免疫过氧化物酶法快速检测牛病毒性腹泻—粘膜病病毒抗原

用间接免疫过氧化物酶法（ＩＩＰ），对非细胞致病性牛病毒性腹泻－粘膜病（ＢＶＤ－ＭＤ）病毒持续感染的４２头牛血清经牛胎儿肌细胞培养检出了ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，１００头外观健康牛的血清，经牛胎儿肌细胞培养未检出ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，该结果与用干扰法获得的结果一致。而且用ＩＩＰ在血沉标黄层涂片中也检出了ＢＶＤ－ＭＤ病毒抗原，用亲和系－生物素过氧化物酶复合物方法在福尔马林固定的组织切片中也检出了ＢＶＤ－Ｍ     

牦牛病毒性腹泻／粘膜病防制中间试验

从１９９１￣１９９３年，应用牛病毒性腹泻／粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）Ｏ系弱毒冻干苗６０万头份对我省青南地区玉树、称多、泽库三个ＢＶＤ／ＭＤ发病严重的县进行了大面积的预防注射，调者被注射牛７６７９７头；同时在该地区应用猪瘟弱毒苗预防注射牛２０万头份，调查被注射牛４８０００头。试验结果：应用ＢＶＤ／ＭＤ Ｏ系弱毒冻干苗使牦牛ＢＶＤ／ＭＤ死亡率由６．６１％降至０．２４％，应用猪瘟弱毒苗亦对该病有较好的防制效     

用琼脂扩散试验检测牛血清BVD／MD抗体

用琼脂扩散试验检测牛血清ＢＶＤ／ＭＤ抗体陈茂盛，寇改霞（西安动植物检疫局，陕西７１００６８）牛病毒性腹泻一粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）是世界各养牛发达国家中危害养牛业的主要传染病。利用中和试验检测血清抗体是进行牛群ＢＶＤ／ＭＤ流行病学调查的公认手段。琼脂扩...     

牛病毒性腹泻病毒现地分离株与疫苗株的抗原差异

用单克隆抗体（ＭＡｂ）作酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）、免疫荧光试验（ＩＦＡ）、病毒中和（ＶＮ）试验及兔疫沉淀试验证明了牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）致细胞病变株８７－２５５２（现地分离）与ＮＡＤＬ和Ｓｉｎｇｅｒ（原型株）之间的抗原差异。两个抗ＢＶＤＶ８７－２５５２株的ＭＡｂ（Ｄ１１和Ｂ７）能强烈中和现地分离株，并对该病毒的４８－ＫＤａ糖蛋白呈特异性。这两个ＭＡｂ有不同的亚型，Ｄ１１为免疫球蛋白Ｇ１     

犊牛睾丸细胞用于犊牛血清BVD/MD抗体检测的可行性探讨

用犊牛睾丸细胞和牛肾细胞，ＢＴ细胞，通过中和试验分别做犊牛血清牛病毒性腹泻／粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）抗体的检测，检测了４１批犊牛血清样品，结果一致性较好，用犊牛睾丸细胞血清（ＢＶＤ／ＭＤ）抗体检测是可行的。     

马立克氏病病毒糖蛋白B基因克隆及其在家蚕细胞中的表达

将马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ＧＡ株基因文库中的ＢａｍＨＩＩ３和Ｋ３克隆质粒分别用双酶切消化，获得２．８ｋｂ的ＢａｍＨＩ－ＳａｌⅠ片段和１．１ｋｂ的ＢａｍＨＩ－ＥｃｏＲＩ片段，然后将这２个片段定向克隆于载体ｐＵＲ２２２中，构建了含ＭＤＶ糖蛋白Ｂ（ｇＢ）基因的重组质粒。为了基因操作方便和高效表达，设计了１对带有酶切位点的引物，用ＰＣＲ扩增了ＭＤＶｇＢ基因部分片段，并按正确方向插入去磷酸化的载体质粒中，得到起始密码子前带有ＥｃｏＲＩ酶切位点的ＭＤＶｇＢ基因克隆，再将该基因插入去磷酸化的家蚕核型多角体病毒（ＢｍＮＰＶ）转移载体ｐＢＦ１４中，ＤＮＡ序列分析确证了克隆基因及阅读柜架的正确性。以重组转移载体与野生型ＢｍＮＰＶ共转染家蚕细胞，用有限稀释法点杂交结合空斑技术纯化重组病毒。用荧光抗体试验检查重组病毒感染的家蚕细胞，可见感染细胞的胞浆及胞膜出现强荧光反应     

安徽、江苏、广西部分地区水牛牛病毒性腹泻/粘膜病血清学监测

用微量细胞中和试验,对安徽、江苏和广西的１２个县部分水牛群血清样品（ｎ＝３４３）牛病毒性腹泻／粘膜病（ＢＶＤ／ＭＤ）中和抗体进行检测。结果从１０个县的血清中检出了ＢＶＤ／ＭＤ抗体,其中安徽水牛血清（ｎ＝１５０）ＢＶＤ／ＭＤ抗体平均阳性检出率为２４．２％（范围１０％～４６．７％）,江苏（ｎ＝１４３）ＢＶＤ／ＭＤ平均阳性检出率为８．４％（０％～１１．１％）,广西（ｎ＝５０）ＢＶＤ／ＭＤ平均阳性检出率为１０．０％（０％～１５．４％）。本调查说明我国水牛群中ＢＶＤ／ＭＤ流行在扩大。     

多价荧光抗体监测外源病毒污染的研究

用猪瘟病毒（ＨＣＶ）、猪细小病毒（ＰＰＶ），牛病毒性腹泻／粘膜病病毒（ＢＶＤ／ＭＤＶ），伪狂犬病病毒（ＰｒＶ），兰舌病病毒（ＢｔＶ），羊口疮病毒（ＯＶ）等六种病毒，多次同时或先后强化免疫猪，制取六价高免血清；用狂犬病病毒（ＲＶ）免疫兔，制取ＲＶ单价高免血清，分别用异硫氰酸荧光素（ＦＩＴＣ）标记制成荧光抗体（ＦＡ），并按二者最佳染色价配制成七价（多价）ＦＡ。由于各病毒在其宿主细胞中复制部位和与宿主细     

鹿感染牛病毒性腹泻－粘膜病病毒的调查

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ对吉林省某地区育成梅花鹿、育成马鹿及马鹿感染牛病毒性腹泻－粘膜病病毒（ＢＶＤ－ＭＤＶ）进行了调查．结果育成梅花鹿的带毒率为３４．１％（２８／８２）；育成马鹿的带毒率为１９，６％（１８／９２）；马鹿带毒率为４４．４％（８／１８）。应用电子显微镜对部分ＥＬＩＳＡ阳性及阴性样品进行负染观察、结果ＥＬＩＳＡ阳性样品中均见有ＢＶＤ－ＭＤＶ粒子．ＥＬＩＳＡ阴性样品中均未观察到ＳＶＤ－ＭＤＶ粒子．本试验结果表明，鹿也可感染ＢＶＤ－ＭＤＶ，其在流行病学中的意义有待于进一步研究。     

双抗体夹心ELISA检测牛病毒性腹泻病毒的研究

建立了从粪便中检测牛病毒性腹泻（ＢＶＤ）病毒抗原的双抗体夹心ＥＬＩＳＡ。试验方法的最佳工作条件为，抗体包被量为１００μｇ／孔，酶标抗体的浓度为１：４００。对不同地区牛、羊、鹿粪样检测结果，牛的ＢＶＤＶ感染率为１６．５％￣８９．０％，羊为１４．６％￣８３．３％，鹿为１９．６％￣４４．４％，并且从许多地区的牛、羊同时检测到ＢＶＤＶ，表明本病在国内某些地区存在着严重的感染。