中药单味药及复方对嗜水气单胞菌的体外抑菌作用

本试验用煎煮法提取中药有效成分,采用琼脂平板扩散法探讨了黄连、五倍子、大黄、诃子等中药单味药及中药复方对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的体外抑菌作用,测定了抑菌圈大小.采用双倍试管稀释法测得了最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).试验结果表明,16种中药提取物对嗜水气单胞菌有不同程度的抑制作用,其中五倍子、黄连、诃子、大黄的水提物的抑菌效果最好,MIC值分别为7.81 mg/mL、15,63 mg/mL、31.25 mg/mL、62.50 mg/mL.五倍子作为主药,分别与诃子、黄连、大黄接一定比例组成的复方的MIC分别为3.906 mg/mL、7.813 mg/mL、15.625 mg/mL.通过对筛选的复方与市场上销售的3种成品复方的体外抑菌活性的比较,发现本实验室筛选的复方对嗜水气单胞菌的体外抑菌活性更强.     

四味穿心莲散及其组分对沙门菌的体外抑菌效果观察

检测四味穿心莲散及其组分(穿心莲、辣蓼、大青叶和葫芦茶)对沙门菌的体外抑菌效果。试验选用穿心莲、辣蓼、大青叶、葫芦茶等10种中药,采用试管二倍稀释法测定各中药水提物、两药联合及市售四味穿心莲散和自制四味穿心莲散对沙门菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,四味穿心莲散的4种组分中,大青叶对沙门菌的抑菌活性最强,MIC为12.5 mg/mL;4种组分杀菌活性一致,MBC均为400 mg/mL;在两药联合中,4种联合呈现相加作用或协同作用;市售四味穿心莲散MIC和MBC均为200 mg/mL,自制四味穿心莲散MIC为50 mg/mL,MBC为200 mg/mL。分析结果表明,大青叶抑菌效果最好,杀菌效果与其他3种组分一致;自制四味穿心莲散的抑菌效果更具优势,杀菌效果与市售方剂一致。     

盐穗木提取物对金黄色葡萄球菌抑菌效果研究

为了解盐穗木提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌效果,解决金黄色葡萄球菌耐药性的问题,笔者测定盐穗木乙醇提取物和正丁醇萃取物的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)及生长曲线。结果表明,盐穗木正丁醇萃取物的抑菌活性显著高于乙醇提取物,盐穗木乙醇提取物和盐穗木正丁醇萃取物的MIC分别为150.00 mg/mL和25.00 mg/mL,MBC分别为250.00 mg/mL和50.00 mg/mL。说明盐穗木正丁醇萃取物有良好的抑菌效果,可为新型抗菌药物的研发奠定基础。     

大蒜提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌效果观察

大蒜提取液具有抗菌等多种药理作用。本研究通过牛津杯法抑菌试验和试管二倍稀释法测定大蒜提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌效果、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对大蒜提取物均为高度敏感,大蒜提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为50mg/mL和25mg/mL,MBC值也分别为50mg/mL和25mg/mL。试验结果表明大蒜提取液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抗菌作用。     

39味中药及其复方对鸡源禽致病性大肠杆菌体外抑菌试验研究

试验旨在筛选抑制鸡源禽致病性大肠杆菌（Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC）O78地方流行株的有效中药。采用打孔法测定39味中药及其复方对APEC的抑菌效果,使用二倍稀释法测定其最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果表明：39味中药中有9味中药对APEC有一定的抑菌效果,其中五味子、洛神花和黄柏对APEC高度敏感,MIC依次为31.25、31.25、500 mg/mL,MBC依次为62.5、125、500 mg/mL;蒲公英、红花和石榴皮中度敏感,MIC与MBC均大于或等于500 mg/mL;丹皮、何首乌和荷叶低度敏感;其余中药无抑菌效果。复方中五味子+洛神花配伍药效最好,MIC与MBC分别为31.25 mg/mL与125 mg/mL。说明在39味中药中五味子、黄柏、洛神花和复方五味子+洛神花（1∶1）对APEC有比较好的体外抑菌能力。     

37种中药及其复方对鸡致病性沙门氏菌的体外抑菌试验

为研究黄连等37种中药对鸡致病性沙门氏菌的体外抑菌效果，使用水提法制备37种中药的提取液，使其浓度为1 g/mL，通过平板打孔法测定37种中药的体外抑菌圈直径，采用二倍稀释法测定有抑菌效果的中药的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC），将抑菌效果较好的中药制备成双联复方中药，测定复方中药对沙门氏菌的MIC和MBC，并用棋盘稀释法测定双联复方中药在体外的联合抑菌指数（FICI）。结果显示：石榴皮、玫瑰茄、五味子的抑菌效果最好，五味子、玫瑰茄的MIC为31.25 mg/mL,MBC为43.75 mg/mL，石榴皮的MIC为250 mg/mL,MBC为350 mg/mL，鸡致病性沙门氏菌对其他药物存在不同程度的敏感性；复方中玫瑰茄+五味子的抑菌效果最好，玫瑰茄+石榴皮、石榴皮+五味子的抑菌效果与单方效果基本一致，抑菌圈直径范围为12.73～18.93 mm，联合抑菌作用效应为无关作用。研究表明单方中药石榴皮、玫瑰茄、五味子和三组复方中药都对鸡致病性沙门氏菌有较强的体外抑菌和杀菌作用，说明用对沙门氏菌抑菌效果较好的单味中药组成复方中药后，其抑菌效果未必会增强。     

百里香酚和植酸对猪源致病菌的抑菌效果研究

研究旨在探究百里香酚和植酸对猪源大肠杆菌和沙门氏菌的抑制效果，为进一步改善猪舍环境和猪肠道功能研究提供参考。试验采用牛津杯法、二倍稀释法和平板涂布法，分别测定百里香酚和植酸对两种猪源致病菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）的影响。结果表明：猪源大肠杆菌和沙门氏菌对50 mg/mL百里香酚表现为高度敏感，对17.5%植酸表现为极度敏感。百里香酚对猪源大肠杆菌MIC和MBC分别为1.56 mg/mL和3.12 mg/mL，对猪源沙门氏菌MIC和MBC均为1.56 mg/mL；植酸对猪源沙门氏菌的抑制效果强于猪源大肠杆菌，对猪源大肠杆菌MIC和MBC均为4.37%，对猪源沙门氏菌MIC和MBC均为2.18%。说明百里香酚和植酸对猪源大肠杆菌和沙门氏菌具有较好的抑菌效果，在抑菌活性物质筛选中具备较好的应用前景。     

大青叶抗胸膜肺炎放线杆菌活性部位的初步分离

提取分离大青叶并测定各级提取物对猪胸膜肺炎放线杆菌的抑菌活性。采用二倍稀释法测定最小抑菌浓度(Minimal inhibitoryconcentration,MIC)和最小杀菌浓度(Minimal bactericidal concentration,MBC)以追踪大青叶的活性部位及其活性成分。采用80%的乙醇提取并通过硅胶柱色谱法对其进一步分离,测定抑菌活性,追踪其活性段。同时以石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、水依次提取,测定抑菌活性,并对提取物的化学成分进行初步分析。硅胶柱色谱各分离组分对试验菌均有不同程度的抑制作用,抑菌效果最好的为组分3,其MIC为3.91 mg/mL。各级提取物中抑菌活性较好的为乙酸乙酯提取物,其MIC为3.91 mg/mL。其抑制胸膜肺炎放线杆菌生长的主要成分可能为生物碱、有机酸和黄酮类物质。     

4种清热解毒复方中草药体外抑菌及抗PRRSV活性研究

【目的】 探索泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散4种清热解毒复方中草药体外抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及抗猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)的效果, 为临床应用提供参考。【方法】 采用传统水煎法对4种复方中草药进行提取, 通过二倍稀释法测定中药对大肠杆菌标准菌ATCC 259222和金黄色葡萄球菌标准菌ATCC 25923的体外抑菌活性; 在测定复方中草药对Marc-145细胞最大安全浓度的基础上, 通过实时荧光定量PCR鉴定复方中草药对PRRSV的抑制作用。【结果】 泻心汤对大肠杆菌的体外抑菌活性最好, 其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration, MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration, MBC)均为7.81 mg/mL; 三黄虎杖汤和黄连解毒汤次之, 其MIC和MBC为31.25~125 mg/mL; 清瘟败毒散抑制大肠杆菌效果较差: MIC和MBC均>250 mg/mL, 而金黄色葡萄球菌对泻心汤、黄连解毒汤和三黄虎杖汤非常敏感, 其MIC和MBC为0.24~0.98 mg/mL。在体外抗PRRSV作用的试验中, 泻心汤、三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散对Marc-145细胞最大安全浓度分别为0.49、0.49、3.90和1.95 mg/mL。4种复方中草药对PRRSV的抑制与直接灭活作用较好, 黄连解毒汤和清瘟败毒散均在0.98 mg/mL时对PRRSV有阻断作用, 泻心汤和三黄虎杖汤在0.24和0.12 mg/mL时对PRRSV有阻断效果。【结论】 4种复方中草药中泻心汤的体外抑菌及抗PRRSV的效果最好, 其次是三黄虎杖汤、黄连解毒汤和清瘟败毒散, 4种清热解毒复方均有一定的抑菌和抗病毒活性, 可以为临床应用提供参考依据。     

功劳叶提取物的体外抗菌活性研究

采用水提法和乙醇回流加热法分别提取功劳叶,应用牛津杯法和试管二倍稀释法分别检测功劳叶提取物对试验菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MinimumInhibitory Consistency,MIC)和最低杀菌浓度(Minimum Bactericidal Consistency,MBC)。结果显示,功劳叶醇提物金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌圈直径分别为20.69 mm、15.40 mE;MIC值分别是31.3 mg/mL、125 mg/mL;MBC值分别是62.5 mg/mL、500 mg/mL。功劳叶水提物对金黄色葡萄球菌的抑菌圈13.54mm,其MIC值、MBC值分别是62.5 mg/mL、500 mg/mL,对大肠杆菌抗菌活性较弱,其MIC值为500 mg/mL,MBC500 mg/mL。功劳叶不同提取物对细菌的抗菌活性有所差异,功劳叶醇提物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均由不同程度的抑菌或杀菌能力。     

中草药对狐狸源腐生葡萄球菌的体外抑菌试验

为了探讨中草药对狐狸源腐生葡萄球菌的体外抑菌效果,筛选出针对腐生葡萄球菌具有较好抑菌作用的药物,试验以临床分离的狐狸源腐生葡萄球菌为试验菌株,采用水煎法提取中草药有效成分,琼脂平板打孔法测定中草药抑菌圈直径,试管二倍稀释法测定中草药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明:苏木和诃子对腐生葡萄球菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径分别为28 mm、23 mm;苏木和诃子对腐生葡萄球菌的MIC均为3. 91 mg/mL,MBC分别为3. 91 mg/mL、7. 81 mg/mL,相对其他中草药来说这二种药物的MIC和MBC均较小。说明日常常用的中草药具有一定的抑菌作用,而苏木和诃子的抑菌、杀菌效果相对较好。     

黔中金荞麦活性物质提取工艺优化及提取物抑菌活性研究

为优化贵州地区优质牧草黔中金荞麦活性物质的提取工艺，并探究提取物抑菌活性，试验通过回流法、超声法、水煮法及鲜样榨汁法对黔中金荞麦地上部分和地下部分进行提取，通过打孔法检测各提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果，确定提取方法；利用高效液相色谱法(HPLC)检测提取物中的有效物质含量，对溶液浓度、料液比、提取温度进行优化，设置正交试验确定最优提取工艺。以微量肉汤二倍稀释法检测在最佳提取条件下提取的黔中金荞麦提取物对3种细菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明：黔中金荞麦地下部分的70%乙醇超声提取物对3种细菌均有抑制作用，对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好，抑菌圈直径为24.2 mm。最佳提取工艺为乙醇浓度50%,提取温度60℃,料液比1∶40。提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的MIC介于31.25～62.5 mg/mL之间，MBC介于为62.5～500 mg/mL之间；对金黄色葡萄球菌的抑制效果较好，MIC和MBC分别为31.25 mg/mL和62.5 mg/mL。说明黔中金荞麦地下部分醇提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌均具有抑制作用...     

石榴皮止泻散体外抑菌效果研究

为评价石榴皮止泻散的体外抑菌效果，将石榴皮止泻散制成水煎液，采用平板法进行体外抑菌试验，并采用试管稀释法测定其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示，平板法体外抑菌试验中每1 mL含1 g生药的石榴皮止泻散水煎液孔周围有明显的抑菌圈，平均抑菌圈直径分别为14.0和15.7 mm;试管稀释法测定石榴皮止泻散对大肠杆菌的MIC为25 mg/mL,MBC为50 mg/mL。结论，石榴皮止泻散水煎液在体外对大肠杆菌具有抑制和杀灭作用。     

库拉索芦荟提取物对两种气单胞菌的抑菌作用

为探究库拉索芦荟提取物对嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌的抑菌作用,采用醇提法提取库拉索芦荟得到芦荟提取物,使用二倍稀释法和K-B法测定库拉索芦荟提取物对两种气单胞菌的抑菌作用,再用嗜水气单胞菌回感鲫鱼,并用库拉索芦荟提取物对患病鲫鱼进行治疗。结果显示:库拉索芦荟提取物对嗜水气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)为95 mg/mL,最小灭菌浓度(MBC)为105 mg/mL;对维氏气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)为62 mg/mL,最小灭菌浓度(MBC)为65 mg/mL。库拉索芦荟提取物对维氏气单胞菌的抑菌效力与强力霉素、红霉素、奥复星相当,抑菌环直径均为16 mm。嗜水气单胞菌攻毒试验中,对照组鲫鱼死亡率高达100%,而库拉索芦荟治疗组的鲫鱼死亡率降低至20%。库拉索芦荟提取物对嗜水气单胞菌与维氏气单胞菌有良好的抑菌效果。     

苦荞麦中芦丁提取及体外抑菌活性研究

采用乙醇回流法提取苦荞麦中的芦丁,并进行TLC检测、紫外光谱和红外光谱检测。将芦丁对两种供试菌进行体外最小抑制浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)、半数抑菌浓度(IC50)测定。结果表明,其对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌的MIC分别为0.40mg/mL和0.20mg/mL;MBC分别为0.50mg/mL和0.20mg/mL;IC50分别为0.2605mg/mL和0.1607mg/mL。     

中药水提物及其复方对大肠杆菌的体外抑菌效果

为了评价中药及其复方对大肠杆菌的体外抑菌效果,取乌梅、五倍子、山茱萸、黄芩等30种中药,通过试管二倍稀释法测定中药水提物对大肠杆菌的最小抑菌浓度（MIC）与最小杀菌浓度（MBC）,并筛选出抗菌作用较强的中药水提物与其他中药水提物组成复方,测定中药复方对大肠杆菌的体外抑菌效果。结果表明,五倍子、乌梅、金银花、大青叶、黄芩、薄荷、五味子、青蒿、秦皮对大肠杆菌有明显的抑制作用,其中五倍子对大肠杆菌的抑菌活性最强（MIC为6.25 mg/mL）,而五味子和乌梅对大肠杆菌杀菌活性最强（MBC为50 mg/mL）。选取9种中药水提物作为主药与其他中药水提物分别组成复方后,大部分复方对大肠杆菌的抑制作用明显增强。     

中药联合对巴氏杆菌的体外抑菌作用研究

探讨中药水提取物及其联合对巴氏杆菌的体外抑菌效果。选用黄连、香附、丁香等30味中药,采用水提法提取药液,用试管二倍稀释法测得单药最小抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并将抑菌效果较好的几味中药作为主药与其他中药进行联合,测定联合后的MIC与MBC。结果表明,单味中药中黄连对巴氏杆菌的抗菌活性最佳,MIC和MBC均为12.5 mg/mL。选取抑菌效果较好的黄连、丁香、香附、蒸陈皮等中药与其他中药联合,结果表明黄连与四制艾叶联合后对巴氏杆菌的抑制效果最好,其MIC和MBC均为3.125 mg/mL。说明黄连与四制艾叶联合的抑菌效果较好,且为协同作用,优于两种单药各自的抑菌活性,可作为抑制巴氏杆菌的药物进行进一步的研究。     

6种中草药对禽源沙门菌的体外抑菌试验

为了研究中草药对3种不同血清型禽源沙门菌的体外抑菌效果,采用水煎法制备黄连、黄柏、白头翁、金银花、女贞子、乌梅6种单味中草药水提液,然后进行药物敏感性试验,并进一步测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,鼠伤寒沙门菌LLCL-8株对黄连、金银花和白头翁较为敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(83.33±29.46) mg/mL、(125.00±0) mg/mL,MBC分别为250.00 mg/mL、250.00 mg/mL、大于500.00 mg/mL;鸡白痢沙门菌LLC-51株对黄连敏感,MIC为(31.25±0) mg/mL,MBC为125.00 mg/mL;肠炎沙门菌S株对黄连、白头翁敏感,MIC分别为(62.50±0) mg/mL、(104.16±29.46) mg/mL,MBC均为250.00 mg/mL。说明黄连对3种血清型禽源沙门菌具有广谱抑菌作用,且抑菌效果相对明显;白头翁、金银花对某些血清型菌株具有较好的抑菌效果。     

苦瓜提取物对四种兽医临床常见菌的抑菌活性研究

采用打孔法和二倍稀释法研究不同质量浓度的苦瓜提取物对4种临床常见菌的抑制作用,并测定苦瓜提取物对4种菌株生长曲线的影响。结果显示,10 mg/mL的苦瓜提取物对大肠杆菌和沙门氏菌的抑制作用最强,而对链球菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用不显著;苦瓜提取物对4种菌株的最小抑菌浓度（MIC）分别为2.5 mg/mL、2.5 mg/mL、5 mg/mL和10 mg/mL。结果提示,苦瓜提取物具有较强的抑菌活性。     

中药复方制剂对奶牛乳腺炎病原菌的体外抑菌试验及均匀设计在试验中的应用

通过均匀设计方法将5种中药有效成分组成10个组方，用试管法测定最低抑菌浓度（MIC）并以平板计数法计算最低杀菌浓度（MBC）。结果：10个组方对金黄色葡萄球菌和无乳链球菌均有明显抑茵作用。结论：复方10即金银花提取物2．2mg／mL、黄芩苷8．75mg／mL、甘草甜素7．63mg／mL、蒲公英提取物6mg／mL、鱼腥草提取物1mg／mL，对2种菌的体外抑菌作用最好。