娟姗青年母牛超数排卵及冻胚移植效果试验报告

2005年3月至7月,在广西地区选择25头娟姗母牛作为供体,用不同厂家、不同剂量的促排卵激素进行超排和重复超排,观察了超排及重复超排效果.结果25头供体共采卵46头次,排卵数502枚,回收到278枚胚胎,采卵率为55.4%,获得207枚可用胚胎,平均4.5枚/头次,可用胚率为74.5%;与此同时在2005年4月至2006年1月,开展了娟姗牛冷冻胚胎的移植工作,对185头本地黄母牛和杂交母牛进行了同期发情处理,结果共有166头发情,其中113头可移植,同期发情率为89.7%,可移植率为61.1%.113头可移植牛移植2个月后,经妊娠检查共有47头怀孕,移植妊娠率为41.6%.     

使用FSH-P超排母牛人工授精方案简化研究

前言目前,研究供体母牛的超排和合理的人工授精方法,以获得稳定数量的可移植胚胎,仍然是牛胚胎移植技术推广中的重要课题。随着对母牛超排机理研究的不断深入,母牛超排程序逐渐趋于固定。现行的常规超排程序多在前列腺素F2α或其类似物处理发情后12小时开始输精,并每间隔12小时再输精1～2次,每次输入的精子数量比自然发情母牛的输精要多2～3倍。输精次数和精子输入量增加的目的在于使得超排母牛排卵时间先后不一的卵子都能和足够的精子相遇而受精,以保证超排处理的     

低剂量FSH超排预处理的效果

目前牛超数排卵的一般程序是在发情周期的中期(9～13天)用促性腺激素(PMSG 或FSH)处理,48小时后注射前列腺素诱导黄体溶解,发情和排卵。这些处理方案虽然都可能达到超排效果,但是胚胎的质量和数量以及卵巢反应的不稳定性仍然是牛胚胎移植难于用于生产的一个最主要的因素。     

牛胚胎移植产业化超数排卵的系统研究

为了提高供体牛的利用率,加速胚胎移植技术的产业化,试验系统地研究了超排方案、青年奶牛的月龄及发情周期不同阶段、重复超排次数、超排间隔时间、卵巢状态、胎次与产后间隔时间对超排效果的影响,共超排供体奶牛1 127头次,回收胚胎共10 900枚,可用胚胎数量为6 942枚,平均每头次获得胚胎数量为6.73枚.结果表明:①应用PSO1、PSO2和 PSO3三种方案进行超排处理,PSO3方案的超排成功率和平均回收可用胚胎数均高于其他两个方案;②利用发情周期9～11 d的自然发情奶牛直接超排效果最好;③对青年奶牛进行超排处理,应限制超排起始时间,15月龄以上的青年奶牛超排效果较好;④供体牛连续重复超排控制在3次以内,连续4次超排处理后极大降低胚胎可用率;⑤超排处理的间隔最短时间应该选择46～60 d;⑥经产牛1～3胎次超排效果较好,7胎次以上较差;⑦产后间隔时间选取80～90 d.     

17β雌二醇或促性腺释放激素(GnRH)与FSH-P结合使用对牛进行超数排卵效果的研究

本实验将生殖正常的54头杂种母牛,在发情周期的第8—12天进行重复超排处理。FSH—P的总用量为28毫克,每天二次,逐日递减。FSH—P处理后的48小时,每头牛注射前列腺素(PGF)500微克。第一组注射FSH—P为对照组;第二组注射FSH—P,并在前列腺素处理后36小时再注射400微克17β雌二醇;第三组注射FSH-P,并在PGF处理后48小时再注射250微克GnRH。在母牛开始发情后的12,24,36小时用冷冻精液进行人工授精。发情后第七天用非手术法采卵(胚胎)。通过直肠检查,记录黄体数并评价卵的回收率。并将试验牛全部采血进行激素测定。处理结果,卵巢反应没有差异。第三组回收的胚胎均数,显著地高于第一、二组(P<0.05),但多精卵或可移植的胚胎均数间差异不显著。组间胚胎回收率、受精率或可移植胚胎的百分率亦不存在明显差异。第二组排卵末期血清雌二醇水平显著地高,这与较高的受精率有关。而且发现黄体数和胚胎参数及发情期雌二醇的水平间有着显著的正相关。     

奶牛超排激素的种类及其效果

超排需用富含FSH或具有类似于FSH活性的促性腺激素处理。而且促性腺激素的效力时间要足以使被刺激的卵泡卵母细胞继续生长、正常受精和胚胎发育。已有几种促性腺激素用于提高肉牛和奶牛的排卵率,或者配合孕酮或PGF_2α以调整发情周期。超排的排卵数一般为15个左右,但是获得的胚胎不到10个,其中可以移植的约为6个。PMSG已用于超排,但是被处理的牛有大量卵泡不能排卵,因为PMSG的半衰期较长。用抗PMSG血清可以降低采集胚胎时存在的大卵泡数量,但是并不能因此而稳定地提高可移植胚胎的数量。FSH的半衰期较短,分几次处理可获得较高排卵率,卵巢上的卵泡虽不太多,但可用的胚胎较多。还可用其他激素如绝经妇女促性腺激素(hMG),但是排卵结果不稳定。用孕酮处理,可调整性周期,可以于性周期中的任何时候进行超排处理,而有利于超排反应。不过效果一般不如于性周期中期用PGF_2α处理的。目前超排处理的重要问题之一是排卵反应很不一致,而且相当高比例的被处理母牛不能提供可用的胚胎。     

奶牛高效重复超排的试验研究

本研究应用诱发卵泡波的方法,对387头供体牛进行了超数排卵和重复超数排卵的试验,找出了效果稳定的连续超排方法。诱发卵泡波的超排方法(“牛欢” EB P4):在供体牛发情周期的任意一天(发情当天除外),于供体牛阴道放入“牛欢”,同时肌肉注射2mgEB和100mgP4,在放入“牛欢”的第4天开始连续4d用递减法肌肉注射FSH(放入“牛欢”当天为第0d),第6.5￣7d撤除阴道栓,即开始注射FSH的第60￣72h撤栓(FSH开始注射48h后肌肉注射PGF2α);诱发卵泡波的重复超排方法:在前一次超排冲卵后的第9￣12d、14d、44d,给供体牛重新放入牛欢,同时肌肉注射2mgEB 100mgP4,其后的程序同诱发卵泡波的超排方法,开始新一轮的超排,两次超排放栓的间隔时间为25d、30d、60d;利用诱发卵泡波的方法对供体牛进行超数排卵,筛选超排效果良好的供体牛,使一头供体牛年生产可用胚胎的数量在60枚以上,是奶牛高效超排的一种有效方法。     

萨福克羊超数排卵影响因素的研究

影响萨福克羊超排效果的因素较多,主要包括供体、激素及其它一些影响供体生理状态的因素。本试验以萨福克羊为研究对象、超排方法的选择,卵巢处于不同生理状态时期的超排、促排激素、超排季节、供体年龄、重复超排、饲养管理等因素对供体超排效果的影响情况进行了研究,结果表明:通过同一季节利用不同方案对萨福克羊的超数排卵处理发现,以国产FSH6～7mg和加拿大FSH250mg进行4d递减处理的排卵数和可用胚率最高,是超数排卵处理的最佳方案。由于进口激素价格高,故推荐使用国产FSH6～7mg进行4d递减处理方案进行萨福克羊超数排卵。在供体发情周期第10～14天中任何一天开始超排都能取得较好的超排效果,可用胚胎平均数为7.1(6.1～8.2)。供体发情配种时用LH/HCG促排激素比LHRH-A3更能使更多的卵泡排卵,但末受精的数量也相应增加,综合考虑,萨福克羊发情配种时用LHRH-A3促排激素的效果最佳。超排季节对供体超排效果没有显著影响(P>0.05)。供体羊的年龄对超数排卵效果没有显著的影响,对性成熟不久的供体羊初次诱导排卵时适当降低FSH剂量,可取得与成年经产母羊一样的较好的超排效果。供体羊重复超排处理时,平均排卵率无显著差异(P>0.05),但采集可用胚胎数量有显著差异(P<0.01)。补饲养条件下的绵羊供体羊平均采集可用胚胎数量显著高于不补饲供体羊可用胚胎数量(P<0.01)。     

超声波预测超排牛的卵泡发育和胚胎产量

寻找预测超排牛个体反应的参数对解决个体间超排反应的差异相当重要。超排4天内发育至排卵前并在发情时排卵的卵泡,在处理开始时直径大于2毫米。应用超声波检查卵巢可以计数这些卵泡,以预测超排反应。采用耳背皮下埋植孕激素法使54头泌乳奶牛(荷斯坦、娟姗及其杂种)同期发情,12天后取出埋植物,同时用PMSG超排,2天后再注射PG。发情期间授精2次,并注射单克隆抗     

不同药物对鲁西黄牛超排处理后血浆中孕酮、17β-雌二醇水平的变化

以FSH、PMSG和PMSG+APMSG等3组药物对鲁西黄牛进行超排处理,开始时,P_4处于黄体期的较高水平,发情前达列最低值,发情后第2天迅速上升,采集胚胎时达到高峰。采集胚胎后,注射15—甲基PGF_(2α),P_4水平又明显下降。在超排处理的第1—8天,3组试验牛血浆中P4水平曲线趋于一致,但第10和第12天时,PMSG组P_4水平明显升高,与其他二组比较差异显著(P<0.05)。开始超排时,3组血浆中E_2水平都急骤升高,发情时达到高峰。发情排卵后E_2水平迅速下降,其中FSH和PMSG+APMSG组呈波浪式维持在较低的基础水平上,而PMSG组在第8、10、12、14天时,E_2水平显著高于其他2组。     

排卵延迟奶牛发情后不同阶段B超黄体相关指标变化规律分析

为研究排卵延迟奶牛发情配种后黄体的变化规律及其差异性,本研究在临床症状观察、直肠检查和B超辅助检查诊断的基础上,选取8头排卵延迟奶牛(排卵延迟组)、5头健康正常发情奶牛(对照组),应用B超对黄体的相关指标(直径、面积、周长和体积)进行了测量及分析,对获得的不同阶段典型黄体声像图进行了描述。结果显示,与对照组相比,排卵延迟组与对照组奶牛黄体的直径、面积、周长和体积在发情配种后7~15 d差异均不显著(P>0.05)。在发情配种后第9和13天排卵延迟组奶牛黄体相关指标(直径、体积、面积和周长)大于对照组奶牛,而在第11天小于对照组奶牛。结果表明,排卵延迟奶牛发情后不同阶段B超黄体直径、面积、周长和体积与正常发情排卵后的相应指标没有显著差别。     

美国短角牛超排效果初报

对10头美国短角牛进行超排处理(其中1头中途掉栓),8头牛发情,同期发情率达88%,配种后第7天对7头供体牛采用非手术法回收胚胎35枚,平均5枚/头。     

牛生长激素对泌乳奶牛胚胎移植的影响

牛生长激素可以提高奶牛人工授精的初次受胎率，这可能是由于bST对胚胎或生殖道功能产生影响。本试验的目的是研究胚胎移植生产中bST对胚胎或／和移植受体的潜在影响。对在人工授精的同时接受bST处理（和未接受bST处理（bST对照供体组，n＝８０）的荷斯坦奶牛进行超排获得胚胎。在第７天冲卵后观察胚胎发育的品质和阶段。可移植的胚胎经乙二醇冷冻用于直接移植。经bST处理的供体牛胚胎发育迅速，但对胚胎品质未有影响。作为受体的荷斯坦泌乳牛在发情期的第１天一部分接受bST（Posilac，５００mg，s．c；bST受体组，n＝９７），而另一…     

超排过程中不同发情时间对胚胎生产效果的影响

在牛胚胎生产过程中,由于不同牛只存在个体差异（如超排月龄、体重、营养状况、卵巢发育情况及初情期月龄等）,其对外界环境的适应能力存在不同的差异;目的：如何有效的控制好供体母牛同期发情的发情时间,提升超排后胚胎的质量与数量。方法：笔者选用10-16月龄的纯种肉用型西门塔尔牛进行胚胎生产,通过对112头次10-16月龄牛只超排进行胚胎生产并对相关数据进行统计分析;结果：根据认真观察记录供体牛只拆栓后的发情期表现,出现部分牛只提前发情或延迟发情现象,其中大部分牛只处于拆栓后24h前后两h集中发情情况;结论：供体母牛在拆栓后24h前后两h集中发情的牛只,其头均生产胚胎的数量与质量均优于延迟发情和提前发情的牛只。     

黄牛超数排卵及非手术法胚胎回收的研究

采用国产、日产外源激素，对杂种黄牛进行超数排卵处理及非手术回收6—7日龄胚胎的研究。以牛发情后第14天至17天，每日递减肌注垂体促滤泡素（FSH）。结果表明两种激素组在超排效果上均无明显差异，其超排有效率为83％，平均排卵数为6．44枚，春、秋两季非手术法，胚胎回收率分别为64．17％（11／17）和76．9％（20／26）。     

海门山羊超数排卵,卵巢反应和胚胎发育观察

用促性腺激素 FSH(280IU 和340IU)、PMSG(1000IU)对海门山羊进行超数排卵处理,并比较它们的超排效果.试验结果表明:用280IU 的 FSH 超排,排卵数平均为7.5±4.6;用340IU 的 FSH 超排,排卵数平均为8.6±6.2;用 PMSG 超排,排卵数平均为5.5.FSH 处理超排效果比 PMSG 处理效果好。FSH 组的两种剂量间的效果差异不显著(P>0.05);卵巢对激素的反应比较明显,卵泡多,卵巢体积增大.经观察,胚胎发育在发情配种后的第3天,以单细胞受精卵到2细胞阶段的胚胎趋多;第4天,以4—8细胞阶段的胚胎趋多;第5天,以16—32细胞阶段趋多;第6天,发育到桑椹胚;第7—8天,以囊胚趋多。这一结果,为海门山羊今后进行胚胎工程提供了参考价值。     

泌乳期波尔山羊的重复超排及胚胎移植效果分析

对26只泌乳期波尔山羊实施2次重复超排处理。其结果如下:①第一次超排有效率为84.62%,平均排卵数为19.5±6.42(枚/只),平均采集胚胎数为15.86±1.84(枚/只),平均采集可用胚胎数为10.5±8.32(枚/只)。第二次重复超排处理时有1只羊推迟发情,超排有效率为96.15%,平均排卵数为28.36±5.26(枚/只),平均采集胚胎数21.48±7.42(枚/只),平均采集可用胚胎数为18.64±4.12(枚/只);②两次重复超排所获得的可用胚胎数差异极显著(P<0.01)。泌乳期供体羊第一次采集的可用胚胎数量[10.50±8.32(枚/只)]显著低于断奶后供体羊[18.64±4.12(枚/只)];③胚胎移植后的2组羊产羔率差异不显著(P>0.05)。     

山羊发情后排卵时间的研究

本试验以江苏地方白山羊为材料，供体羊经ＰＭＳＧ超排处理后，在发情后不同时间从输卵管获取卵子。受体关经ＰＧ处理进行同期发情，手术移卵时观察卵巢上的排卵点及其特征。试验中发现山羊超排处理后，排卵时间是在发情后不到２６小时；自然发情的山羊其排卵时间与超排山羊基本相同。山羊超排处理后排出的卵子有的尚未完成第一次成熟分裂。     

应用国产激素进行奶牛超数排卵及同期发情处理的试验研究

用不同批号的FSH、PGF_(2a)共超排奶牛109头,超排有效率87.16%,采卵成功率90.35%,平均获卵数为7.55±6.62枚,平均获可用胚胎数5.67±5.22枚,不同批号间的平均获卵数,平均可用胚胎数差异均不显著(P>0.05)。供体超排后发情时间为36.30±9.92小时,受体同期发情处理后发情时间为63.24±16.09小时。奶牛移植受胎率为66.66%(6/9),黄牛移植受胎率为42.59%(23/54)。     

超排对供体奶牛生产性能和繁殖力的影响

本文探讨了超数排卵对供体奶牛生产性能和繁殖的影响。26头供体牛组成2个处理组,青年母牛做供体处理组,采卵后至首次发情时间为19.8±3.6天,首次发情配种妊娠率为53.8％(7/13),超排处理到末次配种间隔情期为3.7±0.5个;经产母牛做供体处理组,泌乳曲线不正常,超排当月产奶量比超排前后月均有所下降(下降分别为:98.8±19.10和8.50±11.56kg),采卵后至首次发情时间为23.2±4.1天,与青年母牛组比指标差异显著(P<0.05),首次发情配种妊娠率为38.5(5/13),超排处理到末次配种间隔情期为 3.9±0.7个。结果表明,超排影响产奶量,对其繁殖力也有些影响。