典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟Na+-K+-ATPase的抑制作用

以棉铃虫Helicoverpa armigera和亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis为试虫,建立Na+-K+-ATPase最佳反应系统,研究典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对Na+-K+-ATPase的影响。棉铃虫Na+-K+-ATPase 活力最佳测试条件为酶源蛋白浓度6 μg/mL,反应温度35~40℃,反应时间6 min;亚洲玉米螟则为酶源蛋白浓度8 μg/mL,反应温度35℃,反应时间6 min。近紫外光照(300~400 nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟离体Na+-K+-ATPase活力基本没有影响,但对活体活力有很强的抑制作用。光照和无光照条件下,α-T对两种昆虫离体和活体Na+-K+-ATPase活力均有不同程度的抑制作用。光照组α-T对亚洲玉米螟Na+-K+-ATPase的抑制率高于无光照组,且处理浓度或剂量越高,其抑制率越大;对棉铃虫Na+-K+-ATPase抑制作用不显著。     

美洲大蠊Na~ -K~ -ATPase作为筛选靶标的初步研究

以美洲大蠊 (Periplanata americana)雄性成虫的中枢神经系统为试材 ,对 Na -K - ATPase作为农药筛选靶标进行了初步研究 ,表明 Na - K - ATPase活力测定的最适反应条件是 :酶源蛋白浓度 8.5μg/ m L,温度 30℃ ,p H7.4 ,反应时间 15min。同时以最佳反应系统初步研究了几种拟除虫菊酯 (南开菊酯、氯氰菊酯、溴灭菊酯、氰戊菊酯、二氯苯醚菊酯、胺菊酯 )对 Na - K - ATPase离体活性的影响 ,结果显示出不同程度的抑制作用。并对其用作农药筛选靶标的可能性进行了探讨。     

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟谷胱甘肽-S-转移酶的影响

研究了典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对棉铃虫Helicoverpa armigera和亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)的影响。结果表明:近紫外光照(300~400 nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟幼虫GSTs活性无显著影响,但两种昆虫GSTs对α-T的反应不同。无光照条件下,α-T对亚洲玉米螟离体GSTs活性没有影响,而高浓度α-T能抑制棉铃虫离体GSTs活性;高剂量α-T可使两种昆虫活体GSTs活性升高。光照条件下,高浓度和高剂量α-T抑制棉铃虫GSTs活性,而不影响亚洲玉米螟离体GSTs活性,但低剂量α-T抑制其活体活性,而高剂量α-T则诱导其活性增加。棉铃虫和亚洲玉米螟GSTs对α-T反应的差异,可能与它们对药剂的敏感性以及药剂在两者体内的穿透、运转、贮藏、代谢等生理特性上的差异有关。     

美洲大蠊Na+ -K+ -ATPase 作为筛选靶标的初步研究

以美洲大蠊(Perip lanata am ericana) 雄性成虫的中枢神经系统为试材, 对Na+ -K+ -A TPase 作为农药筛选靶标进行了初步研究, 表明Na+ -K+ -A TPase 活力测定的最适反应条件是: 酶源蛋白浓度815 μg/m L , 温度30℃, pH7.4, 反应时间15min。同时以最佳反应系统初步研究了几种拟除虫菊酯(南开菊酯、氯氰菊酯、溴灭菊酯、氰戊菊酯、二氯苯醚菊酯、胺菊酯) 对Na+ -K+ -A TPase 离体活性的影响, 结果显示出不同程度的抑制作用。并对其用作农药筛选靶标的可能性进行了探讨。     

松油烯-4-醇对淡色库蚊的熏蒸毒力及对其Na+ ,K+ -ATP酶的抑制作用

为进一步探讨杀虫植物砂地柏Sabina vulgaris Ant.精油中主要杀虫活性成分—松油烯-4-醇(terpinen-4-ol)对卫生害虫的生物活性,测定了该物质对淡色库蚊Culex pipiens Pallens及其Na+,K+-ATP酶活性的影响。结果表明:松油烯-4-醇对淡色库蚊具有较强的熏蒸作用,其LC50值为6.79 mg/L, 在LC80剂量下其击倒中时(KT50)为6.92 min;淡色库蚊Na+,K+-ATP酶活性测定的最佳反应条件为pH值7.42、温度35.5℃、底物浓度0.7 mmol/L;离体和活体情况下,松油烯-4-醇均可显著抑制淡色库蚊Na+,K+-ATP酶的活性,其I50值为32.02 μg/mL。Na+,K+-ATP酶可能是松油烯-4-醇对淡色库蚊的杀虫作用靶标。     

闹羊花素-III对菜青虫神经系统的影响

以闹羊花素 - III处理 5龄菜青虫幼虫 ,试虫乙酰胆碱酯酶 (ACh E)的活体活性和离体活性均与对照无明显差异 ,乙酰胆碱 (ACh)含量显著降低 ;对 Na - K - ATP酶、Ca2 -Mg2 - ATP酶比活力有可逆性激活作用 ,处理后 2 4 h比活力提高 ,尤以低剂量 1μg·虫 -1处理的比活力显著提高 ;处理后 6 0 h,以 1～ 3μg·虫 -1处理的比活力恢复正常 ,以 5～ 10μg·虫 -1处理的比活力显著低于对照。     

昆明山海棠杀虫活性成分雷公藤定碱和雷公藤次碱的触杀作用及对Na+ -K+ -ATP酶活性的影响

为进一步探讨杀虫植物昆明山海棠根皮中分离出的雷公藤定碱和雷公藤次碱的杀虫作用机理,采用微量点滴法处理3龄粘虫前胸背板,观察发现试虫均在2 h左右表现出中毒麻醉,8 h后完全恢复,24 h后重新表现为中毒麻醉,48 h后部分死亡。进一步的触杀毒力测定结果表明,雷公藤定碱和雷公藤次碱对3龄粘虫幼虫的24 h麻醉中量分别为8.82 μg/头和 4.58 μg/头,对3龄小菜蛾幼虫的麻醉中量分别为4.71 μg/头和3.46 μg/头。离体和活体条件下测定了雷公藤定碱和雷公藤次碱对5龄粘虫幼虫头部Na+-K+-ATP酶活性的影响,结果表明,两种药剂对粘虫幼虫神经系统Na+-K+-ATP酶活性均有一定的抑制作用,且该抑制作用具有一定的浓度依赖性,推测Na+-K+-ATP酶可能是雷公藤定碱和雷公藤次碱的一个重要作用靶标。     

四种拟除虫菊酯类杀虫剂对枸杞蚜虫的毒力及对三磷酸腺苷酶和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

为寻找防治枸杞蚜虫的适用药剂,采用玻璃管药膜法,测定了4种拟除虫菊酯类杀虫剂对枸杞蚜虫的毒力及对其三磷酸腺苷酶(ATPase)和谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)活性的影响。结果表明:枸杞蚜虫对联苯菊酯最敏感,LC50值为4.34 mg/L;氯菊酯、高效氯氰菊酯和甲氰菊酯的LC50值分别为17.08、40.50和184.84 mg/L。4种杀虫剂对枸杞蚜虫两种ATPase活性均有抑制作用,药剂浓度为1×10-4mol/L时,4种药剂对Na+-K+-ATPase活性的抑制率均高于对Ca2+-M g2+-ATPase的抑制率,其中对Na+-K+-ATPase活性的抑制率从高到低依次为:联苯菊酯高效氯氰菊酯氯菊酯甲氰菊酯,而对Ca2+-M g2+-ATPase的抑制率则是联苯菊酯最高(46.41%),高效氯氰菊酯最低(33.04%)。4种药剂对枸杞蚜虫GSTs活性的影响差异较大:联苯菊酯在低浓度时对GSTs具有诱导作用,高浓度时则表现为一定的抑制作用;不同浓度高效氯氰菊酯和氯菊酯对GSTs活性均表现为抑制作用,抑制率最高达85.02%;而甲氰菊酯处理后GSTs的活性则升高了193.07%~249.96%。     

松油烯-4-醇对家蝇体内几种酶系的影响

测定了松油烯-4-醇对家蝇成虫的毒杀活性及其体内几种酶系活性的影响.结果表明:松油烯-4-醇对家蝇具有较强的触杀作用,24h的LD50为23.91μg/虫;对家蝇的致毒症状可明显地分为兴奋、痉挛、麻痹、死亡或复苏等几个阶段;对Na ,K -ATPase具有较强的抑制作用,在兴奋期、痉挛期、麻痹期和复苏期,酶抑制率分别为23.2l%、20.27%、61.84%和58.35%;离体条件下,对Na ,K -ATPase的I50为0.8379×103μg·mL-1;对AChE有一定的抑制作用;可激活酯酶,在复苏期,酶比活力为对照的1.42倍.     

光活化毒素α-T对棉铃虫和亚洲玉米螟谷胱甘肽过氧化物酶的影响

谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)是机体对抗内源或外源性诱导产生的脂质过氧化反应的一种保护酶系。研究表明,紫外光照(300~400 nm) 对亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis GSH-PX没有显著影响,但可诱导棉铃虫Helicoverpa armigera GSH-PX活性升高。经光活化毒素α-T处理后,亚洲玉米螟和棉铃虫GSH-PX活性均有不同程度的升高,这可能是昆虫对α-T引起的氧化协迫作出的一种防御性反应。     

两种化合物对菜粉蝶幼虫超氧化物歧化酶的影响

室内测试了菜粉蝶 Pieris rapae 4 龄幼虫超氧化物歧化酶的活性，并就 α -三噻吩（ α -terthienyl）和化合物5［1-苯基-4-（3，4-亚甲基 二氧）苯基-丁二炔］两种化合物对其产生的影响进行了比较研究。结果表明，近紫外光照 （300～400 nm）可增强对幼虫超氧化物歧化酶活体活力( in vivo )和离体活力( in vitro )。经光敏化合物处理后，在紫外光照下，超氧化物歧化酶活体活力基本不受化合物 5的影响，但能被 α -三噻吩抑制；离体情况下，无论光照与否，化 合物5均不影响其活力， α -三噻吩在低剂量下有抑制作用，而在高剂量下则可使其活力 增强，显示了不同的剂量反应关系。表明无论在离体还是活体的情况下，幼虫对 α -三噻吩的光敏性优于化合物5。对两种化合物光敏作用的可能机理进行 了探讨。     

4种菊酯类杀虫剂对亚洲小车蝗的毒力和对ATPase活性的抑制

化学防治是草原蝗虫防治的主要应急措施,亚洲小车蝗是内蒙古草原的优势种。采用点滴法测定了4种菊酯类杀虫剂联苯菊酯、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和甲氰菊酯对亚洲小车蝗3龄蝗蝻的毒力。结果表明,联苯菊酯对亚洲小车蝗3龄蝗蝻的毒力最强,LD50值为0.004 8 μg/头,高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯和甲氰菊酯的LD50值分别为：0.022 7、0.012 2和0.005 1 μg/头。同时明确了4种菊酯类杀虫剂对亚洲小车蝗3龄蝗蝻离体ATPase活性都有一定程度的抑制作用。当药剂浓度为1×10-4mol/L时,高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯、联苯菊酯和甲氰菊酯对Na+-K+-ATPase的抑制分别为：57.62%、55.34%、45.70%和20.94%,对Ca2+-Mg2+-ATPase的抑制分别为：58.30%、58.05%、41.80%和19.35%。在浓度范围为1×10-4~1×10-8 mol/L,4种杀虫剂对亚洲小车蝗ATPase活性的抑制存在明显的剂量效应关系。     

反式肉桂醛对稻绿核菌细胞超微结构及3种呼吸酶活力的影响

为初步探究反式肉桂醛(TC)对稻绿核菌的抑菌机制，采用透射电子显微镜观察了TC处理后稻绿核菌菌丝细胞的超微结构，并测定了2、4、8、15及30 μg/mL系列质量浓度TC对稻绿核菌细胞壁完整性的影响，以及其对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸-苹果酸脱氢酶(NAD-MDHase)、琥珀酸脱氢酶(SDHase)和三磷酸腺苷酶(ATPase)活力的影响。结果显示:经4 μg/mL的TC处理后，菌丝细胞内脂质体显著增多，线粒体结构变模糊。当TC质量浓度升高至30 μg/mL时，可破坏菌丝细胞壁的完整性，且对NAD-MDHase活力的相对抑制率为44.3%，对SDHase活力的相对抑制率为76.7%；而Na+-K+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase、Ca2+-ATPase及Mg2+-ATPase的活力随TC质量浓度升高呈U型变化，其中，4 μg/mL的TC对ATPase活力的抑制效果最强，相对抑制率达78.4%以上。研究表明，细胞壁及线粒体可能是TC抑制稻绿核菌菌丝生长的作用靶点，具有进一步研究的价值。     

辣椒碱对小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶和Na+ -K+ -ATP酶活性的影响

采用常规生化方法测定了辣椒碱对小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶和Na+ -K+ -ATP酶活性的影响。结果表明,经不同浓度辣椒碱处理12 h后,小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶活力均显著低于空白对照,在100.56~141.53 μmol ·L-1 ·mg-1Pro ·min-1 之间;而Na+ -K+ -ATP酶活力均显著高于空白对照,在12.43~20.36 μmol ·mg-1Pro ·min-1之间。说明辣椒碱能抑制小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶的活性,而对Na+ -K+ -ATP酶活性则表现为促进作用。     

棉酚和单宁酸对棉铃虫幼虫生长和消化生理的影响

作者利用昆虫人工饲料测试了棉酚和单宁酸对棉铃虫幼虫生长、营养指标以及中肠主要蛋白酶活力的影响。结果表明,棉酚和单宁酸均能显著地抑制幼虫的生长,但二者之间无交互作用,其中单宁酸的作用较棉酚强。含3％棉酚或单宁酸的人工饲料,饲喂4龄幼虫48h后,可引起幼虫近似消化率减小和食物转化率增大,但食物利用率无显著变化。棉酚在离体条件下对类胰蛋白酶和类胰凝乳蛋白酶活力有不同程度的抑制作用,但在活体条件下,上述酶活力无显著变化,仅有中肠总蛋白酶活力下降。单宁酸在离体条件下对类胰蛋白酶有抑制作用,而对类胰凝乳蛋白酶活力无作用:在活体条件下,仅总蛋白酶活力和弱碱性类胰蛋白酶活力显著下降。由此可知,棉酚和单宁酸对棉铃虫的生长抑制作用与幼虫中肠蛋白酶活力和食物消化率的降低有关。     

氯化钙与东莨菪内酯联用对朱砂叶螨的杀螨毒力及其Ca2+-ATP酶活性的影响

为了明确钙离子与东莨菪内酯联合作用的杀螨效果,进而为东莨菪内酯的开发利用提供参考,采用玻片浸渍法测定了钙离子(Ca2+)与东莨菪内酯混用对朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus雌成螨的杀螨毒力,并测定了活体和离体条件下对螨体内Ca2+-ATP酶活性的影响,对Ca2+的增效作用机理进行了初步分析。结果表明:Ca2+与东莨菪内酯联合使用能显著增强东莨菪内酯的杀螨效果,其中联合作用24和48 h的LC50值分别比东莨菪内酯单独处理降低20%和45%;对朱砂叶螨Ca2+-ATP酶活性的测定结果表明,无论在活体还是离体条件下,Ca2+与东莨菪内酯联用均能显著增强对Ca2+-ATP酶的抑制作用,而相同浓度的Ca2+单独作用则对Ca2+-ATP酶活性无影响,这也在一定程度上证明了Ca2+-ATP酶是东莨菪内酯的重要作用靶标之一。     

杀虫荧光假单胞工程菌对棉铃虫的离体及活体生物测定

利用转座子mini Tn5将δ 毒素基因cryIA(c)整合到生防细菌荧光假单胞菌P30 3 1的染色体上 ,构建成荧光假单胞工程菌。以棉铃虫二龄幼虫作供试昆虫的离体生测表明 :在同一剂量水平上 ,PT4 5、PT51、PT6 1、PT71等工程菌株对棉铃虫幼虫的杀虫活性均高于野生菌株HD 73;浓度最高时PT4 5、PT51、PT6 1、PT71、HD 73处理棉铃虫的死亡率分别为 86 7%、76 7%、80 0 %、86 7%、70 0 % ,死亡率与浓度呈正相关 ,体重与浓度呈负相关。用上述工程菌接种棉花活体 ,喷雾处理 3周后 ,用棉叶饲喂的棉铃虫死亡率分别达 70 0 %、6 0 0 %、6 0 0 %、6 6 7%、33 3% ;用棉顶尖饲喂的棉铃虫死亡率分别达 70 0 %、6 3 3%、6 0 0 %、73 3%、30 0 % ;用棉蕾饲喂的棉铃虫死亡率分别为 6 3 3%、53 3%、50 0 %、6 3 3%、2 6 7%。     

水稻不同品种或组合对甲磺隆耐药性差异的机制研究

以水稻乙酰乳酸合成酶(ALS)比活力为研究对象,通过在离体和活体条件下比较其对甲磺隆的敏感性水平,探讨了水稻不同品种或组合的耐药性差异机制。结果表明,离体条件下不同水稻品种或组合ALS对甲磺隆均较敏感,当甲磺隆浓度为100 μg/L时,对ALS比活力抑制率达60%以上,且活力百分比与甲磺隆浓度对数成直线负相关关系,相关程度显著或极显著;活体条件下ALS活力均受到甲磺隆不同程度的抑制,但同一品种ALS活力不随甲磺隆浓度的变化而呈现规律性变化。在甲磺隆浓度相同时,活体条件下所有供试水稻品种ALS活力均显著高于离体条件下的ALS活力,影响程度与植株耐药性差异基本一致,说明甲磺隆在水稻体内存在较强代谢失活作用,代谢失活差异是水稻不同品种或组合对甲磺隆的耐药性差异机制。     

α-三连噻吩光活化抑制植物生长活性及作用靶标

采用小杯法测定了α-三连噻吩（α-T）对几种植物的光活化生长抑制作用.经用近紫外光（320～400nm）照射后,α-T能有效地抑制稗草、油菜和含羞草根、茎的生长,特别对稗草的生长抑制作用最为明显.当α-T处理浓度为10mg/L时,光照对稗草根、茎长的抑制率分别达到87.89%和95.29%,而非光照处理则为13.79%和-5.86%.处理浓度为100 mg/L时,光照对根、茎长抑制率均为100%,而非光照处理分别为16.20%和16.74%.检测不同光照时间和不同浓度处理对生长抑制作用的影响发现,随着光照时间从0.5 h延长到3 h,处理浓度从0.1、1至10 mg/L时,测得对稗草根长和茎长的抑制率呈明显的正相关,只有当光照时间达到一定强度时,才能显现出光活化的效应.电镜观察表明,经α-T处理的稗草愈伤组织,浓度为10mg/L,光照3 h时,可造成细胞生物膜结构的破坏,而非光照处理细胞则无明显损伤.     

新型化合物唑嘧氯草胺的作用机制

采用培养皿法和常规生化方法,研究了新型除草剂唑嘧氯草胺(暂定名,代号:ZJ-2725)的作用机制。结果显示,同时添加20mg/L浓度的缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸能完全恢复唑嘧氯草胺对苘麻芽的生长抑制作用,而添加相同浓度的单一支链氨基酸只能部分消除其抑制作用。离体条件下,随着唑嘧氯草胺浓度的增大,对乙酰乳酸合成酶(ALS)活性的抑制率增加,ALS活性随反应时间的延长而增加,且两者之间符合Michaelis-Meten方程;活体条件下,唑嘧氯草胺对苘麻的ALS也表现出明显的抑制作用,ALS活性明显下降。表明唑嘧氯草胺在植物体内抑制了3种支链氨基酸的生物合成,进而导致植物蛋白质合成受阻而使植物生长受到抑制,ALS即为唑嘧氯草胺的作用靶标。