抗水产病原菌乳酸菌的筛选及其发酵饲料的制备

为筛选具有拮抗水产病原菌特性的乳酸菌并制备发酵饲料,本试验从各类生境分离和收集乳酸菌33株,考察各菌株发酵上清液对革兰氏阴性水产病原菌的抑制作用。选用抑菌性能优良的菌株制备发酵饲料,优化发酵条件,并测定发酵饲料对水产病原菌及益生菌生长的影响。结果表明：33株乳酸菌的发酵上清液对6株病原菌有不同程度的抑制作用,其中屎肠球菌（Enterococcus faecium）7-1抑菌能力最强,以其制备发酵饲料的最佳条件为：发酵接种量4.53 Log10 cfu/g,发酵时间12.5 h以及加水量0.784 mL/g干饲料,发酵后活菌数可达到（7.47±0.02）Log10 cfu/g,饲料稳定性86.89%。发酵好的饲料浸提液对水产病原菌有生长抑制作用,对水产益生菌有生长促进作用。 [关键词] 乳酸菌|屎肠球菌|发酵饲料|病原菌     

番鸭肠道乳酸菌的分离鉴定及抑菌性能

通过革兰染色、菌落形态观察、生化分析鉴定、牛津杯抑菌试验、Caco-2细胞黏附试验对分离到的6株乳酸产生菌进行研究。结果显示:经16SrDNA序列测定,比对分析6株乳酸产生菌与鼠李糖乳杆菌、乳酸乳球菌乳亚种、唾液乳杆菌、乳链球菌、哥伦比亚肠球菌和鼠乳杆菌高度同源。6株乳酸菌抑菌试验检测显示:对大肠杆菌、沙门菌、蜡样芽胞杆菌和金黄色葡萄球菌具有很强的抑菌效应,以CM3菌株的抑菌效果最强。同时,这6株乳酸菌对Caco-2细胞均有一定的黏附能力。结果表明:6株番鸭肠道乳酸产生菌能够黏附于肠道模型Caco-2细胞上并具有较强的抑菌活性,但其黏附性能及保护机制还有待进一步研究。     

具广谱抑菌活性乳酸菌的筛选

从传统发酵食品、市售酸奶中分离出78株乳酸杆菌,其中对B.subtilis和E.coli明显有抑菌活性的有58株。挑取抑菌效果较好的9株进一步研究。结果发现,菌株Lac8和Lac9产生的抑菌素pH作用范围比较广,在pH5～6的范围内仍有较强的活性;热稳定性也很好,加热不仅没有减弱其抑菌活性反而可促进其抑菌活性的发挥。虽然抑菌谱实验中两者对真菌都没有抑菌活性,但其对革兰氏阳性和阴性细菌都有强而稳定的抑菌活性,有进一步研究和工业应用的优良潜质。     

广西猪源益生菌的分离鉴定与生物学特性研究

为了解广西地区猪粪便与微生态发酵饲料中益生菌的存在情况及合理开发和利用猪源益生菌,本试验共采集了15份猪粪便样品和5份益生菌发酵饲料并对其进行益生菌的分离,研究益生菌的形态学特性、生理生化特性及16S rRNA分子序列,进行生长曲线、耐胆盐试验、温度敏感试验、模拟胃肠道耐受试验、耐药性试验、体外抑菌试验、小鼠安全性试验、体内/外抑菌试验,对分离菌株进行生物学特性的研究分析。结果显示,本试验共分离鉴定出6种、29株益生菌,分别为1株屎肠球菌（C2）、2株乳酸肠球菌（C1、C3）、3株植物乳杆菌（R20、R30、R37）、4株干酪乳杆菌（R41~R44）、7株枯草芽孢杆菌（K1~K7）和12株蜡样芽孢杆菌（Y1~Y12）。从中筛选出6株具有生长性能好、耐胆盐、耐高温、对胃肠道耐受、体外抑菌能力强的益生菌：乳酸肠球菌C1、屎肠球菌C2、植物乳杆菌R20、干酪乳杆菌R41、枯草芽孢杆菌K1和蜡样芽孢杆菌Y3。将筛选出的具有优良特性的菌株进行小鼠安全性试验,结果表明,在10⁹ CFU/mL浓度下灌胃6株益生菌对小鼠是安全无毒害的。与此同时,C2、R20、R41、Y3能极显著提高小鼠日增重（P<0.01）,K1能显著提高小鼠日增重（P<0.05）。体内抑菌试验结果表明,C2、R20、K1能降低沙门氏菌G21感染的小鼠的死亡率,有一定程度的体内抑菌作用。各项试验结果表明,R20和K1可作为猪源益生菌的选择菌株。     

广西猪源益生菌的分离鉴定与生物学特性研究

为了解广西地区猪粪便与微生态发酵饲料中益生菌的存在情况及合理开发和利用猪源益生菌,本试验共采集了15份猪粪便样品和5份益生菌发酵饲料并对其进行益生菌的分离,研究益生菌的形态学特性、生理生化特性及16S rRNA分子序列,进行生长曲线、耐胆盐试验、温度敏感试验、模拟胃肠道耐受试验、耐药性试验、体外抑菌试验、小鼠安全性试验、体内/外抑菌试验,对分离菌株进行生物学特性的研究分析。结果显示,本试验共分离鉴定出6种、29株益生菌,分别为1株屎肠球菌(C2)、2株乳酸肠球菌(C1、C3)、3株植物乳杆菌(R20、R30、R37)、4株干酪乳杆菌(R41～R44)、7株枯草芽孢杆菌(K1～K7)和12株蜡样芽孢杆菌(Y1～Y12)。从中筛选出6株具有生长性能好、耐胆盐、耐高温、对胃肠道耐受、体外抑菌能力强的益生菌:乳酸肠球菌C1、屎肠球菌C2、植物乳杆菌R20、干酪乳杆菌R41、枯草芽孢杆菌K1和蜡样芽孢杆菌Y3。将筛选出的具有优良特性的菌株进行小鼠安全性试验,结果表明,在10~9 CFU/mL浓度下灌胃6株益生菌对小鼠是安全无毒害的。与此同时,C2、R20、R41、Y3能极显著提高小鼠日增重(P0.01),K1能显著提高小鼠日增重(P0.05)。体内抑菌试验结果表明,C2、R20、K1能降低沙门氏菌G21感染的小鼠的死亡率,有一定程度的体内抑菌作用。各项试验结果表明,R20和K1可作为猪源益生菌的选择菌株。     

乳酸菌体外抑菌试验报告

对乳酸杆菌(LL)、嗜酸杆菌(LA)、乳酸链球菌(SL)的抑菌特性进行了初步探讨。采用牛津杯法对3株乳酸菌菌液、菌体及其代谢产物进行体外抑菌试验。结果显示,3株乳酸菌的菌液及其代谢产物具有较强的抑菌活性,而菌体没有抑菌活性。代谢产物热稳定性较好,但受pH影响较大。随着pH升高,抑菌活性逐渐降低,在弱酸性、中性和碱性条件下没有抑菌活性。代谢产物的抑菌活性不受过氧化氢酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶的影响。     

中草药对大肠杆菌体外抑菌试验

选用27种不同的中草药制剂(煎剂、挥发油、蒸馏液),以平板稀释法和纸片法对同一株肉鸡源的大肠杆菌进行体外抑菌试验.结果表明,有14种中药对此株大肠杆菌有不同程度的抑制作用.试验还表明中药制剂的配方工艺不同,其抑菌的效果亦有不同.     

枯草芽孢杆菌抑菌强度比较试验研究

本实验室从不同来源分离鉴定16株枯草芽孢杆菌,应用滤纸片方法进行抑菌强度的试验比较。试验分析结果表明:枯草芽孢杆菌菌株抑菌强度不同,从16株中比较筛选出4株抑菌性较强的枯草芽孢杆菌。芽孢杆菌的抑菌作用强度主要取决于产生抗菌肽的性质和产生量。本试验比较筛选出的4株枯草芽孢杆菌所产生的抗菌肽的性质,如何优化培养条件、培养基筛选或OSMAC策略,提高抗菌肽的产生量等有待于进一步研究。     

水貂源乳酸菌的分离鉴定及其抑菌性研究

通过革兰染色、菌落形态观察、生化分析鉴定、牛津杯抑菌试验对分离到的1株乳酸菌进行研究。结果显示,经16 S r DNA序列测定,比对分析该株乳酸菌与鼠李糖乳杆菌、乳酸乳球菌乳亚种、唾液乳杆菌、乳链球菌、哥伦比亚肠球菌和鼠乳杆菌高度同源。乳酸菌抑菌试验检测显示,对大肠杆菌、沙门菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌具有很强的抑菌效应。同时该株乳酸菌对水貂肠道上皮细胞有一定的粘附能力。结果表明,该株乳酸菌株产生菌能够粘附于水貂肠道上皮细胞上并具有较强的抑菌活性。     

地衣芽孢杆菌B38对产气荚膜梭菌的抑菌性能研究

试验旨在探究地衣芽孢杆菌38(Bacillus licheniformis 38,B38)对产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens,CP）的抑菌性能，以期为新型替抗产品的开发提供基础。采用抑菌圈法对48株芽孢杆菌经过两次筛选，获得一株对CP抑菌效果最好的芽孢杆菌，测定其最小抑菌效价、抑菌产物生成曲线、抑菌谱和代谢产物的稳定性，并通过硫酸铵沉淀法对抗菌物质进行粗提取。结果表明：B38对CP的抑菌圈直径最大可达31.14 mm，其发酵上清液的最小抑菌效价为64 AU/mL，主要对革兰氏阳性菌发挥抑菌作用；B38代谢产物的抑菌活性在6～<12 h呈指数增长，在12～<24 h保持稳定；B38代谢产物经胃蛋白酶、胰蛋白酶、蛋白酶K和过氧化氢酶处理后，抑菌活性均大于87.78%，对温度和pH具有良好的耐受性；B38代谢产物中的抑菌物质可以被80%硫酸铵完全沉淀，通过该方法获得的抗菌粗品的MIC为6.25 mg/mL。试验通过抑菌圈法筛选得到了一株对CP具有优良抑菌性能的菌株B38，其发酵产物对蛋白酶、温度和pH具有优良的耐受能力。     

联合使用发酵饲料和发酵中草药微生态制剂替代饲用抗生素对蛋鸡的影响与研究

旨在研究联合使用发酵饲料和发酵中草药微生态制剂替代饲用抗生素对蛋鸡的影响,选取304日龄的海兰灰蛋鸡为试验对象,随机分为对照组和试验组,对照组饲喂基础日粮＋2kg／t氨苄西林,试验组饲喂基础日粮＋3％发酵饲料＋3kg／t发酵中草药制剂。结果表明,试验组在粪便成形度方面明显好于对照组,试验第46天、第175天产蛋率显著提高（P〈0．05）;试验第175天,试验组死淘率及破蛋率与对照组相比,分别降低了25．00％、18．05％,蛋黄颜色差异显著（P〈0．01）,鸡蛋的禽流感H9抗体水平和新城疫抗体水平显著高于对照组（P〈0．05）。发酵饲料和发酵中草药微生态制剂联合使用,在蛋鸡养殖中可以达到抗生素使用的效果。     

比较益生菌和中药组合对鸡源大肠杆菌抑菌效果分析

试验比较多种益生菌和中药组合对鸡源大肠杆菌的抑菌效果,并对其抑菌机理进行分析。结果表明:益生菌中,枯草芽孢杆菌和植物乳杆菌对鸡源大肠杆菌具有明显的抑菌活性,但地衣芽孢杆菌没有效果。中药组合中,黄连和茯苓、赤芍、金银花、鱼腥草、桂枝分别配伍时抑菌效果明显,但中药组合的抑菌效果明显低于益生菌。进一步研究益生菌中的抑菌成分,对植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌发酵液进行粗提取、分离和纯化,发现地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌可以产生肠杆菌肽,肠杆菌肽是抗菌肽的一种,其对鸡源大肠杆菌有抑制作用。     

茶叶渣菌酶协同发酵饲料对青脚麻鸡生长性能、屠宰性能及肌肉风味的影响

试验旨在研究饲粮添加不同水平茶叶渣菌酶协同发酵饲料对肉鸡生产性能、屠宰性能和肌肉风味的影响.1080只25日龄青脚麻鸡随机分成5个组,每组6个重复,每重复36只.对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ组在基础日粮基础上添加5％的菌酶协同发酵饲料,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组添加1％、3％、5％的茶叶渣菌酶协同发酵饲料,试验期为28 d.结果 ...     

发酵饲料对海兰褐蛋鸡生产性能及蛋品质的影响

旨在研究发酵饲料对海兰褐蛋鸡生产性能及蛋品质的影响。以玉米和豆粕为发酵底物,利用乳酸菌和酿酒酵母菌进行发酵。选取336日龄的海兰褐蛋鸡600只,随机分为4组,每组150只,3个重复,每个重复50只。试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的基础日粮中分别添加3%、5%、8%的发酵饲料,对照组基础日粮中不添加发酵饲料。饲喂试验周期为4周,期间测定各组蛋鸡的生产性能及蛋品质相关指标。结果表明,基础日粮中添加不同比例的发酵饲料,均可在一定程度上改善蛋鸡的生产性能和蛋品质,其中：饲喂发酵饲料第2周,试验Ⅱ组的产蛋数与对照组相比显著（P<0.05）增加;饲喂发酵饲料第3周,试验Ⅱ组的产蛋数和总蛋重与对照组相比均显著（P<0.05）提高;饲喂发酵饲料4周后,试验Ⅱ组的产蛋数、总蛋重、产蛋率与对照组相比均显著（P<0.05）提高,并且料蛋比显著（P<0.05）下降;试验Ⅱ组的蛋壳强度显著（P<0.05）高于对照组;试验Ⅱ组和Ⅲ组的哈氏单位显著（P<0.05）高于对照组。综上提示,在基础日粮中添加不同比例的发酵饲料,可在一定程度上提高海兰褐蛋鸡的生产性能及蛋品质,其中,5%添加水平的效果最佳。     

Effect of pharmacological concentrations of zinc oxide with or without the inclusion of an antibacterial agent on nursery pig performance

A study involving nine research stations from the NCR-42 Swine Nutrition Committee used a total of 1,978 crossbred pigs to evaluate the effects of dietary ZnO concentrations with or without an antibacterial agent on postweaning pig performance. In Exp. 1, seven stations (IA, MI, MN, MO, NE, ND, and OH) evaluated the efficacy of ZnO when fed to nursery pigs at 0, 500, 1,000, 2,000, or 3,000 mg Zn/kg for a 28-d postweaning period. A randomized complete block experiment was conducted in 24 replicates using a total of 1,060 pigs. Pigs were bled at the 28-d period and plasma was analyzed for Zn and Cu. Because two stations weaned pigs at < 15 d (six replicates) and five stations at > 20 d (18 replicates) of age, the two sets of data were analyzed separately. The early-weaned pig group had greater (P < 0.05) gains, feed intakes, and gain:feed ratios for the 28-d postweaning period as dietary ZnO concentration increased. Later-weaned pigs also had increased (P < 0.01) gains and feed intakes as the dietary ZnO concentration increased. Responses for both weanling pig groups seemed to reach a plateau at 2,000 mg Zn/kg. Plasma Zn concentrations quadratically increased (P < 0.01) and plasma Cu concentrations quadratically decreased (P < 0.01) when ZnO concentrations were > 1,000 mg Zn/kg. Experiment 2 was conducted at seven stations (KY, MI, MO, NE, ND, OH, and OK) and evaluated the efficacy of an antibacterial agent (carbadox) in combination with added ZnO. The experiment was a 2 x 3 factorial arrangement in a randomized complete block design conducted in a total of 20 replicates. Carbadox was added at 0 or 55 mg/kg diet, and ZnO was added at 0, 1,500, or 3,000 mg Zn/ kg. A total of 918 pigs were weaned at an average 19.7 d of age. For the 28-d postweaning period, gains (P < 0.01), feed intakes (P < 0.05), and gain:feed ratios (P < 0.05) increased when dietary ZnO concentrations increased and when carbadox was added. These responses occurred in an additive manner. The results of these studies suggest that supplemental ZnO at 1,500 to 2,000 mg Zn/kg Zn improved postweaning pig performance, and its combination with an antibacterial agent resulted in additional performance improvements.     

植物乳杆菌和枯草芽孢杆菌混菌发酵饲料对肉鸡生长性能、屠宰性能和肠道结构的影响

本试验旨在研究发酵饲料在肉鸡饲料中的使用方法和添加比例。在肉鸡饲料中添加0、10%、20%发酵全价饲料,正常制粒,研究其对肉鸡生长性能、屠宰性能及肠道等相关指标的影响,为发酵饲料在肉鸡饲料中的应用提供参考。选择1日龄爱拔益加（AA）健康肉仔公鸡180只,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。3个处理组分别饲喂含发酵全价饲料0（F0组）、10%（F10组）、20%的日粮（F20组）,饲养时间42 d。结果表明,从全期来看（1~42日龄）,10%发酵饲料替代组显著降低了料重比（P<0.05）,平均日增重有增加的趋势（P=0.05）。42日龄时,发酵饲料对屠宰性能无显著影响（P>0.05）;20%发酵饲料替代组肉鸡的回肠隐窝深度显著高于对照组和10%替代组（P<0.05）;20%和10%发酵饲料替代组肉鸡十二指肠绒毛长度、十二指肠和空肠的绒毛长度/隐窝深度（V/C）显著高于对照组（P<0.05）。以上结果提示,肉鸡饲料中以10%的发酵全价饲料替代可以降低料重比,提高平均日增重,并对肠道发育有一定的影响。     

两种不同发酵工艺的棉籽粕营养价值的研究

利用现代固态发酵原理,研究两种不同发酵工艺对棉粕脱毒效果及其营养价值的影响。工艺一是使用本实验室保存的两株菌直接进行固态发酵,工艺二是在工艺一的基础上添加酶解液进行固态发酵。试验结果表明(以干物质计),棉籽粕发酵和发酵酶解产品中游离棉酚分别降低到197.68 mg/kg和202.35 mg/kg,粗蛋白质分别提高到59.64%和60.88%,小肽含量分别提高到19.41%和23.59%。来航蛋公鸡强饲代谢试验结果表明,发酵和发酵酶解棉籽粕的能量和营养物质消化率均高于未发酵棉粕。肉鸡饲养试验结果表明,发酵棉粕按50%、75%和发酵酶解棉粕按75%的比例替代基础日粮中的豆粕,不影响肉鸡的日采食量。国标二级高游离棉酚棉籽粕经过固态发酵处理后,外观蓬松变软,气味芳香,其营养价值得到显著改善。蛋公鸡的营养物质及能量消化率得到显著提高,同时益生菌及生物酶活性增加,在肉仔鸡日粮中的应用不影响日采食量。     

Effects of Lactobacillus and Bacillus subtilis Mixed Fermentation Feed on Growth Performance,Slaughter Performance and Intestinal Morphology of Broilers

The purpose of this experiment was to study the usage and proportion of fermented feed in broiler feed.By adding 0,10% and 20% fermented complete formula feed to the broiler feed,and granulating normally,the influence of the usage mode of the fermented feed on the production performance,slaughter performance,intestinal tract and other related indexes of the broiler feed were studied,so as to provide reference for the application of the fermented feed in the broiler feed.180 1-day-old healthy AA male broilers were randomly divided into 3 groups with 6 replicates in each group and 10 chickens in each replicate.The three treatment groups were fed with 0,10% and 20% of the total fermented feed for 42 days.The results showed that:From the whole period (1-42 days old),the 10% fermentation feed substitution group significantly reduced the feed consumption and weight gain ratio (P<0.05),and the average daily weight gain increased (P=0.05).At 42 days old,there was no significant effect of fermented feed on slaughter performance (P>0.05).The ileal crypt depth of broilers in the 20% fermentation feed replacement group was significantly higher than that in the control group and the 10% replacement group (P<0.05).The length of duodenal villi and V/C in 20% and 10% fermentative feed substitution group was significantly higher than that in control group (P<0.05).The results showed that the replacement of 10% fermented feed in broiler feed could reduce the ratio of feed to weight gain,increase the average daily gain,and have a certain impact on intestinal development.     

饲喂发酵饲料对肉鸡生长性能、养分利用率、肠道健康和肉品质的影响

【目的】本试验旨在研究肉鸡生长前期(1~21日龄)饲喂发酵饲料对其生长性能、养分利用率、肠道健康和肉品质的影响。【方法】选用1日龄爱拔益加肉鸡公鸡240只,随机分入4个处理组,每组6个重复,每个重复10只鸡。4组肉鸡生长前期(1~21日龄)分别饲喂添加0、5%、10%、15%发酵饲料的试验饲粮,生长后期(22~42日龄)均饲喂不含发酵料的基础饲粮,试验期为42 d。试验第21和42天时,测定肉鸡的1~21日龄、22~42日龄和1~42日龄生长性能、19~21日龄和40~42日龄养分利用率、42日龄肠道菌的数量和42日龄肉品质等指标。【结果】与对照组相比,饲喂10%发酵饲料显著降低肉鸡1~21日龄料重比(P＜0.05);饲喂15%发酵饲料显著提高肉鸡1~42日龄平均日增重和平均日采食量(P＜0.05),显著提高19~21日龄肉鸡干物质利用率和能量代谢率(P＜0.05)。前期饲喂发酵饲料对42日龄肉鸡的盲肠菌群数量影响不显著(P＞0.05)。与对照组相比,饲喂发酵饲料显著降低42日龄肉鸡肌肉中胆固醇含量(P＜0.05)。【结论】生长前期饲喂10%的发酵饲料显著降低了肉鸡1~21日龄料重比;饲喂15%发酵饲料显著提高了肉鸡1~42日龄平均日增重、平均日采食量及19~21日龄肉鸡干物质和能量利用率。生长前期饲喂发酵饲料显著降低了42日龄肉鸡肌肉胆固醇含量,但是对42日龄肉鸡盲肠菌群数量无显著影响。     

微生物发酵饲料在反刍动物生产中的应用研究进展

微生物发酵饲料是一种利用有益微生物将农业与食品加工副产物进行发酵后制备的新型饲料原料,其适口性好、价格低廉、营养价值相对较高。微生物发酵饲料已被证明能提高动物的生产性能和养殖效益并普遍应用于单胃动物生产中,但其在反刍动物生产中应用还比较少,且对微生物发酵饲料中菌种的具体作用机制和方式的研究还不成熟。本文综述了微生物发酵饲料的作用机理、微生物发酵对饲粮营养成分的影响、影响微生物发酵饲料品质的因素及其在反刍动物生产中的应用。