免疫金标试纸检测与正向间接血凝试验对猪瘟免疫效果的评估对比

当前国内对猪瘟抗体水平检测方法有ELISA检测法、猪瘟正向间接血凝法以及免疫金标试纸检测法。前两种方法虽然都具有微量、特异、准确的优点,但需要比较完备的实验仪器和经验丰富的技术人员,且检测时间较长。而金标试纸条是新开发的一种全新猪瘟抗体检测方法,检测一个样品只需8～15min,操作简便、快速、直观、结果容易判定,但其应用检测结果的准确性尚待求证。鉴于这种情况,开展了免疫金标试纸检测与正向间接血凝试验两种检测方法的比较研究[1]。结果表明,免疫金标试纸检测与猪瘟正向间接血凝试验的结果基本符合,试验结果可靠。     

斑点金标免疫渗滤法快速检测牛血吸虫病抗体的效果观察

目的观察斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病抗体的效果。方法使用斑点金标免疫渗滤诊断试剂盒检测粪检血吸虫病牛血清(血纸)146头份,疫区耕牛血清(血纸)562头份,并用间接血凝法(indirect haem aggluti-nation assay,IHA)法作对比。结果146头份粪检阳性血清(血纸)检测为阳性者140头份,阳性检出率95.9%,IHA法检测为阳性者141头份,阳性检出率96.6%。结论斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点,但仍有一定漏检,有待于进一步研究提高。     

用于检测猪瘟抗体的免疫金标试纸条的研制与应用研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜的检测区，在其下端附着胶体金标记的猪瘟抗原，组成免疫金标试纸条，根据胶体金免疫层析原理，用该试纸条建立检测猪瘟抗体水平的免疫金标检测法。再用本试纸条检测法与Dot-ELISA及间接血凝法对298份猪、鸡、鸭、鹌鹑、兔、鼠、羊血清进行猪瘟抗体检测，结果符合率达100%。试验结果表明，本法与Dot-ELISA及间接血凝法一样特异、敏感和微量，而且检测时间短、直观，结果容易判定，适用于大面积猪瘟抗体监测普查。     

免疫金标试纸检测与正向间接血凝试验对昆明地区犬弓形虫血清学调查的对比

为了解昆明地区犬弓形虫的流行情况,采用免疫金标试纸和间接血凝试验(IHA)检测弓形虫的效果差异。实验采集258份血样,离心得到血清,将每1份血清平均分成A、B组,A组用免疫金标试纸检测,B组用正向间接血凝试验检测。结果表明:A组阳性样本血清74份,阳性率为28.68%;B组血清凝集价≥1:64的有68份,阳性率为26.37%。将A组血清样本按照犬来源进行统计分析,结果流浪犬的感染率远高于家养犬。说明昆明地区犬弓形虫普遍存在,免疫金标试纸的敏感性高于正向间接血凝试验的敏感性。     

怎样做好正向间接血凝试验

正间接血凝实验(IHA)是一种简单、快速、适用的血清学诊断技术,但实验结果受操作技术、器材、样品影响较大,本人根据多年的实践体会,现就实验中器材、试剂、样品、过程和判定标准等方面的优化做一综述,以期作为本实验的借鉴。正向间接血凝试验因其准确度较高、操作相对简单实用、检测成本相对较低深受县级县级兽医实验室的青睐。间接血凝试验(IHA)是上世纪六十年代在我国发展起来的血清学诊断技术,是用已知血凝抗原致敏与免疫无     

免疫金标试纸法与正向间接血凝试验检测猪口蹄疫免疫效果探讨

当前国内检测猪口蹄疫抗体水平的方法有ELISA法、猪口蹄疫正向间接血凝法和免疫金标试纸法等。前两种方法虽然都具有微量、特异、准确的优点,但需要比较完备的试验仪器和经验丰富的技术人员,且检测时间较长。而免疫金标试纸检测法是新开发的一种全新的猪口蹄疫抗体检测方法,检测一个样品只需8～15min,操作简便、快速、直观,结果容易判定,但其检测结果的准确性尚待验证。鉴于此,为了选择一种切合远安县动物疫病防控实际的     

斑点免疫金渗滤法检测猪瘟抗体的研究

以猪瘟抗原包被硝酸纤维素膜，然后用胶体金标记SPA，建立检测猪瘟抗体水平的斑点免疫金渗滤法检测试纸盒。通过胶体金标记金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)直接显色，阳性者出现红色斑点，结果易于判断。整个试验过程仅需5min，操作简单，与猪兰耳病、猪伪狂犬病、猪细小病毒、新城疫和禽流感等阳性血清不发生交叉反应。同时将该法与目前猪瘟的常规检测方法Dot—ELISA法和间接血凝试验同时对200份猪血清进行猪瘟抗体检测比较，符合率达98．4％和98．9％。说明该法微量、特异、敏感可靠，检测时间短，效果直观，非常适用于猪瘟的早期诊断和普查以及疫苗免疫效果后抗体水平的检测。     

三种猪瘟抗体检测方法的比对试验

为找到猪瘟抗体检测的最佳方法,笔者分别选用正向间接血凝试验(IHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和猪瘟抗体免疫金标试纸条快速检测试验这3种不同方法对猪瘟抗体进行检测,从检测方法、检测成本和准确度3个方面进行结果比较和分析。结果表明,猪瘟正向间接血凝反应(IHA)试剂盒操作简便、准确实用、能最大程度地节约监测成本,是较为理想的猪瘟抗体检测方法。     

猪瘟抗体免疫金标试纸条在预防猪瘟中的应用

目前监测猪瘟抗体的检测方法主要有ELISA试验、正向间接血凝试验和免疫金标试纸条试验。ELISA试验，操作条件严格，在实验过程中使用了有毒的显色底物溶液，操作步骤程序多，从试剂的配制到实验结果的出现需2～3d，且费时费力，不具有快速、简便的方法原理；正向间接血凝试验，从操作至结果出现的时间为1．5～2h，虽有快速的特点，但试验用的诊断液     

斑点金标渗滤法检测猪囊虫病

以亲和层析原理为基础,用猪囊虫纯化抗原作为检测用抗原,胶体金直接标记抗原,建立了斑点金标渗滤法诊断猪囊虫病的方法。其中囊虫抗原与胶体金溶液结合的最佳pH值为7.5,最佳浓度为52 mg/mL,检测时血清的最佳稀释度为1∶10。建立的斑点金标渗滤法检测猪囊虫病血清均为阳性,正常猪及其他病猪血清均显示为阴性,整个检测时间只需要5 min左右。试验结果显示,该方法操作简便、快速、特异性好,适用于猪囊虫病的临床诊断和流行病学调查。     

O型口蹄疫抗体金标检测试纸条判定标准的确立

本试验旨在迅速、准确检测口蹄疫阴性血清和阳性血清,确立O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准。通过3批次O型口蹄疫抗体金标检测试纸条,对180份猪、牛、羊口蹄疫阴性血清,197份猪、牛O型口蹄疫弱阳性血清,317份猪、牛、羊O型口蹄疫阳性血清,223份牛Asia 1、A型口蹄疫阳性血清,600份田间血清样品进行检测,同时用O型口蹄疫液相阻断ELISA和O型口蹄疫正向间接血凝2种方法检测相同的血清样品。对3种方法检测的结果进行分析,并且将试纸条的检测线和质控线的显色情况与O型口蹄疫液相阻断ELISA的抗体滴度相比较。确立了试纸条的诊断标准:试纸条抗体滴度1∶2-为口蹄疫抗体阴性;试纸条抗体滴度1∶8+为O型口蹄疫阳性血清。根据试纸条的显色结果与液相阻断ELISA的结果的关系,绘制了比色卡。试纸条的判定标准检测血清结果与液相阻断ELISA和正向间接血凝结果分别进行统计学分析,试纸条与液相阻断ELISA和正向间接血凝相关性分别为y=1.142x+0.7421,y=1.1845x+0.8623;相关系数(r)分别为0.9221和0.9033。结果显示,O型口蹄疫抗体金标检测试纸条的判定标准的确立和比色卡的绘制,实现半定量分析,更加迅速、准确,适于实验室、基层兽医站和养殖场使用。     

斑点金标免疫渗滤新技术检测家畜血吸虫病的效果试验

采用血吸虫病斑点金标免疫渗滤诊断技术在永胜县做了动物血吸虫病感染符合率、特异性试验,共检测2 800份牛血纸,结果检出阳性78头;检测755份牛血清,检出阳性72头;再对被检查的2 800头牛采用粪便毛蚴孵化法检出阳性74头。免疫学诊断结果与病原检查结果阳性符合率血纸达94.8%,血清达97.3%。同时在县内非疫区乡(镇)做了阴性符合率试验,符合率达100%。血吸虫病斑点金标免疫渗滤诊断技术在永胜县6个血防区试验运用,取得了成功。     

不同公司ELISA试剂盒与HI法检测鸡新城疫抗体的比较

分别采用A、B、C三个公司的商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒和血凝抑制(HI)试验方法对168份临床免疫鸡血清和标准阴阳性血清进行新城疫抗体监测方法的比对试验与研究,比较间接ELISA和血凝抑制(HI)两种试验方法的相关性。研究结果表明,A、B、C三个公司生产的商品化间接ELISA抗体检测试剂盒的检测结果与血凝抑制(HI)试验的阳性符合率分别为98%、96.7%、90.2%;阴性符合率分别为86.7%、80%、86.7%;阴阳性总体符合率分别为97%、95.2%、89.9%;A、B、C三个公司的ELISA抗体检测试剂盒的检测时间分别为2.5、3、3h。产品价格分别为1100、800、700元。比较发现,间接ELISA方法是一种快速、敏感、特异的血清学诊断方法,不同公司生产的商品化ELISA抗体检测试剂盒在敏感性、特异性和检测时间上均存在较大的差异,综合分析,B公司生产的商品化酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒成本较低,敏感性较高,可以用于临床样本的大规模检测。     

口蹄疫抗体免疫金标快速检测试纸法的建立

应用免疫学原理与胶体金层析技术，采用双抗原夹心ELISA建立了检测口蹄疫(O型)抗体水平的“口蹄疫抗体(O型)免疫胶体金快速检测试纸法”。应用该法与“口蹄疫正向间接血凝抗原法”对300份猪、鸡、鸭、牛、羊等血液或血清进行口蹄疫抗体水平检测试验，符合率达100％。试验结果显示，该法与间接血凝法一样，具有微量、特异、准确等优点，且操作简易，不需要任何仪器，检测时间短，结果直观，容易判定，适用于基层兽医站、养猪场使用和大面积口蹄疫抗体普查。     

如何把握间接血凝技术中的重要环节

间接血凝技术是本世纪40年代建立的一种血清学方法。它的原理是通过直接吸附或化学偶联的方法把抗原或抗体结合到动物的红细胞上,当其遇到相应的抗体或抗原时,即发生肉眼可见的红细胞凝集现象。把抗原联结到红细胞上检测抗体称之为正向间接血凝;把抗体联结到红细胞上检测抗原称为反向间接血凝。该法以其试剂制备简单、成本低廉、准确、快速、灵敏及操作简便等优点,在人医和兽医临床诊断和流行病学研究上得到广泛应用。     

用间接血凝试验检测伊氏锥虫病抗体

间接血凝试验已广泛应用于寄生虫病的诊断。其中Gill(1965)报道了用甲醛化红细胞间接血凝试验检查家兔和大白鼠血清中的伊氏锥虫抗体;Jatker等(1971)报道了骆驼伊氏锥虫间接血凝试验;Verma等(1977)报道了实验感染水牛犊和黄牛犊的间接血凝滴度。胡氏等(1979)报道了用丙酮醛—戊二醛双醛化红细胞间接血凝试验以诊断耕牛锥虫病,取得了较好的结果。笔者在上述基础上进一步试验,初步标化了各种反应要素,并对疫区耕畜血清,以补体结合反应作对照,检测了伊氏锥虫病抗体。现将结果总结如下。     

应用免疫金标检测试纸与其它方法检测猪瘟抗体的比较

作者应用免疫金标检测试纸与其它检测猪瘟抗体的方法进行比较，试验结果表明免疫金标检测试纸法检出率与西班牙海博莱公司生产的ELISA试剂盒十分接近，与dot-ELISA也较为接近，与正向间接血凝试验有差异，且与猪圆环病毒等无交叉反应，4℃下保存期大于15个月。     

斑点酶标法与斑点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病初探

目的比较宽点酶标法与癍点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病的效果。方法选择疫区水牛，耳静脉取血制备血纸，作为待检样品。分别采用斑点金标免疫渗滤法与癍点酶标法检测，比较检测结果。结果癍点金标渗滤法检测仅需30min，而斑点酶标法则需160min。结论疵点金标免疫渗滤法检测牛血吸虫病，操作简便易行、快捷，省时、省工，工作效率成倍提高。     

三种猪瘟抗体检测方法比较试验研究

为了选择一种方便、准确、经济的猪瘟检测方法,本文通过对猪瘟正向间接血凝法、Dot-ELISA法和免疫金标试纸检测法进行比较试验,其结果依次是:阳性率为90%、86.7%和80%,三者试验结果基本相同,经方差分析,差异不显著(P0.05),检测实验结果可靠。猪瘟抗体金标试纸检测法具有结果直观、操作方便、反映时间短等优势,非常适合我市小型养猪场和散养户,可以及时检测猪瘟免疫状况,制定适合本场(户)的个性化免疫程序,预防猪瘟的发生。     

改良凝集试验(MAT)与间接血凝试验(IHA)对动物血清中弓形虫抗体检测效果的比较

为了比较改良凝集试验(MAT)与间接血凝试验(IHA)两种检测方法检测动物血清中弓形虫抗体的效果,对采自辽宁省不同地区不同动物的3 789份血清进行检测,经MAT法初筛后选取每种动物阴、阳性血清各10份,共计120份,再进行IHA法检测,并对MAT法和IHA法的检测效果进行比较分析。结果表明:MAT法作为血清中弓形虫抗体检测的金标准,其操作简单、所需试剂廉价,且判定标准明确,敏感性、特异性和准确性都优于IHA法。说明MAT法更适用于大规模流行病学调查和临床诊断。