广东地区猪链球菌的耐药性特点及四环素耐药基因携带情况

猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是危害世界养猪业的重要细菌性病原菌之一,本研究旨在了解猪链球菌临床分离株的耐药性特点和四环素耐药基因的携带情况,为临床上该病的防控提供科学依据。本试验采用K-B法和CLSI推荐的肉汤微量稀释法检测猪链球菌广东分离株对18种抗菌药物的耐药性。结果显示,被检菌株对四环素类、磺胺类和氨基糖苷类抗菌药物表现较强的耐药性,尤其对四环素类药物的耐药率高达98.2%;对头孢菌素类药物比较敏感;菌株都耐受6种或6种以上的抗菌药物,其中以6和14重耐药菌株的数量最多,分别占20%和17%。本试验设计了4对引物检测四环素耐药基因携带情况,结果发现56株菌中以携带tetM基因为最多(85.71%)。结果表明tetM很可能是介导广东SS分离株对四环素产生极高耐药率的主要原因之一。     

红霉素与四环素耐药基因在猪链球菌临床分离株中的检测

为了解临床分离的48株猪链球菌对大环内酯类药物及四环素耐药基因的分布,用微量稀释法测定48株临床分离的猪链球菌对大环内酯类、四环素、β-内酰胺类及头孢类9种抗生素的药物敏感性,建立PCR方法对耐药菌株大环内酯类耐药基因ermA/B/C、mefA/E、msrD、mphB、23S rRNA,L4,L22和四环素耐药基因tetM、tetO、tetL、tetK及与Tn916转座子相关的int和xis基因进行检测。结果表明,31株2型猪链球菌中大环内酯类药物耐药率为3.23%,17株9型猪链球菌红霉素耐药率为88.24%,泰乐菌素、磷酸替米考星、阿奇霉素的耐药率均为70.59%。48株猪链球菌对四环素均耐药,但对青霉素、阿莫西林、头孢曲松钠、氨苄西林均敏感。大环内酯类耐药基因主要以ermB为主,占75%(12/16),mefA/E、msrD占25%(4/16),16株红霉素耐药菌株中,tetM、tetO、int、xis的检出率分别为25%(4/16)、62.5%(10/16)、31.25%(5/16)和31.25%(5/16),没有检测到ermA、ermC、mphB、tetL、tetK。所有红霉素耐药菌株均未检测到23S rRNA、L4和L22突变。     

常用抗菌药物对东北地区猪源链球菌的体外抗菌活性研究

采用微量稀释法(27种药物)和琼脂扩散法(7类药物)分别对临床分离的101株猪源链球菌进行了体外耐药性研究。以美国临床检验标准委员会(CLSI/NCCLS)的临界浓度和抑菌圈直径做为判断标准,判定了其对27种药物的耐药性和7类药物的耐药谱。结果表明,临床分离的菌株以耐药菌为主,且100%的菌株呈多重耐药;对头孢菌素类(100%)、磺胺类药物(96%～100%)、大环内酯类(97%～99%)、四环素类(98%)、青霉素类(94%～97%)耐药性最为严重,氟喹诺酮类药物(48%～91%)耐药性次之,共有25种不同的耐药谱型。结果表明,在东北地区分离到的猪源链球菌以多重耐药为主。     

上海市150株猪链球菌对8种常见抗菌药物的耐药情况

为调查上海市猪链球菌耐药情况,采用体外最小抑菌浓度(MIC)药物敏感试验,对2004—2017年从上海市分离的150株猪链球菌,开展了5类8种临床常见抗菌药物的敏感性检测。结果显示:95%的猪链球菌对8种抗菌药物产生了不同程度的耐药,耐药率为16.67%~90.00%。对β-内酰胺类药物的耐药性较低,耐药率分别为氨苄西林16.67%、青霉素19.33%、头孢噻呋26.00%,但也表现出耐药性加重的趋势;对酰胺醇类和喹诺酮类药物出现了一定程度的耐药,其中对氟苯尼考的耐药率为24.67%,对环丙沙星和氧氟沙星的耐药率均为42.00%;对大环内酯类和四环素类药物则出现了极高的耐药性,其中对红霉素、四环素的耐药率分别达到82.67%、90.00%。46%的菌株为多重耐药,其中10.7%的菌株为8重耐药。结果表明,上海市猪链球菌耐药情况较为严峻,除对β-内酰胺类药物较为敏感外,对其他药物均出现了不同程度的耐药,且普遍为多重耐药。因此,上海市需加强兽用抗菌药物的临床用药指导,倡导合理规范用药。     

副猪嗜血杆菌江西分离株药物敏感性及四环素耐药基因tet(B)分析

为了解副猪嗜血杆菌江西株的药物敏感性及其耐药基因,本实验采用K-B法测定分离株对57种药物的敏感性,结果显示20株副猪嗜血杆菌均对阿洛西林和万古霉素敏感,80％及以上的分离株对氨苄西林\舒巴坦、阿莫西林\棒酸等高度敏感.但分离株对恩诺沙星、氨曲南、四环素等的耐受性较强,某些菌株对多种药物具有抗性,其中6株菌能够耐受5种药物,5株菌能够耐受12种药物,3株菌能够耐受13种药物,甚至有2株菌能够耐受多达22种药物.将江西分离株的药物敏感性结果与其它国家或地区以及不同时间分离菌株的结果相比较表明,不同地区及不同时间段分离的菌株药物敏感性存在较大差异.为探索副猪嗜血杆菌耐药的分子机制,本研究设计引物并建立了检测四环素耐药基因tet(B)的PCR方法.运用所建立的方法检测江西株tet(B)基因,在15株四环素耐药菌株中检测出其中9株菌存在该基因,推测tet(B)可能是介导该菌对四环素耐药的主要分子机制之一.     

广东地区水禽源大肠杆菌对四环素的耐药性及耐药基因检测

采用琼脂二倍稀释法测定256株水禽大肠杆菌分离株对四环素类药物的敏感性,并通过PCR方法调查分离株携带耐药基因tet A、tet B、tet C和tet M的情况。药敏试验结果表明256株水禽大肠杆菌分离株对四环素和多西环素耐药率分别为92.2%和77.3%。在237株大肠杆菌四环素耐药株中,tet A、tet B、tet C和tet M的携带率分别为49.8%、57.8%、49.4%和40.1%,仅8.0%的耐药株没有检测到4种耐药基因。结果表明:tet A、tet B、tet C和tet M广泛存在于水禽源大肠杆菌中。tet A和tet B对水禽源大肠杆菌四环素耐药株的产生起重要作用,主动外排作用是大肠杆菌对四环素产生耐药性的主要机制。     

江苏徐州市鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

[目的]调查徐州地区鸡白痢沙门氏菌的耐药性。[方法]从徐州不同地区分离鉴定了19株鸡白痢沙门氏菌,并对19株鸡白痢沙门氏菌分离株进行了药敏试验。[结果]该地区鸡白痢沙门氏菌的多重耐药率为94.7%,多重耐药谱为PG-MY-DOX-TET-AMP的菌株百分比为42.1%,对青霉素和林可霉素耐药率为100%,而对氨苄西林、四环素和新霉素耐药率在50%以上,对头孢唑啉和强力霉素耐药率为40%~50%,对头孢氨苄和复方新诺明耐药率为20%~30%,对氟苯尼考、阿米卡星和环丙沙星未出现耐药菌株,对氟苯尼考和头孢曲松高敏菌株在80%以上。[结论]徐州地区鸡白痢沙门氏菌的多重耐药情况比较严重。     

东北部分地区猪链球菌对四环素类药物耐药机制的研究

为了研究东北部分地区猪链球菌对四环素类药物的耐药机制,在兰氏分群的基础上,对东北部分地区分离的12株猪链球菌进行四环素类药物的耐药性测定和相关基因的扩增。结果表明:12株猪链球菌均属于D群,其中91.7%对多西环素耐药,100%对土霉素耐药,83.3%对盐酸金霉素耐药;12株菌均扩增出tetM基因,但未扩增出tetO基因。同源性分析结果显示扩增的tetM基因与GenBank中的肺炎链球菌、粪肠球菌等的tetM基因的同源性为94%~100%。     

2012-2014徐州地区禽源大肠杆菌耐药性监测

为了掌握徐州地区大肠杆菌耐药菌株的情况和耐药程度,指导临床合理用药,笔者2012-2014年对徐州地区禽源大肠杆菌进行耐药监测,从临床分离鉴定出86株禽源大肠杆菌,采用纸片扩散法测定86株分离菌株对15种抗菌药物的敏感性。结果表明,禽源大肠杆菌分离株多重耐药现象严重,其中11耐和12耐的菌株所占比例最大,分别为25.58%和23.25%;分离的菌株对头孢类抗生素,特别是阿莫西林耐药率最高,达到100%,对氨基糖苷类药物则耐药率相对较低,粘杆菌素耐药率最低,仅为2.3%。     

猪链球菌临床分离株对四环素类抗生素的耐药性和耐药基因分析

【目的】了解广东地区猪链球菌（Streptococcus suis，S.suis）临床分离株对四环素类抗生素的耐药性及耐药基因携带情况。【方法】采用药敏纸片扩散法对2016－2020年分离自广东地区的34株猪链球菌进行四环素类抗生素耐药分析，并通过PCR方法检测四环素耐药基因tetA、tetC、tetD、tetM、tetO和tetX携带情况。【结果】34株猪链球菌对四环素的耐药率高达100%（34/34），其次为米诺环素82.4%（28/34）、多西环素47.1%（16/34）。34株猪链球菌中3重耐药菌株有15株，占比44.1%（15/34），2重耐药菌株有14株，占比41.1%（14/34），耐1种药物的菌株5株，占比14.7%（5/34）。耐药基因检测结果显示，tetA、tetC、tetD、tetM、tetO和tetX基因携带率分别为0、0、0、14.7%（5/34）、100%（34/34）和0。【结论】广东地区猪链球菌临床分离株四环素类抗生素的耐药率较高，主要携带的四环素耐药基因为tetO和tetM基因。     

Transduction of bla(CMY-2), tet(A), and tet(B) from Salmonella enterica subspecies enterica serovar Heidelberg to S. Typhimurium

Antimicrobial resistance of Salmonella spp., especially resistance mediated by extended spectrum β-lactamases (ESBL), is a growing public health concern. Understanding the mechanisms through which Salmomella spp. acquire the resistance genes can lead to the development of intervention and mitigation strategies. Thirty-one Salmonella isolates of bovine origin were analyzed by serotyping, antimicrobial susceptibility testing, phage induction and bacterial host range determination, and phage transduction of antimicrobial resistance. The Salmonella isolates consisted of 12 serovars. Resistance to 1 or more antibiotics was detected in 12 isolates. Inducible phages were recovered from 19 Salmonella (61%) by spot lysis assay. Of the 19 phage samples, 13 were able to multiply in 2 or more Salmonella of various serovars. A cross-serovar transduction of antimicrobial resistance was observed from S. Heidelberg to S. Typhimurium. Transfection of an antimicrobial-susceptible strain of S. Typhimurium with a phage propagated in a S. Heidelberg resistant to multiple β-lactam antibiotics and tetracycline resulted in independent acquisition of bla_CMY-2, tet(A), and tet(B). These data indicate that inducible phages are common in Salmonella of bovine origin, many of them demonstrate a broad host range, and wild-type phage mediated transduction may contribute to the dissemination of antimicrobial resistance, including the resistance mediated by ESBL.     

Identification of the tetracycline resistance gene, tet(M), in Erysipelothrix rhusiopathiae

This is the first report to demonstrate the presence of tet(M) in naturally occurring isolates of tetracycline-resistant Erysipelothrix rbusiopathiae, which causes swine erysipelas. The tet(M) gene was isolated from E. rhusiopathiae strain KY5-42. The nucleotide and the deduced amino acid sequence were 99% identical to the tet(M) gene from Enterococcus faecalis. The gene was necessary and sufficient for the expression of tetracycline resistance in Escherichia coli. The presence of the tet(M) gene in the 114 tetracycline-resistant E. rhusiopathiae isolates from diseased pigs was detected by the polymerase chain reaction assay. The specific amplified DNA fragment was obtained from all 114 tetracycline-resistant strains. It was suggested that the tet(M) gene was widely present in the field isolates of E. rhusiopathiae resistant to tetracycline.     

The rarely reported tet(31) tetracycline resistance determinant is common in Gallibacterium anatis

The present investigation was undertaken to identify and characterize the tetracycline resistance determinant in 22 Gallibacterium anatis strains for which no determinant was identified using primers specific for tet(A, B, C, D, E, G, H, K, L, M, O). A recent study found tet(B) to be the most prevalent tetracycline resistance determinant in a larger collection of G. anatis field strains from Mexico and Denmark. However, in 41% of the tetracycline resistant strains no determinant could be assigned. Here we demonstrate that tet(31) is a common determinant in G. anatis originating from chickens from very different production systems and localities. In addition, tet(31) was identified in strains isolated over a 30-year period. This is the first report on tet(31) since its original identification in Aeromonas salmonicida.