鸡传染性支气管炎毒种保存期试验（一）

对３批不同时期制备的ＩＢＶＨ１２０毒种用ＳＰＦ鸡胚进行毒种保存期测定。用保存５年的ＩＢＶＨ１２０毒种经复壮后繁殖冻干毒种并进行全面鉴定。结果表明冻干毒种在－７０℃条件下保存４年、８年及１５年后毒种效价下降不明显,用保存１５年的ＩＢＶＨ１２０毒种复壮后繁殖、冻干的毒种其免疫原性、安全性等指标均符合规程规定标准。     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ），鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）、减蛋综合症病毒（ＥＤＳＶ）等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７℃孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗、进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２Ｏ、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＬＴＶ、ＥＤＳＶ均为阴性。结果表明、用此法检测鸡胚尿囊液中ＩＢＶ．具有快速、敏感、特异的优点。     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅱ）：疫苗…

根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体     

禽用生物制品外源病原监测研究：传染性支气管炎疫苗外源病毒检测

６４倍稀释的抗ＩＢＶ（传染性支气管炎病毒）高免血清可中和１００个ＥＩＤ＿（５０）ＩＢＶ病毒；２倍稀释抗ＩＢＶ高免血清可中和１０个羽份ＩＢＶＨ５２病毒。用ＮＤＶ（鸡新城疫病毒）ＬａＳｏｔａ或Ⅰ系病毒模拟污染ＩＢＶＨ５２毒株后，再用抗ＩＢＶ高免血清中和，可以检出污染的病毒。抽检ＩＢＶＨ１２０疫苗的１０个羽份可被ＩＢＶ高免血清中和。     

鸡新城疫,传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（I报）：NDV,…

本研究根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二种病毒能在鸡胚中繁殖的特点，通过筛选上述二种病毒的最适稀释比例，将混合毒种接种９～１０日龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养）使接种鸡胚尿囊液９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，每０．１ｍｌ尿素液含ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０，ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。本试验用兔抗ＮＤＶ，ＩＢＶ血清抗体封闭相应病毒测定混合毒获得成功，本研究目的在于为制备鸡二联油乳灭活功时改进繁毒方法，降低疫苗成本。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、传染性法氏囊病三联油乳剂灭活疫苗研制及应用

用新城疫病毒（ Ｎ Ｄ Ｖ） Ｌａ Ｓｏｔａ 株、鸡传染性支气管炎病毒 （ Ｉ Ｂ Ｖ） Ｍ４ １ 株接种鸡胚, 收获含毒鸡胚尿液。用传染性法氏囊病病毒 （ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ） 地方强毒 Ｈ Ｂ９ ０ ９ 株接种３０ ～４０ 日龄肉用鸡, 发病后取囊组织 （ 或收集 Ｉ Ｂ Ｄ 典型发病鸡囊组织） 制备成含毒组织悬液。将三种病毒液按一定比例混合, 制备成三联油乳剂灭活苗。三联苗免疫１８ 日～２８ 日龄雏鸡, 免疫后２１ 天攻毒测保护力, 三种传染病保护率均在９０ ％ ～１００ ％ , Ｎ Ｄ Ｈ Ｉ抗体≥１∶３２ , Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ Ａ Ｇ Ｐ阳性率１００ ％ , Ｉ Ｂ Ｖ Ｎ 抗体≥１∶８ , 疫苗免疫期可达４ 个月以上。疫苗在４ ℃～８ ℃保存期为１８ 个月, １０ ℃～２０ ℃保存为６ 个月, 该疫苗在全省不同地区、不同品种鸡应用１５ 万羽份, 取得理想免疫效果。     

以传染性支气管炎疫苗株和比利时致肾病变异株免疫的鸡…

以传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）疫苗株和ＩＢＶ致肾病变（ＮＩＢＶ）分离株免疫鸡后，进行静脉和气雾攻毒以评价气管和肾脏的交叉保护力。以４株比利时ＮＩＢＶ分离株和意大利ＮＩＢＶ ＡＺ２３．７４株作静脉攻毒。由经比利时参考株Ｂ１６４８攻毒后于不同时间采集的气管样品表明，经血清学紧密相关的比利时ＮＩＢＶ野毒免疫的鸡的气管有较强的保护力，而经Ｈ１２０、Ｈ５２和Ｄ２７４三个疫苗株以及异源ＡＺ２３．７４株免疫的鸡     

同胚增殖鸡新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的效果观察及免疫应答反应

鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）和鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）混合在同一鸡胚中增殖,当ＮＤＶ和ＩＢＶ接种浓度控制在一定范围时,最佳收毒时间选择使ＮＤＶ有足够时间增殖到最佳滴度,且在这一时间内不至于因孵育时间过长而致ＩＢＶ毒力减弱。结果表明ＮＤＶＬａｓｏｔａ株经１０倍稀释分别与４株ＩＢＶ１０００倍稀释液等体积混合后接种,能在同一鸡胚中正常增殖,即９６ｈ收毒,血凝（ＨＡ）方法测定两种病毒的血凝价均能达到最佳滴度,其血凝价不低于各自单独增殖的滴度。４种ＩＢＶ株与ＮＤＶ同胚增殖的ＨＡ滴度进一步证实,在合适的条件下,ＩＢＶ均不对ＮＤＶ的复制产生干扰作用,４种ＩＢＶ的血凝价无明显差异。免疫试验中用同胚增殖两种病毒二联苗接种,鸡体血清中可产生抗两种病毒的ＨＩ抗体,与各自单独接种时的ＨＩ抗体水平几乎一致。本试验中制备的ＩＢ血凝抗原在４℃保存一个月,其血凝活性保持不变。ＩＢＶ微量血凝抑制（ＨＩ）试验特异性测定结果证实,用自制ＩＢＶ血凝抗原进行ＨＩ试验检测鸡ＩＢ阳性血清均能产生稳定的特异性反应,并且无交叉反应。说明ＨＩ试验是检测ＩＢＶ抗体水平的有效可行的方法。     

传染性支气管炎病毒在鸡胚成纤维细胞中适应及复制的生物学特性研究

将传染性支气管郯病毒ＩＢＶ－ＮＨ、Ｔ、Ｈ５２、Ｍ４１适应鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）,连续传代获得毒价稳定细胞适应毒并对其生物学特性进行研究。观察了ＩＢＶ致ＣＥＦ细胞病变效应的特征,测定ＴＣＩＤ５０滴度为１０６．０～１０６．０。细胞培养病毒提纯后负染置电镜下进行形态学观察,见到典型的冠状病毒粒子。病毒经胰酶处理显示出血凝特性,该血凝性能被特异性血清所抑制。表明ＣＥＦ细胞病变（ＣＰＥ）确为ＩＢＶ所致。通过对４株ＩＢＶ在ＣＥＦ细胞中最佳培养时间及繁殖量关系的摸索,证实了３６～７２ｈ释放到培养液中有活性的病毒粒子达高峰,ＴＣＩＤ５０最高可达１０７．０／ｍｌ。     

鸡马立克氏病活疫苗免疫效力比较试验

用ＨＶＴ冻干苗、ＨＶＴ细胞结合苗、ＣＶＩ９８８细胞结合苗、ＳＢ１＋ＦＣ１２６双价活疫苗、３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６双价活疫苗和Ｚ４＋ＦＣ１２６双价活疫苗等６种鸡马立克氏病（ＭＤ）疫苗免疫ＳＰＦ白来航鸡或普通伊莎鸡，用鸡马立克氏病病毒（ＭＤＶ）强毒ＧＡ株、京－１血毒以及鸡马立克氏病超强毒ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株分别攻击进行免疫效力比较试验。试验表明，ＭＤ单价苗的免疫效力强弱顺序依次是ＣＶＩ９８８、ＨＶＴ细胞结合苗和ＨＶＴ冻干苗，这３种ＭＤ单价苗均能给免疫鸡群提供有效的免疫保护力。ＳＢ１＋ＦＣ１２６、Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６等３种ＭＤ双价苗免疫效力显著高于ＭＤ单价苗，均能给免疫鸡群提供较强的免疫保护力，并能有效地抵抗ｖｖＭＤＶ－Ｍｄ５毒株的致瘤作用。Ｚ４＋ＦＣ１２６和３０１Ｂ／１＋ＦＣ１２６ＭＤ双价苗免疫效力无显著差异     

鸡传染性支气管炎病毒血凝谱

用鸡传染性支气管炎病毒标准毒株Ｈ５２、Ｍ４１、Ｔ、Ｎ１１５、ＩＢＶ６２株及国内华中（ＨＺ）、华东（ＨＤ）、华南（ＨＮ）、华北（ＨＢ）、东北（ＤＢ）及西北（ＸＢ）等地方性分离株试验,研究ＩＢＶ血凝特性。结果表明,ＩＢＶ不直接凝集鸡、牛、兔、小白鼠、仓鼠、猪、鹅、马、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞;１％胰蛋白酶３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后,可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞;１０％乙醚３７℃作用ＩＢＶ２ｈ后,可凝集鸡、牛、小白鼠、仓鼠、鹅、绵羊及人的“Ｏ”型红细胞;１％卵磷脂酶Ｃ３７℃作用ＩＢＶ４ｈ后,可凝集鸡、兔、小白鼠、仓鼠、鹅等动物红细胞。     

鸡腺胃型传染性支气管炎的诊断及病毒分离鉴定

天津市部分鸡场发生一种以病鸡极度消瘦、拉稀和死亡为主要特征的传染病,经鉴定确诊为鸡腺胃型传染性支气管炎（ＧＩＢ）,并分离出ＩＢＶ ＪＢ９７０２株,ＨＡ效价为２＾１２,ＥＩＤ５０为１０＾－６．８１／０．２ｍＬ。病毒干扰试验中,ＩＢＶ ＪＢ９７０２＋ＮＤＶ ＬｓＡｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾４～６,ＬａＳｏｔａ接种鸡胚ＨＡ效价为２＾１０～１１;用ＩＢＶ ＪＢ９７０２病毒液１：１０稀释后感染经ＩＢＶ Ｈ     

用单抗介导的荧光抗体技术检测鸡尿囊细胞内传染性支气管炎病毒的研究

用传染性支气管炎病毒Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１、ＡＲＫ、澳大利亚Ｔ株、野外分离株ＲＳ、ＲＹ及鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）、鸡传染性法氏囊病毒、鸡传染性喉气管炎病毒，减蛋综合症病毒等分别接种９日龄ＳＰＦ鸡胚，３７Ｃ孵育４８小时后，将其尿囊液离心，沉淀用ＰＢＳ悬浮，涂片，用抗ＩＢＶ单抗ＭＣ作一抗，进行间接荧光抗体检测。结果：Ｈ１２０、Ｈ５２、Ｍ４１“ＡＲＫ、Ｔ株及ＲＳ、ＲＹ均显阳性，而ＮＤＶ、ＴＢＤＶ、ＩＬＴ     

鸡传染性法氏囊病油乳剂灭活苗的研究：Ⅰ.油乳剂灭活苗制备及免疫试验

选用从四川分离的ＩＢＤＶ－ＲＹ９０１鸡胚适应毒制备油乳剂灭活苗。结果表明，以鸡胚适应１５－２０代的ＩＢＤＶ－ＲＹ９０１毒液制备的油乳剂灭菌苗可诱导鸡产生良好免疫应答，雏鸡免疫后１５天可抵抗强毒攻击，并获得保护。     

应用RT—PCR技术扩增禽传染性支气管炎病毒S1基因的研究

选择Ｓ１基因做为目的基因,运用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增１２株以非免疫鸡胚繁殖并通过超速离心浓缩的鸡胚尿囊液中的ＩＢＶ,所用引物为ＩＢＶ Ｂｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因两侧的对应序列,跨幅为１．７２ｋｂ。结果６株ＩＢＶ毒株（ＳＡＩＢ３、Ｆ、Ｄ４１、Ｈ５２、Ｈｏｌｔｅ）扩增出了长约１．７ｋｂ的Ｓ１基因片段,而另６株ＩＢＶ毒株虽经４次ＲＴ－ＰＣＲ重复后也显阴性。用ＨａｅⅢ内切酶对６个毒株的ＲＴ－ＰＣＲ产物     

兽用冻干疫苗耐热保护剂的研究：鸡传染性支气管炎冻干活疫苗耐热保护剂试

本试验以水解乳蛋白、乳糖、硫脲、多聚蛋白胨、聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰＫ９０）等为主要材料，配Ａ组保护剂，并加Ｂ组保护剂（国内常规的蔗糖脱脂乳）和Ｃ组保护剂（国外疫苗保护剂）分别与鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ Ｈ１２０、Ｈ５２、ＨＫ肾型）弱毒原液，按一定比例配苗，采取特定的冻干曲线制备的试验疫苗，在不同温度下保存后测定效价变化情况。试验证实，Ａ组保护剂耐热保护性能最好，在２～８℃条件下有效保存期达２年以上，达到国外同类产品水平。     

应用RT-PCR技术扩增禽传染性支气管炎病毒S_1基因的研究

选择Ｓ１基因做为目的基因,运用ＲＴ－ＰＣＲ技术分别扩增１２株以非免疫鸡胚繁殖并通过超速离心浓缩的鸡胚尿囊液中的ＩＢＶ,所用引物为ＩＢＶＢｅａｕｄｅｔｔｅ株Ｓ１基因两侧的对应序列,跨幅为１．７２ｋｂ。结果６株ＩＢＶ毒株（ＳＡＩＢ３、Ｆ、Ｄ４１、Ｍ４１、Ｈ５２、Ｈｏｌｔｅ）扩增出了长约１．７ｋｂ的Ｓ１基因片段,而另６株ＩＢＶ毒株虽经４次ＲＴ－ＰＣＲ重复后也显阴性。用ＨａｅⅢ内切酶对６个毒株的ＲＴ－ＰＣＲ产物进行酶切,结果显示Ｍ４１、Ｈ５２、Ｄ４１３个ＩＢＶ毒株的Ｓ１基因包含两个ＨａｅⅢ位点,Ｆ株与Ｈｏｌｔｅ株Ｓ１基因包含１个ＨａｅⅢ位点,而ＳＡＩＢ３株Ｓ１基因则已丢失ＨａｅⅢ位点。实验结果表明：运用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测ＩＢＶ时,由于Ｓ１基因的核酸序列具有较高的变异率,因此Ｓ１基因不宜做为目的基因。     

法氏囊病毒感染对肉鸡内分泌机能的影响

用鸡传染性法氏囊病毒（ＩＢＤＶ）弱毒疫苗免疫和强毒感染艾维菌鸡，采用放射免疫分析法（ＲＩＡ）测定血浆甲状腺素（Ｔ３，Ｔ４）、促肾上腺皮质素（ＡＣＴＨ）和皮质酮（Ｆ）来研究ＩＢＤＶ感染对肉鸡内分泌机能的影响。结果表明：ＩＢＤＶ弱毒疫苗免疫使肉鸡产生高效价抗体，血浆ＡＣＴＨ含量升高；ＩＢＤＭ强毒感染导致肉鸡血浆Ｔ２、Ｆ急剧升高，法氏囊肿大，血清中也出现ＩＢＤＶ抗体，但效价显著低下；而ＩＢＤＶ强毒感染曾     

延长鸡传染性支气管炎H_（52）、H_（120）冻干疫苗保存期的试验

延长鸡传染性支气管炎Ｈ_（５２）、Ｈ_（１２０）冻干疫苗保存期的试验付丽杰，丁国义，冯立秋（黑龙江省生物制品一厂·哈尔滨·１５００６９）按现行《规程》规定，鸡传染性支气管炎弱毒冻干苗的保存期暂定为一年．为了进一步了解该疫苗在－１５℃以下的保存时间，我们...     

鸡传染性法氏囊病强毒筛选和初步分离鉴定

四群经鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）弱毒疫苗免疫的鸡群，在爆发ＩＢＤ期间，采集有肉眼病变的法氏囊组织，匀浆后攻击ＩＢＤ易感鸡。结果表明ＮＨ９１４为ＩＢＤＶ强毒。ＨＮ９１４以鸡胚和细胞上传了４代，将鸡胚２代毒回归易感伊莎鸡，可引起发病和死亡。