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近年来,随着卵母细胞体外成熟(IVM)、体外受精(IVF)以及细胞核移植技术的不断发展,牛胚胎的体外生产已经在几个不同的培养体系中获得了成功.但是,卵母细胞生长发育是一个非常复杂的过程,受多种因素的影响,有些因素的作用对于同种类动物的卵母细胞或体外/体内培养条件下的卵母细胞有着较大的差别.要找出各种动物卵母细胞体外培养的最佳方案以提高卵母细胞体外成熟率,尚有许多工作需要做.研究以延边黄牛卵母细胞为试验材料,试图探明不同浓度的半胱氨酸对延边黄牛卵母细胞体外成熟和体外受精的影响,现报道如下. 相似文献
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对哺乳动物胚胎细胞核移植克隆技术的基本环节,以及细胞周期阶段对细胞核移植克隆胚胎效率影响的研究进行系统综述 相似文献
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卵母细胞体外成熟(IVM)是山羊胚胎体外生产的关键步骤,其对山羊体外生产胚胎的数量和质量均具有非常重要的意义。此外,IVM还可以满足胚胎工程技术如体细胞核移植、转基因动物生产对卵母细胞的大量需求。然而,由于山羊卵母细胞体外成熟研究起步较晚,与牛、猪等家畜相比仍然存在不小的差距,存在诸如体外成熟率低、胚胎质量不佳、培养体系可重复性低等问题。因此,分析山羊卵母细胞体外成熟的主要影响因素,提高山羊卵母细胞体外成熟率,建立山羊卵母细胞体外成熟稳定培养体系,就成为了近年来山羊胚胎体外生产的研究重点。论文综合国内外学者近年的相关研究,对可能影响山羊卵母细胞体外成熟效率的各种因素进行了综述分析,同时对山羊卵母细胞体外成熟现存问题进行了分析,以期为建立山羊卵母细胞体外成熟体系提供理论支持。 相似文献
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本文对哺乳动物胚胎细胞体细胞核移植克隆技术中显微操作的基本环节,以及细胞周期阶段对细胞核移植克隆胚胎效率影响的研究进行综述。 相似文献
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综述了哺乳动物卵母细胞孤雌生殖的主要研究进展,包括卵母细胞的成熟与激活、孤雌发育,以及游离Ca2 浓度的测定。为卵母细胞成熟体系、胚胎发育体系和胚胎干细胞体系的建立,以及体细胞核移植试验提供适宜的方法。 相似文献
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本试验从卵母细胞卵丘多少和初次卵裂时间早晚2个方面进行研究,旨在改善小型猪克隆方案的体外培养环节,提高克隆效率。将卵母细胞按卵丘多少分成3组,比较卵母细胞的成熟效果,取成熟效果好的卵母细胞进行后续试验;PA和SCNT试验均按初次卵裂时间早晚分成3组,在体外培养条件下,比较胚胎的卵裂率和囊胚率。结果表明,卵丘多的卵母细胞体外成熟39~40 h和卵丘少的卵母细胞体外成熟41~42 h,比不区分卵丘多少的卵母细胞体外成熟39~42 h的成熟效果要好;初次卵裂时间发生在26 h以前的胚胎比26 h之后的胚胎在数量和质量上都明显优越,前者胚胎的卵裂率和囊胚率显著高于后者,此结果在孤雌激活(parthenogenetic,PA)胚胎和体细胞核移植(somatic cell nucleartransfer,SCNT)胚胎的体外试验中均得到验证。本研究完善了小型猪克隆方案的体外培养环节,为器官异种移植提供相关技术参考。 相似文献
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Bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) is a sophisticated technique system,including oocyte maturation,donor cell preparation and oocytes microscopic operation,fusion,activation and culture.Although the birth of cloning cattle has been reported recently,the efficiency of somatic cell cloning has remained lowly.In order to establish the optimization somatic cell nuclear transfer system of Yanbian Yellow cattle,this review summarized only from 6 main aspects mentioned above in this field. 相似文献
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Satoshi AKAGI Kazutsugu MATSUKAWA Seiya TAKAHASHI 《The Journal of reproduction and development》2014,60(5):329-335
Nuclear transfer is a complex multistep procedure that includes oocyte maturation, cell cycle synchronization of donor
cells, enucleation, cell fusion, oocyte activation and embryo culture. Therefore, many factors are believed to contribute to
the success of embryo development following nuclear transfer. Numerous attempts to improve cloning efficiency have been
conducted since the birth of the first sheep by somatic cell nuclear transfer. However, the efficiency of somatic cell
cloning has remained low, and applications have been limited. In this review, we discuss some of the factors that affect the
developmental ability of somatic cell nuclear transfer embryos in cattle. 相似文献
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Mice cloned by nuclear transfer from somatic and ntES cells derived from the same individuals 总被引:4,自引:0,他引:4
Wakayama S Mizutani E Kishigami S Thuan NV Ohta H Hikichi T Bui HT Miyake M Wakayama T 《The Journal of reproduction and development》2005,51(6):765-772
The current success rate of cloned mice from adult somatic cell nuclei is very low, whereas it is relatively high for cloned mice from ES cell nuclei. In this experiment, we examined whether the success rate of cloning from somatic cells could be improved via nuclear transfer embryonic stem cells (ntES cells) established from somatic cell nuclei. We obtained 11 cloned mice and 68 ntES cell lines from the somatic cell nuclei of 7 mice, and cloned 41 mice were cloned from the ntES cell nuclei. Unexpectedly, the overall success rate of cloning from ntES cell nuclei in this series was no better than when using somatic cell nuclei. Interestingly, full-term cloned mice were produced only via ntES cells from two individuals, but not by direct nuclear transfer from the somatic cells, and vice versa. Ultimately, we were able to obtain clone mice from 6 out of 7 individuals using either somatic cells or ntES cells. Thus, although ntES cells as donor nuclei do not absolutely assure a better success rate for mouse cloning than somatic cells, to preserve and clone valuable individuals, we recommend that ntES cell lines be established. These can then be used as an unlimited source of donor nuclei for nuclear transfer, and thus complement conventional somatic cell nuclear transfer cloning approaches. 相似文献
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一例体细胞克隆黄牛肺脏的组织结构观察 总被引:1,自引:0,他引:1
作者应用石蜡切片及HE染色技术对体细胞克隆黄牛的肺脏及其细胞类型和形态进行了详细的观察。结果表明,光镜下,该体细胞克隆黄牛肺脏的组织结构与自然繁殖的黄牛肺脏的组织结构基本一致,包括支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管、肺泡管、肺泡囊及肺泡等结构,但体细胞克隆黄牛的细支气管管壁内的皱壁消失,其黏膜以单层立方上皮为主;肺泡处于半充容状态,肺泡腔狭小,肺泡膈较厚,其中含有较多胶原纤维和弹性纤维。肺泡壁的细胞结构不清,肺泡腔内有内容物,可能是发生病变引起。 相似文献
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采用化学去核和无透明带技术相结合,对哺乳动物卵母细胞进行处理,使通过该方法获得的去核无透明带卵母细胞作为受体,进行体细胞核移植,从而获得克隆动物。该方法完全避免了传统核移植的显微操作及其繁琐程序,是纯粹的手工克隆,它的成功将会大大简化核移植程序,提高核移植总效率,同时提高核移植的生产力。论文对手工克隆的研究进展,手工克隆的机理,手工操作的体细胞核移植方法及影响手工克隆的因素进行综述。 相似文献
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体细胞克隆猪的研究与展望 总被引:1,自引:1,他引:1
用体细胞核移植的方法生产的克隆猪诞生至今已近5年,虽然同胚胎细胞核移植相比,体细胞核移植技术难度大,成功率低,但近年来用体细胞核移植技术克隆猪有了更深入的研究,在体细胞核移植基本机理和关键技术上取得了一定的进展。综述了用核移植的方法生产体细胞克隆猪的技术关键和难点及应用情况,并对提高猪体细胞核移植效率的策略进行了分析。 相似文献