多头纤虫抗原特性的研究——多头绦虫节片抗原及原头节ES抗原的S…

为了探明多头绦虫成虫节片抗原及多头蚴原头节排泄分泌抗原的多肽组分，以供今后在免疫诊断与预防脑多头蚴病的应用，本试验应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ首次分析了多头绦虫成虫节片抗主多头蚴原头节ＥＳ抗原的多肽组分。应用１２．５％凝胶的连续系统，垂直板型电泳，考马斯亮头Ｒ－２５０染色的结果表明，成虫节片抗原共有１６条多肽带，其分子量范围２９￣１５４ＫＤ，其中主带４条，分别为７３，８８，１２８，１３４ＫＤ，原头节ＥＳ抗     

不同宿主源棘球蚴包囊液抗原的SDS—PAGE分析

本文利用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对不同宿主源棘球蚴囊液抗原的多肽组成进行了分析和比较,旨在为免疫诊断抗原的分离、鉴定和纯化奠定基础,为细粒棘球绦虫种内变异和株的鉴定提供参考指标。结果表明,在还原条件下,绵羊棘球蚴囊液抗原共有多肽带１９条,其中６６和５９ＫＤ多肽带为主带,４０、３４．５、３３、２４．５和１４ＫＤ多肽带次之。牛源囊液抗原共有多肽带１２条,６６和５９ＫＤ多肽带也为主带,２４．５ＫＤ多肽带次之。人源囊液抗原共有多肽带１３条,６６、４０、２０．５和１４ＫＤ多肽带为主带,５９ＫＤ多肽带近于缺乏,分子量在５９和２４ＫＤ之间的带明显偏少,而７１、６９、６８和２０．５ＫＤ多肽带为自身特有。３种不同宿主源棘球蚴囊液抗原其多肽组成均很复杂,羊、牛源囊液抗原的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ图谱较相似,而人源与此差异明显。初步认为绵羊和牛源囊液抗原在免疫诊断中具有可替代性。     

东毕吸虫抗原特异性的研究：土耳其斯坦东毕吸虫成虫抗原SDS—PA …

为了探明东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组分，供今后在免疫诊断和防治东毕吸虫的应用，本试验应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ首次对绒山羊体内寄生的土耳其斯坦东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组进行了分析。结果表明该抗原有１７条多肽带，其分子量范围２５－９３ＫＤ。其中主带７条，分别为２９，３０，３８，４０，６７，７８，９１ＫＤ。     

多头绦虫抗原特性的研究──多头绦虫节片抗原及原头节ES抗原的SDS-PAGE分析

为了探明多头绦虫成虫节片抗原及多头蚴原头节排泄分泌（ES）抗原的多肽组分，以供今后在免疫诊断与预防脑多头蚴病的应用，本试验应用SDS-PAGE首次分析了多头绦虫成虫节片抗原及多头蚴原头节ES抗原的多肽组分。应用12．5％凝胶的连续系统，垂直板型电泳，考马斯亮兰R－250染色的结果表明，成虫节片抗原共有16条多肽带，其分子量范围29～154kD，其中主带4条，分别为73、88、128、134kD，原头节ES抗原共6条多肽带，分子量范围33～132kD，其中主带2条，分别为33和108kD。本试验初步阐明多头绦虫成虫节片抗原和原头节ES抗原的多肽组分，为进一步研究多头绦虫抗原的特性奠定了基础。     

水牛梭形住肉孢子虫包囊纯化抗原的SDS—PAGE分析

应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析了水牛梭形住肉孢子虫包囊纯化抗原的蛋白质组分。采用垂直板型电泳，连续凝胶系统法，以考马斯亮兰Ｒ－２５０染色进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析的结果表明，水牛梭形住肉孢子虫包囊纯化抗原至少由１０种蛋白质组成，分子量范围为１７．５ＫＤ～１３５ＫＤ。其中主要蛋白质组分有５种，分子量分别为１２５ＫＤ、９８ＫＤ、９０ＫＤ、６９ＫＤ及３５ＫＤ。     

旋毛虫肌幼虫可溶性抗原,排汇分泌抗原的电泳分析

枉文报道了应用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（ＩＥＦ）电泳及二维电泳（ＩＥＦ／ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对旋毛虫肌幼虫排汇分泌（ＥＳ）抗原和肌幼虫可溶性抗原的分析结果。肌幼虫ＥＳ抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后用考马斯亮蓝染色蛋白质，结果显示１６条蛋白带，分子量范围２１￣８０ＫＤ，其中主带９条。ＩＥＦ电泳后分别用ＰＡＳ染多糖、考马斯亮蓝Ｒ－２５０染蛋白质、Ｎｉｌｅ＇     

东毕吸虫抗原特异性的研究──土耳其斯坦东毕吸虫成虫抗原SDS-PAGE分析

为了探明东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组分,供今后在免疫诊断和防治东毕吸虫的应用,本试验应用ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ首次对绒山羊体内寄生的土耳其斯坦东毕吸虫成虫可溶性抗原的多肽组分进行了分析。结果表明该抗原有１７ 条多肽带,其分子量范围２５～９３ＫＤ．其中主带７ 条,分别为２９、３０、３８、４０、６７、７８、９１ＫＤ。本试验初步阐明了土耳其斯坦东毕吸虫成虫抗原的多肽组分,为进一步对该病免疫诊断用抗原的分离、纯化,提高抗原的敏感性和特异性奠定了基础     

旋毛虫肌幼虫可溶性抗原、排泄分泌抗原的电泳分析

本文报道了应用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ），聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦（ＩＥＦ）电泳及二维电泳（ＩＥＦ／ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对旋毛虫肌动虫排泄分泌（ＥＳ）抗原和肌幼虫可溶性抗原的分析结果。肌幼虫ＥＳ抗原经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ后用考马斯亮蓝染色蛋白质，结果显示１６条蛋白带，分子量范围２１～８０ＫＤ，其中主带９条。ＩＥＦ电泳后分别用ＰＡＳ染多糖、考马斯亮蓝Ｒ－２５０染蛋白质、Ｎｉｌｅ＇ｓ蓝染脂、醋酸ａ－萘酯／坚固蓝染酪酶同工酶，结果肌幼虫ＥＳ抗原分别显示１６，２６、７及０条带；肌幼虫可溶性抗原分别显示２１、３８、４及１１条带。二维电泳后用考马斯亮蓝Ｇ－２５０染色多肤斑点，结果ＥＳ抗原显示多肽斑点６１个；肌幼虫可溶抗原显示１２２个多肽斑点。     

多头绦虫抗原特性研究

采用等电聚集电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原进行了分析,ＩＥＦ后,考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色,扫描,结果表明,头节可溶性抗原共出现了４９个吸收峰,Ｐ＾１范围４．０４－９．９１,主吸收峰９个,其Ｐ＾Ｉ值分别为８．２３、８．０２、７．７６、７．５２、６．８５、６．５４、５．６８、５．０８和４．２３,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９．５％。囊壁可溶性可     

牦牛肝片吸虫分泌排泄抗原的生化特性和免疫印迹分析

肝片吸虫的分泌排泄抗原（ＥＳ抗原）在诊断及诱导机体产生抗体方面具有重要作用。本文对寄生于牦牛的肝片吸虫ＥＳ抗原的蛋白质组成及其生化特性进行了分析。ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳显示ＥＳ抗原共有９条带，主要由１２－２６ＫＤ的小分子量蛋白质组成；糖蛋白及脂蛋白染色后发现ＥＳ抗原中糖蛋白极少，而含有较多的脂蛋白；等电聚焦电泳结果显示ＥＳ抗原有２２条带，几乎全部是酸性蛋白，ｐＩ主要集中在４．２５～５．２５范围内；双向电泳共检出３０个多肽，主要分布在ｐＩ４．５～７．０之间；免疫印迹分析结果表明：ＥＳ抗原中分子量为１６．２ＫＤ～１８．６ＫＤ的蛋白质是主要的抗原成分，其中１７．２ＫＤ多肽具有最强的免疫原性。     

羊脑多头蚴抗原的二维电泳分析

对自然感染绵羊的脑多头蚴原头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原经二维电泳分析，电头节可溶性抗原共显示７９个多肽斑点，其中酸性多肽斑点２６个，中性多肽斑点５个，碱性多肽斑点４８个，囊壁可溶性抗原共显示５９个多肽斑点，其中酸性多斑点２０个，中性多肽斑点４个，碱性多肽斑３５上。     

用亲和层析法提取大片吸虫谷胱甘肽转移酶的研究

为了探明大片吸虫谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ）的多肽组分和酶活力,以供今后进行ＧＳＴ的免疫原性和各种蠕虫ＧＳＴ的交叉免疫原性的研究,本试验首次用亲和层析法对大片吸虫ＧＳＴ进行提取,用ＳＤＳ—ＰＡＧＥ分析了大片吸虫ＧＳＴ的多肽组分,用１－氯－２,４－二硝基苯（ＣＤＮＢ）为底物测定了ＧＳＴ酶活力。电泳染色结果表明,大片吸虫ＧＳＴ至少有２条带,其分子量为２９．９～２４．５ＫＤ,其中主带２条,分别为２８．３、２６．２ＫＤ。酶活力测定结果表明,提取的ＧＳＴ可获得１０．４４μｍｏｌ／Ｌ／ｍｉｎ／ｍｇ以上的酶比活性。     

羊脑多头蚴抗原的等电聚集电泳分析

采用等电聚焦电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性怕、囊壁可溶抗原和囊液抗原进行了分析。ＩＥＦ电泳后,分别用考马斯蓝Ｒ－２５０法染蛋白质,ＰＡＳ法染多、醛酸α－萘酯－坚固蓝法染酯酶曲同工酶、Ｎｉｌｅ‘ｓ蓝法洒脂。蛋白质染一头节可溶性抗原显带４２条,等电点４．８９－８．７２;囊壁可溶性抗原显带５０条,ｐｌ４．８０－８．６８,囊液抗原显带３９第,ｐＩ４．８０－９．８８。要色后头节可溶     

鸡减蛋综合征（EDS76）病毒的研究：Ⅱ.GC^2株蛋白性质的研究

ＧＣ２株提纯后经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析得到１３条多肽，分子量范围从１１２０００￣１８０００道尔顿，ＧＣ２株抗原与标准株比较为同一抗原性。     

多头绦虫抗原特性研究——多头蚴抗原等电聚焦电泳后考马斯亮蓝染色扫描分析

采用等电聚焦电泳（ＩＥＦ）技术,对自然感染绵羊的脑多头蚴的头节可溶性抗原、囊壁可溶性抗原和囊液抗原进行了分析,ＩＥＦ后,考马斯亮蓝Ｒ－２５０染色,扫描。结果表明,头节可溶性抗原共出现了４９个吸收峰,ＰＩ范围４０４～９９１,主吸收峰９个,其ＰＩ值分别为８２３、８０２、７７６、７５２、６８５、６５４、５６８、５０８和４２３,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９５％。囊壁可溶性抗原共出现了６１个吸收峰,其ＰＩ范围为４００～９６６,主吸收峰１０个,其ＰＩ值分别为９５９、８９９、８７９、８５１、８３７、８２３、８０２、７８３、７５２和７２９,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９５％。囊液抗原共出现了５２个吸收峰,其ＰＩ范围为４０１～９８０,主吸收峰３个,其ＰＩ值分别为８２３、５９４和５６８,所含蛋白总量占上样蛋白总量的９９９％。     

中华硬蜱唾液腺抗原成分的分析研究

中华硬蜱唾液腺提取物（ＳＧＥ）经ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳显示出２４条蛋白带，其中主带有６条，分子量分别为１４２、１０５、９４、６６、６４和５６ＫＤ。用中华硬蜱叮刺家兔后血清做免疫印渍，特异性抗原带为１０５和９４ＫＤ。说明中华硬蜱１０５和９４ＫＤ的蜱唾液腺蛋白原能够有效地诱慢宿主产生抗体。     

禽腺病毒贵州分离株ＨＳ—１的核酸酶切分析与蛋白抗原鉴定

本研究利用１０％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗestern-Blotting技术鉴定３株不同的减蛋综合征病毒（贵州株ＨＳ－１、南京分离毒ＧＣ２、国际标准毒ＡＶ－１２７）的蛋白抗原性，结果表明，３株毒的蛋白多肽分子量均在１０６－１２kＤ范围,一各条多肽的组成上略有差异；它们都具有两条相同的免疫原性多肽，分子量分别为１０６和１００ＫＤ。同时，运用ＥcoRⅠ,HindⅢ，ＰｓｔⅠ和ＳmaⅠ等５种限制性内切酶进行了酶切分析，证实３株ＥＤＳ病毒用ＰstⅠ和ＳmsⅠ酶切的片段大小及长度略有不同，而其它３种酶的酶切图谱完全相同。     

用几种电泳方法分析牦牛肝片吸虫不同部位抗原

应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、等电聚焦电泳（ＩＥＦ）及双向电泳三种电泳方法分析牦牛肝片吸虫成虫四种抗原（头抗原－ＨＡ、体抗原－ＢＡ、体表抗原ＳＡ、分泌排泄抗原－ＥＳ）。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ结果表明，ＢＡ、ＨＡ、ＳＡ分子量在１２～１００ｋＤ之间，ＥＳ在１２．３～２６ｋＤ之间，蛋白质染色ＢＡ、ＨＡ、ＳＡ、ＥＳ分别显示２５、２４、１８、９条带；ＩＥＦ分析肝片吸虫分别得３４、３３、２８、２２条带，主要由酸性蛋白质组成，主要谱带在ｐＩ４．２０～６．５５内；双向电泳分析ＢＡ、ＥＳ多肽斑点为６９、３０个     

绵羊多头蚴可溶性蛋白质的SDS—PAGE银染分析

应用十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和银染分析法对绵羊多头蚴囊液及原头节的可溶性蛋白质进行分析，结果囊液与原头节分别可见３１和４２条多肽条带，两者均存在与棘球蚴，细颈囊尾蚴相同的２０．３８ＫＤ多肽这两个组成“弧五”抗原的成份。     

犬瘟热病毒的结构多肽分析

差速离心和蔗糖密度梯度离心纯化经鸡胚成纤维细胞蚀斑克隆后的犬瘟热毒Ｓ＿８毒株，采用ＳＤＳ－ＰＡＥＧ电泳及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ转印技术详细分析了犬瘟热病毒的结构多肽。回收凝胶中１条６３Ｋｄ的蛋白带，经３种不同的蛋白酶消化后，首次证明在犬瘟热病结构多肽中，融合蛋白Ｆ多肽的两个亚单位（Ｆ＿１和Ｆ＿２）是以胰蛋白酶的特异性水解位点精氨酸为桥梁连接形成Ｆ多肽的。试验结果表明，犬瘟热病毒主要包括Ｌ（２００．５Ｋｄ）、ＨＡ（７４Ｋｄ）、Ｐ（６８Ｋｄ）、Ｆ（６３Ｋｄ）、ＮＰ（５６Ｋｄ）、Ｍ（３５Ｋｄ）等６条结构多肽，同时下蛋白可在电泳中裂解成Ｆ＿１（４１Ｋｄ）和Ｆ＿２（２７Ｋｄ）２个亚单位。试验还发现其它３条分子量分别为５２Ｋｄ、４４Ｋｄ、３２Ｋｄ的病毒蛋白成分，它们是否均为病毒的结构多肽仍需深入研究。