猪伪狂犬病病毒鄂A株的分离鉴定

从湖北省某些猪场大批死亡的新生仔猪的脑及内脏中分离到的多株病毒,并用其中一代表毒株进行了全面鉴定。该病毒株在仓鼠肾传代细胞上连传１５代均出现典型细胞病变,用适应ＢＨＫ－２１细胞的病毒接种鸡胚成纤维细胞,Ｈｅｌａ细胞,Ｖｅｒｏ细胞,犊牛睾丸原代细胞,猪肾传代细胞ＩＢＲＳ－２均出现典型细胞病变,在电镜下可见到典型的伪狂犬病毒病粒子,病毒对５－碘脱氧尿核苷,氯仿,胰蛋白酶,乙醚敏感,在ｐＨ５．０～９．０     

犬呼肠病毒3型在BHK-21细胞上增殖的研究

采用酶标ＳＰＡ法进行了犬呼肠３ 型病毒在ＢＨＫ２１ 细胞上定位的研究。结果表明：接毒后６ ｈ 即可在胞浆见到絮状阳性反应,２４ ｈ 后呈强阳性着染;Ｈ．Ｅ．染色在胞浆内可见强嗜酸性着染或嗜酸性包涵体,提示可能是病毒感染引起的特征性病变,感染后细胞病变发展较快,６０ ｈ 细胞大部脱落;病毒血凝滴度结果也证实了细胞病变与病毒增殖有关。     

口蹄疫病毒适应于细胞培养的研究

将不同型（Ｏ，ＡｓｉａＩ）系（兔系和鼠系）和不同代次的口蹄疫病毒适应于ＢＨＫ２１细胞培养物，免化Ｏ型毒传至第１５代即产生明显的细胞病变ＴＣＩＤ５０可达７．０－７．６；兔化ＡｓｉａＩ需传２０代以上才能产生ＣＰＥ，ＴＣＩＤ５０为６．０－６．５。     

口蹄疫病毒灭活的研究

将兔体传代的Ｏ型口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）适应ＢＨＫ２１细胞培养，该细胞毒的ＴＣＩＤ５０达７－７．６。在ＰＨ７．９的介质中，用胺类衍生物能使ＦＭＤＶ彻底灭活。给豚鼠接种灭活毒后１个月攻击强毒，能极有效地保护豚鼠抵抗强毒攻击，实验动物的保护达１００％。     

不同启动子对重组痘苗病毒表达狂犬病病毒糖蛋白基因的影响

以血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将狂犬病病毒糖蛋白基因ｃＤＮＡ置于不同类型的痘苗病毒复合启动子下游，构建了４种表达质粒。重组表达质粒转染已感染ＷＲ株痘苗病毒的ＢＨＫ２１细胞，并通过鸡红细胞吸附试验，筛选、纯化出与表达质粒对应的４组ＨＡ－重组痘苗病毒：ｖＳＦＪ１－１０ＲＶｇｐ，ｖＳＦＪ２－１６ＲＶｇｐ，ｖＲＪ１－１０ＲＶｇｐ，ｖＲＪ２－１０ＲＶｇｐ。经间接免疫荧光试验（ＩＦＡ）鉴定，从４组重组病毒中每组各鉴定出１株阳性重组病毒。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测显示，重组病毒感染的ＢＨＫ２１细胞裂解物上清中有１种蛋白与抗ＲＶＧＰ的ＭｃＡｂ发生特异反应，分子量为６９０００。在重组病毒感染早期，ＲＶＧＰ的表达量以ｖＳＦＪ１－１０ＲＶｇｐ最高；而在感染晚期，则以ｖＳＦＪ２－１６ＲＶｇｐ最高。４株重组病毒免疫小鼠，均能够不同程度地诱导小鼠产生抗ＲＶＧＰ特异性抗体。     

牛O型A型口蹄疫双价灭活疫苗研究：A型毒种的选择

收集保藏的６株口蹄疫Ａ型牛源强毒，适应乳鼠５代，转适ＢＨＫ－２１细胞单层１０代，用弗氏安全佐剂制成疫苗免疫豚鼠。综合分析其对实验动物及制苗细胞的适应性，病毒感染性滴度、豚鼠抗强毒攻击的免疫原性、血清中和抗体应答的抗原广谱性表明，在６株毒中ＡＦ／７２具有更好的适应性，病毒滴度高，免疫原性好，抗原谱广。     

FMDV在BHK21细胞扩增后FMDV 140 S抗原的测定

本文报告了用蔗糖密度梯度离心和光密度分析相结合口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）在单层ＢＨＫ２１细胞中扩增后，其中ＦＭＤＶ １４０ Ｓ抗原浓度，并同时分析了经ＢＥＩ（二乙烯亚胺）灭活后，这种抗原含量的改变。结果表明，Ｏ型ＦＭＤＶ在单层ＢＨＫ２１细胞中增殖后，其ＦＭＤＶ １４０ Ｓ抗原浓度降至０．９μｇ／ｍｌ。     

口蹄疫病毒Asia—I型灭活的研究

本研究将适应ＢＨＫ２１细胞培养的口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）亚洲Ｉ型（Ａｓｉｓａ－Ｉ）用胺类衍生物作灭活剂进行灭活试验。灭活毒经细胞连续传代检测未产生致细胞病病作用；经接种实验动物观察，无致细胞病作用且有良好的免疫原性。     

肌注狂犬病病毒糖蛋白cDNA表达载体诱导的小鼠体液免疫反应

将狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡＢｇｌⅡ（１．６７ｋｂ）片段分别正向插入ｐｍＭＴ－１ＢｇｌⅡ位点和ｐＭＴ０１０／Ａ＋ＢａｍＨＩ位点，构建重组质粒ｐｍＭＴ－Ｒｇｐ和ｐＭＴ０１０／Ａ＋－Ｒｇｐ，通过磷酸钙共沉淀法转染ＢＨＫ－２１细胞，经ＰＣＲ、打点杂交及ＥＬＩＳＡ检测，证明糖蛋白基因发生了整合并获得表达。以该表达载体给小鼠肌肉内注射２～３次，采其注射前、后双份血清，经ＥＬＩＳＡ检测证明，注射了表达载体的小鼠，血清中病毒特异性抗体明显升高，表明狂犬病病毒糖蛋白ｃＤＮＡ在小鼠体内表达后，刺激机体产生了抗该糖蛋白特异性抗体     

应用间接免疫荧光法检测狂犬病病毒

取０．５ｍｌ兔ＢＨＫ－２１新鲜健康细胞液和０．１ｍｌ狂犬病病毒细胞液在含小飞片青瓶中混合，培养２４小时后制片，加抗狂犬病病毒兔抗体感作，用抗逸荧光抗体染色，通过荧光显微镜观察细胞浆内黄绿芭一病毒是否在细胞内增殖，从而建立了检测狂犬病病毒的间接免疫荧光法。