全乳ELISA、血清ELISA与胶体金试验对奶牛布鲁氏菌病检测的比较

采用全乳ELISA、血清ELISA与胶体金试验检测奶牛布鲁氏菌病全乳和血清抗体,比较3种方法在布病抗体检测中的应用,同时探讨了全乳样品在冻融次数、保存时间等方面对检测结果的影响等,为奶牛布病监测及净化方案制定发挥技术支撑作用。     

应用全乳环状反应做布病检疫试验的报告

应用血清学方法诊断泌乳期奶牛布病,多因颈静脉采血时的刺激和惊扰造成奶量下降,畜主不满,影响检疫工作的开展。为解决此问题,我们在两个牧场的11个分场选取850头泌乳期奶牛,进行了以全乳环状反应为主,以平板凝集反应(以下简称平板)、试管凝集反应(试管)和补体结合反应(补反)为对照的布病检疫试验,藉以探讨全乳环状反应的敏感性,特异性和应用价值。现报告如下:     

几种布鲁氏菌病检测方法的比较

为研究虎红平板凝集试验(RBT)、全乳环状试验(MRT)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)及胶体金检测试纸条对布病的检测效果,本研究采用以上方法分别对感染地区和净化地区的牛群血清、羊群血清、牛群奶样进行了检测效果的比对。结果显示,针对牛群血清,RBT结果阳性率最高,iELISA与胶体金结果阳性率相似,表明RBT的敏感性较好,iELISA与胶体金检测试纸条的特异性较RBT好;针对羊群血清,iELISA与胶体金检测试纸条的敏感性和特异性较RBT好;针对牛群奶样,MRT结果阳性率低于全乳iELISA和胶体金检测试纸条。全乳iELISA和胶体金检测试纸条在试验中显示出具有较高的敏感性和特异性。     

全乳环状试验在奶牛布病检测中的应用

奶牛布鲁氏杆菌病（下称布病）是人畜共患的一种慢性传染病，患病奶牛可通过乳汁在一定的时间内排菌。为了保证人民群众的身体健康，提供安全放心奶。对奶牛进行布病检测，净化奶牛群．具有重要的现实意义。过去我们一直采用血清学虎红平板凝集试验进行家畜布病检测的阳间筛选。但近年来随着奶牛业发展，存栏逐年上升，逐头采血使得检测任务增大，并且采血技术要求高，基层技术人员缺乏。更重要的是采血取样还会使牛造成一定的应激反应，影响其生产性能，养殖户不愿意配合。从而使奶牛布病检测工作难度增大。     

青海海西州地区牛羊布鲁菌氏病监测方案的研究

目的探索适合青海省海西州地区牛、羊布鲁氏菌病的监测方案,净化布鲁氏菌病.利用琥红平板凝集试验(RBPT)、全乳环状试验(MRT)和试管凝集试验(SAT)对1200份牛血清中376份奶牛血清、677份羊血清,以及376份牛奶进行检测.结果RBPT检测1200份牛血清中9份可疑,3份阳性;376份奶牛血清中3份可疑,1份阳性;其他牛6份可疑,2份阳性;677份羊血清中3份可疑.MRT检测376份奶样中5份可疑,1份阳性.SAT重复检测的20份血清中2份为阳性,RBPT与MRT结果的符合率为100%.结论三种检测方法的联合使用适合大样本的进行布鲁氏菌病的监测,为基层布鲁氏菌病的监测方案的研究提供了理论依据.     

不同方法检测奶牛布氏杆菌抗体的比较试验

采用虎红平板凝集试验(RBT)、全乳环状试验(MRT)和试管凝集试验(SAT)3种国家标准认可的动物布病检疫方法检测奶牛布氏杆菌抗体,并进行了比较研究。从82头非免疫和S2菌苗免疫的奶牛采集血样和乳样,RBT检测血样的阳性率为51.22%(42/82),MRT检测乳样的阳性率为46.34%(38/82),SAT检测血样的阳性率为45.12%(37/82)。以SAT定量检测的结果为参照标准,RBT初筛试验的符合率比MRT高,而且MRT反应强度的差异与SAT抗体滴度没有明显相关性。另对乳清和血清样本中布氏杆菌抗体的差异进行了分析讨论。     

全乳环状试验检测奶牛布氏杆菌病

布氏杆菌病是河北省重点防治的疫病之一，对其检测尤为重要。目前，我省采用的血清学虎红平板凝集试验(RBPT)是牛、羊布病的主要检测方法。但是，由于我省需要检测的牛、羊数量大，采血技术人员匮乏，使RBPT在大面积的奶牛布病检测的推广应用中显得步履艰难。为了适应当前布病检测的形势，避免因采血难而带来的诸多弊端，我们在探索全乳环状试验(MRT)检测奶牛布氏杆菌病的技术上作了一些有益尝试，     

OIE标准全乳iELISA与国标全乳环状试验在奶牛布鲁氏菌病检测中的研究

从不同地区采集奶样,将OIE诊断试验中用于牛布病诊断的全乳iELISA与国标中的MRT进行比对。在检测的526份样品中,全乳iELISA检出93份阳性,国内MRT抗原检出31份阳性,英国卫桥的MRT抗原检出44份阳性(检测数为264份);对其中一个地区的31份奶品,除了抗体的检测外,同时进行了奶样的细菌分离、奶样提取DNA的检测,全乳iELISA与乳样DNA提取均检出21份阳性,且一一对应,国内MRT抗原只检出10份阳性。结果表明全乳iELISA敏感性好,操作方便快捷,具有血清学检测所不具备的许多突出优点。     

乳清代替血清诊断奶牛布病取得成功

乳清代替血清诊断奶牛布病取得成功○黑龙江省八五○农场（虎林市１５８４２２）单志贵陈和增孙树友董元成智宏奶布病是人畜共患的传染病，对奶牛业的发展和人体健康威胁很大。为彻底消灭布病，杜绝危害，在“八五”国家科技攻关示范区，我们用乳清代替血清诊断奶牛布病取...     

全乳环状试验检测奶牛布氏杆菌病的试验探讨

用全乳环状试验 (ABRT)、试管凝集试验 (SAT)、虎红平板凝集试验 (RBPT) 3种血清学方法对南京地区 49头奶牛的血清和乳汁进行了布氏杆菌病的检测试验 ,并用ABRT法检测 2 0 0 0多份乳样。试验结果证明 ,ABRT法具有较高的敏感性和较强的特异性。该法操作简便、易行、快速、结果可靠、准确性高 ,可以在布氏杆菌病实际检疫中进行推广应用 ,并可替代SAT法和RBPT法     

牛源金黄色葡萄球菌单链抗体对奶牛乳腺炎的治疗效果评价

本文首先对患隐性乳腺炎的50头奶牛采取奶样,并对奶样进行了细菌分离鉴定及PCR检测,共检出金黄色葡萄球菌21株;随后对分离到的金黄色葡萄球菌进行了药敏试验,结果显示70%的金黄色葡萄球菌对青霉素产生了耐药性。为了研究针对金黄色葡萄球菌全菌抗原的单链抗体对奶牛乳腺炎的治疗效果,将表达单链抗体的重组质粒通过无针注射器注射到患病奶牛的乳腺(600μg/乳区),48 h后再以相同的剂量注射一次。14 d后,奶样的加利福尼亚乳腺炎试验(California Mastitis Test,CMT)结果显示,治疗奶牛乳腺炎的有效率为83.33%,其中2例完全治愈。定期采集试验奶牛的乳样,并用PCR方法进行检测,发现第二次注射后的14 d内,奶样中未检测到重组质粒,说明重组质粒不能在奶牛体内长期残留。本研究为奶牛乳腺炎治疗抗体的研发提供了理论依据。     

奶牛布鲁氏菌病监测中存在的问题及对策

奶牛布鲁氏菌病(简称为布病)，是由布鲁氏菌引起的人畜共患的传染病，在奶牛中时有发生。大量布鲁氏菌在患病奶牛流产时随胎儿、胎水和胎衣排出，在流产后随阴道分泌物以及乳汁排出。排出的布鲁氏菌污染饲料和饮水，可感染其他健康奶牛，使疫情扩大，造成重大经济损失。含布鲁氏菌的奶及其他污染物对工作人员和消费者也构成一定的威胁。因此，依法对奶牛进行严格的布病监测是十分必要的。     

间接ELISA检测奶牛乳房炎多联苗抗体方法的研究

利用超声波破碎法制备无乳链球菌、停乳链球菌和金黄色葡萄球菌可溶性抗原。对3种破碎抗原最佳包被浓度及包被条件、血清样品工作浓度、封闭液、酶标二抗的最佳工作浓度及作用时间等反应体系进行筛选和优化，初步建立了间接ELISA法检测奶牛乳房炎多联苗3种菌血清抗体的方法。对24头泌乳牛进行抗体检测，结果表明该3种抗原反应体系一致，3种抗原最适包被浓度为4—6μg／mL．血清样品最佳稀释度为1：200，该方法具有快速、简单、特异性和重复性好等优点。     

民和县布鲁氏菌病、结核病监测调查及防治措施

笔者等在2008年6月～2010年7月期间,对民和县10308头奶牛采用牛型结核分枝杆菌PPD皮内变态反应试验,检出阳性病牛54头,阳性率0.524%;采用布鲁氏菌病试管凝集反应试验（SAT）检测奶牛10308头,查处阳性血清23份,阳性率为0.223%;采用虎红平板法和布鲁氏菌病试管凝集反应试验（SAT）试验,检测黄牛1267头、绵羊2351只,结果全部为阴性;布病采用细菌学试验检测奶牛流产胎儿20头份、绵羊测流产胎儿20头份,全部为阴性。从监测调查来看民和县奶牛存在布鲁氏菌病和结核病。本文就＂两病＂监测调查、存在的隐患、问题和综合防治措施提出了自己的看法,并进行了比较深入的探讨。     

几种布鲁氏菌病检测方法比对结果分析

为比较几种常用布鲁氏菌病(简称布病)检测方法特性,在某疫苗免疫的奶牛场随机选取40头奶牛,采集血清和奶样各40份,然后对采集的血清进行虎红平板凝集、试管凝集、胶体金、酶联免疫吸附试验(iELISA和cELISA)和琼脂扩散方法检测,对采集的奶样进行病原学检测(qPCR)和抗体检测(胶体金)。结果显示:4种国标方法(虎红平板凝集、试管凝集、iELISA和cELISA)检出的阳性样品数量有较大差距,分别为16、6、23和33份,其中经试管凝集试验检出的阳性血清,经其他3种国标方法也检测为阳性;通过胶体金法检出阳性血清数(9份)略高于试管凝集试验,且血清及牛奶样品经胶体金检测结果基本一致;琼扩法检出12份阳性血清,且显示抽检奶牛中存在野毒感染;qPCR和胶体金试纸条对采集奶样的检测结果有较大差距,经qPCR检测仅1份样品呈阳性。结果表明:国标方法中,试管凝集试验特异性最高,iELISA和cELISA敏感性较高;病原学检测临床样品检出率较低,琼脂扩散试验敏感性有限,胶体金法敏感性适中,操作简便,适合布病免疫奶牛场自检。本研究为牛场布病不同检测目的方法选择提供了参考。     

奶牛布病疫情的处置体会

布病是由布鲁氏菌引起的人和多种动物共患的传染病。本文对一起奶牛布病疫情的实验室监测、流行病学调查、防控处置措施等进行了介绍,以期为今后奶牛布病疫情的净化处置提供参考。     

湟中县奶牛布病检测及流行趋势分析

布鲁氏杆菌病（简称布病）是一种人畜共患传染病,此病流行较广,青海省湟中心县在2001年12月21日通过省级验收布病达到“稳定控制区”标准。但随着奶牛业在全县迅速发展,奶牛交易流通的增加,及奶产品在人们饮食结构中的比例越来越大,奶牛的布病发病率已在悄然上升。为了掌握湟中县布病是否存在,我们在近五年对奶牛的布病流行情况进行分析。     

利福昔明乳房注入剂(干乳期)对奶牛的安全性研究

研究利福昔明乳房注入剂(干乳期)对健康奶牛的正常体温、日产奶量、奶中体细胞数和乳房内菌群的影响。选择健康泌乳期奶牛12头,给药前1 d和给药前0 d,统计记录各试验奶牛的直肠温度、日产奶量,检测每个乳区采集奶样的体细胞数,并对给药前0 d的奶样进行病原菌分离检测。每头入选奶牛的四个乳区分别单次灌注利福昔明乳房注入剂,在给药后的第1、3、5、7、10天分别记录每头奶牛的日产奶量;在给药后的第12小时、3、5、7、10天分别采集奶样进行体细胞检测,同时检查直肠温度;在给药后的第10天对采集的奶样进行病原菌检测。比较奶牛用药前后直肠温度、日产奶量、奶中体细胞数和病原菌的变化。试验期间对给药奶牛进行连续观察,记录奶牛是否出现红、肿、热、痛等临床症状。结果表明。给药前1 d、给药当天和最后一次给药后的第1、3、5、7、10天,试验奶牛的日产奶量平均值分别为30.5、30.3、29.8、30.3、30.0、30.9和31.0 kg,相互之间无显著性差异(P>0.05);给药前后各时间点采集的奶中体细胞数大都维持在30~50万/mL;给药前后各时间点测得的奶牛直肠温度无显著性差异(P>0.05);病原菌检测结果显示,在给药前0 d分离到7株大肠杆菌、6株链球菌和9株葡萄球菌,给药后第10天采集的奶样中未检测到大肠杆菌和葡萄球菌,仅检测到1株链球菌。与给药前相比,奶中的病原菌数量有所减少,无新增感染。利福昔明乳房注入剂(干乳期)对奶牛正常体温、产奶量、奶中体细胞数无不良影响,该制剂对于奶牛是安全的。     

乐都县奶牛布氏杆菌病监测报告

乐都县奶牛布氏杆菌病监测报告宋景娥，何忠福，王振魁（乐都县畜牧兽医服务中心）１９９４年６～７月，我们对乐都县１２７头奶牛进行了布氏杆菌病监测。阴、阳性血清和抗原诊断液由成都药械厂提供。监测方法按《动物检疫操作规程》中“布病试管凝集反应操作和判定方法”...     

莆田市家畜布鲁氏菌病血清学调查

布鲁氏菌病以下简称布病，是由布鲁氏菌引起的人畜共患慢性传染病。动物布病以流产不孕，生殖系统发炎，关节炎为主要特征，人布病则表现为波浪热、出汗、关节痛、神经痛、肝、脾肿大等症状，该病给畜牧业生产及人类健康造成严重危害。２００１年我站对全市的家畜布鲁氏菌病进行监测，现报告如下：１材料和方法１．１试剂布鲁氏菌琥红平板凝集抗原，试管凝集抗原、阳性血清均由中监所提供。１．２被检血清由各县区畜牧兽医站，乡镇畜牧兽医站组织对规模猪场、奶牛、奶山羊专业户的动物采血，将血样编号、填好采血样表后，及时送市畜牧兽医站…