禽霍乱＋大肠杆菌病 二联蜂胶灭活疫苗与油佐剂疫苗注射部位的动态病理组织学比较观察

用禽霍乱 大肠杆菌二联蜂胶灭活疫苗和油佐剂疫苗分别胸肌注射免疫肉鸡，分别于免疫后7d、14d和28d剖杀，取注射部位的肌肉组织，常规石蜡包埋切片观察。结果为，蜂胶疫苗免疫组免疫后7d时，肌纤维轻度水肿，纤维间有大量淋巴细胞和巨噬细胞的浸润，巨噬细胞吞噬有蜂胶颗粒，14d时肌纤维则恢复正常；油苗注射组免疫后，7d时肌肉中度水肿，其间有大量油乳状疫苗残留，镜检可见肌纤维断裂、坏死，其间有较多较大的油囊，囊壁由大量增生的成纤维细胞、异嗜性粒细胞、巨噬细胞、小血管及淋巴样细胞组成，细胞增生持续存在到28d，最后形成肉芽肿结构。研究结果表明，蜂胶疫苗免疫后对局部组织学影响明显小于油苗注射组。     

猪伪狂犬病蜂胶疫苗和油佐剂疫苗对小白鼠注射部位损伤的病理组织学比较

用猪伪狂犬病 g E/ g I基因缺失蜂胶灭活疫苗和油佐剂疫苗分别腿肌注射免疫实验动物小白鼠 ,分别于免疫后 2 ,7,1 4 d和 3 5d剖杀 ,取注射部位的肌肉组织 ,常规石蜡包埋切片观察。结果表明 ,蜂胶苗注射后立即吸收 ,局部不留痕迹 ,感官与对照相比无任何差异。免疫 2 d注射局部显微变化轻微 ,7d后肌纤维间隙发现吞噬黄色蜂胶疫苗的细胞 ,1 4 d此种细胞更多 ,3 5d汇聚成片 ;油苗注射后在 3 5d的试验期内一直未能全部吸收。免疫 2 d见肌纤维断裂、肿胀、坏死 ,大量嗜中性粒细胞浸润 ,肌纤维间隙广泛分布油囊 ,7d时局部炎症仍很严重 ,1 4 d表现炎症转归 ,至 3 5d形成肉芽组织包裹的油囊结构。结果表明 ,蜂胶疫苗免疫后 ,不但局部组织学影响明显小于油苗注射组 ,而且可趋化大量吞噬细胞到注射局部 ,促进抗原高效递呈 ,且可在注射局部的吞噬细胞胞浆中停留 3 5d以上 ,可能起到了类似“抗原库”的作用 ,从而更加持久有效地诱导免疫应答     

蜂胶疫苗的免疫效果及注射部位病理组织变化

蜂胶具有免疫增强作用,能增加抗体产生,使血清蛋白和丙种球蛋白含量提高,提高白细胞和巨噬细胞吞噬能力。与传统佐剂相比,蜂胶疫苗具有结构稳定,耐热抗冷,提前中和抗体的产生,延长免疫保护期等特点。蜂胶疫苗免疫后,不但局部组织学影响明显小于油苗注射组,而且可趋化大量吞噬细胞到注射局部,促进抗原高效递呈。     

猪生殖和呼吸系统综合征蜂胶疫苗和油乳剂疫苗注射部位的组织学变化比较

用猪生殖和呼吸系统综合征（PRRS）蜂胶灭活疫苗和油乳剂疫苗给小白鼠腿肌注射免疫，分别于免疫后第2、7、14和35d剖杀，采取注射局部肌肉组织进行病理组织学观察。结果显示，蜂胶疫苗注射后即被吸收，局部不留痕迹，组织学变化轻微；油乳剂疫苗注射后在35d试验期内一直未能全部吸收，局部呈炎性组织学变化。峰胶灭活疫苗不但对局部的组织学影响明显小于油乳剂疫苗，而且可趋化大量吞噬细胞到注射局部，促进抗原的高效递呈，并且可在注射局部的吞噬细胞浆中停留35d以上，可能起到了类似“抗原库”的作用，从而更加持久有效地诱导免疫应答。     

1型鸭疫里默氏菌3种不同佐剂灭活疫苗的比较

分别研制1型鸭疫里默氏菌（RA）灭活铝胶疫苗、RA灭活蜂胶疫苗和RA灭活油乳剂疫苗,并从副作用和免疫保护率等方面对比3种疫苗作了比较。结果表明,灭活油乳剂疫苗免疫保护率最高,免疫后9d保护率达83.3%,14d为92.8%－100％,24d时仍为100％;其次是灭活蜂胶疫苗,灭活铝胶疫苗最差,但副作用则从铝胶疫苗、蜂胶疫苗、油乳剂疫苗依次增强,对于同一种疫苗,颈部皮下注射的副作用明显小于腿部肌肉注射,因此,建议选择油乳剂疫苗以颈部皮下注射途径免疫接种雏鸭,即可获得较长时间的保护。     

磷酸钙作为O型口蹄疫多肽疫苗佐剂的研究

为了探索磷酸钙(calcium phosphate,CaP)作为多肽疫苗佐剂的可行性,本研究以O型口蹄疫多肽疫苗为抗原,采用共沉淀法制备CaP-多肽复合物,测定包封率。将制备好的疫苗,分别在0、14、28 d腹腔注射免疫Wistar大鼠,尾静脉采血检测口蹄疫抗体水平。结果显示,CaP可包裹一定量的O型口蹄疫多肽,包封率达到50%,免疫大鼠后油佐剂组抗体效价在14 d达到26,42 d增至210并可维持35~42 d;CaP组在21 d后陆续产生抗体,抗体水平较油佐剂低,为27~28。结果表明,CaP作为佐剂相对游离多肽可以提高O型口蹄疫多肽疫苗免疫效果,但抗体水平相对油佐剂低。     

纳米铝佐剂禽流感疫苗(H5N1)免疫反应性试验

通过自制纳米氢氧化铝佐剂,免疫肉鸡。检测发现初期油苗吸收不良,随着日龄的增加,油苗逐渐被吸收形成淡黄色的痕迹,而后逐渐被吸收;纳米佐剂组疫苗在初期吸收良好,淡黄色的痕迹很快被吸收、肌肉表现潮红。49 d时,纳米组炎性细胞已经被吸收殆尽,仅在毛细血管周围残存尚未被完全吸收的炎性细胞;常规铝组的炎性细胞也明显减少,而油苗组仍有大量炎性细胞未被吸收,炎灶明显,说明与油苗相比,纳米疫苗可以降低佐剂的副作用。     

鸡新城疫纳米蜂胶灭活疫苗免疫作用机理

采取单因素随机分组的试验设计,研究了以蜂胶纳米蜂胶颗粒作为佐剂的新城疫灭活疫苗对鸡的免疫保护效果,测定了免疫器官指数的影响、体液免疫的变化、以及对腹腔巨噬细胞活性的影响。疫苗免疫后7d攻毒,免疫保护率为70.0%。在注射后7d,胸腺指数:A组与B组和C组相比各周均无显著性差异(P0.05),但可看出A组有提高的趋势,D组其胸腺指数也高于E组,注射后21d时差异显著(P0.05)。免疫后每周所测抗体结果均为A组最高,B组次之,C组最差。A组产生抗体早,B组与之相比产生抗体的高峰期晚。该疫苗能促进鸡免疫器官的生长、发育和成熟,促进免疫细胞的分化和增殖,使血液循环中T淋巴细胞增多,使腹腔巨噬细胞活性增强。蜂胶苗产生抗体早,可以获得早期保护。     

灵芝多糖对鸡新城疫疫苗抗体滴度的影响

90只14日龄公鸡随机均分成3组,用新城疫LaSota弱毒疫苗点眼滴鼻免疫的同时,2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的灵芝多糖溶液,注射1次/d,连续注射3次,对照组注射生理盐水。各组分别于免疫后7、14、21、28、35、42d翼下静脉采血,分离血清,用微量血凝抑制（HI）测定新城疫抗体效价。结果表明,灵芝多糖高、低剂量组的HI抗体效价明显高于对照组;灵芝多糖的高剂量组抗体效价明显高于低剂量组;表明灵芝多糖对新城疫疫苗的抗体滴度有明显的增强作用,灵芝多糖高剂量组对新城疫疫苗抗体滴度的增强作用更显著。     

鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗对SPF雏鸡的免疫效果

用鸡传染性法氏囊病免疫复合物疫苗和活疫苗分别免疫1日龄SPF雏鸡,免疫后9d观察法氏囊病变,免疫后14、21、28d对各组鸡采血测定IBDV中和抗体,21d及28d时用强毒攻击,计算各组疫苗保护率。结果表明,免疫后9d免疫复合物疫苗组鸡法囊正常,活疫苗组鸡法氏囊全部明显萎缩;免疫后14、21、28d,免疫复合物疫苗组鸡IBDV中和抗体分别为2.9±0.99、8.1±0.88和10.6±1.78,活疫苗组IBDV中和抗体分别为3.3±1.14、8.3±1.16和9.2±1.23,免疫后21d及28d疫苗免疫组均100%保护。试验证明免疫复合物疫苗比活疫苗更为安全,免疫复合物疫苗免疫SPF雏鸡产生比活苗更高的IBDV中和抗体,保护率达100%。     

鸭疫里默氏杆菌多价灭活苗研制的研究报告

用三个血清型的菌株,分别是JYL-1、JYL-2、JYL-7,用两种佐剂,分别是蜂胶和油乳剂共制备了两种多价菌苗,即JYL-1、JYL-2、JYL-7（1、2、7三个血清型）三个RA血清型混合多价蜂胶苗和油乳剂苗。试验结果表明。蜂胶复合佐剂多价苗具有产生免疫保护速度快,免疫持续时间长的优点,接种后第3天即产生部分免疫保护力,第120天时仍具有完全保护力;油乳剂多价苗产生保护力的速度较慢,接种后第10天时开始表现出部分免疫保护,其完全保护力也可持续到接种后第120天。免疫后13d时,免疫保护率可达90％左右。免疫后16d时保护率为100％。免疫后120d时,两种多价菌苗的免疫保护率均可达到100％,免疫后150～180d时,免疫保护率可达800左右。统计学分析证明,菌苗的安全性良好。用3个免疫剂量的菌苗所做的安全试验表明无明显不良反应,菌苗在4℃保存一年,18～22℃室温保存4个月不影响菌苗的免疫效力。田间试验表明,用菌苗免疫鸭群后,可有效地使鸭群抵抗鸭疫里默氏杆菌的感染。     

鸡全胚成纤维细胞在鸡痘细胞活疫苗生产中的应用

采用鸡胚全部组织(全胚法)制备鸡胚成纤维单层细胞和采用鸡胚部分组织(常规法)制备鸡胚成纤维单层细胞生产了鸡痘细胞活疫苗,接毒后均产生大量的感染多核细胞和典型细胞融合性病变(胡椒粒样).鸡胚效价检测表明,鸡痘细胞苗和鸡痘组织苗均可引起鸡胚绒毛尿囊膜水肿、增厚或痘斑,但鸡痘细胞苗产生痘斑数量明显高于鸡痘组织苗.鸡体刺种结果表明,鸡痘细胞苗诱发的免疫反应(发痘)好于鸡痘组织苗;与常规法相比,全胚成纤维单层细胞制备方法可提高鸡胚利用率2倍以上.全胚法也可应用于制备其他鸡成纤维细胞疫苗.     

不同剂型新城疫-禽流感二联灭活疫苗免疫SPF鸡后抗体水平对比试验

不同剂型的佐剂对疫苗的免疫效果有较大的影响,本试验旨在对比不同剂型佐剂的新城疫-禽流感(简称"新-流")二联灭活疫苗的免疫效果,从而为生产上选择最佳剂型佐剂应用于新城疫-禽流流感二联灭活疫苗提供依据。分别将油包水型、水包油型、水包油包水型佐剂与新城疫及禽流感灭活抗原乳化成不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗,将这三种不同剂型的新城疫-禽流感(H9亚型,HP株)二联灭活疫苗分别免疫一组7日龄SPF鸡。每羽颈部皮下注射0.2 m L,同时设一组未免7日龄SPF鸡作为对照组,各免疫组与对照组SPF鸡于免疫组免后6、10、15、21、28、35 d进行采血,检测新城疫与禽流感抗体水平。结果表明:免疫油包水型疫苗组SPF鸡免疫后新城疫与禽流感抗体上升最快,在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最高,其次是免疫水包油包水型的,而免疫水包油型疫苗组的SPF鸡新城疫与禽流感抗体上升最慢,而且在免后10、15、21、28、35 d的新城疫与禽流感抗体也最低。此外,从各免疫组可以看出,在免后6 d时新城疫抗体已开始产生,在1log2以下,而禽流感抗体仍未产生。可见免疫新-流二联苗后,新城疫抗体比禽流感抗体更早产生,油包水型新-流二联苗的免后抗体高于水包油包水及水包油型,而且能持续刺激机体产生高水平抗体,更具优势。     

兔瘟蜂胶组织灭活苗的研制及免疫效果观察

采用人工感染兔瘟(兔病毒性出血症)病毒致死的兔的脏器(主要是肝)，制成10％的兔瘟组织灭活苗和10％的兔瘟蜂胶组织灭活苗。采用常规血凝抑制实验，初步分析比较了注射兔瘟组织灭活苗和兔瘟蜂胶组织灭活苗后兔体内抗体水平的消长情况。结果表明：兔瘟蜂胶组织灭活苗能明显提高抗体效价，增强免疫效果。     

犊牛腹泻大肠杆菌疫苗的研制与应用

根据南京地区犊牛大肠杆菌腹泻流行病学调查结果,用分离鉴定的犊牛腹泻菌株O78、O26、O15大肠杆菌作菌种,制备油乳灭活疫苗,接种初生犊牛预防犊牛大肠杆菌腹泻。结果表明制备的大肠杆菌油乳灭活疫苗接种初生犊牛能产生良好的免疫保护。     

不同佐剂的奶牛乳房炎多联苗对小鼠免疫机能的影响研究

为了探讨不同佐剂的奶牛乳房炎多联苗对小鼠免疫机能的影响,笔者将小白鼠分为3个组,每组30只,分别为蜂胶苗组、铝胶苗组和空白对照组。用制备的氢氧化铝胶和蜂胶2种乳房炎佐剂多联苗分别免疫小鼠,分别于免疫后的7、14、21、30和45 d采血,进行2种多联苗免疫后E-玫瑰花环率和淋巴细胞转化率测定。结果表明,蜂胶和铝胶2种佐剂苗与空白对照组相比均能显著提高小鼠的细胞免疫水平,2种苗的细胞免疫水平均在免疫后30 d左右达到最高峰(P<0.01),但在免疫后第30和45天时E-玫瑰花环率和淋巴细胞转化率,蜂胶苗组均极显著高于铝胶苗组(P<0.01),说明蜂胶佐剂比铝胶佐剂能更强地增强多联苗抗原对小鼠T细胞的致敏程度。该研究为进一步明确乳房炎多联苗免疫机制及筛选更好的免疫佐剂提供了科学数据。     

Lack of an effect of a commercial vaccine adjuvant on the development of postweaning multisystemic wasting syndrome (PMWS) in porcine circovirus type 2 (PCV2) experimentally infected conventional pigs

The objective of this study was to evaluate the effect of a commercial vaccine adjuvant on the clinical and pathological outcome of PCV2 experimentally infected 8 to 9-week-old conventional pigs. Forty-four pigs were divided into four groups: non-infected control pigs, pigs that received a vaccine adjuvant, pigs inoculated with PCV2, and pigs inoculated with PCV2 together with the vaccine adjuvant. Infection was monitored until 69 days post-inoculation (PI). Some PCV2 inoculated pigs had hyperthermia, but no other clinical signs were recorded. No characteristic PMWS gross or microscopic lesions were observed in any of the pigs. PCV2 DNA was detected in lymphoid tissues by in situ hybridisation in 6 PCV2 inoculated pigs on day 69 PI. All PCV2 inoculated pigs seroconverted between days 21 and 49 PI, shortly after viremia detection. Moreover, viremia was detected between days 7 and 69 PI using PCR. A peak of the virus load was detected by real-time quantitative PCR between days 14 and 21 PI. There were no significant differences in the proportion of PCV2 positive serum and in the viral load between PCV2 and PCV2 + adjuvant inoculated pigs. Although PMWS was not reproduced in neither PCV2 nor PCV2 + adjuvant inoculated pigs, viremia detection and seroconversion indicated that all PCV2 inoculated pigs developed a chronic long-term asymptomatic infection. An increase of PCV2 replication was not observed in pigs inoculated with the adjuvant. These results indicate that the principle of immunostimulation may not be applicable under the experimental conditions used, suggesting that not all adjuvants used in commercial vaccines are capable of triggering mechanisms for PMWS development.     

Immunomodular effect of fusion gene DNA vaccine of avian metapneumoviruses

The objective of this work was to develop and evaluate the immunomodular effect of a DNA vaccine based on the fusion (F) gene of avian metapneumoviruses (aMPV) and to study its protection against field virus challenge, as this will help to better control the disease in turkeys. In this study, the F protein of the Egyptian isolate (Giza-turkey rhinotracheitis-4) of the B-subtype of aMPV isolated in 2009 was expressed from a DNA plasmid in Vero cells. After 1 i.m. injection of turkey poults with this plasmid, the antibody response was detected by ELISA. The turkey poults inoculated with locally prepared DNA aMPV vaccine had highly significant phagocytic activity, as measured by phagocytic percent and index of macrophage activation, in comparison to those inoculated with inactivated and live attenuated vaccines and with the noninfected control group. Intratracheal challenge of turkey poults at 21 d postvaccination by a dose of 100 uL of field Egyptian Giza-turkey rhinotracheitis-4 virus of a titer 6 log₁₀ tissue culture infective dose 50 resulted in 100% protection in poults that received locally prepared DNA aMPV vaccine, whereas those that received commercial aMPV vaccines experienced 80 and 90% protection; typical clinical signs of aMPV infection were seen in control nonvaccinated poults. Therefore, a high success rate was noted when using F gene DNA plasmid vaccine by the induction of a potent immunomodular effect for both cell-mediated and humoral immune response. The use of the F gene DNA plasmid vaccine developed in this study provided 100% protection in vaccinated poults, which can help in controlling aMPV infections in turkeys.     

三种佐剂对鸡体液免疫影响的比较

佐剂是疫苗的重要组成部分,不同佐剂对体液免疫会产生不同的作用.选择合适的佐剂不仅可以增强疫苗的免疫效果,而且可以提高机体的抵抗力.本试验选用白油佐剂、弗氏佐剂和蜂胶佐剂分别与灭活的新城疫病毒制成疫苗,免疫雏鸡,探讨不同佐剂对鸡体液免疫的影响.结果表明,试验组鸡抗体水平高,饲养至61日龄均未发生新城疫,其中弗氏佐剂的效果最好,蜂胶佐剂的效果次之,油佐剂的效果最次.     

鸽新城疫(ND)蜂胶佐剂灭活疫苗免疫效果对比试验

采用鸽新城疫ND-GS 01株毒为种毒,分别研制出了尿囊液毒蜂胶佐剂灭活疫苗和四元材料(鸡胚尿囊液、羊水、尿囊膜、羊膜)混合病毒蜂胶佐剂灭活苗。对研制的两种灭活疫苗经安全性检验、急性毒性试验,免疫抗体消长水平与免疫持续期对比试验,结果表明,四元材料的疫苗与尿囊液疫苗性能一致。