通用引物扩增甲型流感病毒基因组及其高通量测序

为探索使用高通量测序方法测定甲型流感病毒的基因组,设计了一对通用引物进行甲型流感病毒全基因组的RT-PCR扩增,并分析了该方法的敏感性。结果显示,该方法能够扩增的甲型流感病毒多种亚型的全部8个节段的基因,其扩增敏感性为100 pg RNA。     

动物流感监测概况

流感是一种传染病，其病原属于正粘病毒科RNA病毒，可分为4个属：甲型流感病毒属、乙型流感病毒属、丙型流感病毒属和托高土病毒属。它们均由单股负链RNA组成，其中甲型流感病毒多发于低等动物及禽类，乙型流感病毒仅感染人，丙型流感病毒感染人和猪，但极少引起严重的疾病。     

猪甲型H1N1流感及其防治

2009年3月,墨西哥和美国等先后发生人感染甲型H1N1流感病毒,为A型流感病毒。该毒株包含有甲型H1N1流感、禽流感和人流感3种流感病毒的基因片断,是种新型甲型H1N1流感病毒,可以人传染人。这种病在猪中经常发生,很少导致猪的死亡,猪的病死率为1%~4%。人类很少感染甲型H1N1流感病毒,但也曾发现人类感染甲型H1N1流感的病例,但大多数是与病猪有过直接接触的人。     

甲型H1N1流感的特点及其防控

甲型H1N1流感病毒是2009年3月墨西哥出现的一种新型流感病毒。此后不久,这种病毒造成世界范围内的蔓延。论文分析总结了甲型H1N1流感病毒与1918年流感病毒的相似性以及表现出的新特点,归纳了这种病毒的潜在危害性。此外,介绍了甲型H1N1流感的防控策略,主要包括加强猪群监控,流感疫苗和抗流感病毒药物治疗。     

关于禽流感的形势与防控

<正>一、禽流感及流感病毒流感病毒属于正黏病毒科(Orthomyxoviridae)。1.甲型流感病毒属人甲型流感、禽流感、猪流感、马流感、水生哺乳动物流感。2.乙型流感病毒属人流感。3丙型流感病毒属人、猪流感。     

猪场如何防控甲型H1N1流感

正在全球范围内发生蔓延的甲型H1N1流感疫情,是由一株新型流感病毒引起的具有公共卫生意义的重大疫病.已证实该病毒的核酸包含人流感病毒、北美禽流感病毒和北美、欧洲、亚洲三类猪流感病毒的多个基因.显然,甲型H1N1流感的发生,是人与动物流感病毒在某种特定条件下交互作用、重组变异的结果.该病自公布和报道以来,引起了世界范围内空前而广泛关注,截止2009年5月12日,世界上已有30个国家和地区确诊人感染该病,目前该病在传播方面的显著特征是人际间传播,且人感染甲型H1N1流感病毒后可以传染给猪,从而导致甲型H1N1流感的发生和流行.我国内地和香港已确诊2例人感染甲型H1N1流感的输入病例.     

甲型H1N1与季节性H1N1流感病毒检测基因芯片的制备与初步应用

建立DNA微列阵技术检测甲型H1N1和季节性H1N1流感病毒的方法,进而探讨该方法用于检测临床标本的可行性。通过生物医学数据库甲型H1N1流感病毒及季节性H1N1亚型流感HA与NA基因进行检索和筛选,应用分子生物学软件,进行序列分析、引物及探针设计,并进行验证。试验所设计的探针可以对甲型H1N1流感与季节性H1N1流感病毒进行区分,用该方法检测了长春市CDC送检的6份疑似甲型H1N1流感病毒临床病例,4份阳性,检测结果同实时荧光定量PCR方法一致。结果表明,利用本研究建立的DNA微列阵技术检测甲型H1N1流感病毒方法,特异性和敏感性强,可作为甲型H1N1流感病毒临床标本检测方法。     

甲型H1N1(2009)流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与评价

自甲型H1N1(2009)流感病毒于2009年在世界多个国家暴发流行后,许多国家的猪群中检测到该病毒的存在,因此建立快速准确的甲型H1N1流感病毒的检测方法成为迫切需求。本研究针对甲型H1N1(2009)流感病毒NA基因设计特异性引物和探针,建立甲型H1N1(2009)流感病毒特异性实时荧光RT-PCR快速检测方法。并将该方法与WHO推荐美国CDC建立的检测方法和美国农业部推荐的检测方法进行比较。通过田间试验验证该方法在实际应用中的效果。结果表明:本研究建立的方法对检测甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的灵敏度达到10-6,与WHO推荐的A型流感病毒实时荧光PCR检测方法的灵敏度一致,并且高于美国农业部推荐方法的检测灵敏度(10-5);该方法特异性强,与经典型H1N1和其他亚型流感病毒株无任何交叉反应。与香港兽医化验所进行了检测比对,检测灵敏度和特异性完全一致。近3 800份的田间试验表明,所建立的方法准确可靠。本研究所建立检测方法快速灵敏,检测结果准确可靠,适合用于甲型H1N1(2009)流感病毒的分子生物学检测和监测。     

2010—2011年猪场中猪源新型甲型流感病毒流行情况调查

为深入了解猪源新型甲型流感病毒的流行情况,本研究对山东省9个地市40个猪场进行了猪源新型甲型流感病毒的感染情况调查。在养猪场采集有流感症状猪的血液样品(263份)和鼻咽拭子(235份),分别用HI试验来检测血清抗体滴度和荧光定量PCR技术检测鼻咽拭子中的流感病毒的含量。结果表明,血清阳性率为23.07%～63.33%,总阳性率为41.6%;荧光定量PCR检测鼻咽拭子阳性率为10.0%～64.28%,总阳性率为30.63%。这为了解山东省猪源新型甲型流感病毒的发生和分布,并采取相应的公共卫生措施提供了依据。     

我国首个甲型H1N1流感病毒耐药分析基因芯片问世

<正>我国首个专门针对甲型H1N1流感病毒抗药性的基因确诊和耐药性分析的基因芯片,5月15日在军事医学科学院放射与辐射医学研究所研制成功。据介绍,这种芯片采用了具有自主知识产权的纳米标记信号放大技术,在准确检测到甲型H1N1流感病毒     

孩子牙烂了,需要补吗?

随着季节更替,甲型H1N1流感病毒已成为流感病毒中的主导病毒。甲型H1N1流感是由变异后的新型甲型H1N1流感病毒所引起的急性呼吸道传染病。人感染甲型H1N1流感后的症状与普通流感相似,包括发热（腋温≥37．5℃）、流涕、鼻塞、咽痛、咳嗽、头痛、肌痛、乏力、呕吐和（或）腹泻。     

甲型流感病毒快速分型与分析软件的开发与试用

甲型流感病毒危害动物和人类健康,其亚型多、突变率高、易发生重配,因此对其进行检测及流行毒株基因分析尤为重要。为解决传统方法进行大量甲型流感病毒序列分型和分析时存在的费工耗时、人为错误多等问题,结合实际工作需要,使用Perl语言建立了一套lunix系统下的甲型流感病毒快速分型与分析软件,并试用其对Gen Bank中所有宿主为鸭的甲型流感病毒进行了分析。结果显示,该软件可在较短的时间内完成大量序列的分析、分型和遗传进化研究,可用于甲型流感病毒的大规模流行病学调查分析。     

专家就防控宠物感染甲型H1N1流感病毒答记者问

针对近期犬中检出甲型H1N1流感病毒情况，就如何防控宠物感染甲型H1N1流感病毒．中国农业大学动物医学院刘教授接受了记者采访。     

香港检出猪带甲流病毒

香港食物安全中心近日公布,去年11月至今年1月,共有7个来自新界上水屠房猪的样本被发现含有甲型H1N1流感病毒,但病毒没有出现重要基因变异情况。食物安全中心发言人表示,有鉴于甲型H1N1流感病毒已广泛传播,在猪中发现该病毒并非意料之外,而日后的监测结果也可能会不时     

甲型H1N1流感病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立

为建立快速检测甲型H1N1流感病毒[Influenza A(H1N1)pdm09]的TaqMan荧光定量PCR方法,本研究根据甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因保守序列,设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,采用实时荧光定量PCR技术检测甲型H1N1流感病毒。使用含有选定检测序列的重组质粒pMD-HA标准品绘制标准曲线,其相关系数为0.999,敏感性可达50 TCID50。本研究中,甲型H1N1流感病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法与经典H1N1、类禽H1N1、类人H1N1、H1N2、H3N2、H5N1和H9N2流感病毒无交叉反应。结果表明,该方法可以在人类和动物间有效地检测甲型H1N1流感病毒。     

多重RT-PCR方法检测新型甲型H_1N_1流感病毒的研究

为了建立快速检测新型甲型H1N1流感病毒的多重PCR技术,根据GenBank中公布甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)的HA和NA基因序列,设计并合成两套特异性引物。使用TaKaRa公司的一步法RT-PCR试剂盒和自行设计合成的引物建立多重RT-PCR反应,按照预期的PCR产物序列合成的DNA作为阳性对照。结果表明,该方法具有良好的特异性,可以将甲型H1N1流感病毒(2009年流行株)与传统甲型H1N1、H3N2、H5N1、H6N2和H9N2亚型流感病毒区分。该方法同时具有较高的灵敏度,最低可以检测到100个拷贝的阳性克隆质粒。在对183份发热病人临床咽拭子样品检测中发现了10份阳性样品,对350份猪鼻腔拭子样品检测全部呈阴性,结果与中国检验检疫科学研究院试剂盒检测结果一致,说明了该多重RT-PCR方法在临床检测新型甲型H1N1流感病毒方面具有广阔的应用前景。     

加拿大确认火鸡感染甲型H1N1流感病毒

加拿大安大略省卫生官员说，该省一个火鸡饲养场的火鸡确诊感染了甲型H1N1流感病毒，这是继智利后第2个国家发现有火鸡感染这一新型流感病毒。     

2009甲型H1N1流感病毒在人与动物间的潜在风险评估

2009年4月份爆发的甲型H1N1流感,最初被命名为H1N1亚型猪流感,一时间猪价大跌,猪肉滞销,人们谈"猪"色变。2009甲型H1N1流感病毒在全球范围内的爆发证实了动物源性流感病毒的潜在风险。在食品安全问题受到全球性关注的今天,2009甲型H1N1流感病毒在人与动物间的潜在风险值得我     

全球家禽贸易量下滑

加拿大安大略省卫生官员10月20日表示，该省一个火鸡饲养场的火鸡确诊感染了甲型H1N1流感病毒，这是继智利后第二个国家发现有火鸡感染这一新型流感病毒。     

甲型H1N1流感病毒核酸检测能力验证样品制备及其应用效果评价

为考核实验室检测甲型H1N1流感病毒的能力,设计和实施了“CNAS T0459甲型H1N1流感病毒核酸检测能力验证计划”.利用甲型H1N1流感病毒(2009)和经典H1N1猪流感病毒核酸标准物质制备6组能力验证阳性样品,经实验室检测分析,所制备的样品均匀性和稳定性均达到中国合格评定国家认可委员会对能力验证样品的要求.将6组阳性样品和1组阴性样品编号后下发54家参试实验室,共有50家实验室报送了有效数据,其中完全达到能力验证要求的实验室共34家,满意率达68％,其余16家为不满意实验室,包括8家实验室检测经典H1N1猪流感病毒满意,但甲型H1N1流感病毒(2009)特异性检测不满意.本次能力验证为整体提升我国甲型H1N1流感病毒的检测水平和评估各级实验室检测能力具有重要意义.