新疆6个地方双峰驼遗传多样性分析

利用11对微卫星引物对新疆阿克苏、和田、伊犁、克孜勒苏柯尔克孜自治州(克州)、阿勒泰、木垒6个地方共167峰双峰驼的遗传多样性、遗传分化、基因流与遗传距离间的关系进行分析,并利用遗传距离构建系统树。结果:所使用的11个微卫星座位均呈现出高度多态性,每个座位上所检测到的等位基因数为3～6个,共检测到50个等位基因,平均等位基因数和平均有效等位基因数分别为4.545 5和3.567 1个,群体平均杂合度在0.671 5～0.707 8之间,平均多态信息含量在0.609 9～0.655 1之间,因此11个座位均可作为有效的遗传标记用于评估地方双峰驼群体的遗传多样性和系统发生关系;从不同地方资源来看,约有4.36%的变异来自群体间,95.64%的变异存在于群体内个体间的差异;基因流平均值为5.486 9,说明各群体间存在或过去某个时期发生基因交流;各群体间平均遗传距离较小,为0.123 8,平均遗传一致度较高(0.884 0),从而再次证明了群体间遗传分化程度较低;基于Nei氏标准遗传距离构建了聚类关系,其结果与双峰驼起源、育成历史及地理分布情况基本一致。     

新疆13个绵羊群体遗传多样性及遗传分化的研究

利用10个微卫星标记对新疆13个绵羊群体的遗传多样性和遗传分化进行了分析。通过计算多态信息含量（PIC）、平均杂合度（H）、群体内近交系数（Fis）、遗传分化系数（Fst）、总群体近交系数（Fit）和基因流（Nm）等参数,评估各品种遗传多样性和品种间遗传分化。结果表明：13个绵羊群体10个微卫星标记的平均多态信息含量为0.6803;平均杂合度为0.7192,其中中国美利奴羊平均杂合度最高为0.7530,山区和田羊最低为0.6754;13个绵羊群体总近交系数为0.1066,群体内近交系数为0.0565,群体间基因分化系数为0.0531,说明5.65%的遗传变异来自群体间,94.35%的遗传变异来自群体内个体间的差异;基因流Nm平均值为4.4621（3.0808~7.4589）,说明各种群间存在或者在过去某个时期发生基因交流;各种群间平均遗传距离较低,为0.1702,平均遗传一致度数值较高,为0.8448,也再次证明了新疆13个绵羊群体间分化程度不高。基于Nei′s标准遗传距离运用UPGMA聚类法获得的新疆13个绵羊群体的聚类图与其品种育成史和地理分布基本相一致。     

鱼腥草不同地理群体遗传结构与变异的研究

采用SRAP分子标记技术对湖南省怀化地区16个野生鱼腥草群体的遗传特征进行了分析。结果表明,16个鱼腥草群体的多态位点比例(PPB)为53.66%~85.35%,Nei基因多样性指数(h)为0.07~0.23,Shannon表型信息指数(I)为0.10~0.34,说明在鱼腥草群体水平上有相对较高的遗传变异;群体间的基因分化系数(Gst)为0.51,表明大部分的遗传变异均存在于群体间,同时群体内具有一定频率的基因流(Nm=0.326)。UPGMA聚类分析表明,16个群体在遗传距离为0.5处分为五大类群,并且有一定的地缘关系。相关性分析表明,虽然16个鱼腥草群体的遗传结构与生境因子相关均不显著,但基因分化系数(Gst)和基因流(Nm)随海拔的增加有上升而随着纬度和经度的增加有下降的趋势。     

四川三个藏猪群体的微卫星遗传多样性分析

本研究利用已开发的18对微卫星引物,分析了四川境内阿坝、稻城和德格三个藏猪群体共143个个体18条常染色体上的微卫星遗传多样性。结果表明:阿坝藏猪群体多态信息含量和观测杂合度比其他两群低,群体遗传变异较小;三个群体Nei氏标准遗传距离均在0.6以上,平均基因流值大于1,表明三个群体各有特点,群内基因交流频繁。     

利用微卫星DNA标记分析巴布亚新几内亚三个地方鸡群体的遗传多样性及亲缘关系

为了解巴布亚新几内亚地方鸡群体的遗传多样性和亲缘关系,本研究利用20个微卫星DNA遗传标记,对3个群体、96个个体的基因型进行了测定,估算了群体内的杂合度和近交系数(FIS)以及群体间的遗传分化系数(FST)等多样性参数;根据Nei氏标准遗传距离,构建群体水平的NJ树和个体水平上的无根UPGMA树。结果表明,3个群体内的平均期望(基因)杂合度介于0.665 9至0.680 6,平均FIS介于0.020至0.286,总群体水平上的遗传变异仅占5.5%;3个群体相互之间的遗传分化均达到显著水平,在个体水平的无根UPGMA树上,来源同一群体的个体会优先聚为一类。这说明巴布亚新几内亚的3个地方鸡群体的遗传多样性比较丰富,群体间的遗传分化显著,应该分别加以保护和利用。     

5个黑山羊品种(群体)微卫星标记的遗传多样性研究

利用14个微卫星标记分析了攀枝花地方黑山羊、建昌黑山羊、云岭黑山羊、金堂黑山羊、乐至黑山羊5个品种(群体)的遗传多样性及亲缘关系。结果显示,14个微卫星座位多态信息含量(PIC)在0.5129~0.7646之间,均为高度多态位点;5个黑山羊品种(群体)的平均多态信息含量(PIC)为0.6405~0.6856,平均杂合度(H)在0.6985~0.7371之间,说明遗传多样性丰富;群体间平均遗传分化系数(Fst)为0.0296,说明群体间的变异仅为2.96%,群体间存在基因交流;攀枝花黑山羊和金堂黑山羊2个群体之间的Nei氏遗传距离最大(D=0.1286),金堂黑山羊和乐至黑山羊之间的遗传距离最小(D=0.0365);NJ聚类图中,攀枝花黑山羊、建昌黑山羊和云岭黑山羊聚为一类,金堂黑山羊和乐至黑山羊聚为一类,聚类结果与群体的地理分布较为一致。     

西藏光核桃自然居群遗传多样性的SRAP分析

利用SRAP标记对来自西藏境内的4个光核桃自然居群的遗传多样性和群体遗传结构进行了分析和评价。选用20对引物对4个居群的70份材料进行扩增,检测到338个多态位点。在居群水平上,多态位点百分率为63.96%,Nei’s基因多样性和Shannon’s信息指数分别为0.194 3和0.295 5。在物种水平上,多态位点百分率为89.89%,Nei’s基因多样性和Shannon’s信息指数分别为0.246 0和0.383 9。居群间的遗传分化系数为0.170 9,居群间的基因流为1.213 0。UPGMA聚类图中,70个个体未按4个居群各自聚在一起。结果表明,光核桃遗传多样性水平较高,居群间遗传分化较小,居群间的基因交流程度较高。     

陕西省本氏针茅自然种群遗传多样性的ISSR分析

利用ISSR分子标记,对采自陕西省不同地区的5个本氏针茅(Stipa bungeana)自然种群进行遗传变异及群体遗传结构分析,旨在探讨本氏针茅遗传变异产生的分子生态机理,为其资源保护提供理论依据。在100个供试单株中,采用15条ISSR引物共扩增出223条可统计条带,其中多态性带182条,多态性位点比率为81.61%,Nei’s基因多样性(H)为0.1887,Shannon 信息指数(I)为0.2975,各种群之间存在较高的多态性。种群间的遗传变异为63.01%,种群内的遗传变异为36.99%,遗传分化系数φ_st 为0.6300,种群间的基因流(N_m)为0.1468,表明本氏针茅遗传分化程度较高,遗传变异主要分布在种群间,而种群内变异相对较小,且各种群间的基因交流非常有限。     

10个云南地方猪种微卫星遗传多样性分析

为阐明保山猪、迪庆藏猪、高贡黎山猪、丽江猪、明光小耳猪、滇南小耳猪、撒坝猪、大河猪、昭通猪、大河乌猪10个云南省优良地方猪种的群体遗传多样性和遗传结构,本试验参考ArkDB数据库中家猪14条染色体上的15对微卫星引物,对549个云南地方猪个体的耳组织样品进行了检测分析,计算各微卫星座位等位基因数(Na)、有效等位基因数(Ne)、Shannon’s信息指数(I)、表观杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、F-统计量(Fis、Fit、Fst)、基因流(Nm)、群体遗传距离等相关参数及多态信息含量(PIC),采用NTsys 2.10软件构建聚类树,并采用STRUCTRUE 2.3.3软件评估群体遗传结构。结果显示:15个微卫星座位共检测到293个等位基因,各座位等位基因数在5~38个之间,平均等位基因数为19个,平均有效等位基因数8.3682个;10个云南地方猪群体的Shannon多样性、表观杂合度、期望杂合度和多态信息含量分别在1.4374~2.0317、0.6389~0.7756、0.7021~0.8281和0.6647~0.7993之间。各座位单个群体内近交系数(Fis)、总群体近交系数(Fit)、群体间遗传分化系数(Fst)的变化范围分别为-0.0678~0.4594、0.0618~0.5567和0.0713~0.1801;群体间Fst平均值为0.1101,处于中度遗传分化状态,有11.01%的遗传变异来自于群体间,大部分遗传变异来自于群体内;每个座位基因流程度较高,变化范围在1.6392~3.2551之间,平均值为2.0214。基于Nei氏遗传距离构建UPGMA系统发生树显示,高黎贡山猪与迪庆藏猪聚为一支,并与丽江猪、保山猪和明光小耳猪聚为一大支,其结果得到了STRUCTURE分析的验证。综上所述,10个云南地方猪种遗传多样性丰富,群体内有近交现象,群体间处于中度遗传分化,存在着一定的基因交流。     

青藏高原东南缘老芒麦自然居群遗传多样性的SRAP和SSR分析

基于SRAP和SSR分子标记分析了青藏高原东南缘8个老芒麦自然居群遗传变异及群体遗传结构,获得下述结果:1)16对SRAP引物在90个单株中共扩增出384条可统计条带,其中多态性条带334条,占86.98%;16个SSR位点共检测出等位变异221个,平均每个位点13.8个,其中具有多态性的位点数192个,占86.88%。2)2种分子标记检测到老芒麦居群水平的基因多样性(H_e)分别为0.1092和0.1296,而物种水平的基因多样性达0.2434和0.3732。3)基于2种标记的Nei氏遗传分化指数G_st(0.5525和0.5158)表明老芒麦居群出现了较大程度的遗传分化,居群间的基因流非常有限,分别为0.4050和0.4694,老芒麦的遗传变异主要分布在居群间,居群内变异相对较小,Shannon多样性指数和分子方差变异(AMOVA)分析显示了相似的结果。4)基于聚类分析结果表明各居群间存在较为明显的地理分化,8个居群分化为采集地范围内的南、北和中部3个分支。通过对老芒麦遗传多样性和遗传结构的分析提出了对该物种遗传多样性的保护策略。     

河曲藏獒犬品种保护与选育研究

按照公母比例1:3选择公犬50只,母犬150只组建河曲藏獒犬育种核心群,从体型、外貌、体尺、毛色、适应性与气质等方面提出河曲藏獒犬评定的标准与要求,实施各家系等数留种法,使核心群体有效含量达到239.8,世代间隔2.5年,世代近交系数的增量控制在0.2%以下。通过选育核心群公犬平均体高72.1 cm、管围16.3 cm,母犬平均体高70.2 cm、管围15.2 cm,为同步开展河曲藏獒犬品种资源保护与选育奠定了基础。     

藏獒皮肤成纤维细胞培养与生物学特性观察

In order to study biological characteristics of Tibetan Mastiff somatic cells and preserve genetic resource, two fibroblast cell strains from Tibetan Mastiff were established by tissue culture. In vitro culture cell morphology, hyperplasia ability and some biological characteristics were researched. Tibetan Mastiff cells in vitro culture appeared typical morphology of fibroblast cells, grew well and had strong hyperplasia ability. Population doubling time of the cells was 46.1 h. Vimentin expression in the cells was confirmed by immunofluorescence staining. The rate of F5 cells with normal diploidy (2n=78) was 91.4%. Moreover, longer X chromosome belonged to submetacentric chromosome, but Y chromosome did telocentric chromosome. Tibetan Mastiff cell strains eslablished in the study offered the materials for the Tibetan Mastiff somatic cell nuclear transfer research.     

藏獒RAPD-PCR反应体系的优化

以藏獒血液为试验材料,提取基因组DNA后,对藏獒RAPD反应体系进行了优化。结果表明,20μL的最佳反应体系为:2.5 mmol/LMg2+、0.6 mmol/L dNTP、50 ng模板DNA、1.25UTaq酶和0.3μmol/L引物;藏獒RAPD反应的最佳退火温度为36.5℃。     

青海省海北州藏羊群中牛病毒性腹泻病毒和羊边界病毒的流行病学调查

为掌握青海省海北州藏羊群中牛病毒性腹泻病毒和羊边界病毒的感染情况,本研究采用RT-PCR方法分别对青海省海北州的161份健康藏羊血清样品和34份腹泻藏羊组织样品进行了BVDV和BDV的抗原核酸检测。结果显示：195份样品中BVDV和BDV总阳性率分别为29.74 %和14.36 %;161份健康藏羊血清样品中BVDV和BDV平均阳性率分别为26.71 %和11.80 %,BVDV/BDV混合感染率为4.35 %;34份腹泻藏羊组织样品中BVDV和BDV平均阳性率分别为44.12 %和26.47 %,BVDV/BDV混合感染率为17.65 %。本研究表明青海省海北州健康藏羊群和腹泻藏羊群中均存在BVDV、BDV的单独感染以及混合感染,且感染情况在个别养殖场(户)较为严重,本研究为青海藏羊的综合防控措施提供了指导依据,丰富了我国羊群中BVDV和BDV的流行病学资料。     

藏獒品种资源保护与开发利用

藏獒是广泛分布在青藏高原及其周边地区的护卫犬,是在青藏高原独特的自然生态环境中,经过藏族牧民的严格选择和培育而形成的优秀犬品种。本文通过分析藏獒的生物学特性、藏獒品种资源现状,提出藏獒品种资源保护与开发利用的措施,为开展青藏高原生物多样性保护研究奠定基础。     

高原型藏羊的采精及细管冻精授配技术试验

为提高青海高原型藏羊选育工作,探索羊的人工采精和细管冻精技术在高寒地区的应用效果,对青海省海北州祁连3只高原型藏种公羊和玛多县30只高原型藏母羊进行了选育试验,实验结果表明:藏种公羊鲜精采集量平均为1.5mL,呈乳白或乳黄色、无气味、有云雾状,平均活力冻前鲜精为0.65,高出一般羊精子标准活力的0.075,冻后为0.35~0.5,高出本省羊精子标准活力0.1,且经冷配后的30只藏母羊均无返情现象。本实验对于藏羊的改良有重要的实践意义,对于改善纯种高原型藏羊也有重要的参考价值。     

冷季藏羊补饲试验效果观察

藏羊是青海地区特有的牲畜品种,生活在高海拔气候严寒,生长条件恶劣的环境下。但由于青藏高原冬季枯草期漫长,在枯草期内牧草供给缺乏,造成藏羊的体重损失严重,甚至会影响藏羊的正常生长发育,引发藏羊死亡。为进一步验证冬季藏羊补饲的效果,于2018年10月15日至2019年5月30日,从青海省达日县的一个藏羊养殖场选择50头2岁的母羊作为试验对象,按照随机原则将其划分为试验组和对照组,每组25头,试验组羊群在进行传统放牧养殖的基础上每天补充青干草0.4 kg,混合精饲料0.1 kg,对照组藏羊按照常规放牧方式进行管理,并在试验前、试验中期和试验末期各进行称重,测量增重和增重率,研究结果表明,在寒冷季节放牧养殖模式下,通过对羊群进行适量的饲料补充能增加机体的营养供给,试验组羊群在试验中期、试验末期的平均增重量分别为2.78、3.64 kg,增重率分别为13.11%、16.32%,而对照组的平均增重量和增重率呈现负相关,由此得出冬季寒冷季节补充适量的饲料有利于藏羊安全越冬,并维持身体膘情。     

藏獒精液冷冻过程中pH值及甘油对其活力的影响

为探讨pH值和甘油对藏獒精液冷冻保存前后精子活力的影响,筛选6条种公藏獒在其繁殖季节(9~12月份)以不同pH值梯度(5.5,6.0,6.5,7.0,7.5)稀释液和不同甘油平衡时间(10,20,30,40,50,60,70,80,90 min)对藏獒精液进行冷冻,检查精子活力变化。结果表明,在藏獒精液冷冻过程中,pH值为6.5的稀释液中精子在冷冻前后有较高的活力;甘油平衡时间对藏獒精液活力有较大影响,冻前精子活力随甘油作用时间而下降,在甘油平衡时间为20 min所得藏獒冻后精子活力效果较好。     

Seroprevalence of bovine viral diarrhea infection in Yaks (Bos grunniens) on the Qinghai-Tibetan Plateau of China

The seroprevalence of bovine viral diarrhea virus (BVDV) infection in yaks was investigated in Qinghai and Tibet of China during the year 2011. A total of 549 (Tibet 287, Qinghai 262) serum samples was collected from Tibet and Qinghai and were examined for BVDV p80 antibody by ELISA. The results of the experiment showed that 145 (53.65 %) of Tibetan samples and 189 (72.14 %) of Qinghai’s samples were positive for BVDV. The observations of the present study suggest that bovine viral diarrhea is common in yaks in Tibet and Qinghai, China.     

欧拉型藏羊的肉质分析

对欧拉型藏羊肉质品质进行了分析，并与高原型藏羊和青海半细毛羊进行了肉质常规营养和氨基酸含量分析对比，结果表明欧拉型藏羊蛋白质含量达21％，脂肪含量3．15％，胆固醇含量为0．365mg／g，挥发性盐基氮0．1126mg／g，矿物质总量6785mg／kg，氨基酸总量224．835mg／g。欧拉型藏羊与高原型藏羊和青海半细毛羊相比，羊肉具有高能量、高蛋白质、矿物质丰富，低脂肪、低胆固醇的特点，且氨基酸含量更为丰富。