绵羊耳成纤维细胞的体外培养

用组织块法和冷消化法对绵羊耳成纤维细胞在含血清培养液(RPMI—1640)中进行原代和传代培养，探讨动物体细胞培养模式，并对正常细胞形态进行观察。结果表明组织块法和冷消化法培养可获得比较均一、稳定的细胞群，细胞呈典型的成纤维形态，并成功进行传代培养，建立了绵羊耳成纤维细胞系。     

鲤鱼鳍条细胞的原代培养

通过对鲤鱼鳍条细胞进行原代培养,摸索出最佳的培养条件。采用组织块培养法,取一小块鳍条组织在不同培养基、温度、pH、CO₂等培养条件下进行培养,对其生长状况进行观察。培养48 h可见组织块周围有细胞迁出,并形成生长晕,培养1周可形成单层细胞,主要由上皮样细胞和少量成纤维样细胞组成。本研究初步确立了鲤鱼的鳍条细胞培养条件为:培养基为M199,培养温度为25~27 ℃,pH为7.2~7.6,CO₂浓度为5%,原代培养血清浓度为15%~20%,连续培养12 d后可得到纯化的鳍条细胞。     

不同血清浓度对小鼠肺细胞原代培养的影响

为了比较不同血清浓度的培养基对小鼠肺细胞原代培养的影响,在常规RPMI 1640培养基的基础上添加不同浓度的新生牛血清(5%、10%、20%、40%),每隔1 d在倒置显微镜下观察培养细胞的形态并用台盼蓝染色法统计细胞数目,绘制生长曲线。结果表明:4个血清浓度组中均有原代肺细胞生长增殖,血清浓度为10%的培养液培养的细胞生长状况最好,细胞形态完整清晰,数量较多,更适合小鼠的肺细胞生长。说明10%血清浓度的培养液最适合小鼠肺细胞的原代培养。     

RPMI 1640培养基体外培养结肠小袋纤毛虫的研究

试验旨在建立结肠小袋纤毛虫RPMI 1640培养方法,为进一步研究其生活史及致病机制奠定基础。研究不同淀粉含量、不同血清含量、不同初始pH及不同接种量下RPMI 1640培养结肠小袋纤毛虫的培养效果。结果发现,用RPMI 1640培养结肠小袋纤毛虫,最适宜的淀粉含量为30 mg/安瓿,血清含量为20%,pH为7.0;种群自然增长率和种群所达到的最高种群密度随接种量的不同而明显改变。RPMI 1640培养基可用于结肠小袋纤毛虫的体外培养。     

仔猪血清与胎牛血清培养猪耳缘成纤维细胞的比较性研究

采用组织块贴壁培养法,分别用10%仔猪血清和10%胎牛血清DMEM培养基进行猪耳缘成纤维细胞原代、传代培养。结果表明,两组成纤维细胞生长及形态、贴壁率、生长曲线、细胞增值能力均无差异。仔猪血清能完全能替代胎牛血清对猪耳缘组织成纤维细胞进行培养。     

青海湖裸鲤血清淀粉酶的研究

采用了以和丙烯酰胺垂直电泳法对120尾青海湖裸鲤进行了血清淀粉酶（AMY）电泳观察。结果表明：青海湖裸鲤血清淀粉酶有AMY1、AMY2和AMY3三种。AMY2同工酶在个体间存在多态性,其酶型分别AMY2AA型（5.8%）、AMY2BB型（10.8%)、AMY2AB型（13.3%）和AMY2O型（70.0%）。AMY1和AMY3显现出单态,用同样的方法研究了鲤鱼和草鱼血清淀粉酶,结果其多态性谱带与青海湖裸鲤非常相似。认为,血清淀粉酶（AMY）在不同亚科鱼类间差异可能不显著。     

RPMI 1640体外培养结肠小袋纤毛虫的正交试验

利用L9(34)正交试验,研究了淀粉量、小牛血清比例和初始pH值3个因素对结肠小袋纤毛虫在RPMI 1640培养基中最高种群密度的影响。方差分析结果表明,初始pH值对最高种群密度影响最大,其次为小牛血清比例,淀粉量影响最小。最佳培养基组成为淀粉40mg/瓶、血清25%(RPMI 1640培养液2.25mL+小牛血清0.75mL);最适宜的RPMI 1640培养液初始pH值为7.0。     

青海湖裸鲤过氧化氢酶活性及电泳分析

为了比较青海湖裸鲤和鲤鱼过氧化氢酶(CAT)在不同组织中的活性,试验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法和钼酸铵比色法分析青海湖裸鲤和鲤鱼心脏、肝脏、鳃、肌肉中CAT的活性。结果表明:2种方法测定的CAT活性具有一致性,青海湖裸鲤不同组织中CAT活性依次为心脏鳃肝脏肌肉,鲤鱼不同组织中CAT活性依次为心脏肝脏鳃肌肉。青海湖裸鲤与鲤鱼CAT活性均存在明显的组织差异性,尤其是在肝脏和鳃中差异显著(P0.05)。     

青海湖裸鲤幼鱼蛋白质需要量研究

试验旨在确定青海湖裸鲤幼鱼蛋白质需要量(初始体重为:16.43g),以实用饲料配方为基础,设计7个蛋白质水平(31%、33%、35%、37%、39%、41%和43%)的试验饲料,每组饲料投喂3个重复。养殖过程在循环水系统中进行。结果表明,随着饲料蛋白质水平的增加,青海湖裸鲤幼鱼特定生长率呈现先显著上升(P0.05)后平稳的趋势(P0.05),饲料系数呈现下降趋势,但各处理组间无显著差异(P0.05)。青海湖裸鲤幼鱼血清谷草转氨酶活性及总胆固醇和甘油三酯含量随着饲料蛋白质水平的增加而增加(P0.05),而血清尿素氮含量随着饲料蛋白质水平的增加而降低(P0.05)。根据特定生长率结果,由折线模型拟合得出青海湖裸鲤幼鱼蛋白质需要量为37.67%。     

两种鼠血清与两种培养基对PK15细胞培养的比较

为比较研究DMEM培养基和RPMI-1640培养基对PK15细胞的培养效果,选择效果好的作为基础培养基,用大鼠血清和小鼠血清分别以不同量添加进行培养,用细胞显微病变(CPE)观察法和四甲基偶氮唑盐(MTT)测定法测定其对细胞生长的影响,为血药试验选择试验动物提供依据。结果表明:DMEM培养基较RPMI-1640培养基对PK15细胞的培养效果好,加5%大鼠血清或2.5%小鼠血清配制DMEM培养基的培养,对PK15细胞的培养生长无副作用,即两种血清的无毒安全浓度分别为5%和2.5%。