猪化脓放线菌的分离与鉴定

化脓放线菌(Actinomyces pyogenes)为放线菌属(Actinomyces Harz 1877)的细菌，该菌亦曾被称为化脓棒杆菌(Corynebacterium pyogenes)，现已归为隐秘杆菌属(Arcanobacterium，Collins el al．1983)其名为化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)。该菌最早(1893)从牛的脓汁中分得，常见于牛、羊、猪的化脓性病灶，表现为肺炎、关节炎、心内膜炎、乳腺炎、皮下脓肿等。近年来，随着规模化养猪业的发展，猪的腿部疾病越来越常见，病因及病     

化脓隐秘杆菌的特性及化脓隐秘杆菌病的防治

化脓隐秘杆菌原称化脓棒状杆菌（Corynebacterium pyogenes）、化脓放线菌（Actinomyces pyogenes）,1997年定名为化脓隐秘杆菌（Arcanobacterium pyogenes）。该菌是隐秘杆菌属中毒力最强的病原体,是经济型家畜（牛、羊和猪）的一种条件性致病菌,也是这些动物黏膜上的一种共生体,大部分寄居在健康动物的乳房、泌尿生殖道、呼吸道和胃肠道黏膜。     

猪化脓隐秘杆菌的分离及鉴定

化脓隐秘杆菌根据16SrRNA基因序列分析结果,将其归入隐秘杆菌属,主要存在动物的黏膜上,是一种条件致病菌,可引起各种非特异性化脓性感染,部分临床症状与副猪嗜血杆菌相似;一起疑似副猪的检测过程中分离到一株优势菌株,经形态学、生化、16SrRNA鉴定、同源性比对和临床症状确定为化脓隐秘杆菌;药敏试验结果为病原菌对头孢噻呋钠、杆菌肽、卡那霉素、庆大霉素、阿米卡星、恩诺沙星高度敏感,对所选其余药物不敏感。     

化脓隐秘杆菌毒力因子的研究进展

化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)又名化脓放线菌或化脓棒状杆菌,为革兰染色阳性的短棒状杆菌,普遍存在于牛、羊、猪和其他重要经济动物的黏膜上[1],是一种条件性致病菌.化脓隐秘杆菌可在家畜间广泛传播,导致广泛多样的皮肤、内脏器官和关节的非特异性化脓性感染,如急性化脓性乳房炎、慢性脓肿性乳房炎、关节炎、心内膜炎、肝脓肿、子宫炎以及流产和不孕等,给养殖业带来较大的经济损失.     

某猪场支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌混合感染的病原分离鉴定及药敏试验

支气管败血波氏杆菌是引起猪萎缩性鼻炎的病原之一,化脓隐秘杆菌是一种感染牛、羊、猪等动物的机会致病菌。国内目前没有关于二者混合感染猪的报道。本研究从陕西省某猪场发病仔猪肺脏中分离出两株病原菌,经染色镜检、生化试验和16S rDNA测序鉴定,确定病原菌为支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌。采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,发现两株分离菌同时对卡那霉素、庆大霉素和头孢哌酮高度敏感。本研究为猪支气管败血波氏杆菌和化脓隐秘杆菌混合感染的诊断与防治提供了参考。     

化脓隐秘杆菌病牛肺脏中Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3蛋白表达

为了研究化脓隐秘杆菌致牛肺脏细胞凋亡途径,试验对自然感染奶牛肺脏和阴性对照牛肺脏进行取样,并制作病理组织切片和进行苏木素伊红染色,观察肺脏的病理组织学变化;同时采用免疫组织化学的方法检测肺脏中Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9蛋白的表达情况。结果表明:化脓隐秘杆菌可以引起牛肺脏发生化脓和坏死;与阴性对照牛肺脏相比,奶牛化脓隐秘杆菌病肺脏的Caspase-9和Caspase-3蛋白表达差异显著(P0.05),Caspase-8蛋白表达差异不显著(P0.05)。说明化脓隐秘杆菌能够引起奶牛肺脏化脓、肺脏细胞坏死和凋亡,并且以线粒体信号途径介导的凋亡途径占主导。     

浅谈化脓隐秘杆菌的研究进展

正化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes),曾被称为化脓放线菌、化脓棒状菌,1997年重新被归类为化脓隐秘杆菌属~[1]。化脓隐秘杆菌为无芽孢、无荚膜、无鞭毛、不运动、兼性厌氧、多形性的革兰阳性菌~[2]。它对生长条件要求不高,但需在富含血液或血清的培养基中培养。化脓隐秘杆菌的生化特性是可发酵葡萄糖、麦芽糖、山梨醇,不发酵蔗糖、山梨醇、鼠李糖~[1]。化脓隐秘杆菌是一种重要的条件致病菌,其作为皮肤和黏膜生物菌群的一部分,常寄居在     

三峡库区山羊化脓隐秘杆菌的自然感染情况

正化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)属于隐秘杆菌属成员,是一种条件性致病菌。该菌主要寄生在牛、羊及野生反刍动物的上呼吸道、消化道等黏膜处,常与大肠杆菌、连球菌等混合感染,导致家畜发生肺炎、关节炎、皮下脓肿、流产、死胎等现象,同时也可能引起人感染致病,给人类健康带来     

牛源化脓性隐秘杆菌的分离及鉴定

本研究通过对广西南宁某养殖场送检的病死牛病料进行细菌的分离、形态学观察、致病性试验、药敏试验以及用化脓隐秘杆菌特异性引物对分离株靶基因PLO进行PCR鉴定分析。结果分离到1株革兰氏阳性杆菌并能使5只小白鼠全部致死,且该菌对头孢噻呋等9种药物敏感;对红霉素等5种药物不敏感。该菌经PCR鉴定结果为化脓隐秘杆菌(GX-NN-170425)且其PLO基因与其他10株化脓隐秘杆菌参考株的核苷酸同源性为97.7%(Arcanobacterium pyogenes株)~99.9%(SP4株),进化树分析显示该分离株与其他10株化脓隐秘杆菌参考株都处在同一分支上。     

化脓隐秘杆菌溶血素的研究进展

化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes)是一种条件性致病菌,可在家畜间广泛传播,常导致多种动物如牛、羊、猪和人多种器官的化脓性感染,如肺炎、关节为、心内膜炎、乳房炎、脓肿、骨髓炎及子宫炎等[1].     

猪呼吸道疾病综合征主要致病菌的分离鉴定

对3个猪场的4头呼吸道疾病综合征病猪肺脏(猪场分别编号A、B、C,其中猪场A 1头、猪场B 2头、猪场C 1头)进行猪肺炎支原体(Mhp)、副猪嗜血杆菌(Hps)和猪胸膜肺炎放线杆菌(App)PCR检测,进而进行细菌的分离鉴定和药敏试验。结果显示:4份病料中App和Mhp均为阴性,Hps在猪场A和C的病料中为阴性,猪场B病料中为阳性;在猪场A分离出奇异变形杆菌和猪链球菌各1株;猪场B分离出1株化脓隐秘杆菌、1株嗜麦芽窄食单胞菌和1株奇异变形杆菌;猪场C分离出1株化脓隐秘杆菌和1株奇异变形杆菌。药敏试验结果显示:化脓隐秘杆菌对诺氟沙星、洛美沙星敏感,嗜麦芽窄食单胞菌对恩诺沙星敏感,奇异变形杆菌对诺氟沙星、恩诺沙星敏感,猪链球菌对诺氟沙星、洛美沙星、环丙沙星、氧氟沙星敏感。小鼠致病性试验结果表明:变形奇异杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌和化脓隐秘杆菌均能使小鼠出现一过性精神萎靡;猪链球菌引起试验小鼠全部死亡,具有较强致病力。     

牛源化脓隐秘杆菌的分离鉴定与黔中金荞麦体外抑菌试验

为分离致病性牛源化脓隐秘杆菌并探究黔中金荞麦对该菌的体外抑制作用,本试验对采集于贵州省凯里市某养殖场疑似患牛呼吸道综合征的病死牛肺组织进行细菌分离、形态学观察、生理生化鉴定、分子生物学鉴定、药敏试验和致病性试验,并运用打孔法探究黔中金荞麦提取物对分离菌株的体外抑制效果。结果显示,分离菌株为革兰阳性短棒状杆菌,结合生理生化和PCR鉴定结果,确定该菌为化脓隐秘杆菌,系统进化树分析也显示,分离菌株与化脓隐秘杆菌的模式菌株处于同一分支;该分离菌株可致10只小鼠于24 h内全部死亡;其对头孢他啶、利福平、青霉素等7种抗菌药敏感,对环丙沙星中介,对克林霉素、左氧氟沙星、庆大霉素等8种抗菌药耐药;黔中金荞麦不同组织部位、不同处理方法的提取物对该分离菌株均具有一定抑制效果,其中地下部分70%乙醇超声30 min提取物的抑菌效果最好,抑菌圈直径为(28.13±0.25) mm,与头孢喹肟的抑菌效果相当。本试验首次从贵州地区分离到致病性牛源化脓隐秘杆菌,黔中金荞麦对该菌具有良好的体外抑制效果。本试验结果可为该肉牛养殖场疫病防控以及牛化脓隐秘杆菌感染的治疗和预防提供参考依据。     

15种中草药对化脓隐秘杆菌的药敏试验及神经氨酸酶活性的影响

为了测定不同中草药对化脓隐秘杆菌分离株的药敏试验及神经氨酸酶活性的影响,试验采用煎煮法提取连翘、金银花、穿心莲、蒲公英、苍术、红花、黄连、虎杖、黄芩、蛇莓、乌梅、大青叶、杜仲、大黄和贯众等15种中草药的有效成分,测定其对化脓隐秘杆菌分离株的最低抑菌浓度(MIC),同时以2’-(4-methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylneuraminic acid(MUNANA)为底物测定不同中草药提取液在亚抑菌浓度下对化脓隐秘杆菌神经氨酸酶活性的影响。结果表明:连翘、蒲公英、黄连、黄芩、乌梅、大黄具有良好的抗化脓隐秘杆菌活性,其中黄连作用效果最好,对4株化脓隐秘杆菌的MIC值均为0.25 mg/mL;连翘、蒲公英、黄芩、乌梅和大黄对4株化脓隐秘杆菌的MIC值在1.95~31.25 mg/mL之间;对苯唑西林耐药的化脓隐秘杆菌分离株对上述6种中草药依然敏感;另外,红花和大黄两种中草药以亚抑菌浓度作用化脓隐秘杆菌后,其神经氨酸酶活性集中在30~50个荧光单位之间;连翘、黄连、乌梅和贯众等中草药作用化脓隐秘杆菌后,其神经氨酸酶活性集中在50~100个荧光单位之间。说明连翘、蒲公英、黄连、黄芩、乌梅、大黄对化脓隐秘杆菌分离株具有显著抑制作用。     

应用PCR技术鉴定猪源隐秘杆菌的感染

隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes,A.pyogenes),又名化脓放线杆菌,是一种多形态、无运动性的革兰阳性杆菌.Ramos[1]根据16S rRNA基因进行系统进化分析后将其分类到隐秘杆菌属.该菌常导致牛[2]、羊[3]和猪发病[4],表现为肺炎、关节炎[5-6]等.近年来,猪场发病的病因及病原致病机理呈复杂趋势,尤其断奶仔猪肺炎和腿部疾病也越来越明显,不但影响猪的生长性能,而且降低肉猪的商品价值.2011年7月～2012年3月,广西兽医研究所细菌研究室在开展副猪嗜血杆菌病流行病学调查时发现,广西南宁市、贵港市和玉林市分别有3个规模猪场断奶仔猪零星出现以体温升高、关节炎、少量淡黄色稀薄脓汁、心包炎,部分死亡小猪肺部有小坏死灶为主要特征的疾病,临床症状与副猪嗜血杆菌病、链球菌病相似.此外,南宁市和贵港市的两个猪场曾免疫过副猪嗜血杆菌商品苗,但免疫效果不佳.最后,经过PCR鉴定确诊3起病例均由猪源隐秘杆菌引起,报告如下.     

β-内酰胺类抗生素对化脓隐秘杆菌分离株抗生素后效应研究

为了研究3种β-内酰胺类抗生素对化脓隐秘杆菌分离株的体外抗菌活性及抗生素后效应,采用试管液体二倍稀释法测定抗菌药物对化脓隐秘杆菌的体外抗菌活性,采用平板菌落计数法绘制3种β-内酰胺类抗生素对化脓隐秘杆菌分离株的时间-杀菌曲线。结果青霉素、头孢氨苄和头孢噻呋对化脓隐秘杆菌分离株的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.5、2μg/m L和1μg/m,最低杀菌浓度(MBC)分别为4、16μg/m L和16μg/m L;头孢噻呋对化脓隐秘杆菌的杀菌速率最快,青霉素次之;头孢噻呋对化脓隐秘杆菌分离株的抗生素后效应(PAE)较强(3.76 h),青霉素对化脓隐秘杆菌分离株的PAE较弱(2.31 h)。     

化脓隐秘杆菌TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

本试验旨在建立检测化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes,A.pyogenes)特异、灵敏的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。根据GenBank公布的化脓隐秘杆菌溶血素(pyolysin,PLO)基因高保守序列,设计特异性引物和探针建立检测体系,用于化脓隐秘杆菌的快速检测,并对该方法的特异性和灵敏度进行检测。结果显示,本试验建立的TaqMan实时荧光定量PCR方法仅对化脓隐秘杆菌的检测结果为阳性;该方法最低检测DNA浓度为77.6 fg,最低检测细菌浓度为63 CFU/mL。采用本研究建立的方法检测23份林麝临床病例样品,共鉴定出16株化脓隐秘杆菌,与API Coryne生化鉴定方法的结果相同。本研究为化脓隐秘杆菌的检测提供了一种灵敏、特异、快速的检测方法,其可用于化脓隐秘杆菌的诊断和流行病学调查。     

猪隐秘杆菌型出血性坏死性脾炎

六月龄去势公猪表现昏睡、食欲不振、站立困难。尸检发现脾脏边缘呈多重出血灶。从脾脏、肾脏、肌肉和肝脏中分离出革兰氏阳性杆菌,对分离株(TO16177)的16S rDNA基因序列比较分析发现,其可能与未发表过的隐秘杆菌属HJ57-14E菌株(登记号:gi18873551)(比较675bp个碱基,相似性达99.7%)为同一个属。脾脏组织切片的组织学检查发现呈广泛性坏死和炎症,其中革兰氏阳性杆菌显而易见。肝脏中可见多病灶的坏死斑。免疫组织化学检测发现,分离株与抗化脓性隐秘杆菌属(Arcanobacterium pyogenes)和内氏放线菌(Actinomyces naeslundii)的多克隆抗体具有交叉反应,且与后者的交叉反应更强烈。相似的反应也见于扁桃体的化脓灶中分离株,偶尔也见于脾脏和淋巴结中的分离株。本研究结果表明,这种未公开发布的隐秘杆菌属的细菌会引起生长肥育猪多器官功能衰竭,而后继发急性出血性坏死性脾炎。     

产后健康和子宫炎奶牛子宫中化脓隐秘杆菌分离鉴定

为了调查产后3周内健康和子宫炎奶牛子宫中细菌分离情况,尤其是化脓隐秘杆菌及其毒力基因的分布情况。本试验采集了产后3周内15头健康奶牛和11头患子宫炎奶牛的子宫分泌物进行细菌分离鉴定,并对分离到的化脓隐秘杆菌进行毒力基因的检测。结果表明,大肠杆菌、化脓隐秘杆菌、芽孢杆菌是产后3周内子宫分泌物最常分离培养的细菌;从15头健康奶牛和11头患病奶牛的子宫分泌物中分离到17株化脓隐秘杆菌,所有菌株均携带plo基因和fimA基因;携带多种毒力基因的化脓隐秘杆菌在健康和子宫炎奶牛中均可以分离到。本试验为进一步研究化脓隐秘杆菌对子宫内膜的致病机理提供参考依据。     

木犀草素联合庆大霉素对耐药化脓隐秘杆菌抑制作用的研究

为探究木犀草素联合庆大霉素对耐药化脓隐秘杆菌的抑制作用,采用微量肉汤稀释法分别测定木犀草素和庆大霉素对34株化脓隐秘杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。选取对庆大霉素耐药的化脓隐秘杆菌,通过棋盘法测定两种药物联合抑菌效果。经亚抑菌浓度木犀草素作用耐药菌株,比较木犀草素作用前后化脓隐秘杆菌对庆大霉素的耐药性变化情况。结果表明,木犀草素对化脓隐秘杆菌的MIC值为39~156μg/m L,与庆大霉素联合的作用为不相关;耐药菌经亚抑菌浓度木犀草素(1/4MIC)作用36 h后,庆大霉素对耐药菌的MIC值下降2~32倍,且原菌株耐药水平越高,MIC下降倍数越高。提示木犀草素具有良好抗菌活性,且能够逆转化脓隐秘杆菌耐药性。     

猪源化脓隐秘杆菌分离的鉴定与病原特性研究

从天津地区某猪场病猪肺脏脓肿中分离到一株具有β溶血特性的细菌,经形态学与生化特性分析,初步确定为化脓隐秘杆菌(Arcanobacterium pyogenes),并命名为TJjh1913.利用PCR扩增16S rRNA基因,经Blast序列分析,其序列与GenBank数据库中猪源化脓隐秘杆菌的核苷酸序列同源性高达99....