猪弓形虫实时荧光PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速、敏感、特异的猪弓形虫检测方法,根据弓形虫保守基因序列,设计一套特异性引物和FAM荧光素标记的MGB探针;通过对PCR反应体系和反应条件进行优化筛选,建立了猪弓形虫实时荧光定量PCR检测方法,并对此PCR检测方法进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对60份疑似弓形虫感染的临床样品进行了检测。结果显示:建立的猪弓形虫实时荧光定量PCR检测方法在101～107拷贝/μL模板范围内有很好的线性关系;对弓形虫重组阳性质粒出现阳性扩增信号,但对阴性对照的水和其他7种病原对照未扩增出特异性曲线;最低检测模板浓度为10拷贝/μL;自60份疑似猪弓形虫感染样品中检出32份阳性,并且和克隆测序结果一致。结果表明,本研究建立的猪弓形虫实时荧光定量PCR检测方法可用于猪弓形虫的快速检测,从而为猪弓形虫病的诊断提供了特异、敏感、高通量的方法。     

出版消息

家畜电针与针麻: 本书内容分四章, 第一章:电针和针麻的基本知识,包括针具和电麻机的使用和维护等;第二章:电针和针麻的常用穴位,主要叙述穴位的位置、局部解剖、进针方法及配位等;第三章;电针疗法在临床上的应用,着重讲解猪、牛等三十三种常见病的电针疗法;第四章:针麻在兽医临床上的应用。书中附穴位图,可供兽医临床参考。宋大鲁、孙宝琏等编     

犬弓形虫病的调查检测与防治方法

犬弓形虫病属人兽共患疾病,病原为龚地弓形虫,简称弓形虫。多种家畜均能感染发病,伴侣犬,不仅感染率较高,且对人体健康存在着更大的潜在威胁。人体感染后,可导致免疫功能损伤,怀孕妇女出现流产、不孕等症。1临床发热病犬的弓形虫检出率临床上出现体温升高、并伴有呼吸道症状的疑似病犬,进行血清弓形虫抗原、抗体检测,以确诊弓形虫病。经对绍兴天使动物医院28例门诊犬血液样本检测,发现抗原阳性17例,检出率60.7%;抗     

猪弓形虫病的流行特征及防控措施

<正>弓形虫病是由龚地弓形虫引起的一种人畜共患的传染病,该病在兽医临床上多呈隐性感染。本病的主要临床特征为:患病猪表现高热、呼吸困难、腹泻、皮肤出现红斑及神经症状、死亡和妊娠母猪的流产、死胎、胎儿畸形等。广泛流行于人、畜及野生动物中。1病原特征龚地弓形虫,只此一种,但有不同的虫株。全部发育过程有5个阶段,即5种虫型,各个阶段形态各异,滋养体和包囊出现在猪或其他动物体内,裂殖体、配子体     

浅述水针疗法及其临床应用

水针疗法是在穴位、痛点及患部进行注射药液,以期达到治疗疾病为目的的一种方法。此种方法操作简便,使用药品少,疗效确实。在临床治疗过程中达到了明显的效果,现将具体操作简述如下。1注射部位1.1穴位注射此种方法除血针穴位外,各个穴位均可使用。1.2痛点注射是对疼痛点进行的注射。1.3患部注射属于慢性的腰肢疼痛病例,痛点不明显。在采用穴位注射同时还可以进行患部注射。2常用药物5%～25%葡萄糖注射液,30%安乃近注射液,0.9%生理盐水,维生素B1注射液等。3注射方法选定注射部位,剪毛消毒,按肌肉注射方法注射,隔1～2d注射1次,3～5次为一疗程…     

检测多种动物弓形虫抗体的SPA-ELISA方法的建立及初步应用

利用重组弓形虫MIC3作为包被抗原,SPA作为偶联物建立了可检测多种动物弓形虫抗体的SPA-ELISA方法.确定了抗原最适包被质量浓度为2.6 mg/L;血清最适稀释度为1:160,作用时间为45 min;优化了酶标SPA工作浓度,作用时间及底物显色时间.对已知阳性血清的检测下限可达1:6 400,其敏感性是IHAT方法的50～100倍.对临床4种动物共332份血清进行检测,阳性率由高到低依次为:SPA-ELISA(39.4%)>MAT(39.1%)>IHAT(13.1%).以上结果表明,SPA-ELISA不失为一种适用于多种动物弓形虫抗体检测的理想方法.     

弓形虫与附红细胞体人工混合感染猪的临床试验

为探讨弓形虫与附红细胞体混合感染猪的临床症状,将试验猪分为4组,分别皮下接种弓形虫RH株速殖子、附红细胞体、弓形虫 附红细胞体及生理盐水.观察其临床症状.结果表明,分别接种弓形虫和附红细胞体的试验猪出现发热、食欲减退、皮肤发红、便秘等临床症状;混合感染弓形虫和附红细胞体的试验猪上述症状加重.该试验为弓形虫和附红细胞体混合感染猪的临床诊断提供了一定的资料.     

弓形虫套式PCR检测方法的建立及其在奶山羊中应用

根据Gen Bank上发表的弓形虫529 bp高度重复序列,利用Primer 5.0设计2对引物,优化反应条件,建立一种弓形虫套式PCR检测方法,并进行特异性、敏感性和临床样品的检测试验。结果表明,该方法能针对弓形虫扩增出目的条带,而隐孢子虫、贾第虫均无特异性条带出现;该方法最低能检出模板的量为1.021×10-4mg/L;利用所建立的方法对采自关中某羊场奶山羊的332份血液样品进行检测,检出阳性样品76份,阳性率为21.69%。由此可见,所建立的弓形虫套式PCR检测方法特异性强、敏感性高,可用于临床检测奶山羊弓形虫的感染。     

一例猪弓形虫病的诊治报告

<正>猪弓形虫病,又称弓形体病,是由住肉孢子虫科、弓形虫属的龚地弓形虫寄生于猪体内引起。是一种人畜共患寄生虫病。本病对猪危害较大,近几年来,辽宁省报道多起猪发生弓形虫病。现将本人经历的病例报告如下:1临床症状2015年05月16日,本人接到大谭镇大谭村严某电话,所饲养50只仔猪,皮肤均出现紫红斑块,且病猪有高烧、精神沉郁现象。仔细检查病猪,是3月龄仔猪。整个猪群,每头     

治疗脑血管病后遗症一例报告

聂某某,女,56岁,1998年11月15日突发脑溢血,住进顺义区中医院治疗,经抢救治疗脱险,常规调治1个月,仍失语不能翻身起坐,大小便失禁,于12月17日转入我所接受中医生物疗法调治。1 前4疗程的治疗方法及疗效1.1第一疗程调治10天。口服保肽氨,每日20 g,本草金刚液每日30 g,静滴蚓激酶20～40 mL/天。1.2 第二疗程第一疗程治疗10天后改为活蜂直刺;加用脑组织液为溶酶,注射神经生长因子。2月6日后改为隔日穴位下注射脑组织液两支,活蜂直刺加减数量10～25只/次。春节期间休息10天,停止治疗。2月23日后仍隔日穴位注射脑组织液2支。1.3 第三疗程口服…     

猪弓形虫病的中西药结合疗效分析

目的:研究分析中西药结合治疗猪弓形虫病的疗效情况。方法:应用复方磺胺类药物与自拟抗弓形虫中药方剂相结合治疗感染弓形虫病的猪,同时检测猪腹水内的含虫量。然后对小白鼠接种感染猪病料,予以动物回归试验。结果:中西药结合治疗感染弓形虫病的猪达到了100%灭活弓形虫滋养体的作用;回归试验结果显示,一只小白鼠的脑组织内含有少量弓形虫。结论:中西药结合治疗猪弓形虫病获得了比较满意的疗效。     

应重视防控动物弓形虫感染

<正>弓形虫在分类上隶属于孢子虫纲、球虫亚纲、真球虫目、艾美耳亚目、弓形虫科、弓形虫属。目前认为弓形虫属只有刚地弓形虫一个种。该虫呈世界性分布,宿主范围相当广泛,包括人及几乎所有的温血动物,是一种人畜共患病病原。宿主免疫功能低下     

仔猪弓形虫病急性感染的诊治

弓形虫病(Toxoplasmosis)是由弓形虫科刚第弓形虫(Toxoplasma gondii Nicolle&Manceaux,1908)引起的人、畜禽和野生动物共患的原虫病。根据病原学研究证实感染弓形虫的哺乳动物至少有200种。主要临床表现为高烧、呼吸困难、肺炎、淋巴结炎、死胎、流产、失明及神经症状。现就临床上遇到的一起仔猪急性感染弓形虫病诊治过程报道如下。     

青海刚察绵羊几种病原的检测

<正>布鲁菌病是由布鲁菌引起的人畜共患的一种急性或慢性传染病,临床上以母畜流产和公畜睾丸炎为主要特征;羊衣原体病是一种由鹦鹉热衣原体引起的以流产、肺炎、关节炎、结膜炎等多临床症状为特征的传染病;弓形虫病是由专性细胞内寄生的原虫-龚地弓形虫引起的一种人兽共患     

弓形虫529 bp基因的克隆及序列分析

本研究对安徽猪源弓形虫529 bp重复序列进行了分析,为其分子流行病学研究以及诊断方法的建立奠定基础。首先对病料虫体基因组DNA进行提取,然后对弓形虫529 bp基因进行PCR扩增、克隆、测序并对测序结果进行比对、同源性分析和构建系统进化树。结果显示,PCR扩增产物约为528 bp,与已报道的弓形虫同一基因序列具有高度同源性,与GenBank报道的EF648169.1株同源性最高,达99.5%,且遗传距离最为接近;与其他5株猪源弓形虫比对显示主要突变区域在第31～74位和第100～141位碱基。表明该猪源弓形虫与犬源弓形虫EF648169.1株为姊妹株;本基因序列碱基突变较少,保守性较好,适合作为弓形虫病诊断的靶基因。     

天祝白牦牛弓形虫感染情况调查

为查明天祝县白牦牛弓形虫感染情况,采用间接血凝试验(IHA)对甘肃省天祝藏族自治县6个采样点共498份白牦牛血清进行弓形虫血清学检测。结果显示:87份待检血清呈阳性,阳性率17.47%,以1～2岁年龄段弓形虫抗体阳性率最高。     

一种简易,快速检测弓形虫循环抗原的酶联免疫吸附试验

应用双抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法,检测人工感染弓形虫兔血清循环抗原(CAg)的结果:潜伏期内的阳性检出率为10％;急性期和亚急性期的阳性率为40％～100％;慢性早期为20％。检出弓形虫抗原量为0.63μg/ml。本法与血吸虫、肺吸虫、丝虫、钩虫、蛔虫及旋毛虫抗原试验,均呈阴性。上述结果表明,本法具有特异、敏感、简易、快速等特点,可作为急性弓形虫病的快速诊断方法。     

镇江地区家畜弓形虫病血清学调查

为摸清我市家畜弓形虫感染及流行情况,于1987～1989年间我们在丹徒县、句容县、丹阳市、杨中县等市(县区)对鸡、鸭、鹅、猪、水牛、山羊、奶牛、兔等进行弓形虫病血清学(间接血凝法)调查。判定标准:以1∶64被检血清稀释孔呈50％凝集判阳性。调查结果:(1) 从调查中发现,弓形虫感染率地区间差异不明显;但各地以猪的感染率最高,平均为47.32％,其中以成年母猪血清学阳性率更高,如某种猪场种母猪阳性率高达58.6％。(2) 首次在我市鸡、鸭、鹅血清中检出抗体,且阳性率分别为14.58％,12.79％,12.86％,但尚未发现典型的临床病例,     

我国人群和某些动物弓形虫感染研究进展

弓形虫病在世界分布广泛,是由顶复门寄生原虫刚地弓形虫感染而引起的一种食源性寄生虫病。同时,弓形虫也是一种条件性致病原虫,在健康人和大多数动物中很少引起严重症状,主要受危害的群体是妊娠期及免疫力损失或者低下的人和动物。据估计,世界人口的1/3被弓形虫感染,感染率在25%～50%。据我国寄生虫病统计,在我国弓形虫平均感染率约10%,部分少数民族地区感染率相对较高。我国动物弓形虫感染率差异较大,在驯化动物猪、牛、羊、犬和猫弓形虫感染率分别为7.19%～75.95%、0～52.50%、1.30%～39.13%、3.94%～46.67%、1.92%～45.00%。其他动物也有感染,但研究相对较少。论文对我国人和动物弓形虫感染概况进行综述,使读者对弓形虫病在我国的感染情况有所了解,以期引起对弓形虫感染的重视,从而进一步促进人们对该寄生虫的研究和预防。     

猪弓形虫病的诊治报告

<正>猪弓形虫病又称弓浆虫病或者弓形体病,是由龚地弓形虫感染猪而引起的人畜共患原虫病。不同年龄的猪均易感染,多发于6～9月份的炎热季节。现将象山县养殖户发生的一起猪弓形虫体病的诊治情况报告如下。