逆转录—聚合酶链反应（RT—PCR）检测轮状病毒

为了给轮状病毒感染的诊断和流行病学研究提供更为敏感和可靠的手段,选取Ａ组轮状病毒ＶＰ７基因上的２段高度保守序列作为引物,在优化逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）条件的基础上,建立了检测轮状病毒的ＲＴ－ＰＣＲ方法。通过对比试验,确定了ＰＣＲ的最优模式：９４℃变性１ｍｉｎ→５５℃退火１ｍｉｎ→７２℃延伸２ｍｉｎ,３０个循环后再在７２℃下延伸１０ｍｉｎ。用此模式进行了ＲＴ－ＰＣＲ的特异性和敏感性试验。检测的６株轮状病毒分离株（牛ＨＮ－７、ＢＲＶ００７、ＢＲＶ０１４、ＢＲＶ６５５５、猪Ｌｉ９９、Ｎａｎ８６）及２株参考株（牛ＮＣＤＶ、猴ＳＡ１１）,都能扩增出唯一的３４２ｂｐ的目的条带;对猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）及传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）感染猪的粪样、正常ＭＡ１０４细胞检测结果均呈阴性;检测的敏感度可达１ｐｇ水平。对４０份猪、牛、兔的腹泻粪样检测,３０份呈阳性,而用作平行对照的夹心ＥＬＩＳＡ法检测,有２５份呈阳性,两者符合率为８７．５％。两法检测不符的５份粪样的ＰＣＲ扩增产物,用地高辛标记探针进行了斑点杂交,结果均呈阳性,表明ＲＴ－ＰＣＲ法比ＥＬＩＳＡ法敏感性高。     

鸡新城疫（ND）—传染性支气管炎（IB）—产蛋下降综合症（EDS）三联油乳剂灭活…

本试验的研究目的在于了解，掌握ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ三联油乳剂灭活疫苗在不同的温度条件下的性能，保存期及免疫效力。     

鸡新城疫（ND）—传染性支气管炎（IB）—产蛋下降综合症（EDS）三联油乳剂灭活苗的研究Ⅲ免疫对比试验

鸡新城疫（ＮＤ）—传染性支气管炎（ＩＢ）—产蛋下降综合症（ＥＤＳ）三联油乳剂灭活苗的研究Ⅲ免疫对比试验艾武，张秀美，王莉莉，宋敏训，牟建青（山东省农科院家禽研究所２５００２３）用本室研制的ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联油乳剂灭活苗和ＮＤ、ＩＢ、ＥＤＳ７６...     

鸡新城疫（ND）—传染性支气管炎（IB）—产蛋下降综合症（EDS）三联油乳剂灭活疫苗的研究Ⅱ田间免疫试验

鸡新城疫（ＮＤ）—传染性支气管炎（ＩＢ）—产蛋下降综合症（ＥＤＳ）三联油乳剂灭活疫苗的研究Ⅱ田间免疫试验张秀美，王莉莉，宋敏训，艾武，牟建青（山东省农科院家禽研究所２５００２３）用ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ三联油乳剂灭活疫苗实验室制品４批，分别在曲阜、金乡、...     

新城疫—传染性支气管炎—减蛋综合征三联油乳剂苗田间免疫 …

用自制ＮＤ－ＲＩＢ－ＥＤＳ和ＮＤ－ＫＩＢ－ＥＤＳ两种三联油乳剂苗,各免疫产前蛋鸡４批,共１３８５２只,进行田间免疫试验,抽测不同免疫时期鸡血清或蛋黄样品中１６０份,并用９６只随机样鸡进行强毒攻击试验。结果表明：在免疫后的２０￣３４０ｄ,抽测样品中ＮＤ,ＲＩＢ,ＫＩＢ和ＥＤＳ ＨＩ抗体分别处于６．３ｌｏｇ２￣１１．４ｌｏｇ２、６．４ｌｏｇ２￣９．０ｌｏｇ２、６．０ｌｏｇ￣８．９ｌｏｇ、６．３ｌｏｇ￣     

山西肉型猪新品系（SD—Ⅰ系）6月龄体重遗传趋势分析

用混合模型ＢＬＵＰ法对山西瘦肉型猪新品系（ＳＤ－Ⅰ系）选育过程中０－４世代４０头公猪的４４７头后裔６月龄体重进行了遗传趋势评估。结果表明，群体平均育种值随世代的增加而增加，说明ＳＤ－Ⅰ系猪选育过程中所采取的育种措施是有效的。各世代间基本一致，且除０世代外，对表型值都有正的效应。继续进行选育，６月体重有提高的可能。     

用RT—PCR检测新城疫病毒的研究

用反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测新城疫病毒（ＮＤＶ）。研究结果表明ＲＴ－ＰＣＲ可检测出Ｆ４８Ｅ９株、Ｌａｓｏｔａ株、Ⅰ系疫苗株、Ｌ株、ＳＹ１株等５株ＮＤＶ尿囊液为阳性,其敏感性可测至１０－３倍稀释尿囊液病毒。ＲＴ－ＰＣＲ还能直接检测出发病鸡气管中的ＮＤＶ。     

中国流行株ＨＩＶ—1gag—gp120与ＩＬ／ＩＬ—６共表达核酸疫苗质粒的构建和

以pcDNA3.１( ）为载体，构建了中国流行株ＨＩＶ－1gag-gp1２０嵌合基因的核酸疫苗质粒；并以pIRES1neo为载体，构建了gap-gp120与ＩＬ－２／ＩＬ－６共表达的２种核酸疫苗质粒。将核酸疫苗质粒在体外转染ＢＨＫ－２１细胞，ＥＬＩＳＡ方法检测到３种核酸疫苗质粒均表达了目的ＨＩＶ－１结构蛋白。将核酸疫苗质粒免疫小鼠，免疫学指标检测结果表明，在本实验条件下，未能检测到含有gap-gp120的核酸疫苗质粒免疫鼠的细胞免疫和体液免疫功能的明显改变；而与ＩＬ－２／ＩＬ６共表达的２种核酸疫苗质粒使免疫鼠ＣＤ^ 4、ＣＤ^ 8T细胞数量明显升高，ＣonA和ＬＰＳ诱导的细胞增殖能力显著增强，ＣＴＬ活性明显提高，表明ＩＬ－２和ＩＬ－６有效地发挥了免疫佐剂作用。     

鸡产蛋下降综合症灭活疫苗研究──EDS_（76）—NE_（4）株病毒的培养与鉴

在对ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒进行血清学鉴定之后，于鸭胚（ＤＥ）、鸭胚成纤维细胞（ＤＥＦ）、鸡胚（ＣＥ）、鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）和鸡胚肝细胞（ＣＥＬ）上适应培养。结果表明，ＥＤＳ７６－ＮＥ４株病毒为鸡产蛋下降综合症病毒，该病毒能在ＤＥ、ＤＥＦ、ＣＥＬ上增殖，在ＤＥ上增殖，尿囊液的血凝价（ＨＡ）可达１∶２０４８０─１∶３２７６８０倍。     

蜂王浆与10—羟基癸烯酸（10—HDA）

德国科学家Ｄ .Ｊ.朗格 (192 1)首次在工蜂上颚腺中发现 10 -羟基癸烯酸 (简称 10 -ＨＤＡ) ,日本学者佐藤道夫 (1982 )在《蜜蜂科学杂志》上发表文章 ,以大量数据证实蜂王浆中 10 -ＨＤＡ主要由蜜蜂工蜂的上颚腺分泌 ,而在蜂王上颚腺中同样存在 ,并且证实蜜蜂上颚腺中 9-氧代 -癸烯酸(简称 9-ＯＤＡ)和 10 -ＨＤＡ有密切的关系 ,它们二者又与蜜蜂繁殖密切相关。目前日本把 10 -ＨＤＡ作为蜂王浆的主要质量指标 ,而世界各国的认识并不一致。1. 10 -ＨＤＡ的来源首先在蜂王上颚腺上发现两种蜂王物质 ,一种叫 9-氧代 -2 -癸烯酸 (简称 9-ＯＤ…     

胰岛素样生长因子I（IGF—I）的研究进展

胰岛素样生长因子Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）的研究进展沧州市农林科学院钟艳玲王振来胰岛素样生长因子Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ）是生长激素发挥促生长作用的重要调节因子。生长激素具有促进体内蛋白质沉积、骨骼生长等功能，但是生长激素的以上作用并不是直接的，而是ＩＧＦ－Ｉ作用的结果...     

兔口服磺磺胺—6—甲氧嘧啶后血中浓度的监测

本文对５只成年兔按２００ｍｇ／ｋｇ体重给兔灌服磺胺－６－甲氧嘧啶（ＤＳ－３６），并于给药后１０、３０分钟及１、２、４、６、８、１０、１２小时分别测定血药浓度。结果从实测数值可见给兔口服ＤＳ－３６后，２小时血药浓度达最高值，然后呈缓慢下降的趋势，至１２小时后血药浓度为０．０２８±０．００４ｍｇ％，即为本实验监测的最低值。ＤＳ－３６给兔口服后，其吸收分布情况较快，但此剂量口服尚不能达到有效抑菌浓度。     

N—甲基—D，L—天冬氨酸（NMA）对育肥猪生长激素基因表达的影响

以肥育猪为对象，探讨了日粮中添加50mg/kgN－甲基－D，L－天冬氨酸（NMA）对其生长激素（GH）基因表达的影响。结果表明，添加NMA后，肥育猪日增重提高了9．31％（P＜0．01）；料重比降低了7．16％（P＜0．02）；血清GH含量提高了92．54％（P＜0．01）；垂体GH－mRNA水平提高了153．03％（P＜0．01）；下丘脑cAMP水平降低了21．89％（P＜0．01）；腺垂体中cAMP水平升高88．57％（P＜0．05）。     

间接法Dot－ELISA检测鸡败血支原体（MG）抗原的研究

本文首次建立了检测鸡败血支原体（ＭＧ）抗原的间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ。ＭＧ抗原的最低检出量为７．８１×１０￣４ＣＦＵ／ｍｌＭＧ人工及自然感染样本的抗原检测结果与ＭＧ分离的符合率分别为８４．６％和９２．９％。间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测抗原经济、快速、操作简便，有较好的敏感性、特异性和重复性，能检出ＭＧ人工及自然感染病鸡的带菌情况，适合于大规模抗原样本的检测，可以用作疫病早期诊断的依据和进行流行病学调查。     

肉用鸡垂体—肾上腺轴与免疫功能关系的研究

以艾维茵肉鸡为试验动物，研究了垂体－肾上腺轴在传染性腔上囊病病毒（ＩＢＤＶ）强毒株攻击时对免疫系统的调节作用。结果表明，用ＩＢＤＶ强毒株攻击后，试验鸡垂体－肾上腺轴活动加强，血清促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）和皮质酮（Ｆ）上升，抗ＩＢＤＶ抗体、白细胞介素２（ＩＬ－２）和白细胞介素３（ＩＬ－３）上升，Ｔ淋巴细胞转化率下降。未经ＩＢＤ疫苗免疫的鸡由于免疫系统遭到ＩＢＤＶ破坏，在ＩＢＤＶ强毒株攻毒后，抗Ｉ     

产蛋下降综合征（EDS－76）病毒DNA酶切图谱分析

选用ＥｃｏＲＩ、ＰｓｔⅠ、ＰｖｕⅡ、ＨｉｎｄⅢ、ＢｇｌⅠ和ＢｇｌⅡ６种限制性内切酶，对国内４株ＥＤＳ－７６病毒鸡源分离株和国外标准株ＡＶ－１２７及１株鹅源腺病毒的ＤＮＡ进行酶切图谱的比较，结果发现４种鸡源分离株与ＡＶ－１２７株用上述６种酶切的片段数分别为４、８、１０、１０、６和７条。各酶切图形、片段大小亦十分相似，表明均为ＥＤＳ－７６病毒。ＥｃｏＲＩ－ＨｉｎｄⅢ和ＰｓｔＩ－ＥｃｏＲＩ的双酶切也得到同样结果。鹅源分离株的酶切片段数分别为６、７、９、７、４和１０条，酶切图形和片段大小均与ＡＶ－１２７有很大不同，表明该分离株可能为１株血清型相同而基因组不同的ＥＤＳ－７６鹅腺病毒。     

京—1株鸡马立克氏病强毒对BWEL—SPF鸡群的感染试验

用京－１株鸡马立克氏病（ＭＤ）强毒感染１￣１０个家系１日龄的ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡,观察比较临床症状和剖检病变及病理切片,以此评估该ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡群每个家系鸡对京－１株ＭＤ强毒的敏感性。结果,１,５,８,９号家系的ＢＷＥＬ－ＳＰＦ鸡对京－１株ＭＤ强毒最敏感;３,４,５,６,１０号家庭系次之,２、７号家系敏感性相对较差。     

L—肉碱在动物营养中的作用（待续）

Ｌ－肉碱是一种类维生素化合物，其主要的生理功能是促进脂肪酸的转运以利于β－氧化。大量研究表明，Ｌ－三能改善动物对能量的利用效率，提高动物生产性能、胴体瘦内从质以及种用动物的繁殖性能。此外，Ｌ－肉碱可能还具有节的蛋氨酿和赖酸的作用。但是，Ｌ－肉碱的作用仍有争议这可能与动物的年龄、体重、日粮组成、环境条件和动物品种有关。而且，Ｌ－肉碱在体内的作用模式以及动物每一生长阶段的最佳添加量还不十分清楚。     

十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）检测牛奶中掺杂的豆奶

十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）被试验并证实是检测和半定量牛奶和豆奶混合物中的豆奶和牛奶蛋白的非常有效的方法。蛋白分离不需要制备缓冲液，考马斯兰染色可快速给出重现性好，灵敏度高和背景染色弱的结果，样品只需稀释至合适的浓度总蛋白浓度大约３．６ｎｇ）。从电泳谱图上可清晰地看出７条牛奶蛋白带和１３条豆奶豆蛋白带，本文给出了它们的分子量。当牛奶和豆奶混合时，许多蛋白带都可用于检测混合物     

IBDV逆转录—聚合酶链反应和核酸杂交检测方法的研究

以建立的传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和核酸杂交检测方法，检测了细胞培养物、病理组织、粪便和饲料中的ＩＢＤＶ，并与ＩＢＤＶ夹心ＥＬＩＳＡ、琼脂扩散试验（ＩＤ）和病毒分离方法进行了平行比较试验。结果表明，ＲＴ－ＰＣＲ和核酸杂交检测方法具有高度的敏感性和特异性，是深入研究ＩＢＤ流行病学，特别是传播途径的新手段