博落回主要功能成分及其在动物生产中的应用

博落回[Macleaya cordata (willd.) R.Br.]又名"号筒杆",是罂粟科博落回属的多年生草本植物。博落回富含生物碱资源,其主要功能活性成分为血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱等异喹啉类生物碱,具有抗微生物、抗炎、抗氧化、杀虫、抗病毒、抗肿瘤等多种生物学活性。文章通过对博落回主要功能成分血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱等异喹啉类生物碱的抗微生物、抗炎、抗氧化、改善肠道健康等生物学活性及其在动物生产中的应用进行综述,以期为博落回功能成分的开发和应用提供参考。     

博落回中四种生物碱的薄层鉴别研究

建立博落回药材中四种生物碱的薄层色谱(TLC)鉴别方法。开展利用二甲苯-甲醇(5∶1)展开剂分离鉴别博落回中的原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱;利用氯仿-二甲苯-甲醇-氨水(50∶10∶1∶0.1)展开剂分离鉴别博落回中血根碱和白屈菜红碱;利用环己烷-丙酮(3∶2)展开剂分离鉴别博落回中原阿片碱和别隐品碱的系统研究。结果表明建立的薄层方法简便,准确和稳定,可以用于控制博落回药材的质量。     

博落回生物活性物质药理学研究进展

文章总结了博落回生物中4种主要生物碱[血根碱(SAN)、白屈菜红碱(CHE)、别隐品碱(ALL)、原阿片碱(PRO)]及2种代谢物[二氢血根碱(DHSA)、二氢白屈菜红碱(DHCHE)]的药理、毒理及药代动力学和药物残留研究,以期全面了解6种生物碱的药理学特征,为深入挖掘博落回活性物质在养殖生产中的潜在应用提供依据。     

博落回的有效成分及其提取物在畜禽生产中的应用

博落回的主要功能性成分为血根碱、白屈菜红碱、原阿片碱、别隐品碱等异喹啉类生物碱。以血根碱和白屈菜红碱为主要成分的博落回提取物已经被批准作为饲料添加剂使用。博落回提取物应用在畜禽生产中能够提高畜禽生产性能、改善肠道功能、提高抗氧化水平,并具有抗炎、抗菌、抗寄生虫等功能。文章对博落回的有效活性成分进行介绍,并探讨其提取物在畜禽生产中的应用效果。     

二氢血根碱和二氢白屈菜红碱在鸡肌肉中的定量检测方法

建立了一种用于同时测定鸡肌肉中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的UPLC-MS/MS方法。肌肉样品经乙腈-水(95∶5)溶液超声提取后,离心取上清液经脱脂后氮吹浓缩,甲醇复溶。采用Agilent Poroshell 120 EC-C18(2.1mm×150mm i.d.,2.7μm)色谱柱分离,采用正离子化模式下的多反应监测模式进行测定。方法的特异性良好,二氢血根碱和二氢白屈菜红碱在0.2~200μg/L质量浓度范围内线性关系良好(r2≥0.999 6),最低定量限均为0.4μg/kg,平均回收率分别为103.44%和104.36%,准确度RE均≤10.49%,精密度RSD均≤7.43%。该方法应用于长期饲喂博落回散的健康雌性白羽肉鸡的鸡胸肌组织中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的残留量检测,在500mg/kg博落回散组测得DHSA残留量为0.804μg/kg。该方法灵敏度高,重复性好,适用于鸡肌肉中二氢血根碱和二氢白屈菜红碱的残留定量检测。     

博落回生物碱对烟草黑胫病的抑制作用

为了研究博落回总生物碱、总生物碱盐、血根碱、白屈菜红碱对烟草黑胫病菌的抑制效果,试验分别用博落回总生物碱、总生物碱盐、血根碱对烟草黑胫病菌处理5d。结果表明:博落回总生物碱、总生物碱盐、血根碱的半数效应浓度分别为22.49,16.22,21.38μg/mL;博落回总生物碱、总生物碱盐320μg/mL药液抑制率分别为77.42%、86.54%,血根碱、白屈菜红碱40μg/mL药液抑制率分别为62.54%、32.60%。说明博落回总生物碱、总生物碱盐对烟草黑胫病菌抑制效果较明显,血根碱一般,白屈菜红碱较差。     

博落回中6种生物碱对大鼠和猪醌氧化还原酶2的作用研究

为了研究博落回中6种主要生物碱别隐品碱、原阿片碱、血根碱、白屈菜红碱、二氢血根碱和二氢白屈菜红碱对大鼠和猪肝胞液醌氧化还原酶2(NQO2)的影响,初步筛选出对大鼠或猪NQO2具有诱导或抑制作用的生物碱,探讨其在畜禽体内的代谢机制,建立了大鼠和猪NQO2体外孵育体系,以槲皮素为阳性对照,噻唑蓝(MTT)为底物,阳性对照物和待测化合物分别与空白组肝胞液孵育,初步筛选出具有诱导或抑制作用的生物碱。结果显示:博落回中的6种主要生物碱对大鼠和猪NQO2的抑制类型均是可逆性反竞争性抑制,其中原阿片碱和血根碱对大鼠和猪肝胞液NQO2具有较强的抑制作用;原阿片碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为29.26、93.84和18.35μmol·L~(-1),半数抑制浓度(IC_(50))分别为(39.80±2.42)、(203.65±0.20)和(309.20±0.83)μmol·L~(-1);血根碱对雄性大鼠、雌性大鼠和猪NQO2的抑制常数分别为54.87、23.34和151.3μmol·L~(-1),IC_(50)分别为(160.67±5.77)、(148.00±6.62)和(118.25±0.11)μmol·L~(-1);别隐品碱和二氢白屈菜红碱对雌性大鼠NQO2无抑制作用,二氢血根碱对猪NQO2的抑制作用非常微弱。研究结果为博落回中原阿片碱和血根碱的临床应用提供了一定的理论基础。     

超声波辅助优化博落回根原阿片碱、别隐品碱提取工艺的研究

试验旨在使用超声波辅助优化博落回根原阿片碱、别隐品碱的提取工艺。采用单因素试验筛选提取工艺中的时间、液料比、提取次数的最佳条件，通过正交试验确定最佳提取条件；采用硅胶层析纯化原阿片碱、别隐品碱，使用液相色谱、红外光谱、紫外光谱表征所得产物。结果显示，液料比30 mL/g、提取1次、提取时间为30 min时，原阿片碱、别隐品碱提取率最高，分别为92.64%、90.93%。表征结果显示，提取物经柱层析纯化所得物质确定为别隐品碱和原阿片碱。研究表明，试验所用方法简单、快速，可为博落回资源的利用提供参考。     

兽用原料药博普总碱的HPLC特征谱图的建立

建立HPLC特征谱图控制兽用原料药博普总碱的质量。HPLC 特征谱图包含4个特征峰，用对照品定性鉴别4个特征峰分别为原阿片碱、别隐品碱、血根碱和白屈菜红碱。考察检测波长、流动相条件、柱温、流速、色谱柱品牌对各特征峰相对保留时间的影响，确定优化后的高效液相条件，并具有良好的精密度、稳定性和重复性。分析15批博普总碱原料药的液相图谱，样品的相似度均大于0.95，并对特征峰的相对保留时间进行了规定，为原料药博普总碱质量控制提供了依据。     

斜茎黄芪生物碱成分GC-MS分析

采用生物碱系统提取、薄层色谱和GC-MS分析技术,研究斜茎黄芪生物碱成分.结果表明,4.5 kg斜茎黄芪得到酸性和碱性氯仿部分生物碱分别为5.4g和3.6g,提取率为1.3％和0.8％；薄层色谱分析,酸性和碱性氯仿部分生物碱分别在氯仿∶甲醇=15∶1(Ⅴ∶ Ⅴ)和甲醇∶氨水=10∶1(Ⅴ∶Ⅴ)展开体系展开效果最佳,均呈现5个显色斑点；GC-MS分析,酸性和碱性氯仿部分各鉴定出7种生物碱,酸性氯仿部分以别隐品碱(34.84％)、原阿片碱(31.36％)和坎那定(21.46％)含量较高,碱性氯仿部分以别隐品碱(71.74％)、Oxyhydrostinine (7.45％)和坎那定(5.35％)含量较高.斜茎黄芪含有生物碱,且以别隐品碱、原阿片碱、坎那定碱和Oxyhydrostinine为主.     

高效液相色谱法同时测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量

建立了高效液相色谱法测定博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱含量的方法。采用Agilent 1260型高效液相色谱仪,配二极管阵列检测器(PDA),色谱柱为waters SymmetryC18(4.6mm×250mm,5μm),柱温:35℃,流速为:1.0mL/min,流动相:乙腈-三乙胺溶液=25∶75(磷酸调pH值至2.5),检测波长270nm。结果表明:血根碱在0.5~100μg/mL范围内线性关系良好(R^2=1.000),平均回收率(n=6)为98.21%,RSD为1.76%;白屈菜红碱在0.25~50μg/mL范围内线性关系良好(R^2=1.000),平均回收率(n=5)为98.77%,RSD为0.83%。本方法简便快捷,可用于博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的含量测定。     

牛至油博落回口服液的研制及体外抑菌活性测定

【目的】 研制牛至油博落回口服液, 并测定其体外抑菌活性及其主要成分的联合抑菌效果, 为临床用药提供理论依据。【方法】 通过预试验和Box-Behnken响应面法优化处方; 采用高效液相色谱法测定口服液主要成分含量; 采用滤纸片法测定口服液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌的抑菌圈直径; 采用试管二倍稀释法测定口服液、5%牛至油溶液及1%博落回溶液对4种细菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC); 采用微量棋盘稀释法对5%牛至油溶液与1%博落回溶液进行体外联合药敏试验。【结果】 牛至油博落回口服液最优配方为: 5%牛至油, 1%博落回提取物, 25%增溶剂聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油, 0.02%抗氧化剂2, 6-二叔丁基对甲酚(BHT), 余量为水。口服液中香芹酚的含量为42.59 mg/mL, 血根碱含量为6.51 mg/mL。口服液对4种菌的抑菌圈直径分别为16.9、16.4、23.7和17.0 mm, MIC分别为3.125、3.125、1.5625和1.5625 μL/mL, MBC分别为12.5、6.25、3.125和3.125 μL/mL; 5%牛至油溶液对4种菌的MIC分别为25、12.5、6.25和100 μL/mL, MBC分别为100、50、25和>200 μL/mL; 1%博落回溶液对4种菌的MIC分别为6.25、12.5、3.125和6.25 μL/mL, MBC分别为50、25、6.25和25 μL/mL。联合药敏试验表明, 二者联合用药对大肠杆菌、沙门氏菌起相加作用, 对金黄色葡萄球菌无作用, 对粪链球菌为协同作用。【结论】 试验制备了牛至油博落回口服溶液剂, 该制剂对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和粪链球菌具有良好抑制作用。     

UPLC-MS/MS法检测动物性食品中肝脏、肾脏组织中氯霉素残留量

建立了动物性食品中肝脏、肾脏组织氯霉素残留检测的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS／MS）分析方法。样品用β-葡萄糖醛酸苷酶酶解后乙酸乙酯提取,C18（500mg／3cc）固相萃取柱净化,液相色谱-串联质谱负离子模式测定,内标法定量。结果表明：氯霉素在0．5～10．0ng／mL的系列浓度范围内均呈良好线性关系,相关系数r均大于0．990。样品中氯霉素的检测限为0．1μg／kg,定量限为0．2μg/kg。本方法氯霉素在0．2、0．4、2μg／kg的添加浓度范围内,平均回收率均为70％～120％,相对标准偏差（RSD）均小于20％。该方法具有操作简便快捷、结果灵敏度高、准确度高等优点。     

液质联用法检测禽蛋中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留

建立了超高效液相色谱串联质谱法检测禽蛋中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留物的方法。采用电喷雾离子源（ESI）、多反应监测（MRM）、正负离子模式同时扫描检测,内标法定量。禽蛋试样采用碱化乙酸乙酯和乙腈提取,正己烷萃取,LC/MS-MS分析。结果表明,该方法的检测限（LODs）为0.1 μg/kg,定量限（LOQs）为0.2 μg/kg。在0.2~200 μg/L范围内均呈良好线性关系,并且3个添加浓度的平均回收率范围为70%~110%,相对标准偏差（RSD）小于10%。该方法简便高效、准确可靠,可作为禽蛋中氟苯尼考和氟苯尼考胺残留的检测方法。     

QuEChERS-超高效液相色谱-串联质谱法测定牛乳中6种农药残留

建立超高效液相色谱-串联质谱法检测牛乳中6种农药残留量的方法.用乙腈对牛乳进行提取,应用QuEChERS方法进行净化处理,氮吹后复溶,采用C18色谱柱梯度洗脱方式进行液相色谱分离,乙腈和体积分数0.1％甲酸-水溶液为流动相,采用电喷雾离子源正离子模式、多反应监测模式进行检测,外标法定量.结果表明:在1.0～40.0μg...     

液相色谱-串联质谱法检测猪血浆中除虫脲的方法学研究

【目的】考察口服灭蝇蛆药除虫脲（diflubenzuron，DFB）预混剂灌服给药后，在猪体内的药代动力学特征，建立猪血浆中除虫脲浓度的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）检测方法。【方法】以除虫脲-¹³C₆（DFB-¹³C₆）为内标，血浆样品经甲醇沉淀蛋白，离心后取上清液减压浓缩至干，甲醇-水（1∶1）复溶后进行分析。色谱柱为ZORBAX Eclipse Plus C18柱；流动相为甲醇-0.1%甲酸水（含5 mmol/L甲酸铵），进行梯度洗脱；流速为0.4 mL/min；柱温为35 ℃；进样量为10 μL。电喷雾离子源，正离子模式，多离子反应监测模式检测，DFB及内标的定量离子对分别为m/z 311.1→158.1和m/z 317.1→158.1。对色谱和质谱条件优化后，考察该方法的专属性、定量下限、基质效应、线性范围、准确度、精密度和样品稳定性等。【结果】所建立的方法灵敏度高，检测限为0.5 ng/mL，定量限为1 ng/mL；基质效应对样品的检测影响较小；标准溶液在1~1 000 ng/mL的浓度范围内，线性关系良好（R²≥0.998）；在定量下限1 ng/mL及低（2 ng/mL）、中（100 ng/mL）、高浓度（800 ng/mL）的添加水平下，平均准确度在97.78%~115.06%之间，批内、批间变异系数均<10%，符合方法学要求。在考察的条件下，标准溶液、空白血浆加标样品及处理后的样品，稳定性良好；但应避免样品的反复冻融。【结论】建立的LC-MS/MS检测方法简便、专属性强、灵敏度高、准确可靠，可用于猪血浆中除虫脲浓度的检测，进而应用于除虫脲预混剂在猪体内的药代动力学研究。     

高效液相-串联质谱法测定鸡肉中泰妙菌素残留的研究

建立了固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法测定鸡肉中泰妙菌素残留的分析方法。试样经磷酸盐缓冲液(pH8.0)-乙酸乙酯混合提取,经水饱和正己烷除脂后,过MCX固相萃取小柱净化,采用HPLC-MS/MS电喷雾电离正离子扫描,多反应监测模式(MRM)检测,内标法定量。泰妙菌素在0.5~50μg/L的浓度范围内呈现良好的线性关系,相关系数R2大于0.999。其检测限为0.25μg/kg,定量限为0.5μg/kg。     

PRIME HLB固相萃取/超高效液相色谱-串联质谱法测定乳制品中头孢菌素类药物残留

建立牛乳、酸乳和乳粉3 种基质乳制品中采用超高效液相色谱-串联质谱（ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS）同时检测4 种头孢菌素类药物残留的方法。以5%甲酸乙腈溶液进行提取,经Oasis PRIME HLB固相萃取柱净化,氮吹后复溶,采用电喷雾离子源正离子模式及多反应监测模式进行检测。结果表明：牛乳和酸乳中头孢氨苄、头孢匹林、头孢洛宁和头孢喹肟的定量限为4 μg/kg,乳粉中为32 μg/kg     

超高效液相色谱-串联质谱法测定牛奶中的赛拉嗪残留

采用乙腈提取,HLB固相萃取柱净化、超高效液相色谱-串联质谱测定,建立了一种简单、快速的牛奶中赛拉嗪残留的检测方法.对样品的提取、净化过程进行了优化改进,经ACQUITY UPLCTM BEH C18色谱柱分离,正离子电喷雾电离串联质谱测定,牛奶中赛拉嗪的检测限为0.2 μg/kg,定量限为0.5μg/kg.选取0.5...