移植奶牛胚胎冷冻后分割成的二分胚生产同卵双生犊牛的实验

对解冻后品质优良的Ａ级囊胚进行分割，并将二分胚移植生产同卵双生犊牛。结果表明：９枚Ａ级囊胚切割成１８枚半胚，胚胎分割成功率１００％。单胚移植受体６头。妊娠２头，妊娠率３３．３％；双半胚移植６头，妊娠２头，妊娠率３３．３％。     

奶牛冷冻胚胎分割移植效果探讨

分割加拿大奶牛冷冻胚胎 ,借荷斯坦牛受体移植。共分割冷冻胚胎 1 5枚 ,分割为裸半胚 30个 ,分割成功率 1 0 0 %。移植受体 2 7头 (其中移植一对半胚的受体 3头 ) ,移植妊娠 1 4头 ,受体移植妊娠率51 .85% ,产犊 1 4头 ,半胚产犊率为 4 6 .6 7% ,按未分割的整胚计算 ,产犊率达到 93.34 % ,比整胚移植产犊率还提高 1 8.34个百分点。移植半胚生产 1头犊牛需胚胎 1 .0 7枚 ,比整胚减少 0 .2 6枚 ,降低成本1 51 0 .6 0元。说明胚胎分割是降低成本 ,扩大卵源 ,增加良种牛数量的有效方法。     

鲜整胚及分割双半胚移植试验研究

本试验结合我省胚胎移植的现状,用7头纯种西门塔尔牛作供体,46头杂交牛作受体,进行同期发情和超数排卵,获得鲜整胚59枚,双半胚32枚;用鲜整胚22枚,双半胚24枚进行移植,研究鲜整胚与分割双半胚的移植效果。结果表明:鲜整胚单枚移植妊娠率为27.3%(6/22),分割双半胚移植妊娠率为54.2%(13/24),鲜整胚单枚移植妊娠率比分割双半胚移植妊娠率低26.9个百分点,经t检验差异显著(P<0.05)。     

影响和牛双半胚移植妊娠率因素分析

研究和牛胚胎不同胚龄和移植方式对分割双半胚移植妊娠率的影响。结果表明:致密桑椹胚、早期囊胚、囊胚分割后双半胚移植妊娠率分别为60.2%、53.8%和50.0%,随着胚龄的上升妊娠率有下降趋势,各组间无显著差异(P0.05);移植到受体牛同侧子宫角双半胚妊娠率高于子宫角双侧各移植半枚分割胚和整胚(58.6%、41.7%、51.2%)(P0.05),双侧移植双犊率显著高于单侧移植和整胚移植(85.7%、36.9%、0%)(P0.01)。     

奶牛冷冻胚胎分割和分割后半胚冷冻技术

用简易分割方法,分割奶牛冷冻胚胎16枚,获得半胚32枚,分割成功率为100％(16/16),可移植半胚29枚,移植于16头受体牛,到第3个情期未返情者经直肠检查有6头妊娠,妊娠率为37.5％(6/16)。其中,在分割前或者分割后经恢复培养0.5～2h再移植的10头受体牛,5头妊娠;而未经恢复培养,分割后直接移植的6头受体牛中,只有1头妊娠。移植后3个月,直肠检查确定2头流产。已有1头受体黄牛生出1头奶牛牛犊(母)和1头受体奶牛产1头奶牛牛犊。其余的2头妊娠受体牛将于9月份产犊。此外,用简易分割法分割奶牛胚胎5枚,得到半胚10枚,裸半胚直接冷冻,解冻后回收可移植半胚5枚,移植于4头受体牛,无一头妊娠。结果表明,冷冻胚胎的分割半胚优于分割后冷冻半胚移植效果;冷冻胚胎分割前或者分割后恢复培养移植优于未经恢复培养而直接移植;简易分割法可应用于冷冻胚胎的分割。     

胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响

[目的]为了评估胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响。[方法]使用63头青年奶牛作为供体进行超数排卵,评估回收胚胎质量和发育阶段。选择334头青年奶牛作为受体鲜胚移植不同质量和发育阶段胚胎。对胚胎质量分布、发育阶段分布、不同质量胚胎和不同发育阶段胚胎移植30 d妊娠率进行统计分析。[结果]可用胚胎中A级胚胎比例(60.78%)显著高于B级和C级胚胎比例(36.70%和2.52%)(P<0.05);致密桑椹胚比例(54.36%)显著高于早期囊胚,囊胚和扩张囊胚比例(18.35%,25.0%和2.29%)(P<0.05)。A级和B级胚胎移植30 d妊娠率(63.55%和64.35%)显著高于C级胚胎移植30 d妊娠率(44.44%)(P<0.05);致密桑椹胚、早期囊胚、囊胚和扩张囊胚移植30 d妊娠率差异不显著(P<0.05),早期囊胚、囊胚移植30 d妊娠率高于致密桑椹胚、扩张囊胚移植30 d妊娠率(P<0.05)。[结论]选择不同发育阶段的A级和B级胚胎能够获得较高胚胎移植妊娠率,增加早期囊胚和囊胚阶段胚胎移植数量能够提高胚胎移植妊娠率。     

牛胚胎移植技术试验和示范研究报告

对 2 91头受体牛胚胎移植结果表明 ,胚胎移植妊娠率达到 5 3 85 % ;78头同期发情牛的同期发情率为 88 4 6 % ,达到 6 9头 ,其中符合胚移条件并实施移植的牛为 5 4头 ,达到A级黄体水平的牛有 4 1头 ,B级黄体水平的牛有 13头 ,A级黄体发育率为 75 93% ,B级黄体发育率为 2 4 0 7% ;A级黄体妊娠率达到 83 33% ,B级黄体妊娠率达到 30 77%。 2 13头自然发情受体牛中符合胚移条件并实施移植的牛为 10 9头 ,移植率为 5 1 17% ,6 0日龄妊娠牛为 5 9头 ,妊娠率达到 5 4 13% ,比同期发情牛的妊娠率 4 4 4 4%高 (P <0 0 5 )。     

提高波尔山羊胚胎移植妊娠率研究

本文就波尔山羊胚胎质量、胚胎发育阶段、胚胎数量、受体卵巢黄体数、受体注射LRH-A3、供、受体发情同期化程度以及胚胎移植的方向等因素与受体移植妊娠率的关系进行了研究。结果表明:移植囊胚较移植1枚B级桑椹胚妊娠率高;A级桑椹胚妊娠率显著高于移植1枚B级桑椹胚(P<0.05);移植2枚B级桑椹胚妊娠率比移植1枚B级桑椹胚的高39.4%(P<0.05);受体注射LRH-A3有助于提高妊娠率;供、受体发情同步差在48 h以上组妊娠率显著低于0~24 h和24~48 h组(P<0.05);向子宫角前端方向的移植妊娠率比向子宫角基部方向的高12.2个百分点。     

不同分割液对奶牛不同阶段胚胎分割效果的影响

本试验探讨了3种不同分割液对奶牛桑葚胚和囊胚分割效果的影响。借助显微操作仪，将发育至第6～8天的体内常规生产的桑葚胚和囊胚进行分割，体外培养半胚，观察其发育情况，选择形态恢复好的半胚与一个囊胚滋养层细胞囊泡（trophoblastic vesicles，TRV）共移植。结果显示，在PBS+0.2 mol/L蔗糖与PBS+5%PVP中分割桑葚胚，其分割成功率显著高于PBS（P<0.05），分别为89.13%、86.73%和69.67%，而半胚的囊胚发育率及移植妊娠率三者均无显著差异（P>0.05）；在PBS+0.2 mol/L蔗糖与PBS+5%PVP中分割囊胚， 其分割成功率显著高于PBS（P<0.05），分别为94.52%、92.52%和70.52%，而半胚培养的囊胚发育率及移植妊娠率三者均无显著差异（P>0.05）；说明在PBS中分别添加0.2 mol/L的蔗糖和5%的PVP有利于提高奶牛桑葚胚和囊胚的分割成功率。     

影响绵羊胚胎移植妊娠率的因素分析

试验旨在研究影响绵羊胚胎移植妊娠率的关键因素。试验选取64只供体绵羊,对其进行超数排卵处理,同时选取370只受体绵羊,进行同期发情处理。采集胚胎分析其质量、数量及发育阶段,观察受体卵巢黄体数对妊娠率的影响。对试验数据进行卡方检验分析。结果表明,A级桑葚胚妊娠率(72.3%)显著高于B级桑葚胚的妊娠率(60.0%),P0.05;移植1枚A级桑葚胚妊娠率(71.8%)显著低于移植2枚A级桑葚胚妊娠率(82.4%),P0.05;移植1枚B级桑葚胚妊娠率(48.2%)显著低于移植2枚B级桑葚胚妊娠率(58.3%),P0.05;胚胎发育阶段和黄体数对妊娠率无显著性影响(P0.05)。综上所述,胚胎等级、移植胚胎数是影响绵羊胚胎移植妊娠率的主要因素。     

提高波尔山羊超排效果及移植妊娠率研究初报

以波尔山羊为供体、本地白山羊及其用萨能奶山羊改良的高代杂种羊为受体,开展提高超排效果及移植妊娠率研究。结果表明:在提高超排效果研究方面,注射P4+LRH-A3组较对照组头均获胚胎数及可用胚胎的百分率分别提高5.4枚和17.7％;注射P4组、注射LRH-A3组较对照组头均获可用胚胎的百分率分别提高18.99％和14.87％。在提高受体移植妊娠率研究方面,移单胚、双胚、三胚的受体羊移植妊娠率组间差异不显著,但移三胚的受体羊产羔率较移单胚、双胚分别提高66.92％和36.09％,差异极显著;受体羊移入胚胎发育阶段相同的1枚或2枚同等级胚胎(A级或B级),妊娠率和产羔率无显著影响,但移入2枚A级囊胚受体羊的产羔率较移入2枚A级桑椹胚的产羔率高36.23％,差异显著;移植受体的一侧卵巢上有3个以上黄体的妊娠率显著高于1个黄体和2个黄体,分别高31.55％和29.23％,差异显著。移入胚胎的受体羊卵巢上黄体和卵泡同时存在,将卵泡刺破使卵泡液流失,与卵巢上只有黄体存在的受体羊移植妊娠率无显著差异;向子宫角方向和逆子宫角方向移植胚胎对受体羊移植妊娠率无显著差异。     

奶牛胚胎分割试验研究

简单分割7～8天奶牛胚胎59枚(117个半胚)。裸半胚成对移给59头奶牛或黄牛,80～90天有27头(45.8％)妊娠。最后24头受体产犊34头,半胚产犊率29.1％(34/117)。有10对双胎,双胎率41.7％(10/24)。比较在不同情况下—7天或8天;晚桑椹或囊胚期;透明带软化处理或不软化处理—分割的半胚,成对移植后受体妊娠率分别是40.0％和57.9％;35.7％和54.8％;48.6％和41.7％。半胚产犊率分别是26.6％和34.2％;23.6％和33.9％;30.0％和27.7％。均无显著差异(P>0.05)。分割优质胚胎得到最好的(35.7％)半胚产犊率。半胚在体外5小时内移植有较高(30.5％)的产犊率。试验探索了奶牛半胚移给远处分散的农户黄牛的可能性。11对奶牛半胚移给11头黄牛有6头(54.5％)妊娠。最后5头受体产下7头奶牛犊,两对同卵双胎。     

奶牛鲜胚移植试验研究

对11头荷斯坦奶牛进行超排处理,超排有效9头,有效率82%,头均获得胚胎7.8枚,其中可用胚头均5.3枚.移植荷斯坦受体牛37头,妊娠率51.4%;移植秦川黄牛6头,妊娠率50%.     

胚胎因素对肉羊胚胎移植效果的影响

为提高肉羊胚胎移植的妊娠率,研究了胚胎发育阶段、胚胎体外保存时间和移植胚胎数对肉羊胚胎妊娠率的影响。结果表明:发育阶段对妊娠率有显著影响,在移植胚胎数量相同的情况下,囊胚的受胎率(58.7%)高于桑椹胚(56.4%)(P<0.05);胚胎体外保存0～10 min、10～30 min、30～60 min、60 min以上的妊娠率分别为66.7%、65.0%、60.0%、63.3%,四者间均没有显著差异(P>0.05);移植胚胎的数量对受胎率有显著影响,移植2枚囊胚的受胎率(67.7%)显著高于移植2枚桑椹胚(61.2%)、1枚囊胚(58.7%)、1枚桑椹胚的受胎率(56.4%)(P<0.05)。     

奶牛新鲜和冷冻胚胎分割移植试验

用简单方法,分割7～8日龄新鲜牛胚胎(1分为2),裸半胚成对移植给66头受体,90天妊检,移植妊娠率为56.1％(37/66)。除6头流产和尚有5头待产外,已有26头受体产犊35头,其中有9对同卵双胎,双胎率为34.6％(9/26),半胚产犊率为29.2％(35/120)。对影响成对半胚移植妊娠率和半胚产犊率的诸多因素如胚胎质量,胚胎在体外停留时间、胚胎发育阶段、受体牛品种、黄体状况等进行了较系统的研究。同时对冷冻胚胎进行了分割试验,移植妊娠率为45.5％(5/11),已产3头犊牛。对快速冷冻和常规冷冻胚胎分割后的移植妊娠率进行了比较,分别为25.0％(1/4)和57.4％(4/7)。     

波尔山羊胚胎移植技术的研究与应用

对 75只波尔山羊超排处理 ,共获 A、B级胚胎 776枚 ,平均 (10 .35± 6 .4 5 )枚 /只 ,鲜胚移植受体 36 7只 ,移植产羔率达 5 5 .6 %。应用 CIDR和 PMSG同期发情处理受体山羊 5 6 0只 ,5 4 9只达到同期发情 ,32 h内同期率为 98.0 4 %。囊胚和扩张囊胚在发情后 7d的移植产羔率分别为 6 2 .2 2 % (84 /135 )和 5 8.2 6 % (6 7/115 ) ,显著高于桑椹胚 (43.18% )和孵化囊胚 (5 1.72 % ) (P<0 .0 1) ,而囊胚和扩张囊胚间、桑椹胚和孵化囊胚间差异不显著 (P>0 .0 5 )。受体山羊的黄体数量直接影响到移植产羔结果 ,黄体数≥ 2的受体山羊移植产羔率显著高于黄体数为 1的受体山羊移植产羔率 (P<0 .0 1) ,分别为 6 4 .83% (94 /14 5 )和 4 9.5 5 % (110 /2 2 2 )。PMSG注射时间 (在取 CIDR前 2 d或当天注射 )和剂量对受体羊的黄体数和移植产羔率均无显著影响 (P>0 .0 5 )     

国产促卵泡素(FSH)对供体牛超排效果的分析

通过对6头荷斯坦青年母牛用国产FSH 4d逐日递减注射法进行超排处理,非手术采卵.共收集桑椹胚(M)、紧缩桑椹胚(CM)、囊胚(BL)、扩张囊胚(EXB)各胚龄的胚胎49枚,可用胚38枚,其中A级M 1枚、CM 23枚、BL 1枚、EXB 9枚;B级M 1枚、BL 3枚、可用率达77.5%,平均可用胚6.3枚/头.这说明,在严格把握技术环节的情况下,国产FSH超排效果显著.     

荷斯坦牛生产体内性控胚胎的试验研究

本研究采用荷斯坦牛X-性控冻精和超数排卵技术生产奶牛体内性控胚胎。结果显示,使用阴道栓(Cue-Mate)对31头供体奶牛进行同期发情处理,发情率为100%,且发情时间较集中。31头供体奶牛共回收胚胎321枚,头均回收胚胎10.35枚,其中可用胚胎225枚,头均可用胚胎7.26枚。选择36头黄牛受体进行单胚移植,其中21头移植鲜胚,妊娠10头,妊娠率47.62%;15头移植冻胚,妊娠6头,妊娠率40.00%。     

山羊冻胚分割试验

将冷冻-解冻后的琼脂包被孵出胚泡分两组,分别置于12％蔗糖液(A)和磷酸缓冲液(B)中进行2分切割。在体外培养12小时后,A、B两组的半胚发育率分别为68.9％(31/45)和58.3％(35/60)。A组的冻胚分割效果显著好于B组(P<0.05)。将早期囊胚、扩张囊胚、孵出胚泡和琼脂包被孵出胚泡冷冻-解冻后,在12％蔗糖液中分割为2(A、B、C、D组)。在体外培养12～24小时后,A、B、C、D4组的半胚发育率分别为47％(14/30)、 50％(15/30)、27％(8/30)和70％(21/30)。D组的冻胚分割效果显著好于A、B两组(P<0.05)极显著地好于C组(P<0.01)。将5枚在冷冻前用琼脂包被的孵出胚泡在12％蔗糖液中分割为二后移植于5只受体,结果有4只妊娠,共产半胚羔6只,其中2对为同卵双生。本研究证明,在蔗糖液中分割冻胚可提高半胚体外成活率;分割从琼脂释放出的解冻孵出胚泡可提高山羊冻胚分割的效果。     

奶牛胚胎分割和半胚移植技术的研究

以简易方法分割奶牛二分胚39对(78枚);成功率为94.8%(74/78枚);以20%犊牛血清PBS培养液37℃培养2小时,发育复圆率为68.9%(40/58),成对和半胚裸胚移植给黄牛受体的妊娠率为17.1%(6/35)。从而为提高胚胎利用率和生产同卵孪生犊提供了简易方法。