素、恩诺沙星联用以无关或颉颃作用为主。以上结果表明,在体外,穿心莲与头孢曲松、头孢噻呋、大观霉素、氟苯尼考联用对鸡致病性大肠杆菌呈现协同作用,与阿莫西林、安普霉素、阿米卡星、林可霉素、多西环素、恩诺沙星联用呈现无关或颉颃作用。     

河北部分猪场猪源大肠埃希菌的耐药性分析

为了解河北省规模猪场大肠埃希菌耐药情况,从河北省9个地区规模化猪场采集肠拭子,通过分离鉴定获得240株大肠埃希菌。采用微量肉汤稀释法测定了13种常用抗菌药物对分离菌株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),以美国临床检验标准委员会(NCCLS)临界浓度作为判定标准,并统计耐药率。结果表明,多数菌株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋、丁胺卡那霉素、左氧氟沙星不敏感,耐药率分别为99.58%、98.75%、90.08%、78.75%及98.33%;全部菌株对大观霉素、多西环素、氟苯尼考、磺胺六甲氧嘧啶、恩诺沙星、乙酰甲喹、黏菌素耐药;对美罗培南的耐药率为3.81%。