人羊膜间充质干细胞归巢至小鼠急性损伤肝组织及其致瘤性

将小鼠随机分为治疗组和对照组,按20μL/g的剂量腹腔注射10%CCl4溶液,每周2次,连续注射4周,建立小鼠急性肝损伤模型。建模后24h,治疗组尾静脉移植经Dir标记的人羊膜间充质干细胞0.2mL;对照组移植等量未经Dir标记的人羊膜间充质干细胞。使用小动物活体成像系统观察人羊膜间充质干细胞在小鼠体内分布。将NOD/SCID小鼠随机分为3组,试验组注射0.2 mL人羊膜间充质干细胞细胞悬液,阳性对照组注射0.2 mL Hep G2细胞悬液,阴性对照组只注射等量Matrigel和PBS的1∶1混合液。60d后脱颈处死小鼠,观察肿瘤形成情况并进行病理组织学检查。结果显示,活体成像试验发现,人羊膜间充质干细胞移植后2h,全身只有肝脏区域有荧光,人羊膜间充质干细胞移植后1d,肝脏及肺脏附近荧光信号达到最强,移植3d,肺部强荧光消失,肝部附近强荧光仍存在,移植后7~30d,全身各处荧光信号消失,但肝部荧光信号持续存在。体内致瘤试验发现,阳性对照组小鼠有肿瘤形成,而注射人羊膜间充质干细胞的试验组小鼠和阴性对照组小鼠均未观察到肿瘤形成。结果表明,人羊膜间充质干细胞尾静脉移植入急性肝损伤小鼠,可以成功归巢至肝脏并长期定植存在;人羊膜间充质干细胞在体内没有致瘤性,具有一定的临床安全性。     

间充质干细胞的免疫调节特性及其应用研究进展

间充质干细胞(MSCs)是一种具有自我复制和多向分化潜能的多能干细胞,具有低免疫原性和免疫抑制作用,并能优先归巢于损伤组织,促进组织修复.体内外研究显示MSCs可影响T细胞、B细胞、自然杀伤细胞、抗原提呈细胞等免疫细胞功能,减轻器官移植后免疫排斥,有望在移植免疫领域得到广泛应用.论文概述了间充质干细胞的生物学特性,免疫...     

兔骨髓间充质干细胞的分离培养及肝内示踪

通过分离培养兔骨髓来源的间充质干细胞(MSCs),示踪其肝内移植命运,为MSCs的细胞治疗肝脏疾病提供理论依据和试验支持.采取全骨髓贴壁培养法分离培养兔骨髓MSCs,利用携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的慢病毒载体感染MSCs,选择最优转染效率,并移植入经D-氨基半乳糖诱导的急性/亚急性肝衰竭受体兔体内,荧光显微镜下...     

骨髓间充质干细胞对心梗大鼠Desmin和cTnT表达的影响

来源于Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)经淫羊藿苷(ICA)体外诱导处理,移植到心梗大鼠体内,研究心梗大鼠受损心肌的心肌结蛋白(Desmin)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达情况。把分别经ICA(10-7mol/L)和5-aza(10μmol/L)诱导24 h+1周的MSCs,按照4×106的密度植入心梗大鼠体内2周或4周,通过免疫组化检测心肌Desmin和cTnT的表达。与2周组比较,注射4周的心梗大鼠Desmin和cTnT表达更加理想。在体外经10-7mol/L浓度的ICA诱导24 h+1周的MSCs经尾静脉注射治疗4周,能更有效地修复急性心梗大鼠的受损心肌。     

兔骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化的研究

旨在研究5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导兔骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化的作用及适宜浓度.取兔股骨骨髓,分离并培养骨髓间充质干细胞,用5-Aza定向诱导向心肌样细胞分化.用倒置显微镜、免疫细胞化学法鉴定诱导后的细胞是否能表达心肌特异性蛋白α-横纹肌肌动蛋白(α-actin)和肌钙蛋白T(Cardiac troponin T,cTnT),计算各组细胞向心肌样细胞的诱导分化率.结果,5-Aza诱导MSCs后,细胞明显变宽,诱导1个月后的MSCs呈长杆状,走向趋于一致,相邻细胞间连接较紧密,相互融合.心肌细胞特异性蛋白α-actin和cTnT呈阳性表达,不同浓度的5-Aza诱导的MSCs心肌细胞特异性蛋白的表达率不一样,其中以10 μmol·L-1组表达率最高.5-Aza作用兔MSCs体外培养可以诱导其向心肌样细胞分化,最佳浓度为10μmol· L-1.     

鸡肺脏间充质干细胞的分离鉴定及其对禽流感病毒的易感性研究

本研究分离并鉴定了1~2周龄雏鸡的肺脏间充质干细胞(MSCs)。显微镜下观察,这些培养细胞呈成纤维细胞样形态。表型上,这些细胞表达对干细胞自我更新和多功能性至关重要的CD44、CD90、CD105和转录因子PouV。鸡MSCs的多向分化潜能性显示其能够被诱导分化成为脂肪细胞和成骨细胞。与鸡骨髓MSCs和哺乳动物MSCs相同,鸡肺脏间充质干细胞具有免疫调节活性并能严重抑制T细胞受有丝分裂原刺激后的增殖。进一步检测了这些细胞对禽流感病毒(AI)H1N1和H9N5的易感性。鸡肺间充质干细胞可以表达已知的α-2,3和α-2,6唾液酸受体,且H1N1和H9N5这2个禽流感毒株都能在其中复制增殖。病毒感染MSCs能引起细胞裂解和细胞因子及趋化因子的产生。对鸡及其他哺乳动物的肺间充质干细胞(MSCs)特性的进一步鉴定将有助于理解肺感染性与非感染性疾病的发病机理和肺损伤修复的机制。     

同源异体骨髓间充质干细胞移植治疗犬急性肝功能损伤

探讨同源异体骨髓间充质干细胞(BMMSCs)移植对犬急性肝功能损伤的治疗作用,为犬干细胞治疗相关疾病提供理论基础和技术支持。对患急性肝损伤的10只病犬经超声引导腹腔内肝门附近移植BMMSCs,移植后检测血常规、肝功能和肝脏B超,观察同期的症状体征和不良反应情况。结果显示,干细胞移植7天后可使患犬各项肝功能指标明显改善,10d后B超结果显示肝组织回声均匀,无明显异常,14d后患犬的精神、体力、食欲明显好转,干细胞移植21d后血常规各项指标恢复正常,患犬基本康复,移植干细胞的患犬均未发现有不良反应。说明相对于常规治疗,犬BMMSCs同源异体移植治疗急性肝损伤可明显缩短治疗时间,显著提高患犬生活质量。     

重组新城疫病毒HN基因乳酸菌抑制结肠癌作用评价

为评价重组新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)基因植物乳杆菌对鼠结肠癌(CRC)潜在的抑制作用,试验以前期构建的可表达NDV HN基因的植物乳杆菌(简称重组菌HN/Lab)为研究对象,通过肿瘤诱导建立小鼠CRC皮下移植瘤模型,通过腹部手术建立小鼠原位移植瘤模型,并在肿瘤诱导前后给荷瘤鼠灌胃重组菌和不表达HN基因的植物乳杆菌(L.p),通过监测肿瘤体积、荷瘤鼠的存活率以及肿瘤组织的病理学来评价重组菌对CRC的抑制作用。结果表明,试验分别成功建立了小鼠CRC皮下移植瘤和原位移植瘤模型;重组菌(CT26+HN/Lab组)能明显抑制荷瘤鼠皮下肿瘤的生长,分别在肿瘤诱导后25,30 d差异显著(P0.05),重组菌组小鼠的存活率和生存时间也显著高于CT26组(P0.05);重组菌对小鼠原位移植瘤模型抑制效果明显,在肿瘤诱导7 d后即能明显抑制肿瘤的生长(P0.05),抑瘤率为43.13%,与植物乳杆菌(CT26+L.p组)23.03%抑瘤率相比有了明显的提高;病理组织学观察结果显示,重组菌诱导肿瘤坏死明显,浸润的淋巴细胞数量增多,能够抑制肿瘤细胞向黏膜层转移。因此,NDV HN基因重组乳酸菌对鼠CRC模型具有较好的抑制作用。     

槲寄生在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用研究

为了探讨槲寄生在荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用,将槲寄生提取物1.65～15 mg/(kg·d)经皮下分别注射于荷肉瘤S180的实体瘤和腹水瘤小鼠体内,连续注射9d后,分别对其肿瘤重量、抑瘤率、脾有核细胞数、脾指数、生存期以及肿瘤组织等病理变化进行观测.试验结果表明,槲寄生对体内肿瘤生长的抑制率为14.7%～28.3%,经其治疗后,小鼠的存活时间及脾指数均明显高于对照组(P<0.01),且其瘤组织中为较致密的结缔组织,对照为疏松的结缔组织.槲寄生在荷瘤小鼠体内有明显的抗肿瘤作用,对脾脏的保护功能可能与其抗瘤机制有关.     

人羊膜间充质干细胞抑制肝损伤小鼠淋巴细胞增殖和干扰素-γ分泌的研究

为了研究人羊膜间充质干细胞(h AMSCs)进入损伤动物体内后对动物机体免疫相关指标的影响,探究人羊膜间充质干细胞免疫原性,试验采用两步酶消化人羊膜组织分离培养h AMSCs,用流式细胞技术和免疫荧光的方法鉴定细胞表面分子;将CCl4橄榄油混合液按体重比腹腔注射到小鼠体内造肝损伤模型,损伤后的小鼠尾静脉注射h AMSCs,观察小鼠30 d内外周血中淋巴细胞和血浆中γ-干扰素(IFN-γ)的变化。结果表明:试验分离得到较高纯度的h AMSCs细胞;尾静脉注射细胞的肝损伤小鼠与未注射细胞的肝损伤小鼠相比,注射细胞的小鼠体内淋巴细胞数量有所降低;损伤小鼠体内血浆中IFN-γ含量随着h AMSCs注入时间的延长也逐步降低。h AMSCs进入肝损伤小鼠体内不引起淋巴细胞发生增殖,也不诱发分泌IFN-γ,反而降低动物体内的免疫功能。说明h AMSCs具有低免疫原性,可能使其进入机体后不被免疫细胞识别,从而能够在机体内修复脏器。