淫羊藿对鸡肝脏和胸肌中部分矿物元素含量的影响

为了探讨饮用淫羊藿浓缩物对青脚麻鸡肝脏与胸肌部分矿物元素沉积的影响,试验将400只2周龄青脚麻鸡随机分成4组,每组100只,对照组、淫羊藿低浓度组、淫羊藿中浓度组、淫羊藿高浓度组鸡的饮水中淫羊藿的添加量分别为0 g/L、0.5 g/L、1 g/L、2 g/L,试验期为6周。试验结束时各组随机抽取8只鸡,心脏采血处死,测定肝脏和胸肌中部分矿物元素的含量。结果表明:与对照组比较,淫羊藿各剂量组鸡肝脏中的铁、磷和高浓度组鸡肝脏中镁的含量均极显著下降(P0.01),淫羊藿各剂量组鸡肝脏中的锌和淫羊藿高浓度组鸡肝脏中钙的含量均极显著升高(P0.01);淫羊藿各剂量组鸡胸肌中的铁、锌和淫羊藿中、高浓度组鸡胸肌中钙、镁的含量均极显著或显著升高(P0.01,P0.05),而磷含量均极显著下降(P0.01);钾含量仅淫羊藿高浓度组下降(P0.05)。说明淫羊藿能明显降低鸡肝脏中铁、镁、磷的沉积,而促进锌、钙的沉积;同时促进胸肌中铁、镁、锌、钙的沉积,降低钾、磷的沉积。     

响应曲面法优化淫羊藿黄酮提取工艺

在单因素试验基础上,采用响应面法的(Box-Benhnken)组合设计原理,对淫羊藿总黄酮的提取工艺参数进行优化。淫羊藿总黄酮的最佳提取工艺条件为:提取时间1.73 h、水料比31∶1(mL/g),温度67.5℃、乙醇浓度79%,淫藿黄酮类化合物的平均提取率为2.054%,比理论预测值高0.08%。     

淫羊藿提取物内控方法初探及初步饲喂试验

为了建立淫羊藿提取物内控方法并摸索临床饲喂剂量,试验利用水提法制作淫羊藿提取物,用薄层色谱法鉴别淫羊藿苷;用高效液相色谱法检测淫羊藿苷含量;在妊娠母猪饲料中添加低剂量(500 g/t饲料)、中剂量(1 000 g/t饲料)、高剂量(1 500 g/t饲料)淫羊藿提取物,在妊娠期使用14 d,并设立对照组,在母猪分娩后统计母猪分娩率、活仔数、仔猪初生重等,分析淫羊藿提取物对母猪生产性能的影响。结果表明:薄层色谱法所得荧光斑点对应整齐且明显;高效液相色谱法所得线性回归方程为y=10 930x+95 789,R~2=0.990 6,检测设备精密度RSD为0.35%,检测方法重复性的RSD为1.5%,检测样品中淫羊藿苷的含量为1.0 mg/g;饲喂试验低、中、高剂量组的活仔数显著高于对照组(P0.05),饲喂试验中剂量组和高剂量组初生重显著高于对照组(P0.05),而中剂量组和高剂量组初生重差异不显著(P0.05),低剂量组初生重虽然高于对照组,但差异不显著(P0.05)。说明薄层色谱法可以作为淫羊藿提取物质量控制的方法之一;高效液相色谱法检测淫羊藿提取物中淫羊藿苷含量的方法可以为其在生产加工和临床应用中提供数据支持;淫羊藿提取物作为饲料添加剂可以改善母猪生产性能,建议添加剂量为1 000 g/t。     

β-谷甾醇、淫羊藿苷对猪精子体外获能效果的影响

探讨中药单体成分β-谷甾醇(β-sitosterol)、淫羊藿苷(Icariin,Ica)对猪精子体外获能的影响,以期提高体外受精效果.以mTBM+肝素获能液为对照组,分别添加β-谷甾醇、淫羊藿苷的低、中、高3个剂量为试验组,利用金霉素荧光染色(chlortetracycline,CTC)法结合体外受精检验体外获能效果.在mTBM+肝素中添加β-谷甾醇2(中剂量0.08 mg/L)、淫羊藿苷2(中剂量17 mg/L)的B型精子率(获能精子)显著高于对照组和其他剂量组(P＜0.05),F型精子率(未获能精子)显著低于对照组和其他剂量组(P＜0.05),AR型精子率(发生顶体反应精子)与对照组和其他剂量组差异不显著(P0.05),卵裂率和囊胚率均极显著高于对照组和其他剂量组(P＜0.01);表明中药单体成分β-谷甾醇、淫羊藿苷能够显著促进猪精子体外获能效果.     

沙冬青种子总黄酮提取纯化与急性毒性及抗氧化活性研究

本研究旨在探讨沙冬青种子总黄酮的提取纯化、急性毒性和抗氧化活性等特性。采用超声辅助提取法提取纯化沙冬青种子总黄酮,用AlCl_3-CH_4O显色法进行沙冬青种子总黄酮含量测定;对纯化后沙冬青种子总黄酮进行急性毒性试验;采用体外Fenton体系产生羟基自由基(·OH)和邻苯三酚自氧化法产生超氧自由基(O^-_2),检测沙冬青种子总黄酮对·OH和O^-_2的清除作用;测定沙冬青种子总黄酮对衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮含量测定方法的精密度(RSD=0.78%)、重复性(RSD=0.52%)、稳定性(RSD=0.65%)、回收率(99.140%)均在误差范围内,提取纯化后沙冬青种子总黄酮含量达86.780%。沙冬青种子总黄酮属于无毒化合物,并对·OH和O^-_2具有良好的清除能力,在总黄酮作用剂量为1 250μg/mL时,对·OH和O^-_2的清除率分别达96.45%和50.39%。与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著提高小鼠血清SOD活力(P<0.01),其中,在150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组,小鼠血清SOD活力高达102.42 U/mL。此外,与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著降低小鼠血清中MDA含量(P<0.01),以150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组降低效果最明显。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮具有良好的自由基清除能力和抗氧化活性,从而有效改善和提高机体免疫力。     

半仿生法提取淫羊藿补骨脂对小白鼠的激素样作用试验研究

为了探讨半仿生法提取中药淫羊藿、补骨脂对白鼠的性激素样作用，将中药淫羊藿、补骨脂用半仿生法提取和常规水煎提取，并用器官重量法对未成熟小白鼠进行性激素样作用探讨。结果表明：淫羊霍、补骨脂均有性激素样作用，试验组与阴性对照组相比，有权显著差异(p＜0．01);半仿生提取法摄取的药液比常规水煎液效果好。     

紫外分光光度法测定不同粒径淫羊藿中总黄酮的溶出量

为了解不同粒径淫羊藿与淫羊藿总黄酮溶出量之间的关系,试验采用紫外分光光度法,在270 nm波长下进行测定。结果表明:2.5~25.0μg/mL淫羊藿苷与吸光度呈良好的线性关系(R2=0.996 8),相对标准偏差(RSD)为2.08%,平均回收率为97.45%~99.60%,不同粒径淫羊藿中总黄酮的溶出量随粒径的变小而增加,但当粒径达100目后,淫羊藿总黄酮的溶出量不再随粒径的减小而增加。     

响应面法对磷酸化淫羊藿多糖制备工艺的研究

采用混合磷酸盐法制备磷酸化淫羊藿多糖,再以磷酸化淫羊藿多糖磷酸根含量为考察指标,通过响应面法对工艺的提取参数进行优化,研究了修饰条件中反应温度(A)、反应时间(B)和反应p H值(C)3个因素对磷酸化多糖磷酸根含量的影响,建立了回归模型,验证了其有效性,并分析了主效应和因素交互作用。结果表明:反应温度、反应时间和反应p H值对磷酸化淫羊藿多糖磷酸根含量的影响显著,并且两两因素间存在一定的交互作用;影响磷酸化淫羊藿多糖的工艺因素按主次顺序排列为:反应温度反应时间反应p H值;磷酸化淫羊藿多糖的最佳工艺为:三聚磷酸钠与三偏磷酸钠比例为5∶2,反应温度97℃,反应时间2.8 h,反应p H 8.7,在此条件下,磷酸化淫羊藿多糖磷酸根含量为(6.012±0.021)%。     

中药多糖对人工感染大肠杆菌和金黄色葡萄球菌小鼠的免疫增强作用研究

目的:通过测定感染大肠杆菌或金黄色葡萄球菌小鼠服用黄芪多糖、淫羊藿多糖前后的IgG水平、脾脏指数等,探讨黄芪多糖、淫羊藿多糖对小鼠免疫功能的影响。方法:大肠杆菌组:设有空白对照组、黄芪多糖组、淫羊藿多糖组、黄芪-淫羊藿多糖组、黄芪多糖大肠杆菌组、淫羊藿多糖大肠杆菌组、黄芪-淫羊藿多糖大肠杆菌组、空白大肠杆菌组,取80只昆明白雌鼠,平均分为8组,每组10只。金黄色葡萄球菌组的分组同大肠杆菌组。实验期为8 d,分别于第1、4、7天进行腹腔注射,最后一次腹腔注射完毕24 h,处死小鼠,测定体质量、脾脏质量,计算脾脏指数,观察小鼠免疫器官质量的变化;用ELISA法检测小鼠血清中IgG水平的变化。结果:黄芪-淫羊藿多糖金黄色葡萄球菌组比空白金黄色葡萄球菌组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05),黄芪-淫羊藿多糖组比空白对照组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05);黄芪多糖大肠杆菌组、淫羊藿多糖大肠杆菌组比空白大肠杆菌组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05),黄芪-淫羊藿多糖组比空白对照组小鼠血清中IgG含量显著提高(P0.05);黄芪多糖组、黄芪-淫羊藿多糖大肠杆菌组、黄芪多糖金黄色葡萄球菌组均能够增加小鼠免疫器官质量。结论:黄芪多糖、淫羊藿多糖对小鼠具有免疫增强作用。     

沙冬青种子总黄酮提取纯化与急性毒性及抗氧化活性研究

本研究旨在探讨沙冬青种子总黄酮的提取纯化、急性毒性和抗氧化活性等特性。采用超声辅助提取法提取纯化沙冬青种子总黄酮,用AlCl_3-CH_4O显色法进行沙冬青种子总黄酮含量测定;对纯化后沙冬青种子总黄酮进行急性毒性试验;采用体外Fenton体系产生羟基自由基(·OH)和邻苯三酚自氧化法产生超氧自由基(O~-_2),检测沙冬青种子总黄酮对·OH和O~-_2的清除作用;测定沙冬青种子总黄酮对衰老小鼠血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮含量测定方法的精密度(RSD=0.78%)、重复性(RSD=0.52%)、稳定性(RSD=0.65%)、回收率(99.140%)均在误差范围内,提取纯化后沙冬青种子总黄酮含量达86.780%。沙冬青种子总黄酮属于无毒化合物,并对·OH和O~-_2具有良好的清除能力,在总黄酮作用剂量为1 250μg/mL时,对·OH和O~-_2的清除率分别达96.45%和50.39%。与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著提高小鼠血清SOD活力(P0.01),其中,在150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组,小鼠血清SOD活力高达102.42 U/mL。此外,与衰老模型组小鼠相比,沙冬青种子总黄酮可极显著降低小鼠血清中MDA含量(P0.01),以150 mg/(kg·d)总黄酮剂量组降低效果最明显。上述结果提示,沙冬青种子总黄酮具有良好的自由基清除能力和抗氧化活性,从而有效改善和提高机体免疫力。     

复合益生菌和纤维素酶发酵对艾草营养品质和微观结构的影响

本试验旨在研究复合益生菌和纤维素酶发酵对艾草化学成分、活性成分、发酵品质以及微观结构的影响,并研究其适宜发酵时间。以全株艾草粉(70%)和混合饲料(30%,由80%的玉米、10%的麸皮和10%的葡萄糖组成)为发酵底物,按照不同处理方式分为4个组,其中对照组不添加其他物质,复合益生菌组添加1%复合益生菌(含干酪乳杆菌1.0×10^6 CFU/mL、产朊假丝酵母菌1.0×10^8 CFU/mL和枯草芽孢杆菌1.0×10^6 CFU/mL),纤维素酶组添加1%纤维素酶(滤纸酶活力为130 FPU/g),菌酶联合组同时添加1%复合益生菌和1%纤维素酶,每个组设3个重复。将发酵底物混合均匀后,按照固体∶蒸馏水=5∶3(质量比)的比例添加蒸馏水,高压灭菌后进行发酵,发酵时长为7 d。结果表明:1)与对照组相比,单独添加复合益生菌除显著降低了艾草中半纤维素的含量(P<0.05)外,对其他各项纤维成分的含量无显著影响(P>0.05);单独添加复合益生菌、纤维素酶以及二者联合添加显著降低了艾草中中性洗涤纤维和半纤维素的含量(P<0.05);单独添加纤维素酶以及与复合益生菌联合添加均显著提高了艾草中粗蛋白质的含量(P<0.05),且菌酶联合组粗蛋白质含量显著高于其他各组(P<0.05)。2)与对照组相比,纤维素酶组与菌酶联合组艾草的pH显著降低(P<0.05),可溶性碳水化合物含量显著升高(P<0.05);菌酶联合组艾草中总黄酮和多酚含量显著升高(P<0.05)。3)纤维素酶组和菌酶联合组艾草表面微观结构显示凹凸不平,出现了大面积的破碎。4)菌酶联合组发酵第4天时,艾草中枯草芽孢杆菌、干酪乳杆菌和产朊假丝酵母菌的活菌数以及总黄酮和多酚含量均处在较高水平,其中产朊假丝酵母活菌数和总黄酮含量显著高于其他发酵时间(P<0.05)。由此得出,复合益生菌与纤维素酶联合添加显著降低艾草的pH,显著提高了可溶性碳水化合物、总黄酮和多酚的含量,改善了艾草的微观结构。复合益生菌和纤维素酶联合添加时艾草的适宜发酵时间为4 d。     

不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织中FATP1基因表达研究

为研究不同乳脂率德宏奶水牛乳腺组织中FATP1基因的表达情况,试验选取216头处于泌乳盛期的健康德宏奶水牛,分为高乳脂率组(H组)、中乳脂率组(M组)和低乳脂率组(L组),采集乳样,用乳品分析仪测定乳脂率,利用气相色谱法测定脂肪酸含量。采集乳腺组织,利用荧光定量PCR法检测FATP1基因的mRNA表达水平,并与乳脂率和脂肪酸含量进行相关性分析。结果表明:H组乳脂率、总脂肪酸含量和长链脂肪酸含量均极显著高于M组和L组(P<0.01),M组显著高于L组(P<0.05)。不饱和脂肪酸含量H组极显著高于L组(P<0.01),显著高于M组(P<0.05),而M组与L组无显著差异(P>0.05)。FATP1基因mRNA表达水平为H组极显著高于L组(P<0.01),而H组与M组、M组与L组均无显著差异(P>0.05)。相关性分析表明,乳脂率与乳中总脂肪酸、长链脂肪酸和不饱和脂肪酸含量间呈极显著正相关(P<0.01),FATP1基因mRNA表达量与乳脂率、脂肪酸总量、长链脂肪酸含量、不饱和脂肪酸含量均呈极显著正相关(P<0.01)。研究表明在乳脂合成的过程当中FATP1基因对脂肪酸的摄取和转运起到重要的调控作用。     

不同养殖模式及季节性因素对肉鸡生长性能、屠宰性能及肉品质影响的研究

旨在探讨不同养殖模式及季节性因素对肉鸡生长性能、屠宰性能及肉品质的影响。选取2个批次的相同品种肉雏鸡,第1批饲养时间为10—12月,第2批饲养时间为3—5月,从第5周龄开始,将每个批次的肉鸡随机分为3组,各组饲养模式分别为散养、网上平养、发酵床养殖。测定并比较相同批次内不同养殖方式与相同养殖方式下不同批次5~10周龄肉鸡的生长性能,以及10周龄后肉鸡的屠宰性能和肉品质性能指标。结果表明:第1批散养肉鸡的第10周龄体重极显著高于发酵床养殖(P<0.01),第2批散养肉鸡的第10周龄体重极显著高于发酵床养殖和网上平养(P<0.01);第1批散养肉鸡的胸肌肉色和粗脂肪含量极显著高于发酵床养殖和网上平养(P<0.01),第2批散养肉鸡的胸肌粗脂肪含量极显著高于发酵床养殖和网上平养(P<0.01);第2批散养肉鸡的腿肌水分极显著低于发酵床养殖和网上平养(P<0.01),腿肌粗脂肪含量极显著高于发酵床养殖和网上平养(P<0.01)。3种饲养模式下,第2批肉鸡的第8~10周龄体重均极显著高于第1批(P<0.01);网上平养模式下,第1批肉鸡的屠宰率与全净膛率显著高于第2批(P<0.05);网上平养与散养模式下,第1批肉鸡的胸肌率极显著高于第2批(P<0.01);3种饲养模式下,第2批肉鸡的胸肌粗蛋白含量极显著高于第1批(P<0.01),第1批肉鸡的腿肌肉色、剪切力与系水力极显著高于第2批(P<0.01)。综上提示,散养模式下肉鸡的体重及肉品质指标优于网上平养及发酵床养殖模式;肉鸡的生产性能、屠宰性能及肉品质受季节性因素影响。     

Comparison Research on Nutrient Composition of Meet between Yanbian Yellow Bulls and Steers

In order to compare the nutrient composition of meet between Yanbian Yellow bulls and steers,16 healthy beef cattles from same breed group with similar age and body weight were chosen and randomly divided into two groups with 8 cattles per group.The experimental group was made up by steers and control group was bulls,all cattles were slaughtered after feed for 373 d.The results showed that:① At the early stage of experiment,the total protein,globulin,A/G,blood glucose,triglyceride,aspertate aminotransferase,alanine aminotransferase levels of the two groups had no significant difference (P>0.05),and albumin,high-density lipoprotein cholesterol, urea nitrogen and cholesterol of experimental group were extremely significantly or significantly higher than that of control group (P<0.01;P<0.05);At the end of the experiment,albumin,A/G and cholesterol of experimental group were significantly higher than the control group (P<0.05),and the triglycerides content was extremely significantly higher than control group (P<0.01);There was no significant difference in other indexes between the two groups (P>0.05);② The oleic acid content and C18:1 n9/C18:2 n6 in longissimus dorsi of experimental group were 6.51% and 229.42% higher than that in control group,the difference were significant or extremely significant (P<0.05;P<0.01),respectively.The linolic acid and octadecoic acid in control group were extremely significantly higher than that of experimental group (P<0.01);③The proportion of Pro,Gly,Ala and Arg in longissimus dorsi of control group were significant higher than that in experimental group (P<0.05),while other amino contents were no significant difference between two groups (P>0.05).In conclusion,the fat deposition,unsaturated fatty acid,especially oleic acid content in Yanbian Yellow steers were significantly higher than bull and it had good meat quality and good taste which was suitable for the production of high-grade beef.     

Effect of Dietary Picriafel-tarrae Lour Extracts on Serum Biochemical Indexes and Immune Function of Guangxi Partridge Chickens

This trial was conducted to investigate the effect of dietary Picriafel-tarrae Lour extracts on serum biochemical indexes and immune function of Guangxi Partridge chickens. 500 Guangxi Partridge chickens with 1 day old were randomly divided into 5 groups with 5 replicates per group and 20 chicks per replicate.Groups A,B and C were treatment groups and fed diets with 0.70%,0.35% and 0.175% Picriafel-tarrae Lour extracts,respectively,group D was a medical control group fed a diet with 0.01% colistin sulfate premix,and group E was control group fed basal diet. Serum samples were collected from 10 chicks in each group at 21,35 and 49 days old to analyze the biochemical and immune indexes. The results showed that compared with group E, the contents of GLU and TP were not significantly affected by the Picriafel-tarrae Lour extracts (P>0.05).However, in 21 and 35 days old, the TBILI content of groups A,B and C were extremely significantly or significantly reduced (P<0.01;P<0.05);At 35 days old,the activity of serum AKP of groups A,B and C were extremely significantly higher than that of group E (P<0.01),and the activity of serum GOT of group C at 21 and 35 days old were significantly higher than that of group E (P<0.05);At 49 days old,the serum IgG content of groups A,B,C and IL-2 of groups B and C were extremely significantly or significantly lower than those of group E (P<0.01;P<0.05);At 49 days old,the T-AOC of group B was significantly higher than group E (P<0.05);The GSH content of groups A,B and C at 49 days old were significantly increased than group E (P<0.05).In conclusion,the dietary Picriafel-tarrae Lour extract could significantly decreased the TBILI content,reduce the contents of IgG,IL-2 and IL-6, improve the activities of AKP and GOT,and the contents of T-AOC and GSH in some degree. The 0.35% additive amount had the better effects.     

四君子汤对脾虚大鼠空肠黏膜损伤的修复作用及机制

通过检测脾虚大鼠空肠中PCNA和IGF-1的表达,探讨四君子汤对脾虚大鼠空肠黏膜修复的影响。试验分对照组、脾虚组、四君子颗粒治疗组和治疗对照组,每组采取空肠中段作样本;H.E.染色法观察空肠组织结构,免疫组织化学法检测PCNA和IGF-1的表达。脾虚组大鼠空肠绒毛长度、隐窝深度极显著降低(P<0.01);四君子颗粒治疗组大鼠绒毛长度、隐窝深度的显著高于治疗对照组(P<0.05)。脾虚组大鼠空肠中PCNA、IGF-1阳性细胞数极显著增加(P<0.01);四君子颗粒治疗组PCNA、IGF-1阳性细胞个数显著高于治疗对照组(P<0.05)。结果表明,四君子汤可以促进脾虚模型大鼠空肠的修复过程。     

甘肃棘豆黄酮抗氧化活性及免疫活性的研究

为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2（IL-2）和免疫球蛋白G （IgG）抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E （28.55%）,低于维生素C （97.05%）;对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E （69.70%）,低于维生素C （98.69%）;对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C （98.98%）、略低于维生素E （32.57%）。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200 μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组（P<0.01）,50和100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异（P>0.05）;各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组（P<0.01）,其中,50 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）,100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。     

猪呼吸道疾病综合征中性粒细胞cAMP-PDE和血浆cAMP、IL-6、TNF-α的变化及中药疗效研究

本试验通过观察呼吸道疾病综合征（PRDC）病猪中性粒细胞（PMN）环磷酸腺苷磷酸二酯酶（cAMP-PDE）活性和血浆cAMP、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量的变化及自拟中药汤剂对其的影响与疗效,以期为呼吸道炎症的病理机制与中药防制积累资料。将PRDC病猪随机分组,治疗组灌服由芦根、黄芪、白芍、甘草组成的1 g生药/mL中药,1.5 mL/kg,每天2次,连续给药10 d。停药后取全血检测各组外周血白细胞数量;并分离PMN,HPLC法检测cAMP-PDE活性;ELISA试剂盒测定血浆中cAMP、IL-6、TNF-α的含量。与健康对照组相比,患病组白细胞数量显著升高（P<0.05）,cAMP-PDE活性和血浆TNF-α、IL-6含量均极显著升高（P<0.01）;治疗组TNF-α含量显著升高（P<0.05）。与患病组相比,治疗组的白细胞数量、cAMP-PDE活性和血浆TNF-α含量均显著降低（P<0.05）,IL-6极显著降低（P<0.01）。结果表明PRDC病猪存在外周血白细胞数量、PMN cAMP-PDE活性和血浆IL-6、TNF-α含量升高的异常变化,自拟中药汤剂能改善呼吸道病猪的临床症状,其作用机制与降低白细胞数量,抑制PMN cAMP-PDE活性和降低血浆IL-6、TNF-α含量相关。     

沙冬青种子总黄酮活性成分分析及对小鼠免疫功能的影响

本研究旨在通过高效液相色谱-质谱联用（LC-MS）和高效液相色谱（HPLC）技术对沙冬青种子总黄酮主要活性成分进行分析及含量测定,并探索沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫功能的影响。采用LC-MS分析沙冬青种子总黄酮主要活性成分,在HPLC优化条件下用标准品对主要活性成分的含量进行测定;采用MTT法和ELISA试剂盒检测沙冬青种子总黄酮对小鼠脾淋巴细胞增殖和IL-2、IL-4生成的影响,以及总黄酮对肝脏KCs细胞的增殖和NO、NOS含量的影响;运用定量溶血分光光度法和血清溶血素HC₅₀测定法检测不同浓度沙冬青种子总黄酮对小鼠抗体生成细胞和血清溶血素的影响。结果显示,沙冬青种子总黄酮中主要活性成分为芒柄花素、7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄酮、黄豆黄素和穗花杉双黄酮,其中,芒柄花素含量高达52.48%,其次为7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄酮,含量为11.20%。在2.5~100 μg/mL总黄酮作用下,沙冬青种子总黄酮对脾淋巴细胞的增殖和细胞因子的产生具有明显的促进作用,尤其在20 μg/mL时脾淋巴细胞增殖率和IL-2的分泌量分别高达217.62%和159.661 pg/mL,与空白对照组相比差异极显著（P<0.01）;在40 μg/mL时,脾淋巴细胞IL-4的分泌量高达149.274 pg/mL,极显著高于空白对照组（P<0.01）。沙冬青种子总黄酮对KCs细胞的增殖及NO和NOS分泌也具有明显促进作用,在60 μg/mL时,与空白对照组相比,KCs细胞增殖率达67.77%,NO和NOS的分泌量分别达180.106和29.942 μmol/L（P<0.01）。此外,沙冬青种子总黄酮能明显促进小鼠体内抗体生成细胞和血清溶血素含量的增加。综上表明,沙冬青种子总黄酮主要活性成分为芒柄花素和7,3'-二羟基-4'-甲氧基黄酮。沙冬青种子总黄酮对小鼠免疫活性细胞的增殖、相关免疫细胞因子和抗体的产生与释放等都具有显著的促进作用。