磁场对低温保存牛精液的影响

将５ｍＬ稀释后的新鲜精液分为５组，每组１ｍＬ。取其中１组作为对照组，不经磁场处理，其余４组分别放入磁化杯磁化２ｈ、５ｈ、２４ｈ和一直磁化，５组均放在冰箱０－５℃的环境中保存。对其精子活率、顶体完整率和精子存活时间进行分析，试验重复１５次。结果表明，精液经过磁化可以提高活率，并且延长了存活时间，尤以磁化５ｈ效果最明显，其存活指数比对照组提高了２３．７％，差异显著。磁场能使精液的顶体完善率下降，且随着     

不同离心速率对波尔山羊精液低温保存效果的影响

对波尔山羊精液进行1 000 r/min、2 000 r/min、3 000 r/min、4 000 r/min离心处理,用含葡萄糖、柠檬酸钠、EDTA和卵黄的稀释液代替精清,在4 ℃下保存,每隔12小时检测一次精子活率和精子顶体完整率.结果表明在这四种离心处理中以1 000 r/min处理效果最好,生存指数和保存48小时后的精子活率显著优于其它离心处理(P＜0.01),精子顶体完整率显著高于其它三种离心处理(P＜0.01),精子的存活时间达到90小时,精子顶体完整率、精子活率和生存指数随着离心转数的增加而下降.     

波尔山羊除精浆冷冻精液的试验研究

以波尔山羊精液为试验材料,通过二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000 r/min离心处理,制作细管冻精,并进行活力、顶体完整率、存活时间以及超微结构的观察分析.结果表明,经离心处理的冻精精子活率显著优于对照组(P<0.05),精子顶体完整率显著高于对照组(P<0.05),精子存活时间处理间差异不显著,除精浆可使精子所受冷冻损伤大为减轻,显著提高冻后精子品质.     

在4℃降温平衡过程中0.2g/L咖啡因与精子共孵育时间对猪颗粒冻精质量的影响

实验旨在探讨在猪精液于4℃平衡2 h过程中0.2 g/L咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h,对颗粒冻精解冻后精子活率、活力、质膜完整性和顶体完整性以及解冻后精子体外存活时间等指标的影响,以期进一步提高猪颗粒冻精质量。实验结果表明,在精液冷冻之前,咖啡因不同平衡时间组的精子活率和活力都呈现出升高趋势,但与对照组差异不显著;咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组的精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组,前3组之间差异均不显著。而颗粒冻精解冻后,咖啡因与精液共孵育2 h、1 h和0.5 h组精子活率和活力均显著高于对照组,其中共孵育1 h组显著高于其他3组(P0.05),共孵育2 h组和0.5 h组间差异不显著(P0.05);共孵育2 h组精子顶体完整率和质膜完整率显著低于对照组和共孵育0.5 h、1 h组(P0.05),但后3组之间差异不显著;共孵育2 h组精子存活时间显著低于对照组、共孵育1 h和0.5 h组(P0.05),其中共孵育1 h组精子存活时间最长,达7 d以上。总之,在精液4℃降温平衡过程中咖啡因与精液共孵育1 h对冷冻后精子质量最有利,解冻后精子活率和活力显著高于其他各组,且解冻后精子体外存活时间最长。     

稀释方法、孵育温度和时间对冷冻—解冻后猪精液质量的影响

试验以精子冻后活率、质膜完整率和顶体完整率三项指标评价了一步稀释法(Ⅰ组)和两步稀释法(Ⅱ组),以及不同保存温度和时间对解冻、稀释后的猪精液质量的影响。结果表明,采用两步稀释法对解冻后的猪细管冻精进行稀释,精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别达到82.6%、89.4%和90.3%,极显著高于一步稀释法(P0.01)。用两步法稀释后的精液36℃保存5 min、10 min和15 min时精子活率分别为81.2%、80.8%和80.9%(P0.05),40 min时为50.1%;精子质膜完整率和顶体完整率未见显著下降(P0.05);17℃保存15 h时精子活率、质膜完整率和顶体完整率分别为81.1%、88.9%和91.4%(P0.05);60 h时分别为50.4%、61.4%和61.6%,均极显著低于初始的各项指标(P0.01)。     

冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂对梅花鹿冻融精子质量的影响

【目的】 探究在冷冻稀释液中添加大豆卵磷脂代替10%卵黄对梅花鹿精液冷冻保存效果的影响,为梅花鹿人工授精体系的完善提供参考。【方法】 采用电刺激法采集梅花鹿精液,以精液冷冻稀释液中分别添加1%、2%、3%、4%和5%大豆卵磷脂代替10%卵黄作为试验组,添加20%卵黄作为对照组,分别进行各组精液冷冻保存。5 d后,进行精液解冻,检测解冻后各组精子的活力、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性、存活时间,筛选合适浓度的大豆卵磷脂。选取4~5岁健康雌性梅花鹿,肌肉注射300 IU孕马血清促性腺激素（PMSG）和0.4 mg氯前列醇钠进行同期发情处理,发情后第20 h用20%卵黄组与筛选出的大豆卵磷脂组冻精进行人工输精,输精后30 d使用B超检测仪检测妊娠情况,统计妊娠率。【结果】 与对照组相比,1%大豆卵磷脂组冻融后的精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率及线粒体活性均显著提高（P<0.05）;随着稀释液中大豆卵磷脂浓度的增加,其冻融后精子活力、向前活动力、快速前进活力、活率、质膜完整率、顶体完整率以及线粒体活性呈下降趋势,精子存活时间也随浓度的增加而减少。1%大豆卵磷脂组冻融精子人工授精梅花鹿的妊娠率为61.11%,高于对照组、2%和3%大豆卵磷脂组,但差异均不显著（P>0.05）。【结论】 在梅花鹿精子冷冻稀释液中添加1%大豆卵磷脂替代10%卵黄,能有效提高梅花鹿冻融精子的质量,为进一步筛选新型梅花鹿精液冷冻稀释液提供理论基础。     

添加低剂量大豆卵磷脂稀释液低温保存绵羊精液的优化研究

本实验旨在探讨添加低剂量大豆卵磷脂稀释液对绵羊精液低温保存效果。实验一采用6个浓度(0%、0.25%、0.5%、0.75%、1.0%、1.25%)大豆卵磷脂替代TRIS专利稀释液中卵黄低温保存绵羊精液,在第0、1、4、7、10、12、18天检测精子活率、顶体完整率;实验二选用实验一中最优添加组(0.5%组)和TRIS专利稀释液制成粉剂低温保存绵羊精液,在保存第0、1、4、7、10、12天对精子活率和顶体完整率进行测定,并在保存第10天对绵羊进行人工授精。结果表明:实验一中,0%组从第1天精子活率低于其他组(P<0.05),0.25%组精子活率观测值从第10天开始低于0.25%以上浓度组(P<0.05),0.5%、0.75%、1.0%、1.25%组保存第10天精子活率均大于50%,0.5%组保存第18天精子活率高于1.0%、1.25%组(P<0.05);各组顶体完整率缓慢下降,各时间点均无显著性差异;实验二中,0.5%组与TRIS组在各时间点的精子活率、顶体完整率与受胎率均无显著性差异,保存第10天精子活率均高于50%;0.5%组受胎率为65.49%,略低于TRIS组67.65%(P>0.05)。本实验条件下,绵羊精液低温保存稀释液中添加0.5%大豆卵磷脂替代卵黄效果最佳。     

同种和异种抗精子抗体血清对牛精子活力和顶体完整性的影响

8头黑白花成年公牛,每头采集3次精液,利用精子死活染色法和顶体染色法,评定不孕母牛抗精子抗体阳性血清(同种血清组,试验组Ⅰ)和兔抗牛精子抗体免疫血清(异种血清组,试验组Ⅱ)在0.2、4及6小时对精子活力和顶体完整性的影响,研究抗精子抗体引起牛不孕的可能机理。结果表明,在2小时,试验组Ⅰ和Ⅱ的精子活率显著低于处女牛血清组(对照组Ⅲ)和空白对照组(对照组Ⅳ,P<0.05或0.01),但在4、6小时,各组之间的差异不明显(P>0.05)。2、4和6小时对照组Ⅲ、Ⅳ的精子顶体完整率均明显高于试验Ⅰ、Ⅱ组(P<0.01或0.05)。在6小时前,相同时间间隔时,各组精子活率高于顶体完整率,随着作用时间延长,精子顶体完整率的下降幅度大于精子活率。试验表明,抗精子 抗体血清除能影响精子活力外,主要损伤精子顶体的正常形态。     

不同处理对猪精子活率、顶体完整率、DNA含量及精清酶活性的影响

对猪全精进行稀释、保存、冷冻、冷休克处理,测定相关指标.结果表明,精液1:1稀释后,在室温(25℃)保存过程中,精子活率、顶体完整率逐渐下降,精清中GOT活性持续升高,ALP活性变化不明显,LDH活性首先于保存的第24h升高,以后下降.精液1:10稀释后,精子活率急剧降低,顶体完整率没有显著性变化;随室温保存时间的延长,两者呈下降趋势,到室温保存的第24h,除GOT活性升高外,其它两种酶活性变化不明显.精液经冷冻解冻、冷休克处理后,精子活率、顶体完整率大幅度下降,精清中GOT、LDII、ALP活性升高,并随冷休克处理时间的延长而加剧;稀释后再进行冷休克处理,各指标变化幅度减小.本试验结果还表明,猪精液DNA含量为3.14mg/10~9精子,其与精子密度呈正相关(r=0.893),试验中各种处理均未引起精子DNA含量明显变化.     

牛冷冻精液稀释液中草药配方的初步研究

通过比较以淫羊藿为主要成分的单方及复方中草药提取液对牛冷冻精液解冻后精子活率、畸形率、顶体完整率及低温保存时间的影响，以期开发牛冷冻精液中式稀释液。将三种不同配方的淫羊藿提取液分别以6．25％、12．5％、25．0％、50．0％的体积分数添加于稀释液中，制作牛颗粒冻精，利用干解冻法（40～42℃）解冻后分别检查精子活率、畸形率和顶体完整率，评定其品质。结果表明：配方三取得了较佳的冷冻效果。其提取液添加12．5％时精子冻后活率平均达到0．56，极显著高于其他各组（P〈0．01）：精子顶体完整率最高达到76．80％。畸形率仅14．61％，低温保存时间长迭138h。配方三最有利于生产牛冷冻精液。     

保存温度和不同种类稀释液对猪精液品质的影响

猪精液在室温保存时,含庆大霉素的稀释液保存效果优于含青、链霉素的稀释液,两种稀释液在保存72h时,精子活率、顶体完整率、GOT和LDH活性以及存活指数差异极显著(P<0.01).低温保存时,含蜂蜜和卵黄的稀释液对防精子冷刺激、维持精子活率的效果比含葡萄糖、奶粉的稀释液理想.在冷冻保存条件下,以含2%甘油的稀释液保存效果最佳.液态保存(室温、低温)的猪精液,LDH活性随精子活率下降而下降;pH值则都呈先上升后下降的变化趋势.室温保存主要是引起精子顶体脊膨大和保存后期的顶体前端膨大;低温保存主要引起顶体前部膨大和保存后期的少数顶体脱落;冷冻保存主要是造成顶体的膨大程度加大和顶体脱落.3种保存条件都造成精子线粒体透性增强.液态保存和冷冻保存精液的精清GOT活性与顶体完整率无显著相关性(P>0.05).     

不同离心条件对犬精液冷冻保存质量的影响

为评估3种离心条件对犬精液解冻后的影响。将手握法采集的精液分成3等份,分别用3种离心条件离心、稀释冷冻,解冻后保存在37℃水浴中,0-6h测定精子活力、活率、畸形率、顶体完整率。结果表明,3种离心处理组的精子0h活力、活率、畸形率、顶体完整率差异不显著（P〉0.05）,但随保存时间的增加明显下降（P〈0.05）,3组之间变化差异不显著（P〉0.05）。     

除去精浆对波尔山羊冷冻精液品质的影响

以波尔山羊精液为实验材料,采用二步稀释法在降温前以葡萄糖-卵黄液为洗涤液,应用离心洗涤法对波尔山羊精液进行1000r/min离心处理,制作细管冻精,并进行超微结构分析.结果表明:经离心处理的冻精精子活率极显著优于对照组(P<0.01),精子顶体完整率极显著高于对照组(P<0.01) ,精子存活时间不同处理间未见显著差异(P>0.05).精浆中包含有多种物质,充当精子载体的作用,并可稀释精子,为精子提供代谢物质.试验中除去精浆后精子活率、 顶体完整率均优于对照组,表明除去精浆对冷冻后的精子品质有提高作用.     

新西兰兔精液冷冻保护剂的筛选

本试验的目的是分析在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中分别添加不同浓度的海藻糖、透明质酸、维生素E(Ve)、超氧化物歧化酶(SOD)对兔精液冷冻保存效果的影响,以冻后精子活率、质膜完整性、顶体完整率等作为质量评定指标,筛选出效果较好的新西兰兔精液的冷冻保护剂种类及浓度。结果表明,精液冷冻保存稀释液中添加3种浓度的海藻糖均未提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加0.5%和1%的透明质酸提高了兔精液冷冻后的精子活率(P0.05),但各组间质膜完整率和顶体完整率无显著差异;添加2 g/L Ve提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05);添加4 000 IU的SOD提高了兔精子4℃平衡后的活率、冷冻后精子活率、质膜完整率和顶体完整率(P0.05)。结果证实,在新西兰兔精液冷冻保存稀释液中添加适宜浓度的Ve和SOD可提高兔精液冷冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率。     

液氮蒸汽熏蒸时间对犬精子冷冻效果的影响

本试验研究了0.5 m L细管冷冻保存犬精液过程中液氮熏蒸时间对精子冷冻效果的影响。试验分为5组,将精液细管置于液氮液面上方2 cm处,分别熏蒸0 min(直接投入液氮)、1 min、2 min、4 min、8 min。解冻后通过活率、活力、畸形率及顶体完整率对精子进行评估。结果:液氮蒸汽熏蒸0 min和1 min组精子活率和活力显著低于其它各组(P0.05)。与直接投入液氮相比,在液氮蒸汽中预冷冻超过2 min能够提高精子顶体完整率(P0.05)。本试验表明在使用0.5 m L细管冷冻犬精子时,液氮熏蒸时间在4~8 min较为适宜。     

菟丝子水提物对17℃保存猪精子品质的影响

在猪精液基础稀释液中添加不同浓度的菟丝子水提物,测定17℃保存时猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率及SOD活性,探讨菟丝子水提物对猪精液17℃保存效果的影响。试验分5组:基础稀释液组(I)、菟丝子水提物0.125%(II)、0.25%(III)、0.5%(IV)及Vc对照组(V),结果表明,随着保存时间的延长,各组猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和SOD活性均降低,且前三者降低显著(P<0.05),后者I、IV和V组在保存第2天时及II组和III组在保存第4天时显著降低(P<0.05)。各组相比,保存后第1天和第2天时,精子活率、质膜完整率和顶体完整率均无显著差异(P>0.05),且保存后第3⁵天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第15天均以III组最高,其中精子活率除第3天III组与II、V组精子无显著差异外,质膜完整率除第3天III组与II和IV组无显著差异外,其余均存在统计学差异(P<0.05),但顶体完整率仅第3天显著高于I组和II组(P<0.05)。保存后第1³天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第43天,各组精子SOD活性均无显著差异存在(P>0.05);第4⁵天时,精子SOD活性II-V组均显著高于I组(P<0.05),其中以III组最高,但仅第4天III与各组存在显著差异(P<0.05)。结果表明:适量浓度的菟丝子水提物对17℃保存猪精子具有保护作用。     

测定冻精酶活性的高低预测精液品质

[目的]为了通过测定牛冻精谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)的活性高低来预测精液品质.[方法]用人医血清酶类测定的赖氏法测定两种酶的活性.[结果]表明:谷丙转氨酶与精子活率呈极显著负相关(P＜0.01),与顶体完整率呈显著负相关(P＜0.05);谷草转氨酶与精子活率呈极显著负相关(P＜0.05),与顶体完整率呈极显著负相关(P＜0.01).[结论 ]谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性愈高,精子活率和顶体完整率愈低,精子品质下降.     

鸵鸟卵黄对猪精子冷冻后质量的影响

为了提高猪冷冻精液品质和精子抵抗低温打击的能力,本研究以5%、10%、15%、20%和25%等不同浓度的鸵鸟卵黄作为冷冻保护剂,以20%的鸡蛋卵黄和20%的鸽蛋卵黄为对照,将冷冻-解冻后的精子活率、质膜完整率和顶体完整率作为评价指标,分析鸵鸟卵黄对猪精子的抗冷冻保护作用。结果表明：稀释液中添加20%鸽蛋卵黄时,精子活率、顶体完整率和质膜完整性分别为52.11%、55.62%和54.94%,显著高于其他组（P〈0.05）。虽然稀释液中添加15%鸵鸟卵黄时,冷冻-解冻后精子活率、顶体完整率和质膜完整率显著高于5%、10%、20%和25%鸵鸟卵黄组,但仍然显著低于稀释液中添加20%鸽蛋卵黄处理组。本研究表明,鸵鸟卵黄在冷冻过程中对猪精子具有一定的保护作用,但相对于鸽子蛋和鸡蛋卵黄效果并不理想。     

N-乙酰半胱氨酸对绵羊精液低温保存效果的影响

为研究精液稀释液中不同浓度N-乙酰半胱氨酸(NAC)对绵羊精液低温保存效果的影响,试验用含有不同浓度(0,0.5,1.0,1.5,2.0 mmol/L)NAC的绵羊精液稀释液在4℃条件下保存绵羊精液,并对精子活率、有效存活时间以及48小时的精子畸形率和顶体完整率进行了检测。结果表明:在稀释液中添加1.0 mmol/L的NAC能显著提高精子有效存活时间、总存活时间和48小时精子的顶体完整率(P0.05)。说明添加1.0 mmol/L NAC的精液稀释液能显著改善绵羊精液的低温保存效果。     

不同浓度的甘油和DMSO对蒙古羊精子活力的影响

研究由两个实验组成:实验一探讨添加不同浓度的甘油(1%、3%、5%、7%,V/V)对冷冻精子活率的影响,实验二探讨在37℃或5℃下添加不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)(1%、1.25%、1.5%、1.75%,V/V)对冷冻精子活率的影响.通过实验组获得蒙古羊的最优的甘油浓度稀释液条件下,测定精子解冻后的活力、直线运动率、成活率及顶体完整率.同样用DMSO代替甘油测定精子活率、直线动动率、成活率和顶体完整率,实验结果显示前一项指标得到显著的改善(P＜0.05),且在37℃添加7%甘油效果最好.但是顶体完整率随着甘油或DMSO浓度的增加而出现下降趋势,也就是顶体完整率在5℃下添加1%的甘油或1.75%的DMSO效果较好(P＜0.05).实验中在37℃中增加DMSO顶体完整率显著下降(P＜0.05),此外,在5℃时添加1%DMSO时精子顶体完整率优于其他实验组.实验中在37℃条件下加入1.75%的DMSO比在5℃下精子活力好,在37℃添加7%的甘油比在5℃下添加7%的甘油效果显著(P＜0.05).研究结果表明,对于蒙古羊甘油仍是较好的精子冷冻保护剂.