生物素亲和素系统标记技术在动物传染病诊断上的应用现状

生物素亲和素系统是七十年代末应用到免疫学领域中,八十年代初应用到分子生物学领域中的一种生物反应放大系统。由于生物素亲和素系统改良的免疫诊断方法和生物素化的核酸探针具有敏感性高、特异性强、稳定性好没有放射性污染和应用面宽等特性而日益受到医学、兽医学及其它生物学界的广泛重视。近年来,动物传染病诊断方面也有应用生物素亲和素系统改良的各类方法的报道。本文根据作者自己的工作以及收集的部分材料对生物素的理化性质及其衍生物的制备、亲和素蛋白的理化和生物学特性以及生物素亲和素系统放大原理和该系统改良的一些基本检测方法作一简要的概述。此外,还着重介绍一下生物素亲和素系统改良的方法在动物传染病诊断上应用的现状。     

亲和素-生物素系统-酶联免疫吸附试验(ABS-ELISA)在兽医免疫诊断学中的应用

<正> 七十年代中期,亲和素(Avidin)与生物素(B-iotin)之间的强亲和作用及多价反应性,引起了免疫学工作者的极大兴趣,经研究进行亲和素与生物素既可偶联抗体等一系列大分子生物活性物质,又可被酶等多种材料所标记,据此发展成为一种新颖的生物反应放大系统,即亲和素-生物素系统(Avidin-BiotinSystem,ABS)。该系统最初被用于免疫组织化学,进行组织和细胞内特异性抗原的检测、定位及半定量研究。1979年,Guesdon等又将ABS首次引入了固相酶免疫吸附试验。ABS-ELISA是亲和素-生物素系统与ELISA技术相结合所建立的一种新的     

生物素-亲和素标记技术

生物素-亲和素系统(BAS)是一种具有高亲和力、灵敏度高、特异性强和稳定性好等优点的信号放大标记技术,研究证明生物素与亲和素依靠接触表面均一的多层膜来维系其稳定的结合。随着不断的探索和研究,该技术现已发展出多种标记方法,例如桥-亲和素-生物素标记法、亲和素-生物素-过氧化物酶法、标记生物素-抗生物素法,由于该标记技术具有优秀的性质,因此很快渗透到多个学科,在细胞和抗原的定位和检测中体现出极其重要的作用。目前,BAS已广泛应用于免疫学、分子生物学和组织化学等领域,并取得较好的效果。文章对该技术的特点、方法和应用做了简述。     

亲和素——生物素系统在免疫学上的应用

从七十年代末起,亲和素—生物素系统(Avidin—Biotin system)开始出现在免疫学领域中。由于亲和素—生物素间亲和力大,特异性强,敏感性高,可分别结合各种类型大小分子,因此,它在免疫学中的应用很有发展前途。     

亲和素—生物素—酶复合物(ABC)法在免疫诊断学中的应用

亲和素—生物素—酶复合物(Avidin—Biotin—Enzyme Complex,ABC)法是Hsu等于1981年在生物素—亲和素架桥法(BRAB)和标记亲和素法(LAB)的基础上进行改良、建立起来的。这种方法是预先按一定比例将生物素化酶和亲和素共温后形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体反应。该法不仅减少了反应步骤。而且由于ABC的网格可以网罗相当数量的酶分子,从而使生物素—亲和素系统(BAS)的敏感度大为提高。用该法对多肽类激素进行了酶标测定,发现抗体滴度可提高20～40倍,并通     

生物素检测桑蚕浓核病毒(DNV)简报

生物素—亲和素系统(Biotin—AvidinSystem,BAS)是近几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,具有很高的灵敏度、特异性和稳定性,被广泛应用于免疫化学、生物工程等领域。我们采用生物素标记IgG抗体,用亲和素—生物素—辣根氧化酶复合物(ABC)与抗体结合后染色的方法检测桑蚕浓核病毒(DNV),获得了良好的效果。用本法检测家蚕DNV抗原国内外尚未见报道,现将结果简报如下:     

亲和素—生物素酶联免疫吸附试验在寄生虫病免疫诊断上的应用

亲和素—生物素系统酶联免疫吸附试验是八十年代初建立起来的一种新型生物反应放大系统,是将具有高亲和力、高稳定性的亲和素—生物素系统(Avidin-Biotin System,ABS)引入ELIsA反应的免疫诊断技术.ABC—BLISA即亲和素—生物素—过氧化物酶复合物(Avidin-Biotin-Peroxidase Complex)则是预先按一定比例将生物素化酶与亲和素共温形成ABC复合物,再使ABC复合物与生物素化抗体的反应.近年来,ABC—ELISA以其明显的优越性而日益受到了国内外学者的关注,在寄生虫病的免疫诊断方面得到广泛应用,并取得了可喜进展.本文就ABC—ELISA在寄生虫病的免疫诊断方面的应用概述如下.     

免疫学检测新技术——生物素—亲和素系统在免疫检测中的应用

随着医学和生物学的不断发展,对免疫学检测技术要求越来越高——敏感、快速、准确、简便等。继免疫酶法、荧光免疫测定法、放射免疫测定法(RIA)后,由 Guesdon(1979年)创建的生物素——亲和素系统(BAS)在免疫检测中的应用具有上述特点,且比常规酶联免疫吸附试验(ELISA)敏感20～80倍(Kendall,1983),可达到0.1ng/ml的水平,相当于甚或高于 RIA 测定法(Sutton,1985),已显示其巨大的应用潜力,引起     

囊虫病免疫诊断检测方法的研究进展

由于科学技术的发展,囊虫病免疫诊断检测方法有了很大的进展,主要有1.免疫学检测方法,包括酶联免疫吸附法(ELISA)、斑点酶联免疫吸附法(Dot-ELISA)、生物素-亲和素酶联免疫吸附法(BAS-ELISA)、单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)、酶联免疫印渍技术(ELIB);2.基因检测技术,包括DIG标记DNA探针、细胞因子基因检测方法、基因重组技术;3.免疫试剂盒的应用,包括循环抗原酶联免疫试剂盒、猪囊虫短程抗体IgG4快速ELISA检测试剂盒等。     

猪肉中氯霉素残留的生物素-亲和素放大免疫检测方法

生物素-亲和素放大免疫检测方法是在常规免疫检测的基础上[1-3],结合生物素-亲和素系统(biotin-avidin system,BAS)的高度放大作用,而建立的一种检测系统.目前,BAS技术在兽药残留检测中已有研究报道[4],而在生物学领域已经得到广泛应用,成为当今生物医学研究工作中最具使用价值和发展前途的技术之一[5-9].     

牛病毒性腹泄病毒核酸探针的研制及其应用

本文描述了应用光敏生物素标记制备的牛病毒性腹泄病毒核酸探针，并对其稳定性和有效期，灵敏度及特异性进行了试验研究。利用牛病毒性腹泄病毒生物素探针对乌盟达茂旗等４个地区１１５份病样的检测结果表明，生物素探针比常规免疫学方法高出１／３，是一种重复性好和特异性强的牛病毒性腹泄病毒检测方法。     

免疫组化技术在实验动物病毒检测中的应用

免疫组化技术在实验动物病毒检测中的应用遇秀玲（北京丰台军事医学科学院实验动物中心，１００７１）免疫组化技术是将抗原抗体反应的专一性和显微形态学相结合，以研究组织或细胞中抗原定位的一种方法，其中包括亲和素生物素化酶复合物法（ＡＢＣ法）、生物素一亲和素系...     

ABC-ELISA检测桑蚕浓核病毒(DNV)简报

生物素——亲和素系统(Biotin-AvidinSystetem.BAS)最近几年发展起来的一种新型生物反应放大系统,具有很高的灵敏度、特异性和稳定性,在免疫化学等领域得到广泛应用。BAS与酶联免疫吸附试验(ELISA)相结合的ABC-ELISA法可提高普通ELISA的敏感性,能同放射免疫     

ABC—酶联免疫吸附法检测家蚕浓核病毒的研究

利用生物素—亲和素生物放大系统的原理,并结合酶联免疫吸附试验(ELISA),建立了新的检测家蚕浓核病毒(DNV)抗原的方法。     

应用生物素-亲和素系统检测感染兔弓形虫抗体的实验研究

鉴于弓形虫病感染的多样化,病原诊断又较困难,血清学检测逐渐成为常规辅助诊断方法之一.七十年代末国内外相继建立了检测血清中抗弓形虫抗体的酶联免疫吸附试验(ELISA).近年来,生物素-亲和素系统(BAS)已用于多种抗原抗体系统但未见检测弓形虫抗体的报道.本文应用亲和素和生物素标记的过氧化物酶复合物(ABC)为标记物的ABC-ELISA方法检测感染兔弓形虫抗体的实验研究并与常规ELISA法进行对比观察,现将初步试验结果报告如后.     

生物素标记ST基因探针检测产肠毒素性大肠杆菌的研究

采用二步法缺口翻译反应,用Bio-11-dUTP标记编码大肠杆菌耐热肠毒素的DNA片段作为杂交探针,通过菌落杂交试验,在严格去蛋白和RNA的条件下,表明生物素标记的DNA探针对产肠毒素性大肠杆菌的检测具有高度特异性.用链亲和素和生物素-碱性磷酸酶系统,通过点杂交试验可以检测出1.25pg的靶序列DNA.     

用生物素-亲和素强化免疫斑点试验检测口蹄疫病毒的研究

传统酶联免疫吸附试验一般用辣根过氧化物酶(HRP)标记IgG进行检测。HRP的稳定性虽好,但敏感性稍差。为了克服这一不足,引入碱性磷酸酶(AP)检测系统,进行免疫强化斑点试验检测口蹄疫病毒的研究。用光敏生物素标记纯化的A蛋白(SPA)代替第二抗体,通过AP标记的亲和素(Avidin-AP)检测生物素化抗体,最后加入底物BCIP和NBT显色判定。该法操作简单、检测时间短,并具有良好的特异性和重复性。由于引入生物素系统和AP,检测的灵敏度比曾通ELISA高。     

光敏生物素标记核酸探针检测A群轮状病毒的研究

采用光敏生物素标记Ａ群轮状病毒（ＧＡＲＶ）全基因组ＲＮＡ，制备了ＧＡＲＶ群特异核酸探针，该探针与样品进行打点杂交，经亲和素－碱性磷酸酶（ＡＶ－ＡＰ）系统显色，可检出１００ｐｇ病毒ＲＮＡ序列。试验表明轮状病毒光敏生物素核酸探针具有特异、灵敏、稳定的特点，可用于ＧＡＲＶ的检测和进行基因相关性研究。     

用生物素标记核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒的研究

本文报道了应用生物素标记核酸探针检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)的研究。将纯化的IBR病毒全基因组,用缺口翻译方法把生物素——尿苷三磷酸(Biotin—dUTP)掺入双链IBRV—DNA上作为探针,与点在硝酸纤维膜上的样品进行打点杂交,然后在链霉亲和素——碱性磷酸酶中孵育,用氮蓝四唑和5—溴—4—氯—3—吲哚磷酸作用,阳性反应呈现紫色斑点。通过检测样品中IBRV—DNA同源序列,以确定是否存在IBRV。结果表明:应用生物素核酸探针可检出10pg的IBRV—DNA,具有灵敏、快速、无放射性污染、探针保存时间长等优点,为IBRVI临床检测提供了一个有力的手段。     

家蚕病毒的血清学研究进展

<正> 血清学方法是实验诊断病毒感染和鉴定病毒的重要手段,也是研究病毒的重要方法,已在人和动植物病毒的研究与诊断中广泛地应用。同时随着免疫学基础理论的不断发展和与医学、生物学各分支的互相渗透,除了经典的血清学方法如免疫沉淀试验、免疫扩散试验,细胞凝集反应和补体结合反应等不断标准化外,象免疫荧光,免疫酶技术、放射免疫技术和生物素亲和素系统(BAS)等技术方法又不断地建立和广泛地得到应用。五十年代末期开始,血清学方法也被成功地应用于昆虫病毒的研究。六十年代我国学者曾用家蚕质型多角体病毒的多角体(CPB)抗血清,鉴别了两种多角体形状的 CPV(CPV—T 和 CPV-H)之间的相互关系,以后国内外学者又相继对家蚕的其他各种病毒进行了鉴定、定位和早期诊断研究,促进了对家蚕病毒研究的深入。