糖皮质激素受体阻断对雏鸡热应激的影响

本研究用５０ｍｇ／ｋｇ体重的Ｒｕ４８６ＰＶＡ缓释剂皮下注射,阻断雏鸡淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）,在２４小时内受体阻断率达６０％。受体阻断细胞对体内正常糖皮质激素（ＧＣ）几乎无反应,并且有拮抗外源性ＧＣ的作用。将ＧＲ阻断鸡群置于高温环境（４３℃）,...     

鸡糖皮质激素受体阻断模型的建立

采用药物缓释法，给雏鸡皮下注射糖皮质激素（ＧＣ）拮抗剂ＲＵ４８６（５０ｍｇ／ｋｇ），经放射蛋白分析法测得血浆ＲＵ４８６含量可达（２３７．２±８．７４）ｎｍｏｌ／Ｌ，并在该水平上维持３０ｈ；血浆总ＧＣ浓度为（１３８．３±１１．４５）ｎｍｏｌ／Ｌ，较对照雏鸡虽有所升高，但始终低于有效期内血浆ＲＵ４８６水平。在此期间，雏鸡外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）阻断率达６１．５８％±３．４２％，血浆磷脂酶Ａ２未见变化，外周血淋巴细胞程序性死亡减少。从而成功地建立了雏鸡ＧＲ阻断模型，并可维持２４ｈ。给模型雏鸡注射外源性皮质酮，结果显示，雏鸡能有效地抵抗高水平血浆皮质酮的作用     

糖皮质激素受体阻断对鸡热应激耐受的影响

采用药物缓释法,给雏鸡皮下注射糖皮质激素（ＧＣ）拮抗剂ＲＵ４８６（５０ｍｇ／ｋｇ）阻断糖皮质激素受体,然后将雏鸡于（４３±０．５）℃下实施热应激,测得其血浆ＧＣ为（１１３．９６±１６．６０）ｎｍｏｌ／Ｌ,比正常鸡约升高１倍,而外周血淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）阻断率为４１．０９％±６．２２％,血糖浓度为（１３．８９±０．６０）ｍｍｏｌ／Ｌ及血浆ＡＣＴＨ水平为（７７．８１±５．２４）ｎｇ／Ｌ,与正常对照雏鸡血糖浓度及血浆ＡＣＴＨ水平相比无统计学差异（Ｐ＞０．０５）;未见外周血淋巴细胞程序性死亡现象;同时观测雏鸡平均存活时间（６．２９±０．３１）ｈ,为普通应激雏鸡平均存活时间的约２倍。结果表明,ＧＲ阻断可拮抗由应激导致ＧＣ过度升高对机体的不良影响,并可提高对高温的耐受性。     

非糖皮质激素依赖性鸡糖皮质激素受体阻断模型的建立

本研究应用部分去肾上腺鸡以皮下注射糖皮质激素受体（ Ｇ Ｒ） 拮抗剂 Ｒ Ｕ４８６（米非司酮）缓释胶（ Ｐ Ｖ Ａ）５０ ｍ ｇ／ｋｇ·ｄ。在７２ ｈ 内鸡外周血淋巴细胞 Ｇ Ｒ 被阻断（７４．９３±９．５０）％ 。而在此期间血浆 Ｇ Ｃ Ｔ 浓度始终维持于正常水平（９９．１６±７４８） ｎｍ ｏｌ／ Ｌ。证明 Ｇ Ｒ 的阻断不是因体内 Ｇ Ｃ 浓度的负反馈调节，而确系非激素性 Ｒ Ｕ４８６ 所阻断。从而首次成功地为研究鸡代谢及 Ｇ Ｃ， Ｇ Ｒ 功能建立了鸡非 Ｇ Ｃ依 赖性 Ｇ Ｒ 阻断模型。模型鸡在受体阻断期间由于 Ｒ Ｕ４８６ 阻断 Ｇ Ｃ 对腺垂体的负反馈调节效应使促肾上腺皮质激素（ Ａ Ｃ Ｔ Ｈ）分泌增加。同时鸡体血糖水平也由于 Ｇ Ｒ 的阻断维持正常。因此 Ｇ Ｒ 阻断限制了 Ｇ Ｃ诱导的细胞能量的消耗过程，还抑制了垂体肾上腺轴的过度分泌，对稳定机体内分泌及代谢过程的平衡及在异常刺激条件下维持生命活动的正常进行有一定意义。     

猪卵丘卵母细胞复合体和壁层颗粒细胞上LHR/hCGR的检测及性腺激素的分泌

用取自 ３～５ ｍ ｍ 卵泡的处于减数分裂阻抑状态的猪卵丘卵母细胞复合体（ｐ Ｃ Ｅ Ｏ），培养 ４８ ｈ，用 Ｆ Ｓ Ｈ（１００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）或 ｈ Ｃ Ｇ（０、５０、１００、２００、５００ Ｉ Ｕ／ Ｌ）刺激 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌甾体激素；用放射受体测定法（ Ｒ Ｒ Ａ）比较 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 的卵丘细胞及壁层颗粒细胞（ Ｍ Ｇ Ｃ）上促黄体激素受体／人绒毛膜促性腺激素受体（ Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ）的数量； Ａ Ｍ ｅ Ｘ 石蜡切片、免疫组织化学染色，检测 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在 ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 以及 Ｍ Ｇ Ｃ 的分布情况。在 Ｆ Ｓ Ｈ 作用下，ｐ Ｃ Ｅ Ｏ 分泌的孕酮明显高于 ｈ Ｃ Ｇ 作用组和对照组 （ Ｐ ＜ ００５）； 平均每个壁层颗粒细胞上的 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ是每个卵丘细胞的 １０５ 倍； Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 在基膜两侧分布较多，且卵母细胞上没有 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ，临近卵母细胞的卵丘细胞膜上较少被染色。以上结果表明，在体外试验中，可能由于 Ｃ Ｅ Ｏ 上 Ｌ Ｈ Ｒ／ｈ Ｃ Ｇ Ｒ 的数量不足或生理活性降低， Ｌ Ｈ／ｈ Ｃ Ｇ 不能促进卵母细胞恢复减数分裂。     

阻断淋巴细胞糖皮质激素受体对鸡免疫功能的影响

为进一步证明糖皮质激素受体（ＧＲ）在介导淋巴细胞免疫功能中的作用,观察ＧＲ阻断鸡对马立克氏病病毒（ＭＤＶ）的感受性,用ＲＵ４８６阻断鸡淋巴细胞ＧＲ,当ＧＲ被阻断６０％以上时（ＲＵ４８６剂量为５０ｍｇ／ｋｇ）,鸡脾细胞诱生ＩＬ－２和ＩＦＮ活性及Ｔ、Ｂ细胞丝裂原刺激增殖活性均明显降低;外周血淋巴细胞、单核细胞、ＡＮＡＥ＋细胞减少;脾脏、法氏囊、胸腺重量与体重之比的相对重量减轻,淋巴细胞系统免疫功能呈低下状态。此时雏鸡对ＭＤＶ的易感性增高。当ＧＲ被阻断不足３５％时（ＲＵ４８６剂量为２５ｍｇ／ｋｇ）,对淋巴细胞系统免疫功能无影响。     

淋巴细胞凋亡抑制与鸡马立克氏病的发生

本研究证明，外源性糖皮质激素（ＧＣ）可以诱导正常鸡和马立克氏病毒（ＭＤＶ）疫苗免疫鸡淋巴细胞ＤＮＡ出现１８０～９００ｂｐ的阶梯状小分子断片，即诱导淋巴细胞凋亡过程启动。尤其是疫苗免疫鸡淋巴细胞对体内生理浓度ＧＣ就有相当高的致ＤＮＡ阶梯状小分子断裂的敏感性。而这种诱导反应可以被ＲＵ４８６阻断，人工感染ＭＤＶ鸡同样有抑制该反应的作用，这暗示ＭＤＶ引起无免疫活性淋巴细胞在鸡体内堆集直到形成肿瘤，可能与ＭＤＶ抑制淋巴细胞凋亡，使自体生理性清除非功能性淋巴细胞的机制受阻有关。本研究还以ＲＵ４８６阻断鸡淋巴细胞糖皮质激素受体（ＧＲ）。结果使鸡对ＭＤＶ敏感性提高，ＭＤ病变形成提前。     

公雏鸡肾上腺去除及其对地塞米松和RU_(486)的反应

应用电灼烧和强酸腐蚀的方法成功地对１０ 周龄公雏鸡实行了肾上腺去除术。在此基础上对完全去肾上腺雏鸡给以外源性糖皮质激素（ Ｇ Ｃ）地塞米松（ Ｄｅｘ）２ ｍ ｇ／ｋｇ·ｄ可以逆转由于 Ｇ Ｃ 缺失造成的血糖降低和水盐代谢紊乱。对去除１ ２３肾上腺雏鸡并给以 Ｒ Ｕ４８６ Ｐ Ｖ Ａ ５０ ｍ ｇ／ｋｇ·ｄ，雏鸡血糖、血清钠，血清钾维持正常水平；虽然其血清 Ａ Ｃ Ｔ Ｈ 浓度升高至（１４６． ９４±７．５６） Ｉ Ｕ／ Ｌ（ Ｐ＜ ０．０１），但血清皮质酮并没有在高浓度 Ａ Ｃ Ｔ Ｈ 刺激下大量分泌而维持于９０．４８～１０３．１４ ｎｍ ｏｌ／ Ｌ 的生理范围内。为在不受内源性 Ｇ Ｃ干扰下建立鸡糖皮质激素受体（ Ｇ Ｒ）阻断提供了实验动物模型。     

白细胞介素-1α调节仔猪睾丸间质细胞睾酮分泌的机制

本实验利用体外培养的２～３周龄仔猪睾丸间质细胞，研究了ＩＬ１α调节间质细胞睾酮分泌的机制。结果表明，ＩＬ１α能抑制ｈＣＧ刺激间质细胞分泌睾酮，其睾酮产生量随ＩＬ１α剂量增大（０～１００μ／ｍｌ）及刺激时间延长（０～４８ｈ）而下降。用２０μ／ｍｌ和５０μ／ｍｌ的ＩＬ１α刺激４８ｈ，可分别抑制６０％和６５％的睾酮产生。ＩＬ１α同样抑制ｃＡＭＰ（３μｍｏｌ／ｍｌ）诱导的间质细胞睾酮的分泌，但不影响ｈＣＧ与间质细胞膜受体的结合量及ｈＣＧ诱导的第二信使ｃＡＭＰ的增加。说明ＩＬ１α抑制ｈＣＧ促睾酮分泌的作用，其抑制点不在ｈＣＧ与受体的结合及第二信使ｃＡＭＰ的聚集上，而在ｃＡＭＰ产生之后的某个环节。     

传染性法氏囊病强毒感染与鸡法氏囊植物凝集素受体的关系

用４种辣根过氧化物酶标记植物凝集素（ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＳＢＡ、ＲＣＡ）作探针，观察了接种传染性法氏囊病强毒（ＩＢＤＶ）和不接种毒组鸡肠、气管和法氏囊凝集素受体的变化．结果发现，接毒组法氏囊粘膜上皮存在ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ受体．滤泡细胞含有ＣＯＮＡ、ＷＧＡ．ＲＣＡ、ＳＢＡ受体；未接种毒组粘膜上皮存ＣＯＮＡ、ＳＢＡ受体，滤泡细胞仅有ＷＧＡ受体．接毒组或非接毒组肠和气管粘膜上皮均含有ＣＯＮＡ、ＷＧＡ、ＲＣＡ受体．这些部分存在凝集素受体可能与ＩＢＤＶ感染有关．