铜鱼对4种饲料原料的离体酶解动力学研究

本试验旨在研究铜鱼对4种常用饲料原料中蛋白质的离体消化和酶解能力.选用体重146.81g左右的野生铜鱼200尾,暂养24 h排出其消化道内容物后解剖,取出其肠道和肝胰脏制备成消化酶液,在离体条件下对鱼粉、豆粕、菜粕和棉粕进行消化酶解.试验结果表明:在离体条件下铜龟对饲料原料中蛋白质的酶解能力为肝胰脏强于肠道,而在肠道中则以中肠最大,后肠最小.在0～4 h铜鱼肠道对鱼粉、豆粕、菜粕和棉粕酶解时的氨基酸生成速度以鱼粉最大,为8.551 mg/h(P<0.05);胰脏酶解液的氨基酸生成速度则以豆粕最大,为13.110 mg/h(P<0.05);铜鱼对4种饲料原料酶解的平均速度分别为:鱼粉10.75 mg/h、豆粕10.03 mg/h、菜粕9.05 mg/h、棉粕7.36 mg/h.由此可知,铜鱼对鱼粉和豆粕具有较好的消化酶解能力.     

异育银鲫肠道对膨化和非膨化饲料蛋白质的酶解动力学研究

试验采用离体研究方法,以异育银鲫肠道的粗酶液为酶源,测定了7种饲料原料(鱼粉、肉骨粉、豆粕、棉粕、菜粕、玉米、次粉)膨化前后,在4.5h内氨基酸生成量随反应时间的关系和氨基酸的生成速度。用氨基酸生成速度表示蛋白质酶解速度。结果表明:①豆粕、鱼粉、肉骨粉膨化后蛋白质酶解速度下降;菜粕、玉米、次粉膨化后蛋白质酶解速度上升,特别是玉米膨化后效果尤为明显;棉粕膨化后蛋白质酶解速度差异不显著;②对非膨化饲料,蛋白质酶解速度均表现为:鱼粉>肉骨粉>豆粕>棉粕>菜粕>次粉>玉米;③对膨化饲料,蛋白质酶解速度为:膨化鱼粉>膨化玉米>膨化菜粕>膨化棉粕>膨化肉骨粉>膨化次粉>膨化豆粕。     

草鱼肠道对几种蛋白饲料氨基酸消化和吸收效率的离体研究

采用离体消化率方法测定草鱼肠道对鱼粉、豆粕、菜粕、棉粕的蛋白质消化率分别为 66%、 56%、 37%、 50%.在酶水解过程中氨基酸的生成量逐渐增加;以生成的氨基酸量占饲料量的百分比表示氨基酸生成效率,以鱼粉最高,其次为豆粕 (为鱼粉的 92% )、棉粕 (为鱼粉的 80% )和菜粕 (为鱼粉的 62% ),在水解 7h时鱼粉、豆粕、菜粕、棉粕的氨基酸生成效率分别为 54.08%、 49.91%、 33.76%、 43.52%.采用肠道离体灌注试验系统和方法测定了草鱼肠道对 4种饲料蛋白质酶水解液中氨基酸的吸收转运速度,以鱼粉最高,为 0.45mg/min,其次为豆粕 0.36mg/min、棉粕 0.30mg/min,最低为菜粕 0.26mg/min.如果以单位时间内肠道对氨基酸的吸收转运量占流过肠道内的氨基酸量的比例表示肠道对氨基酸吸收效率,结果为草鱼肠道对 4种蛋白质饲料水解液氨基酸的吸收转运效率无显著性的差异.上述结果初步表明草鱼肠道对 4种饲料蛋白质的氨基酸消化效率有较大差异,但对其蛋白质水解产物--氨基酸的吸收效率并无显著性差异,肠道对氨基酸的吸收效率可能不受饲料种类的影响.     

铜鱼肠道、肝胰脏对四种蛋白质饲料的离体消化率测定

采用体外消化法研究了铜鱼(Coreiusheterodon)对鱼粉、豆粕、菜粕和棉粕4种饲料蛋白质的离体消化能力。试验结果表明:①铜鱼对鱼粉、豆粕、菜粕和棉粕的干物质离体总消化率为菜粕50.18%>鱼粉50.13%>豆粕49.11%>棉粕32.90%,而对粗蛋白的离体总消化率为:鱼粉41.92%>豆粕40.88%>菜粕23.68%>棉粕21.39%;②铜鱼对4种饲料原料的干物质和粗蛋白体外消化能力为:中肠>肝胰脏>前肠>后肠。     

鲫鱼肠道对四种蛋白质饲料的体外消化与其酶解液中氨基酸吸收效率的研究

采用离体消化方法测定了鲫鱼肠道对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕的体外消化率和氨基酸的生成效率。同时采用同位素示踪法和肠道离体灌流模型分别测定了鲫鱼离体肠道对4种蛋白质饲料体外酶解液中氨基酸的吸收速度。结果表明:鲫鱼肠道对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕的体外消化率分别为48.51%、85.52%、60.64%、67.22%,其中以花生粕最高,鱼粉最低,消化率彼此之间的差异均显著(P<0.05)。在酶解过程中氨基酸的生成量逐渐增加,以生成的氨基酸量占饲料量的百分比表示氨基酸的生成效率,在酶解7h时以鱼粉最高为12.23%,其次是花生粕为12.14%、棉籽粕为11.23%、菜粕为6.78%。鲫鱼肠道(每克)对4种蛋白质饲料酶解液中氨基酸的吸收转运速度,以鱼粉最高,在灌流40min时,速度为1.058mg/min,其次为花生粕0.782mg/min、棉籽粕0.679mg/min、最低为菜粕0.451mg/min,差异显著(P<0.05)。如果以单位时间内肠道对氨基酸的吸收转运量占流过肠道的氨基酸总量的比例表示肠道对氨基酸的吸收效率,结果为鲫鱼肠道对4种蛋白质饲料酶解液氨基酸的吸收转运效率间无显著性差异(P>0.05),所以肠道对氨基酸的吸收效率可能并不受饲料种类的影响。量。采用凯氏定氮法对烘干的饲料样品和消化滤渣进行粗蛋白质含量测定,按照公式计算饲料样品的离体消化率:蛋白质离体消化率(%)=(消化前饲料重量×饲料粗蛋白质含量-消化后滤渣质量×滤渣粗蛋白质含量)/(消化前饲料质量×饲料粗蛋白质含量)。1.3酶解液氨基酸总量测定及计算方法按照1.2.2的方法分别对饲料样品进行酶解,于0、1、3、5、7h分别取酶解液0.2ml(同时补充等体积的磷酸缓冲液),加入10%的三氯醋酸0.2ml,待蛋白质沉淀后以6000r/min离心20min后,取上清液0.1ml采用茚三酮法测定OD570值,用亮氨酸作标准曲线计算酶溶液氨基酸的总量,再按照酶解的氨基酸总量(扣除饲料酶解前的游离氨基酸含量)占饲料量的百分比计算氨基酸的消化生成效率。1.4用于肠道灌注的酶解液制备方法按照1.2.2的方法对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕进行酶解7h后,取酶解液以10000r/min离心25min,收集上清液为酶解液,于冰箱冷冻保存备用。定量取此酶解液0.2ml加入10%三氯醋酸0.2ml,待蛋白质沉淀后以6000r/min离心20min,采用茚三酮定量测定酶解液氨基酸浓度。1.5灌注试验方法采用叶元土等利用的肠道灌注系统进行蛋白质饲料酶解液的灌注试验。整个灌注系统置于生化培养箱中,控制环境温度在28℃,恒流泵控制灌注液的流量在2.00ml/min,由氧气瓶从灌流开始前5min就向培养液中充入医用氧气以保持肠道组织活性。1.6离体肠道的制备将鲫鱼捣毁脊髓处死,立即解剖取出肠道,在生理盐溶液浸渍下剔除肠道外壁上的脂肪、血污等,在灌流系统中用生理盐溶液冲洗干净肠道内容物,置于生理盐溶液中待用。每次灌注试验用一尾鲫鱼的肠道,每次试验至少重复3遍。用于解剖获取肠道的鲫鱼平均体重为126g,试验前养殖于室内循环养殖系统中,养殖环境温度为25℃左右,投喂粗蛋白质为30%的颗粒配合饲料2周以上。1.7肠道对氨基酸平均转运速度计算方法在灌注液中加入放射性酪氨酸(L-[4,5-3H]-tyr,放射性浓度为0.5毫居里/毫升),从灌注开始(0min)每10min取肠道外培养液0.1ml,持续40min,并取开始时肠道外培养液样品。每次取样品液100μl,取3个平行样品,并补充同样体积的生理盐溶液以保持肠道外培养液总体积恒定。取肠道内灌流液100μl于闪烁瓶内,设3个平行样品,样品液均置于闪烁瓶内,加入闪烁液5ml放置半小时后,在SN-6930液体闪烁计数器中计数(cpm值)。因灌流液的氨基酸浓度是已测知的,所以根据灌流液cpm值和肠道外培养液cpm值,就可计算出肠道外培养液的氨基酸浓度,再根据培养液体积(40ml)计算经过肠道转运到培养液中的氨基酸总量,最后根据吸收转运的时间计算单位质量肠道对氨基酸的平均转运速度。1.8数据的表示与处理由于鱼体大小差异使肠道长度和质量有一定的差异,为减小试验误差,统一比较标准,我们把鲫鱼肠道对试验氨基酸的跨壁运输量表示为单位肠道组织重量(g)对试验氨基酸的跨壁运输量,并以此为基础计算氨基酸吸收转运速度,计算公式如下:转运到肠道外培养液中氨基酸的浓度=灌流液氨基酸浓度×(肠道外培养液cpm值-空白培养液cpm值)/灌流液cpm值;跨壁运输量=(培养液cpm值-空白培养液cpm值)×灌流试验氨基酸浓度×培养液体积/(灌流液cpm值×肠道质量);氨基酸平均转运速度=(培养液cpm值-前10min时培养液cpm值)×灌流试验氨基酸浓度×培养液体积/(灌流液cpm值×肠道质量×10)。在肠道灌注系统中用恒流泵控制肠道酶解液的流过速度为2.00ml/min,通过酶解液中氨基酸的浓度计算单位时间(min)流过肠道的氨基酸量。肠道对氨基酸的吸收转运效率(%)=每分钟氨基酸的平均吸收转运量/每分钟流过肠道内的氨基酸量。数据采用Microsoft-Excel2003作统计处理,采用多重比较的最小显著极差法(LSR法)进行差异显著性分析。2试验结果2.1离体消化率鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕4种蛋白质饲料在消化前的粗蛋白质含量分别为69.13%、55.06%、44.25%、50.58%。在离体条件下,通过肠道消化酶水解7h,得到鲫鱼对鱼粉、花生粕、菜粕、棉籽粕蛋白质的离体消化率分别为48.51%、85.52%、60.64%、67.22%,花生粕消化率最高,鱼粉最低,消化率彼此之间的差异均显著(P<0.05)。2.2酶解蛋白质饲料氨基酸生成效率     

草鱼对膨化饲料与非膨化饲料蛋白质酶解速率的研究

试验采用离体研究方法,以草鱼肠道的粗酶液为酶源,测定了膨化和非膨化的7种原料:即鱼粉、豆粕、菜粕、棉粕、肉骨粉、次粉、玉米,在4.5h内氨基酸生成量随反映时间的关系和氨基酸的生成速度。用氨基酸生成速度表示蛋白质酶解速度。结果表明,1)豆粕、鱼粉、肉骨粉膨化后蛋白质酶解速度下降;玉米、菜粕、次粉膨化后蛋白质酶解速度上升,特别是玉米膨化后效果尤为明显;棉粕膨化后蛋白质酶解速度差异不显著;2)对非膨化饲料,蛋白质酶解速度表现为:鱼粉>肉骨粉>豆粕>棉粕>菜粕>次粉>玉米;3)对膨化饲料,蛋白质酶解速度为:膨化鱼粉>膨化玉米>膨化菜粕>膨化肉骨粉>膨化棉粕>膨化次粉>膨化豆粕。     

异育银鲫对十种常用饲料原料离体消化率的测定

利用异育银鲫(allogynogenetic crucian carp)的肠道为消化酶酶源,采用离体消化率的测定方法,分别测定了米糠、麦芽根、血粉、豆粕、花生粕、花生饼、棉粕、菜粕、玉米蛋白粉、鱼粉的离体消化率。异育银鲫对10种饲料原料的蛋白质消化率分别为:花生饼43.38%、玉米蛋白粉41.27%、米糠39.72%、血粉37.20%、花生粕36.85%、棉粕35.60%、鱼粉33.87%、豆粕32.69%、菜粕32.10%、麦芽根21.28%。试验结果表明:血粉、花生粕、花生饼、棉粕、玉米蛋白粉作为优质的高蛋白饲料原料替代或部分替代鱼粉在异育银鲫饲料配方中使用是可行的。     

草鱼肠道对四种饲料蛋白质氨酸消化和吸收率的试验研究

采用离体消化方法，利用草鱼肠道消化酶作为酶源，在水解7h后用茚三酮方法测定水解液中生成的氨基酸总量，以生成的氨基酸量占消化前饲料蛋白质量的百分比表示氨基酸离体消化率，四种饲料的氨基酸消化率分别为鱼粉64．56％、豆粕88．73％、菜粕75．03％、棉粕81．00％，显示出草鱼对3种植物饲料蛋白质的氨基酸消化率高于鱼粉的结果。采用肠道离体灌注试验系统，利用饲料蛋白质的酶水解液为灌注液，用茚三酮方法测定了草鱼肠道对四种饲料蛋白质酶水解液中氨基酸整体的吸收速度，结果显示出肠道对氨基酸整体的吸收速度与水解液中氨基酸浓度呈正相关关系，在50rain内其吸收平均速度以鱼粉最高，为0．45mg／min，其次为豆粕0．36mg／min、棉粕为0．30mg／min，最低为菜粕0．26mg／min。如果以单位时间内肠道对氨基酸的吸收量占流过肠道内的氨基酸量的比例表示肠道对氨基酸吸收率，结果显示出在不同时间段，草鱼肠道对四种蛋白质饲料水解液氨基酸的吸收率无显著性的差异。     

欧洲鳗对几种蛋白质饲料的体外消化研究

利用体外消化法研究了欧洲鳗粗酶液对鱼粉、发酵豆粕、菜籽粕、玉米蛋白粉、啤酒酵母、蝇蛆粉、膨化大豆、豆粕、花生粕、红虫粉等10种单一蛋白源以及另外5种复合蛋白源酶解7 h的体外消化率以及酶解液中游离氨基酸的生成量,以期筛选出最有可能替代鱼粉的蛋白原料。结果表明:(1)最有望部分或全部取代鱼粉的植物性蛋白源为啤酒酵母、发酵豆粕和花生粕,其干物质和粗蛋白质体外消化率分别为62.75%、55.15%、49.45%和78.50%、70.70%、85.70%;动物性蛋白源中红虫粉和蝇蛆粉的干物质体外消化率与鱼粉差别不大,粗蛋白质消化率红虫粉蝇蛆粉鱼粉。(2)在0～7h,各种蛋白源酶解氨基酸生成量基本呈增加趋势,对植物性蛋白源来说,啤酒酵母氨基酸生成量明显高于其他植物性蛋白源,其次是发酵豆粕、玉米蛋白粉和花生粕,较低的为菜籽粕、膨化大豆、豆粕。对于动物性蛋白源来说,红虫粉体外消化生成氨基酸的量明显高于鱼粉和蝇蛆粉。这一结果说明红虫粉和啤酒酵母是优质的蛋白源,很容易被鳗鱼消化吸收利用。(3)对于混合蛋白源混1、混2、混3、混4、混5来说,其干物质和粗蛋白质的体外消化率分别为:混1混2混5混4混3;混2混1混5混4混3,而原料中粗蛋白含量为混3混4混5,其鱼粉添加量分别为80%、70%、60%,混1、混2均不含鱼粉,这说明鳗鱼对几种植物性蛋白源的粗蛋白体外消化率均高于鱼粉,这也与之前单一蛋白源的粗蛋白体外消化率结果一致。     

翘嘴红鲌、花(鱼骨)对18种饲料原料蛋白质、氨基酸离体消化率

利用翘嘴红鮊、花(鱼骨)的肠道为消化酶酶源,采用离体消化率的测定方法,分别测定了对次粉、麸皮、玉米、小麦、大豆、豆粕、膨化大豆、葵粕、红花籽粕、花生粕、棉粕(1)、棉粕(2)、油菜籽、菜籽粕、菜籽饼、血粉、国产鱼粉、肉粉的离体消化率.翘嘴红鮊对大豆、花生粕、油菜籽、菜籽饼、豆粕有较好的消化率(消化率≥36.20%);花(鱼骨)对花生粕、油菜籽、豆粕、菜籽饼、棉粕(2)有较好的消化率(消化率≥33.87%),这些原料在人工配合饲料中可以优先选择.     

癸氧喹酯干混悬剂含量测定的改进

采用高效液相色谱法测定癸氧喹酯干混悬剂的含量,在2-250μg/mL范围内,峰面积的常用对数与进样量浓度的常用对数呈良好的线性关系,R^2=1(n=5),平均回收率为99.24%~99.51%,RSD在0.05%~0.28%。此方法分析时间短,样品前处理简便、定量结果准确,重现性好,结果满意,为其质量控制提供了依据。     

猪毛色遗传的研究进展

本文概述了猪的毛色类型、猪的毛色遗传模式,着重综述了猪毛色基因分子基础的研究进展,指出存在问题并就未来发展方向做了思考。     

Effects of size of ingestively masticated fragments of plant tissues on kinetics of digestion of NDF

Ingestively masticated fragments were collected and sized via sieving. Different sizes of esophageal masticate and ruminal digesta fragments, and ground fragments of larger masticated pieces were incubated in vitro, and undigested NDF remaining at intervals of up to 168 h of incubation was determined. The ruminal age-dependent time delay (tau) for onset of digestion of NDF was positively correlated (P < 0.004) with the mean sieve aperture estimated to retain 50% of the fragments between successive sieve apertures (MRA). Degradation rate of potentially degradable NDF (PDF) and level of indigestible NDF were not related (P > 0.10) to MRA of masticated and ground fragments. Estimates of tau were positively related to MRA, with slopes of bermudagrass < corn silage < ruminal fragments of corn silage. It was concluded that fragment size-, and consequently, ruminal age-dependent onset of PDF degradation of a mixture of different fragment sizes results in an age-dependent rate of degradation of the more rapidly degrading of two subentities of PDF. Models are proposed that assume a tau before onset of simultaneous degradation of PDF from two pools characterized as having gamma-modeled age-dependency and age-constant rates. The ruminal age-dependent pool seems to be associated with the faster-degrading pool, and its rate parameter increases with range in MRA in the population of fragments. Conceptually, the ruminal age-dependent rate parameter for PDF degradation seems to represent a composite of several effects: 1) effects of the size-dependent tau; 2) range in MRA of the population of ingestively masticated fragments; and 3) subentities of PDF that degrade via more rapid age-dependent rates compared with subentities of PDF that degrade via age-constant rates. The estimated fractional rates of ruminative comminution of ingestively masticated fragments (0.060 to 0.075/h) were of a magnitude similar to the mean fractional rates of PDF digestion (0.030 to 0.085/h), which implies that ruminative comminution may be first-limiting to fractional rate of PDF digestion. The in vivo roles of ingestive and ruminative mastication of fragments on PDF degradation must be considered in any kinetic system for estimating PDF digestion in the rumen. These results and others in the literature suggest that the rate of surface area exposure rather than intrinsic chemical attributes of PDF may be first-limiting to degradation rate of PDF in vivo.     

中华人民共和国农业部公告 第267号

为贯彻落实《兽药生产质量管理规范》(简称《兽药GMP》),进一步推动兽药GMP实施进程,我部制定了《兽药生产质量管理规范检查验收办法》,现予公告。本公告自2003年6月1日起施行。附件:兽药生产质量管理规范检查验收办法二○○三年四月十日第一章 总则 第一条 为推动《兽药生产质量管理规范》(以下简称兽药GMP)的实施,规范兽药GMP检查验收工作,制定本办法。 第二条 农业部负责全国兽药GMP管理和检查验收工作;负责制修订兽药GMP检查验收管理规定;负责兽药GMP检查员队伍建设和监督管理工作,负责国际兽药贸易中GMP互认工作。 …     

鸡败血支原体垂直传播模式及其阻断方法

以国际标准强毒Ｒ株人工感染非免疫产蛋鸡,定时扑杀,分别从鼻窦、眶下孔、气管、肺、气囊、卵巢和输卵管分离ＭＧ,并收集感染鸡所产蛋分离ＭＧ。结果表明,人工感染４８小时后上、下呼吸道及肺已被全面感染,９６小时气囊已被感染,１２０小时输卵管已能分离到ＭＧ,卵巢始终分离不到ＭＧ。人工感染鸡自１４４小时便能在其所产蛋中分离出ＭＧ。药物治疗能在７２小时内消除感染,油乳剂苗则需２４天后逐渐降低蛋内ＭＧ分离率,药物卵内注射、种蛋药浴、高温处理均能杀死卵内ＭＧ,但以研制的种蛋浸泡剂药浴效果为最好。     

Mechanism of Action of Probiotic Function of Lactobacilli

乳酸杆菌作为益生菌广泛用于人和动物.本文综述了乳酸杆菌改善宿主健康的机制.乳酸杆菌可通过产生抗菌物质如乳酸、过氧化氢、细菌素,或者通过竞争营养或肠道黏附位点来抑制致病菌;通过诱导黏附素的分泌或阻止细胞凋亡而增强肠道的屏障功能,从而保护肠道.文章重点讨论了乳酸杆菌表面成分(表面蛋白、脂磷壁酸和肽聚糖)与肠道受体(C型凝集素受体、Toll样受体和Nod样受体),阐述了他们结合后启动免疫调节信号,调控肠道免疫功能以发挥改善健康作用的机制.     

商会自治的基石——商会自治规范研究

在现代法律秩序中,商会自治规范是制定法的基础和必要的补充,甚至在某些方面替代了制定法;商会自治规范主要包括商会组织规范、行为规范、惩罚规范以及争端解决规范等;其效力仅及于其内部成员;商会自治规范和制定法之间存在冲突,但也存在整合的基础。     

獭兔睾丸的组织学观察

家兔作为一种实验动物 ,推动了繁殖技术的发展。本试验通过对不同年龄公獭兔的睾丸进行组织学观察、测定 ,研究精子的发生规律 ,为系统地进行繁殖生理工作提供依据。1　材料与方法选 60日龄、75日龄、90日龄 3个年龄公獭兔各5只 ,用外科手术法摘取两侧睾丸 ,放入 Bouin氏液中固定 ,二甲苯透明 ,石蜡包埋 ,切成 5～ 8μm切片 ,H.E.染色。在显微镜下观察 ,并进行定量组织学指标测定及差异性比较。2　结果和讨论2 .1　睾丸定量组织学指标的测定结果　见表 1。表 1　獭兔睾丸定量组织学指标　　　μm,个 /精细管60日龄 75日龄 90日龄曲细精管…     

Observations of fracture of the anconeal process of the ulna of swine

Fractures of the anconeal process of 5 pigs ranging in age from 4 to 8 months were studied radiographically and histologically. Clinically, animals with a fracture of the anconeal process had a "tight," restricted gait. In pigs at 4.5 months of age, a radiolucent line through the base of the anconeal process was composed of fibrocartilage, fibrous connective tissue, and hyaline cartilage. Subperiosteal proliferation of woven bone was located along the cranial surface of the olecranon, adjacent to the base of the anconeal process. In older animals, the radiolucent line through the anconeal process contained variable amounts of fibrous connective tissue and fibrocartilage. The proliferation of subperiosteal bone at the base of the anconeal process formed a "buttress callus" which retained a radiolucent area between the callus and the proximal surface of the anconeal process. The latter region of radiolucency was continuous with the transversely oriented line that traversed the base of the anconeal process.