梨火疫病菌噬菌体的初步研究

为找到梨火疫病菌适度专化性的噬菌体，用于该病的检测和鉴定，从英国病山楂枝条上分离到一株噬菌体，测定了其寄主范围、潜育期、繁殖量等，还观察了其形态。分离到的噬菌体为高度专化性噬菌体，不能单位用于梨火疫病菌的检测和鉴定，可与其他梨火疫病菌噬菌体株系配合使用。     

应用聚合酶链反应技术检测梨火疫菌的研究

应用梨火疫菌ＰＣＲ技术可以准确，快速地检测出梨火疫菌潜伏侵染的样品，检出样品中梨火疫菌的最低带菌量为５０个细菌，未发现它与其它植病细菌有交叉反应，从ＰＣＲ扩增、电泳分离到获得最后结果仅需８小时。此法适宜对进口苗木、接穗和水果上的梨火疫菌快速检疫和对引种苗圃和果园里梨火疫病发生进行监测。     

用重寄生菌和杀菌剂防治黄瓜白粉病

能产生分生孢子器的Ampelomyees quisqualis是白粉菌上的一种重寄生真菌,Cesati(1852)在一百三十年前首次作了记载。这种重寄生菌广泛寄生于多种白粉菌上。白粉菌是专性寄生,它的寄主范围很有限,但重寄生菌能够人工培养,且比它寄主的专化性更弱。在挪威温室黄瓜上有两种白粉病流     

梨园气溶胶中梨火疫病菌的定量检测

为系统研究梨园气溶胶中梨火疫病菌的含量, 本研究于2019年－2021年在新疆库尔勒市人和农场梨园, 利用病原菌孢子捕捉器在每年春季(4月下旬)、夏季(6月中旬)、秋季(9月中旬)收集梨园气溶胶, 检测梨火疫病菌。结果显示, 健康梨园气溶胶中未检测到梨火疫病菌, 不同发病程度的梨园气溶胶中均能检测到梨火疫病菌, 携菌量均值在102 cfu/(24cm2·h)以上, 其中, 气溶胶中梨火疫病菌含量最高值为2.81×104 cfu/(24cm2·h), 最低值为8.50×102 cfu/(24cm2·h); 重度、中度、轻度发病果园收集的气溶胶中含梨火疫病菌总菌落数均值分别为8.74×103、4.55×103、2.36×103 cfu/(24cm2·h)。此外, 在同一高度收集的气溶胶中, 梨火疫病菌菌落数随收集时间的延长而增加。不同季节气溶胶携菌量检测结果表明, 秋季发病梨园中气溶胶携菌量明显高于夏季和春季, 与梨园梨火疫病发病规律相符。致病性测定结果表明, 气溶胶中分离的梨火疫病菌具有致病性。     

梨火疫病的传播扩散与检疫处理

自从对梨火疫病(Erwinia amylovora)的世界性传播现状进行分析以来,梨火疫病又在哥伦比亚(1993)、前苏联的乌克兰、前南斯拉夫的克罗地亚(1995)发生,本文拟就梨火疫病的传播扩散途径、检疫处理措施作以介绍。 一、梨火疫病的传播扩散特点 1.梨火疫病菌的存在形式 梨火疫病的传播扩散直接取决于病原菌的存在形式。据国外研究证实,主要有4种存在形式:菌脓、菌束、表生细菌和内生细菌。菌脓是梨火疫病菌存在最直接、最常见的形式,除越冬后复活的溃疡斑表面外,侵染不久后花、     

吩嗪类化合物对梨火疫病菌的抗菌活性研究

由解淀粉欧文氏菌Erwinia amylovora引起的梨火疫病是危害梨、苹果等蔷薇科果树的一种重要细菌病害,在世界范围内造成严重损失,是果树上重要的防控对象。药剂防治是控制梨火疫病传播蔓延的一种重要手段。吩嗪类化合物是绿针假单胞菌Pseudomonas chlororaphis和抗生素溶杆菌Lysobacter antibioticus等生防细菌产生的抗菌活性物质,在农药、医药等领域有广阔的应用前景。为明确吩嗪类化合物对梨火疫病菌的抗菌活性,本研究通过测定含不同浓度药剂的菌悬液OD600的方法,评价了本课题组分离的5个吩嗪类化合物以及常见的抗细菌药剂对梨火疫病菌的室内抗菌活性。结果表明,堆囊粘菌素(myxin)和吩嗪-1-羧酸(PCA)活性较好,EC50分别为 7.20 μg/mL 和46.41 μg/mL。中生菌素、噻霉酮、春雷霉素等药剂EC50为7.21～50.74 μg/mL。进一步对活性较好的药剂进行了复配筛选,结果显示,吩嗪-1-羧酸∶中生菌素=9∶1复配组合的EC50为27.15 μg/mL,增效系数为1.28,表现了一定的相加作用。本研究明确了5个吩嗪化合物对梨火疫病菌的抗菌活性,为扩充梨火疫病防治药剂种类、开发利用吩嗪类化合物提供了参考。     

亚洲梨火疫病致病相关因子的研究进展

本文概述了亚洲梨火疫病(Erwinia pyrifoliae)的生物学特性、危害症状、寄主范围、分布情况,重点介绍了该病菌的微生物学、生理生化、分子生物学特点,以及一些致病相关因子的研究进展.同时,分析比较了亚洲梨火疫病菌和梨火疫病菌以及日本梨枝枯病菌的关系,指出了亚洲梨火疫病菌传入我国的风险以及在检疫上的重要性.     

梨火疫病菌的实时荧光PCR检测

 根据梨火疫病菌16S~23S间的ITS保守序列,设计并合成了一对特异性引物REA/FEA,应用荧光染料SYBR Green I,对10个梨火疫的菌株和其它相关参试菌株进行了检测。结果表明,10个梨火疫菌株都产生荧光信号而其它参试菌株都不产生荧光信号,成功建立了梨火疫病菌的实时荧光PCR检测方法。整个检测过程只需3h,完全闭管,降低了污染的机会,无需PCR后处理。检测的灵敏度是4个菌体细胞,比常规PCR电泳检测提高了10倍。用该特异性引物对梨枝条浸泡液进行实时荧光PCR检测,结果可特异性检测到目标菌的存在,并且检测的灵敏度是24个菌体细胞,比常规PCR电泳检测提高10倍。     

免疫吸附PCR技术提高梨火疫病菌检测灵敏度

本研究采用已经发表的引物和制备的梨火疫病菌抗血清,研制了免疫吸附-PCR技术,使其检测梨火疫病菌纯菌的灵敏度比标准PCR技术提高10倍;检测模拟样品中的梨火疫病菌灵敏度提高了1000倍;从相关混合菌液中能够更加灵敏和准确地检测出梨火疫病菌.该方法简单易行,准确灵敏,具有广阔的应用前景.     

重寄生菌葡酒锈生座孢(Tuberculina vinosa)和白蜡锈生座孢(T.fraxinis)的寄生专化性

 用葡酒锈生座孢(Tuberculina vinosa)的孢子悬浮液,在贴梗海棠、木瓜、苹果和垂丝海棠锈病发生期,喷雾接种于叶面锈菌性子器处,7-12 d出现重寄生现象。表明葡酒锈生座孢除能在自然条件下寄生梨锈病菌外,在人为接种条件下,其寄主范围包括贴梗海棠锈病菌、木瓜锈病菌(Gymnosporangium asiaticum)、苹果锈病菌和垂丝海棠锈病菌(G.yamadai)。用葡酒锈生座孢和白蜡锈生座孢(T.fraxinis)在梨锈病菌和大叶白蜡锈病菌(Aecidium fraxinibungeanae)上交互接种,结果表明,两者不能交互寄生。研究T.vinosa和T.fraxinis的寄生专化性,对2种重寄生菌的应用及锈生座孢属(Tuberculina)种的鉴定具有意义。     

免疫捕获PCR检测进境苹果果实中梨火疫病菌

利用梨火疫病菌抗体和PCR技术建立了梨火疫病菌免疫捕获PCR方法,检测苹果模拟样品的灵敏度达到了1.5×102cfu/reaction。与直接PCR进行比较,免疫捕获PCR方法检测苹果模拟样品的灵敏度提高了10倍以上,而且省去了DNA提取等步骤。利用该方法成功从进境苹果样品中检测到梨火疫病菌,产物测序结果表明,产物序列和梨火疫病菌的相应序列高度一致。试验结果表明,免疫捕获PCR法能除去样品中的大部分PCR反应抑制物质,可以有效检测进境苹果中梨火疫病菌,在口岸水果检疫中具有一定的应用潜力和推广价值。     

辣椒疫霉致病力分化的初步研究

关于辣椒疫霉Phytophthora capsici Leonian致病力的分化研究,Black等曾报道来自台湾的辣椒疫霉对辣椒有一定的寄生专化性,菌株间存在致病力分化现象,可分为3种致病型,国内这方面的研究迄今报道较少。为了明确安徽省辣椒疫霉是否存在致病力分化现象,为辣椒抗病育种及该病的防治提供理论依据,作者对分离自该省不同地区的辣椒疫霉菌株的致病力及其分化进行了初步研究,结果如下。     

重寄生菌白粉寄生孢的致病性研究

 在离体条件下,选择了6种白粉菌和49个白粉寄生孢(Ampelomyces quisqualis)菌株进行致病性测定,结果表明,白粉寄生孢菌株之间存在致病性分化且差异极显著,致病性分化主要与寄主真菌和寄主植物有关,而与地理来源相关性不大。研究同时表明,白粉寄生孢有一定的寄生专化性。     

美国进境樱桃果实中梨火疫病菌的检测

为了筛选快速、灵敏的梨火疫病菌检测方法,利用常规PCR、套式PCR和实时荧光PCR方法分别对美国进境的326批樱桃果实中梨火疫病菌进行检测。结果显示,3种PCR方法的检出率不同,不同引物或探针的检出率也存在差异。在常规PCR中,引物Ams3/Ams4c、P29A/P29B和PEANT1/PEANT2的检出率分别为35.28%、24.85%和16.87%;单管套式PCR和套式PCR的检出率分别为23.01%和50.61%;4种实时荧光PCR的检出率分别为17.48%(探针PA)、32.21%(探针Ams)、29.14%(探针ITS)和23.93%(SYBR GreenⅠ)。在所有试验方法中由引物P29A/P29B和PEANT1/PEANT2组成的套式PCR的检出率最高。检测结果证实了进境樱桃果实中存在梨火疫病菌DNA,套式PCR和常规PCR(引物Ams3/4c)可用于进境樱桃样品中梨火疫病菌的常规检测。     

利用蜜蜂传播生防菌防治梨火疫病

梨火疫病由梨火疫病菌(Erwinia amylovora)引起,可以通过蜜蜂授粉传播而加重危害.为做好香梨安全授粉工作,防止因直接放蜂造成梨火疫病的大流行,本研究测试了香梨花上分离的一株解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)对梨火疫病菌的拮抗效果,并利用自行研发的"蜜蜂导向盒"进行了蜜蜂...     

基于MaxEnt模型预测梨火疫病菌的潜在地理分布

为探究梨火疫病菌解淀粉欧文氏菌Erwinia amylovora在全球的潜在地理分布,基于其全球分布数据和筛选得到的环境变量,利用MaxEnt模型对其在当前气候和未来气候条件下的潜在地理分布进行预测,并利用刀切法和皮尔逊相关性分析法筛选对梨火疫病菌分布有重要影响的环境变量。结果显示,对梨火疫病菌分布有重要影响的环境变量包括2月平均最高温度、1月平均降水量、7月平均最低温度、温度变化方差、昼夜温差月均值和7月平均降水量,表明春季和夏季的温度和降水对梨火疫病菌的分布有较大影响。在当前气候条件下,梨火疫病菌在全球的适生区分布较广,适生区总面积达到5.58×10⁷ km²,且高适生区主要分布在北美洲沿海地区、地中海沿岸和亚洲中部及东部的部分地区;梨火疫病菌在我国的适生区总面积为7.36×10⁶ km²,占全国陆地总面积的76.70%;在未来气候SSP126和SSP585情景下,梨火疫病菌在全球的适生区总面积分别为5.52×10⁷ km²和5.24×10⁷ km²。表明梨火疫病菌对我国大部分地区有潜在威胁,应加强监测与防控。     

利用电加热自动消毒修枝剪阻断梨火疫病田间传播

梨火疫病是近年传入我国的检疫性病害,由梨火疫病菌(Erwinia amylovora)引起,可通过修剪工具田间扩散加重危害.为阻断修剪工具传病途径,做好梨火疫病的有效防控,本研究测试了电加热自动消毒修枝剪的灭菌效果和阻断梨火疫病田间传播性能,结果表明:电加热自动消毒修枝剪在工作状态下可在1s之内完全杀死沾染在刀片上的梨...     

介绍一种简易准确的梨火疫病检测方法

梨火疫病是梨和苹果树上一种危险的细菌性病害。它在美国、新西兰危害十分严重。1957年梨火疫病传入欧洲,近年已蔓及西欧沿海各国,我国至今末发现梨火疫病,梨火疫病是重要对外植物检疫对象之一,寻找一种准确、快速,简便易行的检测方法是我国当前对外检疫工作巾一个迫切需要解决的问题。对梨火疫病菌的选择性培养基研究自 Lelliott(1968)报道营养蔗糖选择性培养基以来相继已推出数种。它们都具有一定的应用价值,但最终证实还要依靠致病性测定。     

海南湛江柑桔疫霉种的鉴定及交配型研究

 1988~1990年,从海南和湛江地区发生柑桔脚腐病的11个柑桔园采集了大量的病组织和病株基部的土壤样品,经分离共获得48个疫霉分离菌,根据孢子囊形态、脱落性、卵孢子产生、最高生长温度和淀粉利用能力等将其鉴定为寄生疫霉(Phytophthora parasitica Dast)柑桔褐腐疫霉(P.citrophthora R.E.&E.H.Smith)和辣椒疫霉(P.capsici Leonian)。这三种疫霉均是柑桔树的致病菌,其中寄生疫霉和柑桔褐腐疫霉的出菌率高,认为是这两个地区柑桔脚腐病的主要致病菌,而辣椒疫霉在中国柑桔园是首次发现。交配型测定结果以寄生疫霉的A~1,交配型占绝对优势。     

产harpin的成团泛菌工程菌的构建

 梨火疫病菌(Erwinia amylovora)产生的胞外蛋白harpin是引发其非寄主植物过敏反应的因子。harpin蛋白还具有诱导植物抗性的功能。成团泛菌(Pantoea agglomerans)308R对链格胞属(Alternaria)的真菌具有拮抗活性,是一株抗利福霉素的自发突变株,对壮观霉素敏感。本文通过电击转化法将带有梨火疫病菌hrp基因簇的重组质粒pCPP430导入308R。所得转化子具有pCPP430的壮观霉素抗药性标记,在番茄上引起过敏反应;从转化子中提取到与pCPP430大小一样的质粒,其酶切物理图谱也与pCPP430完全相同;用地高辛标记的harpin的结构基因hrpN为探针对转化子中的质粒进行Southern blotting分析,结果在转化子中得到信号明显的杂交片段,而受体菌308R中未出现杂交信号;提取细菌的外壁的蛋白质进行PAGE分析,在大约44 kd的位置上308R(pCPP430)比308R明显多出1条带。这些结果表明成团泛菌能够表达梨火疫病菌的hrp基因簇,所产harpin蛋白也是有活性的。