两种兽用狂犬病灭活疫苗抗体效价的监测报告

为了了解不同种类的狂犬病灭活疫苗的免疫效果,笔者分别使用国产兽用狂犬病灭活疫苗(CTN-1株)和进口兽用狂犬病灭活疫苗(PasteurRIV株)对120条散养犬进行免疫。在免疫前和免疫后7 d、21 d、90 d、180 d、360 d分别采集犬血清,采用ELISA方法检测抗体水平。结果表明,使用国产灭活疫苗和进口灭活疫苗免疫,其在免疫前和免疫后7 d、21 d、90 d、180 d、360 d抗体阳性率,分别为0、86.7%、98.3%、98.3%、98.3%、86%和0、85%、100%、100%、100%、89.7%;免疫前、使用国产疫苗免疫、使用进口疫苗免疫,其抗体平均阳性率分别为0、93.6%和95%。分析表明,两种疫苗比较,免疫抗体产生峰值时间一致,衰减速度同步,免疫效果相当,都能够达到预防和控制狂犬病流行的目的。在犬狂犬病免疫工作中选择国产兽用狂犬病灭活疫苗(CTN-1株)还是进口兽用狂犬病灭活疫苗(Pasteur RIV株)取决于地区对免疫效果和价格两个因素的综合考量。     

犬狂犬病灭活疫苗(SAD株)免疫效果的研究

对犬狂犬病灭活疫苗(SAD株)的免疫效力及副作用进行了研究,表明SAD株灭活疫苗没有明显的副作用且免疫效果好,持续时间长。所有免疫犬在免疫7 d后均产生中和抗体,疫苗原苗免疫组平均水平达到了6.1 U,与进口同类疫苗相当。在免疫后14 d达到高峰,然后缓慢下降。疫苗免疫后12个月内虽然抗体水平呈下降趋势,但到12个月时,免疫犬的抗体水平仍在0.5 U以上,与进口狂犬病灭活疫苗效果无显著差异。攻毒试验结果表明,免疫12个月以后,疫苗原苗和稀释疫苗免疫组均有80%以上保护率,与进口疫苗保护率相当。     

ELISA与FAVN方法检测犬狂犬病抗体的比较

比较酶联免疫吸附试验(ELISA)与细胞培养病毒中和试验(FAVN)检测狂犬病疫苗免疫后血清抗体.将40只犬免疫兽用狂犬病疫苗后,第14 d静脉采血分离血清,分别采用ELISA法和国际贸易指定试验FAVN法检测血清样品,试验犬免疫第21 d攻击狂犬病毒BD06株.结果表明,两种方法检测结果差异不显著(p≥0.05,p=0.19),FAVN、ELISA法检测狂犬病抗体与攻毒试验结果的阳性符合率均为100%.     

狂犬病灭活疫苗PV2061株的免疫原性试验

本试验对兽用狂犬病灭活疫苗PV2061株的保护效率进行评估,分别以常量、1/2剂量和1/4剂量免疫本动物并进行街毒攻击试验。血清中和抗体检测结果表明,前2组在免疫4周后抗体阳性率均为100%,抗体的平均滴度分别为4.86 IU/mL和1.18 IU/mL,1/4剂量组的抗体滴度较低,平均滴度仅为0.36 IU/mL。攻毒后前2组的保护率为100%,1/4剂量组的保护率为40%,阴性对照组攻毒后全部死亡。对试验犬的脑组织进行直接荧光抗体染色检测表明仅有死亡犬脑组织中有狂犬病病原存在。综上所述,狂犬病灭活疫苗PV2061株正常免疫剂量和1/2免疫剂量的强毒攻击保护率均在80%以上,阴性对照犬的死亡率高于80%,符合国际标准。本试验为灭活疫苗PV2061株的保护效率提供了试验依据,为其实际应用并投入生产奠定了试验基础。     

猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)对兔与猪免疫攻毒保护平行关系的研究试验

用研制的连续3批猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)分别以不同剂量免疫健康兔和断奶仔猪,检测其免疫28 d后的血清抗体,采用血清中和试验法测定血清中和指数,并对免疫28 d后的兔和断奶仔猪分别进行攻毒,统计各组兔和断奶仔猪免疫后攻毒保护率。结果表明,兔免疫28 d后的血清抗体中和指数为794～1258时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥1479时可获得100%保护;仔猪免疫28 d后的血清抗体中和指数为229～269时保护率为60%～80%,血清抗体中和指数≥331时可获得100%保护。兔与仔猪对猪伪狂犬病灭活疫苗(HB-J株)均产生良好的免疫应答反应,抗体值较高者获得保护率相对较高,兔与猪免疫与攻毒保护呈现平行关系。     

猪乙型脑炎(HW1株)细胞灭活疫苗免疫抗体水平分析

为评估猪乙型脑炎(HW1株)细胞灭活疫苗的免疫原性,用商品化的乙型脑炎鼠脑疫苗、乙型脑炎弱毒疫苗(SA14-14-2株)以及自制乙型脑炎细胞灭活疫苗(HW1株)分别免疫仔猪,通过抗体水平监测试验、中和抗体试验、小鼠攻毒保护试验分别检测了其特异性抗体消长情况、中和抗体效价产生情况及疫苗对小鼠的攻毒保护率。结果显示,3种疫苗均能产生中和抗体,乙型脑炎细胞灭活疫苗免疫组中和抗体水平要高于鼠脑疫苗和弱毒疫苗免疫组,乙型脑炎细胞灭活疫苗和弱毒疫苗免疫组对小鼠的攻毒保护率高于鼠脑疫苗免疫组,但两者之间差异不显著。抗体消长情况显示,至8周观测期结束,鼠脑疫苗免疫组的抗体阳性率为80%,乙型脑炎细胞灭活疫苗和弱毒疫苗免疫组抗体阳性率为100%。结果表明猪乙型脑炎(HW1株)细胞灭活疫苗的免疫原性优于鼠脑灭活疫苗和弱毒疫苗。     

狂犬病灭活疫苗(r3G株)的免疫效力及安全性试验报告

为检测狂犬病灭活疫苗(r3G株)的免疫效力及安全性,将威克中试生产的3批疫苗(批号2015006、2015007、2015008)和参考苗(梅里亚狂犬病灭活苗)同时以同样剂量(2.0 IU)免疫狂犬抗体阴性的3月龄健康比格犬及怀孕母犬,并监测疫苗对体温及体重的影响,定期检测血清中狂犬病病毒的抗体效价,同时跟踪免疫母犬的产仔情况。结果表明,3批中试疫苗效价高且批间稳定,各批效价均高于5.0 IU/m L,对3月龄犬具有很好的安全性及免疫原性;首免14 d抗体效价即可达到有效保护水平(大于0.5 IU/m L),免疫持续期可达15个月。中试疫苗对怀孕母犬亦具有很好的安全性。     

貂源伪狂犬病毒DL14/08株免疫原性及其保护效果的研究

为研制貂源伪狂犬病(PR)灭活疫苗,本实验室从疑似患PR的水貂脑组织中分离到一株PR病毒(PRV)DL14/08株(10~(7.10)TCID_(50)/m L),采用甲醛灭活以铝胶为佐剂制备了水貂源PR灭活疫苗。采用水貂和家兔对疫苗进行安全性检验和最小免疫剂量测定,结果显示水貂和家兔的最小免疫剂量均为5×10~(5.6)TCID_(50)/m L;采用研制的PR灭活疫苗和商品化猪用PR灭活疫苗免疫水貂,免疫21 d后平均中和抗体分别为1∶516和1∶348,用相当于100倍半数致死量毒力的分离株病毒攻毒,自制灭活疫苗组保护率为100%,商品化疫苗组保护率为80%。实验结果表明,制备的水貂源PR灭活疫苗抗体水平及攻毒后保护率明显高于商品化疫苗,能够有效保护强毒株对水貂的攻击,可以作为水貂伪PRV预防和控制的候选疫苗株。     

牛病毒性腹泻病毒灭活疫苗的制备与免疫效果研究

为了开发针对牛病毒性腹泻病毒(BVDV)流行毒株的新型疫苗,试验采用以BVDV-1b亚型毒株(SC株)和白油为疫苗株和佐剂,制备了BVD油乳剂灭活疫苗,并通过抗体消长规律和免疫攻毒保护试验对灭活疫苗的免疫效果进行了研究。结果表明:该疫苗具有良好的安全性;用该疫苗给牛免疫1.0 mL和2.0 mL后的第21天中和抗体效价达到峰值,在免疫4.0 mL后的第30天中和抗体效价达到峰值,其中4.0 mL的免疫剂量在免疫后第180天中和抗体效价仍维持在6.0 lb以上;该疫苗在免疫2.0 mL后的21 d内均能够有效保护BVDV-1b强毒株的攻击,保护率达100%。说明BVDV油乳剂灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性,为我国研发具有自主知识产权的BVDV疫苗奠定了基础。     

猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗（LA-A株）的最小免疫剂量和制品保存期的研究

本研究将伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)变异株(PRV AH02LA株)的gE基因缺失株(LA-A株)接种BHK-21细胞,经纯悬浮培养制备抗原,甲醛灭活后制备油乳剂灭活疫苗,并确定该灭活疫苗的最小免疫剂量和效力检验方法,以及在2~8℃保存期。结果显示:猪伪狂犬病病毒基因缺失灭活疫苗(LA-A株)的效力检验方法为以2.0 mL(抗原含量108.20TCID50)接种4~5周龄PRV阴性健康仔猪,颈部肌肉注射,间隔28 d以相同剂量和方法加强免疫,加强免疫后第21 d,免疫猪血清PRV抗体中和指数应不低于10000,攻毒保护率应不低于80%;最小免疫剂量为1.0 mL(抗原含量107.90 TCID50);制品保存期:在2~8℃保存期为18个月。该研究结果为新型疫苗的研制提供了重要的试验依据。