高效液相色谱法测定饲料中的那西肽

试验建立高效液相色谱法测定饲料中那西肽含量的方法。用N,N-二甲基甲酰胺提取饲料中那西肽,用高效液相色谱仪进行测定。在0.02~10.00μg/m L质量浓度范围线性关系良好;在0.50~500.00 mg/kg范围,回收率范围为80.00%~105.00%。高效液相色谱方法操作简便及结果可靠,适用于饲料中那西肽的测定。     

高速逆流色谱分离制备那西肽

那西肽为动物专用抗生素。以那西肽菌丝体为原料,采用四氢呋喃为提取溶剂,用中性氧化铝进行初步纯化,以乙酸乙酯、甲醇、石油醚和水为两相系统,进行高速逆流色谱纯化,得到含量不低于95%的那西肽产品,总回收率为86%。方法操作简单,回收率高,为那西肽的进一步研究开发打下基础。     

那西肽预混剂组分HPLC检测方法的建立

为了建立那西肽预混剂组分测定的高效液相检查法,采用十八烷基键合硅胶为填充剂,以0.025%磷酸水溶液-乙腈(50:50)为流动相,检测波长为241 nm,并以该色谱条件对来自7个厂家的14批不同规格的那西肽预混剂进行了测定。综合结果给出组分的建议限度为:那西肽组分A的峰面积不得少于那西肽组分A与组分B峰面积之和的88.0%。该方法具有专属性强、耐用性好、操作简便等优点。     

高效液相色谱-荧光检测法与抗生素微生物检定法测定那西肽预混剂含量的比较研究

研究两种方法测定那西肽预混剂含量的异同。一种方法是新建立的高效液相色谱-荧光检测法,另外一种方法是抗生素微生物检定法,该法收载于《兽药质量标准》2017年版那西肽预混剂质量标准,为那西肽预混剂的法定检测方法。用这两种方法分别测定三个规格那西肽预混剂的含量。两种方法结果相对偏差在1.5%以内,差异不显著。高效液相色谱法影响因素少,线性范围大,操作更便捷,出结果更快,应用于那西肽预混剂实际检测中效率更高。     

那西肽在养猪生产中的应用

那西肽（Nosiheptide）为含硫多肽类抗生素,由Streptomyces actuosus发酵产生。其结构为12种氨基酸及衍生物合成的多肽,分子量为1222。1998年那西肽被批准为国家三类新兽药,2001年那西肽被列为可在鸡饲料中使用的药物添加剂。2002年杭州汇能生物技术有限公司首次对那西肽进行产业化研究。     

高效液相色谱法测定饲料中那西肽A

为建立高效液相色谱测定饲料中那西肽A的方法 ,根据饲料样品多样性的特点,采用乙二胺四乙酸二钠溶液和N,N-二甲基甲酰胺超声提取饲料中的那西肽A。采用C18色谱柱,0.02%磷酸溶液+乙腈(60∶40,V/V)为流动相,流速为1.0 mL/min,荧光检测器激发波长为327 nm,发射波长为521 nm。那西肽A在浓度0.02~10μg/mL时线性良好,线性相关系数为0.9999。当添加浓度为0.5~500 mg/kg时,平均回收率为81.6%~95.6%,相对标准偏差(RSD)为1.6%~9.2%。方法的检测限为0.2 mg/kg,定量限为0.5 mg/kg。该方法操作简便、结果准确、稳定性好,应用于实际样品检测,结果满意,表明该方法适用于饲料中那西肽A的测定。     

不同种类植物油及黄豆饼粉对那西肽发酵的影响

有机氮源和碳源质量的波动是引起那西肽发酵单位波动的重要原因之一,为选用最有效的有机氮源和碳源生产那西肽并保持稳定的发酵水平,试验以发酵摇瓶平均化学效价为指标,比较及评价了6种不同种类植物油及4种不同加工温度生产的黄豆饼粉对那西肽发酵产生的影响。结果表明,低温黄豆饼粉-菜籽油为最佳组合,其摇瓶平均化学效价比对照高出44.11%。即不同种类植物油由于所含脂肪酸种类和比例不同,不同加工温度的黄豆饼粉由于营养物质含量不同,均会很大程度影响那西肽发酵。     

那西肽过柱纯化工艺

那西肽是我国允许使用的一种动物专用抗生素,由活跃链霉菌发酵产生。文章采用大孔吸附树脂对那西肽提取工艺进行研究,比较8种大孔吸附树脂对那西肽粗品所含杂质的吸附能力。结果表明:混合树脂是纯化那西肽比较理想的树脂。提取过程中,上样液质量浓度为2.0 mg/m L,上样液p H 3.0,最大上样量为35 BV,上样流速2.5 m L/min。经纯化后的那西肽产品为淡黄色粉末,纯度最高可以达到99%。     

那西肽的研究进展

那西肽是一种含硫多肽类抗生素，它具有明显的促进畜禽生长及改善饲料利用率的作用，而且用量低，元残留，对环境影响小，属于环保型饲料添加剂。现对那西肽的理化性质、生物学功能，以及在禽畜和水产养殖上的应用研究等进行了综述。以期对那西肽的进一步研究与推广应用起一定作用。     

那西肽对皖西白鹅仔鹅生产性能的影响

试验用那西肽(2.0%、3.0%、4.0%)饲喂皖西白鹅仔鹅,研究饲喂那西肽对皖西白鹅仔鹅的生长速度、饲料转化率、成活率等方面的影响.结果表明,在屠宰率方面,各试验组间和各试验组与对照组间差异均不显著(P>0.05);在体重方面.各试验组均高于对照组.当饲粮中那西肽添加水平为4.0%时,皖西白鹅的生长性能和饲料利用率最好.该试验旨在筛选出较佳的饲喂量,并在养鹅业中推广应用,以提高养鹅业的经济效益.     

日粮中不同那西肽和硫酸粘杆菌素水平对仔猪生产性能的影响

为研究日粮中不同那西肽与硫酸粘杆菌素水平及其组合对断奶仔猪生产性能的影响,笔者开展了本试验。试验采用2×2双因子试验设计,试验期为28d。试验结果表明：随着饲粮中那西肽添加量由2．5mg／kg增加到5．0mg／kg。仔猪平均日增重和平均日采食量均得到显著改善（P〈0．05）,但对饲料转化率和腹泻率的影响不显著（P〉0．05）;硫酸粘杆菌素对仔猪平均日增重、平均日采食量、饲料转化率和腹泻率的影响均不显著（P〉0．05）;那西肽和硫酸粘杆菌素未体现出显著的组合效应（P〉0．05）。     

抑菌促生长的饲料添加剂--那西肽

那西肽是符合当前人们对饲料添加剂要求的含硫环状多肽类抗生素，不但能促进畜禽生长，提高饲料效率，而且无残留，对环境影响极小，对人畜安全，是一种比较理想的饲用抗生素的替代品。本文对那西肽的理化性质、生物学作用以及在动物生产中的应用效果及其使用的安全性进行了全面阐述。     

那西肽对鸡产气荚膜梭菌病的预防效果

为研究那西肽在人工诱发鸡产气荚膜梭菌病中的预防效果,将480只1日龄雏鸡随机分为6个处理组,每个处理组4个重复,每个重复20羽,其中第1组为常规饲养,第2～6组为A型产气荚膜梭菌感染试验组。各组饲喂的日粮如下:第1组和第2组,空白对照日粮;第3、4、5组,对照日粮+那西肽(1.25mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg);第6组,对照日粮+杆菌肽锌(30mg/kg),测定鸡的生产性能和死亡率,观察肠道病变情况,并进行预防效果评价。结果表明,感染产气荚膜梭菌各试验组鸡的生产性能受到一定负面影响;饲料中添加1.25mg/kg、2.5mg/kg、5mg/kg那西肽能有效的减少产气荚膜梭菌引起的死亡。     

微生物浊度法与管碟法测定吉他霉素效价的比较研究

为比较微生物浊度法和管碟法测定吉他霉素效价,以《中国药典》(2015年版)吉他霉素抗生素微生物检定法浊度法和《中国兽药典》(2010年版)吉他霉素抗生素微生物检定法管碟法为依据测定一批吉他霉素效价。结果显示:浊度法测定效价平均值为1691 U/mg,RSD为0.9%;管碟法测定效价平均值为1687 U/mg,RSD为1.0%,两种方法测定结果无显著性差异(P0.05)。本实验表明,浊度法测定吉他霉素效价与管碟法相比更加快速、便捷,而且可避免吉他霉素多组分的影响因素。     

平菇菌糠饲料的营养价值与安全性评估分析

试验依据国家饲料卫生标准(GB13078—2001)中的检测方法对平菇不同生长阶段培养基的基质组分进行了检测和安全性评定。通过对平菇不同生长阶段培养基(以棉籽壳和玉米芯为主)基质组分的检测及对基质饲料价值的评定,结果发现,第4潮菌糠用作饲料营养价值较高且生产成本较低。此时粗蛋白质含量为10.10%,较初始培养基提高了59.31%,而粗纤维含量降低了29.57%,木质素、纤维素和半纤维素的降解率分别提高到63.62%、46.60%和77.06%;并依据国家饲料卫生标准要求对第4潮菌糠中的游离棉酚、黄曲霉毒素B₁和重金属含量等指标进行了检测,其中游离棉酚的含量仅为67.90 mg/kg,未测出黄曲霉毒素B₁的含量(＜10 μg/kg),铅、氟、铬、镉、汞的含量均符合国家饲料安全标准。因此,用第4潮菌糠制备反刍动物粗饲料可满足要求,切实可行。     

Method for determining serum pepsinogen concentration, using pepsin standards and ultraviolet absorbance

A simplification of the traditional hemoglobin methods for determining serum pepsinogen concentration was developed. In this method, 10% trichloroacetic acid solution was added to control samples, and hemoglobin substrate was added to controls and active enzyme samples; standards and samples were incubated for 18 hours, the proteins in the active tubes were precipitated with trichloroacetic acid and removed by filtration, and the absorbances of the supernatant of each standard and sample at 280 nm were measured. The major differences between this method and other methods for determining pepsinogen values are that the preacidification of serum with hydrochloric acid was eliminated, the incubation period was reduced to 18 hours (down from 24 hours), the relative pepsinogen concentration was determined by measuring the concentration of hydrolysis products, using ultraviolet, rather than visible absorbance, and a pepsin standard curve was used to determine the serum pepsinogen concentration. Comparison of freshly prepared pepsinogen and pepsin standard curves indicated that the pepsinogen preparations were slightly more active than the pepsin preparations (on a weight-to-weight basis) on the same substrate. Pepsin standards are used because they are more stable than pepsinogen standards. Three linear standard curve ranges were used: O 10 to 100, 50 to 300, and 100 to 500 ng of pepsinogen/ml of serum. The use of pepsin standard curves permits some variability of the incubation conditions without altering the results. For best results, the hemoglobin substrate solution should be prepared daily. This method may be useful in diagnosing ostertagiasis.     

复方黄芪金银花颗粒剂的质量标准研究

建立了控制复方黄芪金银花颗粒的质量标准。采用薄层层析对颗粒中女贞子、金银花、黄芪、枸杞子进行了薄层鉴别以及双光束紫外-可见光分光光度法测定了颗粒中绿原酸的含量。结果显示,薄层鉴别方法专属性强,绿原酸在42.24～84.48μg/mL范围内具有良好的线性关系,标准曲线回归方程为：A=0.0053×C-0.0012（r=0.9999,n=5）;样品在24 h内稳定,RSD=0.733%;加样平均回收率为102.094%,RSD=0.499%;该方法精密度高,RSD=0.382%。本质量标准可有效控制复方黄芪金银花颗粒的质量。     

那西肽对生长肥育猪的作用效果及其在产品中的残留

选择32头30kg左右健康的二元杂交生长猪, 随机分为4组, 每组8头, 个体饲喂, 4组均喂相同的基础饲粮, 但添加不同饲用抗生素,分别是低、高剂量那西肽(10mg/kg、50mg/kg)、盐霉素(30mg/kg) 和对照。猪体重达90kg时, 分别按0、3和7d停药后屠宰, 检测那西肽在样品各器官中的残留量。结果表明: 那西肽可显著提高生长肥育猪的采食量和日增重(P<0 05), 但是对料重比的改善作用不明显; 当检测灵敏度为0 01mg/kg时, 在低、高剂量那西肽组猪的心脏、肝脏、肾脏和背最长肌中, 均未检出那西肽。     

Quantification of Whole Blood Short-chain Fatty Acids by Gas Chromatographic Determination of Plasma 2-chloroethyl Derivatives and Correction for Dilution Space in Erythrocytes

A precise, accurate and stable method for quantification of short-chain fatty acids (SCFA) in ovine whole blood is presented and validated. The method is based on esterification of plasma SCFA by reaction with chloroethyl chloroformate in a water/acetonitrile/2-chloroethanol solution and gas chromatographic (GC) analysis of the derivatives. Whole blood concentrations of SCFA could be obtained by correcting plasma concentrations for a 45% dilution space of SCFA in the erythrocyte fraction of the blood. The recovery of SCFA in plasma and whole blood was 96-100% independent of the haematocrit value when compared with water standards. The method avoided carry-over from sample to sample, contrary to earlier published methods. The average intra-assay and inter-assay coefficient of variation for repeated measurement of SCFA content in plasma samples was 2.5% and 3.1%, respectively. The derivative was found to be suitable for a precise and accurate determination of the ¹³